实验五RPMI-1640的配制

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,实验六 RPMI-1640的配制,不完全RPMI-1640培养液配方,RPMI-1640干粉 1袋(1,000mL量),L-谷氨酰胺 0.29g,NaHCO,3,溶液 2.2g,HEPEs 2.39g,去离子水 1,000mL,溶解，过滤除菌，分装，-20保存。,合成培养基的配制,1、将RPMI-1640粉袋竖立轻弹，使袋中干粉下沉，,剪开袋口，将干粉倒入3,000mL三角瓶中；,2、加入1,000mL去离子水，快速旋转摇动三角瓶，或,用磁力搅拌器搅拌一定时间使干粉培养基充分溶解；,3、称取3.7g NaHCO,3,、2.39g HEPEs加入三角瓶，快,速旋转摇动充分溶解；,4、在超净台中安装好灭菌过滤器，对溶液进行滤过,除菌，分装入250mL或500mL瓶中，瓶口用胶塞塞紧；,合成培养基的配制,5、用塑料膜将瓶口封好，加皮筋扎紧，4冰箱或,-20贮存备用，此为不完全RPMI-1640液。,6、完全RPMI-1640培养液的配制：不完全RPMI-1640,培养液占8090，小牛血清占1020。按1,体积分别加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素,和链霉素的终浓度分别为100UmL。,