某些因素对离体蛙心心脏活动的影响实验报告

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,离体蛙心灌流及某些离子、药物对离体蛙心活动的影响,(perfusion of frog,s heart),主要内容,相关理论知识,实验部分,实验目的,实验对象,实验仪器与药品,实验步骤,结果分析与讨论,相关理论知识,正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。,相关理论知识,心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋,性、传导性和收缩性。,心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物,质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对,心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明显,的影响。,影响心肌细胞电生理特性的原因,1.,心肌的自动节律性,（,1,）最大复极电位与阈电位的差距,（,2,）,4,期自动除极速度,2.,心肌的兴奋性,（,1,）静息电位水平：依赖于细胞外,K,+,浓度（,2,）,Na,+,通道的性状,相关理论知识,3.,心肌的传导性,主要取决于动作电位,0,期除极速度和幅度,4.,心肌的收缩性,依赖于细胞外钙离子浓度,相关理论知识,影响心肌细胞电生理特性的原因,相关理论知识,离子对心脏活动的影响,钾离子,K+,参与心肌细胞的复极化和自律细胞的,4,期自动去极化过程，其改变不仅取决于细胞内外,K+,浓度梯度，还与细胞膜对,K+,通透性有关，因此其影响是多方面的,相关理论知识,离子对心脏活动的影响,钙离子,Ca,2+,对,Na,+,内流存在竞争抑制作用，称膜屏障作,用，对静息电位无影响。,Ca,2+,o,，可使心肌细,胞的兴奋性降低，传导减慢，收缩力增强。,相关理论知识,迷走神经和乙酰胆碱,迷走神经兴奋时，节后纤维释放,Ach,激动心肌,细胞膜上,M,型胆碱受体，产生负性变力、负性传导、,负性变时等效应。,心交感神经与去甲肾上腺素,心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上,腺素，激动心肌细胞膜上的,受体，产生正性变,力、正性传导、正性变时等效应。,实验目的,1.,本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。,2.,用离体蛙心灌流的方法观察：,K,+,、,Ca,2+,酸、碱度,肾上腺素（,E,）,乙酰胆碱（,Ach,）,对心脏活动的影响,实验对象,蟾蜍,实验仪器设备,RM6240,生物采集系统,张力换能器,蛙类手术器械,蛙心插管,试管夹,缝合线,蛙心夹,铁支架,滴管,实验药品,任氏液,l,KCl,3,CaC12,l,：,10,000 E,l,：,10,000 ACh,3,乳酸,2.5,NaHCO3,实验步骤,一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.,破坏脑和脊髓,2.,暴露心脏,一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.,观察心脏的解剖结构,实验步骤,（腹面）,（背面）,实验步骤,一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.,蛙心插管,1.1,在主,A,干下穿一线打一松结；在左主,A,下再穿一线结扎。,实验步骤,一、离体蟾蜍心脏标本制备,1.,蛙心插管,1.2,在主动脉根部剪一,斜口，将插管插入动脉,圆锥，在心室收缩时,将插管插入心室，结扎,固定。,1.,用试管夹将蛙心管固定,在铁支架上,2.,把张力换能器固定铁支,架支台上，在心室,舒张期,将与换能器相连的蛙心夹,夹在心尖上。,实验步骤,二、连接仪器和装置,注意事项,1.,蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗,3,次。,2.,每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。,3.,随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。,4.,换能器头端应向下倾斜以免液体进人换能器。,5.,各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果,。,观察项目,一、描记正常心搏曲线,曲线幅度,收缩的程度,曲线疏密,心率,曲线基线,舒张的程度,二、观察离子、药物和酸碱的影响,1),更换任氏液为,3%,氯化钙溶液,1,2,滴，,记录心率和收缩幅度，冲洗（下同）,2),滴加,1,2,滴,1%,氯化钾溶液,3),滴加,1,2,滴,1,：,10000,去甲肾上腺素溶液,4),滴加,1,2,滴,1,：,10000,肾上腺素溶液,5),滴加,1,2,滴,1,：,10000,乙酰胆碱溶液,6),滴加,1,2,滴,2.5%,碳酸氢钠溶液,7),滴加,1,2,滴,3%,乳酸溶液,观察项目,实验结果,实验项目,收缩强度,心率,处理前,处理后,处理前,处理后,任氏液,2%CaCl,2,1%KCl,1,：,10000 E,1,：,10000 Ach,2.5%NaHCO3,3%,乳酸,结果分析与讨论,1.,任氏液：正常对照,2.3%CaCl,2,灌流：,结果分析与讨论,3.1%KCl,灌流：,结果分析与讨论,4.1:10000 E,灌流,4,期,If,、,I CaT,通道,4,期自动去极速度,自律性,心率,与心肌,1,受体结合,Ca2+,内流,肌浆网释放,Ca2+,兴奋,-,收缩耦联,收缩力,cAMP,结果分析与讨论,5.1:10000 Ach,灌流,与心肌,M,受体结合,K,+,外流,Ca,2+,内流,E-C,耦联,收缩力,最大复极电位,4,期,K,+,外流,自律性,心率,Ca,2+,i,碳酸氢钠 乳酸,结果分析与讨论,6.2.5,NaHCO,3,灌流,中和,H+,，,Ca2+,与肌钙蛋白结,合，心肌收缩力恢复。,7.3%,乳酸灌流,H,+,与,Ca,2+,竞争肌钙蛋白，,Ca,2+,不能与肌钙蛋白结,合，心肌收缩力。,思考题,通过本次实验结果，分析离子、药物和递对,心搏曲线有什么影响？为什么？,