实验----鱼类急性毒性实验教材课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,鱼类急性毒性实验,鱼类急性毒性实验,鱼类急性毒性实验鱼类急性毒性实验,实验简介,鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济动物。在污染水体中，当污染物达到一定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应，例如行为失常，组织器官病变，生理功能紊乱乃至死亡。在人为控制条件下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强度测定、水体污染程度、废水及其处 理效果检查，而且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供科学依据。因此，开展鱼类急性毒性实验的研究，对实验结果给出正确合理的评价，对于我国水资源保护具有重要意义。,实验简介鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济,实验简介鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济,实验原理,在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，以,96h,为一实验周 期，在,24h,、,48h,、,72h,和,96h,时记录实验鱼的死亡率，确定鱼类死亡,50%,时的受试物浓度，半数致死浓度用,24h LC50,、,48h LC50,、,72h LC50,和,96h LC50,表示，并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。,实验原理 在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，,实验原理 在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，,实验材料,1.,实验常用仪器设备,温度控制仪；,（溶氧仪）,pH,试纸,（分光光度计）,玻璃水槽,抄网：尼龙制，对照和实验容器分用。,实验材料1.实验常用仪器设备,实验材料1.实验常用仪器设备实验材料1.实验常用仪器设备,实验溶液的制备,以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配制而成。母液最好每日配各,1,次，比较稳定的物质也可以两日配制,1,次，配好后，最好低温保存。配制好的母液可以稀释为进行毒性实验的溶液，以等比或等对数 间距设置浓度系列，相临浓度比值不得超过,2.2,。,实验溶液的制备以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配,实验溶液的制备以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配,实验用鱼的选择,实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有 代表性，经济价值比较高，来源丰富、取材方便、遗传稳定，生物学背景资料丰 富，大小适中，在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。,斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。建议的实验温度,21-25,，建议实验鱼的全长,2.0,士,1cm,。,实验用鱼的选择实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有,实验用鱼的选择实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有,试验方法与步骤,1.,实验条件,(1),实验用水 使用高质量的自然水或标准稀释水,(,见本节附录,),，也可以使用饮用水,(,必要时应除氯,。水的总硬度为,10-250mg/L(,以,CaCO3,计,),，,pH,为,6.0-8.5,。,(2),实验周期,96h,。,(3),实验负荷 静态实验系统最大承载量为,1.0 g,鱼,/L,。,(4),光照每天,12-16h.,(5),温度与实验鱼种相适宜，变化范围土,2,。,(6),溶解氧不低于空气饱和值的,60%,。曝气时不能使受试物明显受损。,试验方法与步骤 1.实验条件,试验方法与步骤 1.实验条件 试验方法与步骤 1.实验条件,2.,实验方法,正式实验前必须对实验用鱼进行驯养，然后根据预实验得出 的结果,(,以上部分内容可另行安排实验时间,),，在包括使鱼全部死亡的最低浓度和,96h,鱼类全部存活的最高浓度之间至少应设置,5,个浓度组。每个实验浓度组应至少设,3,个平行系列，每一系列设一个空白对照。如使用了助溶剂，应增设溶剂验量对照，其浓度与试液中的最高溶剂浓度相同。每一浓度组及对照组至少使用,7,尾鱼。,2.实验方法 正式实验前必须对实验用鱼进行驯养，然后根据预实,2.实验方法 正式实验前必须对实验用鱼进行驯养，然后根据预实,实验前鱼应驯养。用水需曝气。,实验分组：,4,组,浓度系列：每组分别取,0,，,35,，,70,，,140,，,280ml,母液加入鱼缸水中，充分混匀，则得到实验浓度,0,，,0.25,，,0.5,，,1,，,2g/L,重铬酸钾（母液,3L,，,50g/L,重铬酸钾，每组,600mL,）,高浓度用小鱼缸，,7L,水，,8,条鱼（大小均匀）。空白用大鱼缸，,14L,水，,16,条鱼,实验控制温度,15C,。缓慢曝气。,2.,实验方法,实验前鱼应驯养。用水需曝气。2.实验方法,实验前鱼应驯养。用水需曝气。2.实验方法 实验前鱼应驯养。用,实验溶液调节至相应温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放入各实验容器中。转移期间处理不当的鱼均应弃除。同一实验，所有实验用鱼应在,30min,内分组完毕。实验期间，不要对溶液强烈充气，溶解氧含量应高于空气饱和值的,60%,。同时避免产生对鱼类行为的干扰。实验期间不投饵。,实验溶液调节至相应温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放,实验溶液调节至相应温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放,在实验开始后,3h,或,6h,观察各处理组鱼的状况，并记录实验鱼的异常行为,如鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素沉积等,。,至少在,24h,、,48h,、,72h,和,96h,后检查受试鱼的状况，并做记录。如果受试鱼没有任何肉眼可见的运动，如鳃的扇动、碰触尾柄后无反应，即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数目后，将死鱼从容器中取出。,在实验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况，并记录实验鱼的异,在实验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况，并记录实验鱼的异,每天至少测定一次,pH,、溶解氧和温度。实验开始和结束时亦要测定。至少在实验开始和结束时，测定实验容器中实验液的受试物浓度。,pH,：试纸,（溶解氧：溶氧仪）,温度：温度计,（六价铬：二苯碳酰二肼分光光度法）,每天至少测定一次pH、溶解氧和温度。实验开始和结束时亦要测定,每天至少测定一次pH、溶解氧和温度。实验开始和结束时亦要测定,3.,数据处理,(1),在对数,-,概率坐标纸上，绘制处理浓度对死亡率的曲线。用直线内插法或常用统计程序计算出,24h,、,48h,、,72h,、,96h,的,LC50,值，并用标准方法计算,95%,的 置信限。,(2),如果实验数据不适于用标淮方法计算,LC50,，可用不引起死亡的最高浓度和引起,100%,死亡的最低死亡浓度估算,LC50,的近似值，即这两个浓度的几何平均值。,3.数据处理(1)在对数-概率坐标纸上，绘制处理浓度对死亡率,3.数据处理(1)在对数-概率坐标纸上，绘制处理浓度对死亡率,结果与评价,目前，根据鱼类急性毒性实验的,LCso,值，评判毒物的危害等级，在国内还没有统一的规范化标准。,1990,年国家环保局的,环境监测技术规范,中给出了污 染物对鱼类急性毒性分级标准，见表,5-4,。,1994,年，针对新化学品管理，国家环保局又制定了,新化学物质危害评估准则,，其中给出了新化学品对鱼类急性毒性的危害分级标准，参见表,5-5,。根据下列标准，可以初步评判化学品或污染物 的环境危害性。,结果与评价目前，根据鱼类急性毒性实验的LCso值，评判毒物的,结果与评价目前，根据鱼类急性毒性实验的LCso值，评判毒物的,实验-鱼类急性毒性实验教材课件,实验-鱼类急性毒性实验教材课件,附录标准稀释水的配制方法,用于配制标准稀释水的试剂应为分析纯，去离子水或蒸馏水的电导率应,10S/cm,。具体配制方法如下,:,制备标准稀释水前先按照下列要求配制,4,种溶液,氯化钙溶液 将,11.76g CaC12 2H2O,溶解于水中，稀释至,1L,。,硫酸镁溶液 将,4.93g MgSO4 7H2O,溶解于水中，稀释至,1L,。,碳酸氢钠溶液 将,2.59g NaHCO3,溶解于水中，稀释至,1L,。,氯化钾溶液 将,0.23g KCl,溶解于水中，稀释至,1L,。,将这,4,种溶液各,25mL,加以混合并用蒸馏水稀释至,1L,，即配成标准稀释用水。,溶液中钙离子和镁离子的总和是,2.5mmol/L,。,Ca:Mg,的比例为,4:1,，,Na:K,比为,10:1,。稀释用水需经曝气直到氧饱和为止，然后储存备用，在使用前不必再曝气。,附录标准稀释水的配制方法 用于配制标准稀释水的,附录标准稀释水的配制方法 用于配制标准稀释水的,鱼类急性毒性实验,鱼类急性毒性实验,鱼类急性毒性实验鱼类急性毒性实验,实验简介,鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济动物。在污染水体中，当污染物达到一定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应，例如行为失常，组织器官病变，生理功能紊乱乃至死亡。在人为控制条件下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强度测定、水体污染程度、废水及其处 理效果检查，而且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供科学依据。因此，开展鱼类急性毒性实验的研究，对实验结果给出正确合理的评价，对于我国水资源保护具有重要意义。,实验简介鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济,实验简介鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济,实验原理,在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，以,96h,为一实验周 期，在,24h,、,48h,、,72h,和,96h,时记录实验鱼的死亡率，确定鱼类死亡,50%,时的受试物浓度，半数致死浓度用,24h LC50,、,48h LC50,、,72h LC50,和,96h LC50,表示，并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。,实验原理 在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，,实验原理 在规定条件下，使鱼类接触含不同浓度受试物的水溶液，,实验材料,1.,实验常用仪器设备,温度控制仪；,（溶氧仪）,pH,试纸,（分光光度计）,玻璃水槽,抄网：尼龙制，对照和实验容器分用。,实验材料1.实验常用仪器设备,实验材料1.实验常用仪器设备实验材料1.实验常用仪器设备,实验溶液的制备,以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配制而成。母液最好每日配各,1,次，比较稳定的物质也可以两日配制,1,次，配好后，最好低温保存。配制好的母液可以稀释为进行毒性实验的溶液，以等比或等对数 间距设置浓度系列，相临浓度比值不得超过,2.2,。,实验溶液的制备以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配,实验溶液的制备以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配,实验用鱼的选择,实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有 代表性，经济价值比较高，来源丰富、取材方便、遗传稳定，生物学背景资料丰 富，大小适中，在室内条件下易于饲养和繁殖的种类。,斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。建议的实验温度,21-25,，建议实验鱼的全长,2.0,士,1cm,。,实验用鱼的选择实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有,实验用鱼的选择实验鱼类一般选择对污染物敏感，在生态类群中具有,试验方法与步骤,1.,实验条件,(1),实验用水 使用高质量的自然水或标准稀释水,(,见本节附录,),，也可以使用饮用水,(,必要时应除氯,。水的总硬度为,10-250mg/L(,以,CaCO3,计,),，,pH,为,6.0-8.5,。,(2),实验周期,96h,。,(3),实验负荷 静态实验系统最大承载量为,1.0 g,鱼,/L,。,(4),光照每天,12-16h.,(5),温度与实验鱼种相适宜，变化范围土,2,。,(6),溶解氧不低于空气饱和值的,60%,。曝气时不能使受试物明显受损。,试验方法与步骤 1.实验条件,试验方法与步骤 1.实验条件 试验方法与步骤 1.实验条件,2.,实验方法,正式实验前必须对实验用鱼进行驯养，然后根据预实验得出 的结果,(,以上部分内容可另行安排实验时间,),，在