临床药代动力学生物利用度和生物等效性研究讲解课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床药代动力学、生物利用度和生物等效性研究,临床药代动力学（PK）研究,研究药物在人体内处置的过程（吸收、分布、代谢和排泄），,是临床制定合理用药方案和个体化药物治疗的依据。,生物利用度（BA）,是指药物或药物活性成分吸收进入全身循环的程度和速度。一般分为绝对生物利用度和相对生物利用度。,生物等效性（BE）,是指药学等效制剂或可替换药物在相同试验条件下，服用相同,剂量，其活性成分吸收程度和速度的差异无统计学意义。通常,意义的生物等效性研究是指用生物利用度研究的方法以药代动,力学参数为终点指标，根据预先确定的等效标准和限度进行比,较研究。,PK、BA和BE研究常用的分析方法,色谱法：气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、色谱-质谱联用法（LC-MS、LC-MS-MS、GC-MS、GC-MS-MS）。用于大多数药物检测。,免疫法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等。多用于蛋白质多肽类物质检测。,微生物学方法：可用于抗生素药物的测定。,方法学确证,1.特异性,特异性,系指在样品中存在干扰成分的情况下，分析方法能够准,确、专一地测定分析物的能力。,要求：,必须证明所测定物质是受试药品的原形药或特定的代谢物；生物样品所含内源性物质不得干扰样品的测定。如果有几个分析物，应保证每个分析物都不被干扰。,应确定保证分析方法特异性的最佳条件。,色谱法至少要考察6个不同来源空白生物样品色谱图、空白生物样品外加对照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图，来反映分析方法的特异性。,对于质谱法，则应注意考察分析过程中的介质效应。,方法学确证,2.标准曲线和定量范围,标准曲线,反映所测定物质浓度与仪器响应值的关系，一般用回归方程来评价。,要求：,1）提供标准曲线的线性方程和相关系数，说明其线性相关程度。,2）标准样品是在相同生物介质中加入已知量的分析物配制而成，必须至少采用6个浓度的标准样品，建立标准曲线。对于非线性相关可能需要更多浓度点。,方法学确证,2.标准曲线和定量范围,要求：,3）在定量范围（即标准曲线高低浓度范围）内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确度。,4）定量范围要能覆盖全部待测的生物样品药物浓度范围，不得用定量范围外推方法求算药物浓度。,5）建立标准曲线时应随行空白生物样品，用于评价干扰。,方法学确证,3.定量下限（LLOQ）,定量下限,是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。,要求：,1）定量下限应能测定35个消除半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1/101/20的药物浓度。,2）定量下限的准确度应在真实浓度的80120%范围内，相对标准差（RSD）应小于20%。,方法学确证,4.精密度和准确度,1）,精密度,是指在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测定值的,分散程度,。,通常用质控样品RSD考察方法的精密度。一般RSD应小于15%，在LLOQ附近的RSD应小于20%。,2）,准确度,是指在确定的分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的,接近程度,（即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差）。一般应在85%115%范围内（偏差应小于15%），在LLOQ附近应在80%120%范围内。,方法学确证,4.精密度和准确度,3）一般要求选择高、中、低3个浓度的质控样品同时进行精密度和准确度考察。低浓度通常在LLOQ的3倍以内，高浓度接近标准曲线上限，并在中间选一个浓度。,测定批内精密度，每一浓度至少测定5个样品；批间精密度应至少连续测定3个分析批（45个样品）。,方法学确证,5.样品稳定性,根据具体情况，对含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件,下，以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存,放条件和时间。要注意考察储备液的以及样品处理后溶液中分,析物的稳定性，以保证检测结果的准确性和重现性。,6.提取回收率,分析过程的提取效率，以样品提取和处理过程前后分析物,含量百分比表示。应考察高、中、低3个浓度的提取回收率，,其结果应当一致、精密和可重现。,方法学确证,7.微生物学和免疫学方法的确证,上述很多参数和原则也适用于微生物学和免疫学方法，,但应考虑它们的特殊之处。微生物学和免疫学分析的标,准曲线本质上是非线性的，应采用更多的浓度点来建立,标准曲线。,方法确证实验应包括在几天内进行的6个分析批，每个,分析批包括4个浓度（LLOQ、低、中、高浓度）的质控,双样本。,生物样品测定和质量控制,在测定生物样品中的药物浓度时应进行质量控,制，以保证所建立方法的实际应用可靠性。,质量控制：,1）整个生物样本分析过程应遵从预先制定的实验室SOP以及GLP原则。,2）建议由独立人员制备不同浓度的质控样品。,3）来自同一个体的生物样品最好在同一批中测定。,4）每个分析批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。,生物样品测定和质量控制,质量控制：,5）每个浓度的质控样品至少双样本，均匀分布在未知样品测试顺序中；若一个分析批中未知样品数较多时，应增加各浓度度点质控样品数，质控样品数应大于未知样品总数的5%。,6）质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应小于20%；最多允许1/3不在同一浓度的质控样品结果超限。如 质控样品测定结果不符合上述要求，该分析批样品测试结果作废。,7）标准曲线的范围不能外延，浓度高于定量上限的样品应采用空白介质稀释后测定；低于定量下限的样品，在进行药,代动力学分析时，Cmax以前的样品定为零值，以后的样品定为无法定量。,分析数据的记录与报告提交,生物分析方法建立中产生的数据和QC样品测试结果应全部记录,保存。,提交数据至少包括：,1.方法建立数据分析方法的详细描述；仪器设备、分析条,件、分析方法所用对照品的纯度和来源，方法学确证数据及代,表性色谱图或质谱图并加以说明。,2.样品分析数据分析样品时标准曲线及回归方程，各分析,批QC样品测定结果及批内、批间精密度和准确度，各分析批待,测样品浓度计算结果。提交20%受试者样品测试的色谱图复印,件，包括相应分析批的标准曲线和QC样品的色谱图复印件。,3.其他相关信息,创新药物临床药代动力学研究,健康受试者药代动力学研究,患者药代动力学研究,特殊人群药代动力学研究,药代动力学与药效动力学相关性研究,健康志愿者药代动力学研究,单次给药、多次给药和进食对口服药物药代动力学影响的研究。阐明新药制剂不同剂量水平的吸收、分布、代谢和排泄特征，是制定临床试验用药方案的依据。,药物代谢产物的药代动力学研究。,药物-药物的药代动力学相互作用研究。阐明药物相互作用对药代动力学的影响。一般在IV期进行；但如临床前研究已提示有明显相互作用，则应在临床试验阶段进行该研究。,患者药代动力学研究,结合药物临床试验进行此项研究。初步明确在相,应疾病状态下的药代动力学的特点，指导临床合,理用药。,特殊人群药代动力学研究,肝或肾功能损害患者,老年或儿童患者,遗传因素对药代动力学影响（个体差异和种族差异）。,药代动力学与药效动力学相关性研究,探索相关性的特征、治疗浓度范围和中毒,浓度，确定是否纳入临床治疗药物监测的,范畴，进一步提供安全、有效用药依据。,健康志愿者单次给药药代动力学研究,1.受试者选择标准,通过病史、体检、心电图、血/尿生化和血液学检查证实身体健康。,一般为男女各半，可了解是否存在性别差异。,一般在18-45岁，同批受试者年龄不宜相差太大。,体重一般不应低于50kg，体重指数一般1924范围内。,受试者必须自愿参加，并在试验前签署知情同意书。,（AIDS和HIV病毒感染者，药物滥用者，最近三个月内献血或作为受试者被采样者，嗜烟酒者和近二周曾服过各种药物者均不宜作为受试者。）,健康志愿者单次给药药代动力学研究,2.受试者例数,一般为每剂量组812例。,3.对试验药物的要求,药品质量应在符合GMP条件的车间制备，并经检验符合质量标准。,药品保管应有专人保管。试验结束后剩余药品和使用药品应与记录相符。,4.药物剂量,一般选用低、中、高三种剂量。剂量主要根据I期耐受性试验结果，参考临床前试验结果以及II期临床试验的拟用剂量。高剂量必须小于或等于人体最大耐受的剂量，但应高于治疗剂量。,健康志愿者单次给药药代动力学研究,5.研究步骤,受试者在试验日前进入I期临床试验观察室，晚上进统,一清淡饮食，然后禁食10小时。次日晨空腹口服药物,（注射给药不需空腹），用200240ml温水送服。如需,收集 尿液，则在服药前排空膀胱。服药1小时后可适,量饮 水，24小时后进统一清淡饮食。按试验方案在,给药前、后不同时间采取血样和/或尿样（如需收集尿,样，应记录总尿量后，留取所需量）。试验期间应避,免剧烈运动，禁服茶、咖啡及其他含咖啡和醇类饮料，,禁止吸烟。,健康志愿者单次给药药代动力学研究,6.采样点的确定,服药前采空白血样品。完整的血药浓度-时间曲线应包括药物,各时相的采样点；一般吸收分布相至少2-3个，平衡相（峰浓,度）3个，消除相6个。一般不少于11个采样点，应有35个,消除半衰期的时间，或采样持续到血药浓度为Cmax的,1/101/20。,应收集服药前和服药后不同时间段尿样。取样点的确定可参,考动物药代动力学试验中药物排泄过程的特点，应包括开始,排泄时间、排泄高峰及排泄基本结束的全过程。,健康志愿者单次给药药代动力学研究,7.药代动力学参数的估算,用药代动力学统计软件处理数据、计算药代动力学参数、模型判断、统计学分析和图形显示。,主要药代动力学参数有：,反映药物吸收速率和程度 Ka,Tmax,Cmax,AUC;,反映药物在体内的分布容积 Vd；,反映药物从血液循环中消除特点 Kel,t1/2,MRT,CL。,从尿液浓度估算药物经肾排泄的速率和总量。,对参数进行分析，说明其临床意义，并对II期用药提出建议。,健康志愿者多次给药药代动力学研究,目的：,考察药物多次给药后的稳态浓度（Css），达到稳态浓度的,速率和程度，药物谷、峰浓度之间的波动系数（DF），是否,存在药物蓄积作用，明确稳态浓度和临床药理效应的关系。,1.,受试者选择标准、例数和对试验药物的要求,与单次给药相同。,2.药物剂量,采用II期试验拟订的剂量，根据单次给药的消除半衰期和II,期试验给药方案确定总服药次数和总剂量。,健康志愿者多次给药药代动力学研究,3.研究步骤,受试者应在I期临床试验观察室服药、采集样本和活,动。如为口服药物，需用200240ml温水送服。早、中、,晚三餐均进统一饮食。,4.采样点确定,根据单次给药的消除半衰期，估算药物可能达到稳态,浓度的时间。连续测定三次谷浓度以确定已达稳态浓,度。达稳态浓度后，于最后一次给药后，采集各时相血,样（同单次给,药）。,健康志愿者多次给药药代动力学研究,5.药代动力学参数估算,根据测定的三次谷浓度及稳态血药浓度-时间数据，绘,制多次给药后的药-时曲线，求得相应药代动力学参数，,包括Tmax,Cmax,t1/2,CL,Cav,AUCss及DF等。,说明多次给药时的药代动力学特点，应与单次给药的,药代动力学参数比较，观察是否存在明显差异，特别在,吸收和消除等方面是否有显著的改变。,生物等效性研究,（一）试验设计与操作,1.交叉设计,多数药物吸收和清除在个体间存在很大差异，个体间,的变异系数远远大于个体内变异系数，因此，生物等,效性研究一般要求按自身交叉对照的方法设计，可以,将制剂因素对药物吸收的影响与其他因素区分开来，,减少不同试验周期和个体差异对结果的影响。受试者,随机分组，按一定顺序接受处理，二次处理间的清洗,期不应短于7个消除半衰期，以消除前一处理的携带,效应。,生物等效性研究,2.受试者选择,受试者选择应当尽量使个体间差异减到最小，以便能检测出,制剂间的差异。,2.1入选条件,男性健康受试者。特殊作用的药物应根据具体情况选择受,试者。,年龄：1840岁。同一批受试者年龄不宜相差10