天然药物葡萄子原花青素与糖尿病血管病变课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,山东大学齐鲁医院,高海青,中国 昆明,天然药物葡萄子原花青素,与糖尿病血管病变,山东大学齐鲁医院 天然药物葡萄子原花青素,1,主要内容,概述,葡萄子原花青素抗内皮细胞糖基化损伤,葡萄子原花青素抗糖尿病靶器官损害,基于蛋白质组学技术探讨其作用靶点,葡萄子原花青素应用前景,主要内容概述,2,糖尿病流行病学,印度,79.4,中国,42.3,美国,30.3,印度尼西亚,21.3,日本,8.9,2030,年,Reference:Wild S,Roglic G,Green A,Sicree R,King H.Global prevalence of diabetes.Diabetes Care.2019;27(5):1047-1053,.,糖尿病流行病学印度79.4中国42.3美国30.3印度尼西亚,3,糖尿病血管病变,微血管病变,肾病,（蛋白尿）,视网膜病（失明）,大血管病变,缺血性心脏病（心肌梗死）,脑动脉硬化,（中风）,末梢血管病变,(,足坏疽,),神经病变（手脚麻木）,糖尿病血管病变微血管病变 肾病视网膜病（失明）大血管病变缺血,4,研究背景,糖尿病的发病率逐年增加,:,已成为仅次于心脑血管病和肿瘤之后第三位的常见病；,自从胰岛素应用于临床以来，糖尿病因急性并发症致死者明显减少，而糖尿病的慢性血管并发症则成为患者早死及致残的首要原因,UKPDS,研究的结果表明：在新诊断的糖尿病患者中有,50%,以上患有糖尿病大血管和微血管并发症。糖尿病病人发生高血压、动脉粥样硬化的比率要明显高于非糖尿病患者，高血压、动脉粥样硬化的发生率在糖尿病人群是非糖尿病人群的两倍,研究背景糖尿病的发病率逐年增加:已成为仅次于心脑血管病和肿瘤,5,研究背景,糖尿病血管病变发病机制：,多元醇途径,己糖胺途径,蛋白激酶,C,途径,糖基化终末产物形成途径,Brown Lee,教授研究表明四条病理性通路的共同机制为线粒体电子传递链上过氧化物的过度产生,因此，有效阻断氧化应激、抑制,AGEs,的形成及交联、阻,断,AGEs,与受体的作用将是防止糖尿病慢性血管并发症的重要,途径，而对此开发有效药物也是当前医药界的研究热点,研究背景糖尿病血管病变发病机制：,6,研究背景,糖尿病血管病变发病机制,己糖胺途径,多元醇途径,蛋白激酶,C,途径,糖基化终末产,物形成途径,Brownlee M.Nature,2019,414(6865):813-820.,Brownlee M.Nature,2019,414(6865):813-820.,研究背景糖尿病血管病变发病机制己糖胺途径多元醇途径,7,Brownlee M.Nature,2019,414(6865):813-820.,线粒体电子传递链上过氧化物的过度产生,研究背景,Brownlee M.Nature,2019,414(,8,葡萄子原花青素（,GSPE,）是从葡萄子中提取的一种多酚类化合物,具有强大的抗氧化和抗非酶糖基化作用,一种天然植物成分，,资源丰富,制备简单，价格低廉,无明显的毒性反应,研究背景,葡萄子原花青素（GSPE）是从葡萄子中提取的一种多酚类化合物,9,体外实验：,葡萄子原花青素抑制内皮细胞糖基化损伤的作用机制,体内实验（一）：,葡萄子原花青素,对糖尿病大鼠主动脉、心脏、肾脏、海马、视网膜,组织的保护作用,体内实验（二）：,基于蛋白质组学技术探讨葡萄子原花青素保护糖尿病靶器官的作用靶点,研究背景,体外实验：研究背景,GSPE,抑制,AGE-BSA,诱导的内皮细胞,ROS,产生（,LSCM,）,注：组,1,7,分别代表组对照组、,BSA,组、,GSPE,组、,AGE-BSA,诱导组、,5 g/ml GSPE,治疗组、,15 g/ml GSPE,治疗组、,25 g/ml GSPE,治疗组；与对照组相比，,p0.01,；与,AGE-BSA,诱导组相比，,p0.05,，,p0.01,葡萄子原花青素,内皮细胞,Gao Hai-qing et al.J Cardiovasc Pharmacol.2019;48:47-53.,GSPE抑制AGE-BSA诱导的内皮细胞ROS产生（LSCM,11,GSPE,选择性抑制,AGE-BSA,诱导的内皮细胞黏附分子表达,注：组,1,7,分别代表组对照组、,BSA,组、,GSPE,组、,AGE-BSA,诱导组、,5 g/ml GSPE,治疗组、,15 g/ml GSPE,治疗组、,25 g/ml GSPE,治疗组；与对照组相比，,p0.01,；与,AGE-BSA,诱导组相比，,p0.01,VCMA-1,ICMA-1,葡萄子原花青素,内皮细胞,Gao Hai-qing et al.J Cardiovasc Pharmacol.2019;48:47-53;,Gao Hai-qing et al.J Cardiovasc Pharmacol.2019;49:293-8.,GSPE选择性抑制AGE-BSA诱导的内皮细胞黏附分子表达,12,GSPE,抑制,AGE-BSA,诱导的内皮细胞,RAGE mRNA,表达,注：组,1,7,分别代表组对照组、,BSA,组、,GSPE,组、,AGE-BSA,诱导组、,5 g/ml GSPE,治疗组、,15 g/ml GSPE,治疗组、,25 g/ml GSPE,治疗组；,与对照组相比，,p0.01,；与,AGE-BSA,诱导组相比，,p0.01,葡萄子原花青素,内皮细胞,Gao Hai-qing et al.J Cardiovasc Pharmacol 2019;50:434-440.,GSPE抑制AGE-BSA诱导的内皮细胞RAGE mRNA表,13,糖尿病模型的建立,葡萄子原花青素,分组,糖尿病模型的建立葡萄子原花青素分组,14,PWV,（,cm/s,）,=d/t,葡萄子原花青素,PWV,测定,PWV（cm/s）=d/t 葡萄子原花青素PWV测定,15,肾脏,主动脉,葡萄子原花青素,标本取材,心肌,肾脏主动脉葡萄子原花青素标本取材心肌,16,标本取材,海马,坐骨神经,葡萄子原花青素,标本取材,视网膜,标本取材海马坐骨神经葡萄子原花青素标本取材 视网膜,17,主动脉形态学观察,弹性模量（,EM,）和壁应力（,WS,）分别用,Moens-Korteweg,公式和,Lame,公式计算：,EM=(,PWV,2,Di)/h,；,WS=(CAMBPDi)/2h,，,为血液密度（,1.05 g/ml,）,主动脉形态学观察弹性模量（EM）和壁应力（WS）分别用Moe,18,GSPE,对主动脉组织形态学的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,Biosci Biotechnol Biochem.2009;73(6):1348-54.,GSPE对主动脉组织形态学的影响注：C1组：正常对照组；C2,19,GSPE,对糖尿病大鼠壁厚度,/,内径、,PWV,、,WS,和,EM,的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,Biosci Biotechnol Biochem.2009;73(6):1348-54.,GSPE对糖尿病大鼠壁厚度/内径、PWV、WS和EM的影响注,20,GSPE,对心肌组织形态学的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,J Cardiovasc Pharmacol.2019;50:503-9.,GSPE对心肌组织形态学的影响注：C1组：正常对照组；C2组,21,GSPE,对肾脏组织形态学和,RAGE,表达的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,J Nephrol.2019;21(5):722-33,；,Gao Hai-qing et al.,Nephron Exp Nephrol.2009;111(2):e31-41.,GSPE对肾脏组织形态学和RAGE表达的影响注：C1组：正常,22,GSPE,对视网膜组织形态学的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,Chin Med J(Engl).2019;121(24):2544-52.,GSPE对视网膜组织形态学的影响注：C1组：正常对照组；C2,23,GSPE,对海马组织形态学和,RAGE,表达的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,Exp Clin Endocrinol Diab.2019;116(4):215-24,；,Gao Hai-qing et al.,J Nutr Sci Vitaminol(Tokyo).2009;55(3):223-30.,GSPE对海马组织形态学和RAGE表达的影响注：C1组：正常,24,GSPE,对坐骨神经组织形态学的影响,注：,C1,组：正常对照组；,C2,组：,GSPE,正常治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃；,DM1,组：糖尿病未治疗组；,DM2,组：糖尿病,GSPE,治疗组，每日予,GSPE 250mg/kg,灌胃,葡萄子原花青素,糖尿病大鼠,Gao Hai-qing et al.,J Nutr Sci Vitaminol(Tokyo).2019;54(4):321-8.,GSPE对坐骨神经组织形态学的影响注：C1组：正常对照组；C,25,GSPE,对糖尿病大鼠主动脉、心肌、肾脏、视网膜、海马等组织具有保护作用；,保护机制：,AGEs-RAGE,核转入因子,kappa B(NF-B),该信号通路在糖尿病慢性血管并发症中具有重要作用,目前，仅初步明确了,GSPE,对糖尿病靶器官的保护机制，但其作用靶点尚未阐明，因此，我们应用蛋白质组学技术深入探讨了,GSPE,对糖尿病主动脉、肾脏、视网膜组织作用靶点,结论,GSPE对糖尿病大鼠主动脉、心肌、肾脏、视网膜、海马等组织具,26,蛋白质组学流程图,生物学问题的提出,实验模型的设计,实验组和