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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,适合专业(群):食品加工技术专业群,教师:万国福,食品微生物技术,实训项目教程,行动领域,任务一,菌落总数测定,任务二,大肠菌群检验,任务三,霉菌、酵母菌检验,任务四,乳酸菌检验,前期准备,试管、平皿和吸量管,包扎灭菌,行动领域,任务一,菌落总数测定,一、目的要求,1、学习活菌计数的计数方法。,2、掌握食品细菌总数的测定报告方式。,二、实验原理,本实验采用平板计数技术测定水中细菌总数。细菌总数主要作为判定被检水样污染程度的标志,是指1m,L,水样在肉膏蛋白胨琼脂培养基中,置37经24小时培养后,所生长的细菌菌落的总数。,三、实验材料,1、培养基:,LST,培养基、,GLGB,培养基,2、器皿:已灭菌的1m,L,吸管,,,试管,(,15150),三角锥瓶500m,L,、三角锥瓶500m,L,(内装蒸馏水2,25,m,L,),10m,L,吸管,3,、其他:牛皮纸或报纸,酒精灯,棉花,高压蒸汽菌锅,电烘箱,线绳,,,毛刷等,四、操作方法,1、样,品,的采,样,依据取样原则采样。,2、细菌总数测定,(1)稀释水样 以无菌操作,将检样25m,L,放于含有225m,L,灭菌水的三角锥瓶中,摇匀,做成1:10的均匀稀释液。,三、实验器材,1、培养基:,平板计数琼脂培养基,2、器皿:已灭菌的平皿,1m,L,吸管,,,试管,(,15150),三角锥瓶500m,L,、三角锥瓶500m,L,(内装蒸馏水2,25,m,L,),10m,L,吸管,3,、其他:牛皮纸或报纸,酒精灯,棉花,高压蒸汽菌锅,电烘箱,线绳,,,毛刷等,取一支lm,L,吸管插入吸取1,10稀释液1ml注入含有9m,L,灭菌水的试管内,振摇试管,混合均匀,做成1,100稀释液。,另取1m,L,灭菌吸管按上述操作顺序操作10倍递增稀释液,如此每递增释1次,即换用1支1m,L,灭菌吸管。,分别吸取1m,L,,依次稀释,用每个,稀释度的移液管吸1ml稀释液注入灭菌平皿内,每个稀释度三个平皿。,10,-1,10,-2,10,-3,稀释液移入平皿后,应及时将凉至46的肉汤蛋白胨琼脂培养基(可放置50水浴保温),倾注入平皿内,约15ml,并迅速转动平皿使之混合均匀。,注意摇晃左3圈右3圈,凝固后倒置于37培养箱中培养24小时后取出,计算平皿内菌落数目。,3菌落计数方法(参见GB4789.2-2010),(1)先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个培养皿有较大片状菌苔生长时,则不应采用,而应以无片状菌苔生长的培养皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到培养皿的一半,而其余的一半菌落分布又很均匀时,则可将此一半的菌落数乘2以代表全培养皿的菌落数,然后再计算该稀释度的平均菌落数。,(2)公式计算,(3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。,(4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。,(5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间,则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。,五、实验,数据及结果,将各稀释平板上的菌落数填入下表,稀释度,10,1,10,2,10,3,平板号,1,2,3,平均,1,2,3,平均,1,2,3,平均,菌落个数,根据试验结果,报告检测结果:,被检样品每,1mL,(,g,),中食品菌落总数为:,。,谢谢观看!,
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