肿瘤发病学-精品资源ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,GDMCBL,*,1,Pathogenesis,癌变机制,Carcinogenesis,一、前言,长时间：数年、十几年、几十年, 多因素,:,多种致癌因素, 多基因,:,原癌基因、抑癌基因、凋亡调控基因,多阶段：,2,二、细胞癌变学说的发展,慢性炎症学说与胚胎残余学说,（,20,世纪,50,年代）,慢性炎症学说：子宫颈炎与子宫颈癌,炎症与肿瘤相关性文献：,CNKI 42663,篇,截止,2016/11/30,肿瘤的发生、发展及治疗与炎症的关系,Medline: 74301,篇,3,4,慢性炎症学说与胚胎残余学说,（,20,世纪,50,年代,）,胚胎残余学说,如：颅咽管瘤,颅咽管上皮组织，,皮样囊肿,外、中胚层异位组织，,表皮样囊肿,外胚层异位组织，,畸胎瘤,三胚层，,脊索瘤,残留的脊索组织。,这些组织具有增殖分化的潜力，在一定的条件下发展为肿瘤,二、细胞癌变学说的发展,5,基因突变学说与基因调控失常学说,正常细胞在致瘤因子作用下发生基因突变并异常增殖并遗传下去,证据,肿瘤细胞染色体数量异常,瘤细胞表型可以遗传,环境致癌物诱导基因突变,DNA,修复障碍者，肿瘤发病率高,二、细胞癌变学说的发展,6,7,二、细胞癌变学说的发展,基因调控失常学说,基因未突变，表达调控异常而致瘤,证据,有些肿瘤染色体数目无异常,肿瘤特异性抗原未被鉴定,胚胎期基因的异常活性,肿瘤细胞可被正常逆转,恶性肿瘤的逆转治疗,将肿瘤细胞逆转为普通细胞的关键基因,8,二、细胞癌变学说的发展,乳腺癌与,HER2,基因扩增,人表皮生长因子受体,2(Human Epidermal growth Factor Receptor 2,，,Her2),为原癌基因，与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关，对治疗药物的选择至关重要,(,如赫赛酊,曲妥珠，,Herceptin),。,检测方法：,IHC,：,-,+,，,+,，,+,FISH,：红色,/,绿色信号,1.8-2.2,CISH,RT-PCR,乳腺癌患者,Her2,基因,FISH,法检测的临床应用研究,GDMCBL,9,10,癌基因,(oncogene),学说,1911,年,Rous,用鸡肉瘤的无细胞滤液复制鸡肉瘤,病毒癌基因与细胞癌基因,1969,年,Huebner,与,Todaro,提出癌基因学说,三、癌基因学说,11,原癌基因分类及功能,生长因子家族,: sis,int-2,生长因子受体家族,:erbB, kit, ros, met ,蛋白酪氨酸激酶家族,:abl, src, yes.,G,蛋白家族,:H-ras, K-ras, N-ras,核蛋白转录因子家族,:fos, jun, myc,三、癌基因学说,12,三、癌基因学说,原癌基因活化机制,病毒癌基因启动子插入,:SRC,点突变,:RAS,ErbB2,基因扩增,:UBE2C,SIS, MYC, ErbB2,染色体重排或易位,:MYC,BCR/ABL,原癌基因低甲基化与抑癌基因的高甲基化,:RAS, RB, P16, APC,13,Burkitts,lymphoma,c-myc,基因染色体转位,14,原癌基因 活化机制 相关肿瘤,Ras,点突变 肺癌，结肠癌,Myc,易位,Burkitt,淋巴瘤、肺癌,bcl-2,易位,B,细胞淋巴瘤,erb-B2,扩增 乳腺癌、肺癌、胃癌,Sis,过度表达 骨肉瘤,15,四、抑癌基因的发现及作用机制,抑癌基因,Tumor suppressor gene,是一类对细胞生长起,负调节作用,的基因,主要作用是抑制细胞的过度增殖,丢失、突变,或,过甲基化,时细胞恶性生长,发现,细胞融合实验,Harris H, et al. Suppression of malignancy by cell fusion. Nature. 1969 Jul 26;223(5204):363-8.,“,两次突变假说（,two hit hypothesis)”,等位基因的杂合型丢失（,loss of heterozygosity,，,LOH,）,16,抑癌基因 功能 相关肿瘤,Rb,调节细胞周期,RB,、成骨肉瘤、胃癌,p53,转录调节因子 胶质母细胞瘤、结肠癌,WT,负调控转录因子,WT,、横纹肌肉瘤、肺癌,NF-1,抑制,RAS,信号和,p21,神经纤维瘤、嗜铬细胞瘤,p21 CDK,抑制因子 前列腺癌,17,四、抑癌基因学说,Rb,基因,第一个被克隆的抑癌基因（,1986,）,18,四、抑癌基因学说,Rb,基因,与,E2F,结合而调节细胞周期,磷酸化,/,去磷酸化是其活性的调节机制（磷酸化后解除与,E2F,因子的结合）,细胞周期,G0,、,G1,期，表现为去磷酸化，,G2,、,S,、,M,期则处于磷酸化状态,RB,基因缺失、突变失活，或者与肿瘤病毒产物结合而失活，诱导细胞增殖,19,20,p53,基因,1983,年被克隆，,1989,年确定为抑癌基因,17p13.1,，全长,20kb,，,11,外显子，,10,内含子，编码,53kDa,核蛋白,与,DNA,和蛋白质结合，功能复杂（参与细胞周期，细胞凋亡，抑制肿瘤进展）,具有突变热点区域,缺失与突变与,50%60%,人类肿瘤有关,四、抑癌基因学说,21,22,23,四、抑癌基因学说,p16,基因,BRCA,基因,nm23,基因,APC,基因,24,五、细胞癌变学说,-,其他基因,细胞周期调控基因,Cyclins-CDKs-CDKIs,细胞周期调控与肿瘤,细胞周期与抗肿瘤治疗展望,细胞周期标记物在肿瘤中的应用,Cyclin D,鼻咽粘膜增生,Cyclin D,鼻咽癌,25,五、细胞癌变学说,-,其他基因,DNA,修复基因,易感肿瘤的遗传性疾病与,DNA,修复基因异常有关,Bloom,综合征（先天性毛细血管扩张红斑及发育异常）,着色性干皮病（患者在,20,岁之前会在紫外线暴露部位发生肿瘤，其中皮肤基底细胞癌，鳞状细胞癌及恶性黑素瘤的发生风险比正常人高出,1000,倍 ）,Fanconi,贫血,人 类,DNA,修 复 基 因,DNA,修复基因与肝癌关系的研究进展,26,五、细胞癌变学说,-,其他基因,凋亡相关基因,Bcl-2,及,Bcl-2,家族,: Bcl2/Bax,比值变化,P53,C-myc,ICE,及,ICE,家族,BCL-2,免疫组化染色,27,三氧化二砷诱导肿瘤凋亡,As,2,O,3,作用,PML,基因 治疗,M3,中国工程院院士王振义和中国科学院院士陈竺将,As,2,O,3,（俗称砒霜）与西药结合起来用于治疗白血病，使急性早幼粒细胞白血病患者的“五年无病生存率”从约,25%,跃升至约,95%,。这种联合疗法目前是全世界急性早幼粒细胞白血病的标准疗法,28,五、细胞癌变学说,-,其他基因,分化相关基因,AML M3 PML-RAR,融合蛋白,维甲酸,诱导分化,诱导分化疗法应用的现状,分化相关基因,NDRG1,与肿瘤,29,五、细胞癌变学说,-,其他基因,端粒及端粒酶,telomere and telomerase,30,端粒,1,、概念：,真核细胞线性染色体末端的一组重复,DNA,序列 ，通常由富含鸟嘌呤核苷酸,(G),的短的串联重复序列组成。,2,、组成：,DNA,：短的串联重复序列，不含功能基因。,蛋白质：与单链富,G,端粒,DNA,结合的蛋白；与双链端粒,DNA,结合的蛋白,GDMCBL,31,32,端粒酶,1,、概念：端粒酶是一种,RNA,与蛋白的复合体，它以自身,RNA,上的一个片段为模板通过逆转录合成端粒重复序列，并通过一种,RNA,依赖性聚合酶（如逆转录酶）机制加到染色体,3,末端以延伸端粒。,2,、组成：,RNA,（作为模板）,蛋白质（反转录酶）,3,、作用机制：在端粒,DNA,的复制时，端粒酶既有模板，又有逆转录酶这两方面的作用。其与端粒,3,端结合后，以其,RNA,为模板，经反转录延长端粒，从而保护,DNA,双链末段免遭降解及相互融合。,33,五、细胞癌变学说,-,其他基因,miRNA,真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码,RNA,大小长约,2025,个核苷酸,成熟的,miRNAs,是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进,RNA,诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶,mRNA,，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶,mRNA,或者阻遏靶,mRNA,的翻译,miRNA,参与各种各样的调节途径,34,miRNA,特点,广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的短序列,RNA ,它本身不具有开放阅读框架,(ORF) ;,通常的长度为,18,25 nt ,但在,3,端可以有,1,2,个碱基的长度变化,;,成熟的,miRNA 5,端有一磷酸基团, 3,端为羟基,这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能,RNA,的降解片段区别开来；,多数,miRNA,还具有高度保守性、时序性和组织特异性。,35,miRNAs,与癌症,约,50%,得到注解的,miRNAs,在基因组上定位于与肿瘤相关的脆性位点（,fragile site,）。这说明,miRNAs,在肿瘤发生过程中起至关重要的作用，这些,miRNAs,所起的作用类似于抑癌基因和癌基因的功能，有研究人员将,miRNA,命名为“,oncomirs”,36,充当抑癌基因作用的,miRNA,mir-125b-1,:,位于染色体的,11q24,脆性位点，乳腺癌、肺癌、卵巢癌、子宫癌病人中,11q924,位点常有缺失，而这一位点并不存在已知的抑癌基因。,miR-15a,和,miR-16-1,:,负调控,BCL2,，这两个,miRNAs,的缺失或下调，导致了,BCL2,表达的升高，促进了白血病、淋巴瘤和前列腺癌的发生。,mir-143,和,mir-145,:,结肠癌中明显下调。其发夹结构的前体分子在肿瘤和正常组织中含量相似，这表明，可能是由于其成熟过程受到破坏。,mir-143,和,mir-145,的肿瘤抑制基因功能不仅仅局限于结肠癌，在乳腺癌、前列腺癌、子宫癌、淋巴癌等细胞系中其表达量也明显下调,37,肺癌病人的,let-7,表达显著降低，并且这导致这些病人更差的预后，,非小细胞肺癌,病人的,let-7,表达水平越低，其预后越差，术后生存期越短。体外组织培养实验表明，在人的肺癌细胞中瞬时的表达,let-7,可以抑制细胞的增殖，这也说明,let-7,在肺组织中可能是一个抑癌基因。实验表明，在人类细胞中,let-7,通过,3,非翻译区域直接抑制癌基因,Ras,的表达。大约有,15-30%,的人类肿瘤都含有,Ras,突变，而激活的突变导致这个蛋白表达上升可以引起细胞转化。因此，能够调节,Ras,蛋白表达的,let-7,，可以控制细胞的增殖速度。,38,充当癌基因作用的,miRNA,miR-21,:,胶质母细胞瘤中表达量比正常组织高,5-100,倍。反义核酸的研究发现这个,miRNA,通过抑制凋亡而并非影响细胞增殖控制细胞生长，这预示着这个,miRNA,具有癌基因的功能。另一项独立研究，利用芯片来检测肿瘤和正常组织的,245,个,miRNAs,的表达水平，也发现胶质母细胞瘤中,miR-21,表达升高。由于,mir-21,不是一个大脑特异性的基因，在乳腺癌样品中表达也有增加，这个基因可能在肿瘤发生中起到广泛的作用。,39,Metzler,等人发现，在,BIC,基因上具有一段,138,个核苷酸的保守序列，编码,mir-155,的发夹结构。该研究组还发现在,Burkitt,淋巴瘤,中，,miR-155,表达量上升了,100,倍，此外的研究也发现，,Hodgkin,淋巴瘤等肿瘤中,miR-155,水平也有提高。因此，,mir-155,可能是作为一个癌基因和,MYC,协同作用，而其正常功能是在,B,细胞的分化中起作用，其可能的靶基因是那些对抗,MYC,信号通路的基因。,40,miRNA,鉴定及功能研究手段,目前鉴定,miRNA,常用的方法包括,直接克隆鉴定,，,miRNA,芯片分析,和,生物信息学预测,。计算机预测的,miRNA,必须经过,RT-PCR,或,Northern,试验分析才能鉴定，另外也可以通过,miRNA mimics,和,inhibitors,从功能上进行实验鉴定。,41,miRNA mimics,是模拟生物体内源的,miRNAs,，运用化学合成的方法合成，能增强内源性,miRNA,的功能。而,miRNA inhibitor,是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶,miRNA,的抑制剂。,GDMCBL,42,Mechanism of RNAi (shRNA/miRNA,）,43,miRNA,与肿瘤,microRNA,肿瘤发生,miR-9,神经母细胞瘤,miR-10b,乳腺癌,miR-15,、,miR-15a,白血病、垂体腺瘤,miR-16,、,miR-16-1,白血病、垂体腺瘤,miR-17-5p,、,miR-17-92,肺癌、淋巴瘤,miR-20a,肺癌、淋巴瘤,miR-21,乳腺癌、胆管腺癌、,头颈癌、白血病、宫颈,癌,miR-29,、,miR-29b,白血病，胆管腺癌,miR-31,结肠直肠癌,miR-34a,胰腺癌,miR-96,结肠直肠癌,miR-98,头颈癌,miR-103,胰腺癌,miR-107,白血病、胰腺癌,miR-125a,、,miR-125b,神经母细胞瘤、乳腺癌,miR-128,胶质母细胞瘤,miR-133b,结肠直肠癌,miR-135b,结肠直肠癌,44,miR-143,结肠癌、宫颈癌,miR-145,乳腺癌、结肠直肠癌,miR-146,甲状腺癌,miR-155,乳腺癌、白血病、胰腺癌,miR-181,、,miR-181a,、,miR-181b,、,miR-181c,肺癌、白血病、胶质母细胞瘤、甲状腺癌,miR-183,直肠结肠癌,miR-184,神经母细胞瘤,miR-196a-2,胰腺癌,miR-221,胶质母细胞瘤、甲状腺癌,、,胰腺癌,miR-222,甲状腺癌,miR-223,白血病,miR-301,胰腺癌,miR-376,胰腺癌,let-7,、,let-7a,、,let-7a-1,、,hsa- let-7a-2,、,let-7a-3,肺癌、结肠癌,45,Mature miRNA,的检测,利用,PAP,（,Poly A Polymerase,） 加尾法,通用性高；适用于同一样本检测多种,miRNA,经济、方便,GDMCBL,46,miRNA Primer Array,个性化,Primer Array,提供的六种排布形式，如上所示（不同颜色代表检测样品，同色中的各孔代表检测的各个基因）：,A.,每,96-well-Plate,可进行,8,基因、,12,个样品的检测；,B.,每,96-well-plate,可进行,16,基因、,6,样品检测；,C.,每,96-well-Plate,可进行,24,基因、,4,样品检测；,D.,每,96-well-Plate,可进行,32,基因、,3,样品检测；,E.,每,96-well-Plate,可进行,48,基因、,2,样品检测；,F.,每,96-well-Plate,可进行,96,基因、单样品检测。,47,miRNA Target,的分析,研究发现，在哺乳动物中，,miRNAs,的基因抑制作用是通过其,5,一段长为,6,8nt,的核苷酸与,mRNAs3,端非翻译区域相结合实现的。一般这段核苷酸位于,miRNA,序列,5,的,28,个,nt,，被称为,seed,区。,48,有关,miRNA,文献,http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed,应用微阵列芯片分析人不同分化鼻咽癌细胞株,miRNA,的表达,.,在线工具：,MiRanda,、,TargetScan,、,PicTar,、,DIANA-microT,软件,http:/www.targetscan.org/,49,六、癌变过程的多阶段性与多步多击性,癌变过程的启动、促进与进展,启动,:,致癌物引起染色体基因突变或基因外,DNA,突变,促进,:,阈下剂量致癌剂刺激后促癌剂再多次刺激诱导癌变,进展,:,转化细胞成瘤并出现异质性,50,实验 处理方法 癌肿,i i i i i i i i i i i i i i + (3/102,i o o o o o o o o o -,o p p p p p p p p - (1/106),i p p p p p + (36/83),p p p p i -,I,：,9,10,二甲,1,2,苯并蒽,(DMBA),P,：巴豆油,1942 Berenblun,实验,51,致癌物与促癌物的协同作用,致癌的二阶段学说,致癌物,激发过程,促癌物,促进过程,52,七、癌变的发生是个多阶段的过程,正常上皮过度增生早期腺瘤中期腺瘤晚期腺瘤结肠腺癌,53,癌变多阶段的分子基础,体外转化实验中癌基因协同效应（,in vitro,）,Land,实验表明，在绝大多数情况下单个癌基因并不足以引起细胞转化,H-Ras,转染成纤维细胞后可使其发生停泊非依赖性生长而在软琼脂中产生集落，但在连续传代时细胞死亡，也不能在裸鼠体内产生肿瘤。,把两个癌基因,(,如,H-Ras,与活化的,Myc),一起导入成纤维细胞就能使其发生有效转化。,Land,据此认为,H-Ras,基因产物使细胞发生形态改变并降低对血清需求而导致其出现停泊非依赖性生长，而,Myc,基因产物则使细胞永生化。,54,癌变多阶段的分子基础,转基因动物模型提供了癌基因协同效应的体内证据 （,in vivo,）,1987,年,Sinn,等利用转基因动物模型成功地证实了癌基因在体内的协同效应,以小鼠乳腺肿瘤病毒,MMTV,作为调控序列，构建,MMTV-c-Myc,转基因，所产生的转基因小鼠在,3,4,个月时发生乳腺肿瘤，而且肿瘤呈散发性分布，局灶性成长,而构建的,MMTV-Ras,转基因所形成的转基因鼠发瘤时间较,MMTV-c-Myc,早；,当上述两种转基因鼠交配所获的,F1,代小鼠，其发生乳腺肿瘤的速率大大高于单一携带,Myc,或,Ras,的转基因鼠。,55,八、癌基因学说在肿瘤防治中的意义,肿瘤的基因诊断,从基因的角度对疾病作出诊断,又称,DNA,诊断,基因诊断的利用例子：,地中海贫血,乳腺癌,HER2 FISH test,淋巴瘤染色体异位检测,IGH/BCL2,t (14;18) (q32;q21),染色体易位,IGH/MYC,t (8;14) (q24;q32),染色体易位,IGH/CCND1 t(11; 14)(q13;q32),染色体易位,API2/MALT1 t(11;18)(q21;q21),染色体易位,IGH/MALT1,t (14;18) (q32;q21),染色体易位,BCR/ABL t(9;22),染色体易位,【,费城染色体,】,56,基因诊断的内容,明确特定基因是否正常,明确疾病相关基因的异常情况,基因扩增情况,基因酶切位点情况,基因连锁分析,基因转录产物分析,57,基因诊断,基因诊断的方法,DNA,重组技术,细胞成分示踪技术,mRNA,与蛋白的检测,基因诊断流程,58,肿瘤基因诊断例子,59,Her2,基因检测流程,石蜡组织标本,IHC,检测,再用,FISH,方法检测,1+,3+,2+,+,Herceptin,治疗,+,再用,FISH,方法检测,Herceptin,治疗,FISH,检测,+,再用,FISH,方法检测,+,60,疾病,名称,检测探针,标记颜色,探针定位,探针名称,乳腺癌,GLP Her2,/ CSP17,红,/,绿,Her2,：,17q11.2-q12,CSP17:,17p11.1q11.1,CSP17,:,17,号染色体着丝粒,正常,: 2,红,/2,绿,异常,:,红信号,大于2,为异常细胞,(,绿色信号不少于2个的细胞,),Her-2,基因,FISH,探针组,61,DAPI,染色后与,HE,切片对比图,观察浸润部分,导管内癌,62,结果判断,统计,Ratio,值（计数,浸润性部分,的,20,个细胞）,Ratio,值,20,个细胞核中红信号总数,/,绿信号总数,Ratio,1.8,为阴性结果,Ratio,2.2,或众多信号连接成簇时可不计算为阳性结果,比值,2,4,为低度扩增,4,10,为中度扩增,10,为高度扩增,Ratio,在,1.8-2.2,之间时，则需要再计数,20,个细胞核中,的信号。如仍为临界值，则应在,FISH,检测报告中注明。,63,A,.,无须计数的大簇团信号（高度扩增）,B.,颗粒状信号（,R10,，高度扩增）,C.,须计数的颗粒状信号（,R=3.5,，低度扩增）,A,C,B,Her-2,基因扩增状况,GDMCBL,64,Her-2,基因无扩增情况,红信号数,2,，同时绿信号非整倍体,R,30%,的肿瘤细胞全部,的细胞膜高强度着色,免疫组化,（,3+,）,与,FISH,对比图,40,100,浸润性导管癌,级,IHC,：,+,FISH,：呈,簇团状高度扩增,100,68,免疫组化,（,2+,）,与,FISH,对比图,1.,30%,的肿瘤细胞全部,的细胞膜,弱至中等,着色,40,浸润性导管癌,级,IHC,：,+,FISH,：,Ratio5,，中度扩增,100,69,免疫组化,（,2+,）,与,FISH,对比图,2.,30%,的肿瘤细胞全部,的细胞膜弱至中等着色,40,100,浸润性导管癌,级,IHC,：,+,FISH,：,Ratio,1.45,，无扩增,70,30%,的肿瘤细胞弱的着色,免疫组化,（,1+,）,与,FISH,对比图,1,40,100,浸润性导管癌,级,IHC,：,+,FISH,：,Ratio,1.62,，无扩增,71,免疫组化,（,1+,）,与,FISH,对比图,2,40,100,浸润性导管癌,级,IHC,：,+,FISH,：簇状扩增,30%,的肿瘤细胞弱的着色,72,免疫组化,（）,与,FISH,对比图,1,100,40,浸润性导管癌,级,IHC,：,FISH,：,Ratio,1.02,，,Her2,基因无扩增,7%,的细胞出现黄色融合信号,81,病例,1,：,男,，,74y,腹腔肿物；,FISH,：,54%,的细胞可见融合信号；,诊断,：,FL,。,4,40,100,82,病例,2,：女、,36,颈部肿物,抗炎治疗后（出现变性坏死）,诊断：,DLBCL,FISH,：阳性，,10%,的细胞可见融合信号,40,IHC:BCL2,100,83,肿瘤的基因治疗,基因治疗概念,将遗传物质转入机体细胞，达到治疗（预防）疾病的目的,美国已经批准,613,项试验性基因治疗，欧洲批准了,213,项，我国也批准了,3,项，包括肿瘤和血友病。,全世界有超过,4000,名患者参与了实验性基因治疗。,基因治疗方式,基因原位修复,基因增补,84,基因治疗,基因增补疗法需要考虑的因素,靶点选择,目的基因导入的途径与方法（,in vivo,and,ex vivo,),病毒介导法,化学介导法,物理介导法,85,基因治疗,肿瘤基因治疗策略,直接应用抗癌基因治疗,抑癌基因如,p53,重组人,p53,腺病毒注射液（商品名今又生 ）。,2003,年,10,月,16,日，国家食品药品监督管理局批准重组人,p53,腺病毒注射液新药证书，意味着世界上第一个癌症基因治疗药物在中国诞生,反义核酸或核酶,“,自杀基因,”：,HSV-TK,增强肿瘤免疫原性：,B7,，,MHC,增强抗癌细胞免疫因子：,ILs,，,TNF,逆转肿瘤细胞耐药：多药耐药基因（,MDR,）,86,基因治疗,肿瘤基因治疗存在的问题,基因治疗的安全性,基因导入效率及调控表达水平,基因治疗载体系统,精准医学,Precision medicine,概念,是应用现代遗传技术、分子影像技术、生物信息技术，结合患者生活环境和临床数据，实现精准的疾病分类及诊断，制定具有个性化的疾病预防和治疗方案,意义,提高疾病诊治水平，惠及民生与国民健康,;,推动医学科技前沿发展，增强国际竞争力,;,发展医药生物技术，促进医疗体制改革,;,形成经济新增长点，带动大健康产业发展。,87,Precision medicine,美国版,PM,提出,2011,年美国国家科学院（,NAS,）、美国国家工程院（,NAE,）、美国国立卫生研究院（,NIH,）及美国国家科学委员会（,NSB,）共同发出迈向精准医学的倡议,2015,年,1,月,20,日美国总统奥巴马在国情咨文演讲中提出了“精准医学计划”（,PMI,），呼吁美国要增加医学研究经费，推动个体化基因组学研究,2015,年,1,月,30,日奥巴马总统正式批准,PMI,，提议国会在,2016,年财年向该计划投入,2.15,亿美元，以推动个性化医疗的发展,同时，,FDA,计划建立一个精准,A,平台，为研究人员、新一代测序技术开发者提供存放和共享基因信息的云工具,PM,的关键词是遗传学信息与诊断和治疗,88,Precision medicine,中国版,PM,的提出,国家,973,计划首席科学家、中国科学院副院长、中国协和医科大学副校长、国家精准医疗战略专家组负责人,詹其敏,院士为主要推动者,2015,年,3,月，科技部举办首届国家精准医疗战略专家会议并成立由,19,人组成的专家委员会。计划在,2030,年前投入,600,亿元用于,PM,3,月,27,日，国家卫生和计划生育委员会公布了首批,11,个肿瘤基因测序临床应用试点单位,4,月,21,日清华大学精准医学论坛提出研究制定重大科技专项，以推动精准医学的发展,筹建清华大学精准医学研究院，建设中国科学院系统研究所,精准医疗已被纳入“十三五”重大科技专项，上升为国家战略，成为医药大健康产业发展的驱动引擎。精准医疗将改变现有的诊疗模式，为医学发展带来一场革命性的变化,89,PM,与,Pathology,传统的组织学的诊断是临床病理学的基础,分子病理学是对传统诊断的补充和完善。从分子水平判断肿瘤的生物学行为及其预后，能够有效的提高对肿瘤患者的治疗水平和提高对肿瘤疾病的判断准确性，提高病人治愈率和对治疗的信心,疾病的分子分型,分子治疗靶标检测,高危因素等预后分子指标,钟南山院士曾说过“临床病理水平是衡量国家医疗质量的重要标志”,90,分子病理学研究手段,原位杂交,:,ISH,FISH,CISH,SISH,基于,PCR,平台的检测,经典的,PCR,，如淋巴瘤重排,实时荧光,PCR,（,Real time PCR,）,扩增阻滞突变系统（,Amplification Refractory MutationSystem,，,ARMS),核酸测序技术,Sanger,测序,下一代测序技术（,Next-generation sequencing,，,NGS,）,GDMCBL,91,肿,瘤,分,子,治,疗,靶,点,GDMCBL,92,GDMCBL,93,GDMCBL,94,GDMCBL,95,GDMCBL,96,GDMCBL,97,GDMCBL,98,GDMCBL,99,100,思考题,怎样理解,wt-p53,基因在人类肿瘤发生中的“分子警察” 作用？,假设,A,基因是一个新近发现的肿瘤相关基因，请设计一个（组）实验来证实其属于癌基因还是抑癌基因及如何实现基于,A,基因靶点的肿瘤基因治疗。,基于细胞周期理论对肿瘤治疗有何启示？,CPC,A1478,陈,女,63,岁,病史：五个月前胃疼，逐渐加重，服胃舒平、去痛片等稍 见缓解。,三个月前持续胃痛、胃胀、呕吐，并有便血和呕血。入院后体检发现锁骨上多个淋巴结肿大变硬，肝脏肿大。胃肠透视发现胃小弯侧近幽门处有充盈缺损，,B,超显示肝脏有多个大小不等强回声团。,患者逐渐消瘦、贫血，腹胀及腹水，并出现咳血、咳脓痰及呼吸困难等症状，,X,线显示肺部多发散在、界限清楚的圆形病灶，多靠近胸膜，之间可见散在模糊片状阴影。经抗感染治疗无效，入院后二个月死亡。,101,