第09章生物碱类药物的分析(精品)

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,二、生物碱类药物的通性,1,.,碱性,季铵碱脂肪胺、脂环胺芳胺、,N-,芳杂环酰胺,小檗碱麻黄碱、阿托品罂粟碱咖啡因,吗啡具酸碱两性,2.,溶解性,游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解,生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂,3.,旋光性,一般多为左旋体有效。,第二节 鉴别试验,一、特征鉴别反应,（一）双缩脲反应,侧链具有氨基醇结构,（二）,Vitali,反应,托烷生物碱,（三）绿奎宁反应,硫酸奎宁、硫酸奎尼丁,（四）,Marquis,反应,吗啡生物碱,（五）,Frohde,反应,吗啡生物碱,（六）官能团反应,吲哚生物碱,1.,利血平,+,新制香草醛玫瑰红色,2.,（七）紫脲酸胺反应,黄嘌啉类生物碱,（八）还原反应,吗啡与磷酸可待因的区分反应,二、一般鉴别反应,（一）熔点测定法,（二）沉淀反应,常用的生物碱沉淀试剂为：,1.,重金属盐类，如,K,2,HgI,4,、,KBiI,4,、,I,2,KI,、二氯化汞等；,2.,大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。,（三）显色反应,常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸等,（四）,UV,（五）,IR,（六）色谱法,1.HPLC 2.TLC,硅胶为吸附剂：游离生物碱能顺利迁移，生物碱盐类吸附太牢，造成严重拖尾。,解决方法：,（,1,）在展开剂中加少量的碱性试剂，如氨、二乙胺、有机脂烃胺类；,（,2,）硅胶板用碱处理,第三节 特殊杂质检查,特殊杂质检查主要根据药物与杂质的理化性质差异来进行。,利用药物和杂质在颜色、溶解行为、旋光性质、对光吸收选择性等物理性质上的差异，检查杂质是否符合限量规定,一、物理法,（,一）溶解行为的差异,利用药物与杂质在溶解性方面的差异进行检查。如硫酸奎宁中无机盐的检查；吗啡中其他生物碱的检查。,（,二）旋光性质的差异,如,硫酸阿托品中“,莨菪碱,”,的检查。,（,三）对光吸收性质的差异,如利血平中氟化产物的检查，利血平供试品置于,365nm,紫外光灯下检查，不得显明显荧光。,（四）吸附或分配性质的差异,如硫酸奎宁中“其他金鸡纳碱”的检查，利用其吸附性质的差异。,二、化学法,利用药物与杂质在化学性质上的差异进行检查。如生成沉淀或显色反应。,一、非水溶液滴定法（非水碱量法）,原料药,（一）原理,水溶液中滴定突跃不明显，在非水介质中，碱性增强，使滴定顺利进行,第四节 含量测定,1.,溶剂：,冰醋酸、冰醋酸,+,醋酐、醋酐,2.,滴定剂,：,高氯酸的冰醋酸溶液,或高氯酸的二氧六环溶液,有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类,8,p,K,b,10,冰醋酸作溶剂,10,p,K,b,12,冰醋酸,+,醋酐,p,K,b,12,醋酐,（二）适用范围,3.,指示终点的方法,电位法,：玻璃,甘汞电极系统,指示剂法,：结晶紫、喹哪啶红等,HClO,4,溶液稳定性,一般采用半微量法,。,Chp,（,2000,）测定方法为：取供试品适量,约,消耗高氯酸滴定液（,0.1 mol/L,）,8 ml,，加冰醋酸,10,30 ml,使溶解。若供试品为氢卤酸盐，应再加,5,醋酸汞的冰醋酸溶液,3,5 m1,，加各药品项下规定的指示液,1,2,滴，用高氯酸滴定液（,0.1mol/L,）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。,（三）一般测定方法,（四）生物碱盐类的滴定,置换滴定：,无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：,高氯酸氢溴酸盐酸硫酸,HSO,4,-,硝酸其它弱酸（磷酸、有机酸）,由于有机酸系弱酸，被高氯酸置换出的,HA,，对滴定无干扰，能准确滴定。,1.,有机酸盐的测定,一般均预先在溶液中加入,Hg(Ac),2,的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。,理论量,1,3,倍,2.,氢卤酸盐的测定,生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。,（,1,）直接滴定,3.,硫酸盐的测定,注意硫酸盐的结构，正确判断反应的摩尔比。,A.,硫酸阿托品,HClO,4,直接滴定时，反应摩尔比为,11,B.,硫酸奎宁,HClO,4,直接滴定时，反应摩尔比为,13,滴定反应如下：,+,3HClO,4,+,用,HClO,4,直接滴定硫酸喹宁时，摩尔比是,13,（,2,）加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后滴定,硫酸奎宁 反应摩尔比为,12,硫酸阿托品 不能滴定,因,HNO,3,具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示终点。如硝酸士的宁,4.,硝酸盐的测定,按常法测定，,如磷酸氯喹、磷酸可待因,5.,磷酸盐的测定,简便、快速、准确、精密、取样量小，测定的是生理活性部分。,如有酸性或碱性成分存在时会影响，选择性差，不能直接用于制剂分析，只能用于原料药测定。,（五）特点,（六）片剂分析,片剂中许多赋形剂如硬脂酸盐、苯甲酸盐、羧甲基纤维素钠等都消耗高氯酸，因此片剂的测定一般需提取分离并经干燥后才可进行。,如硫酸奎宁片,碱化、有机溶剂提取后，供试品成为游离碱，如,1mol,硫酸奎宁,2mol,奎宁消耗,4mol HClO,4,，所以用,HClO,4,滴定时，反应摩尔比为,14,即片剂滴定度不同于原料药。,二、提取中和法（,提取酸碱滴定法、提取容量法）,（一）原理与方法,1.,碱化,2.,有机溶剂提取,3.,中和法测定,（,1,）,直接滴定法 用于碱性较强的生物碱,（,2,）剩余滴定法 用于碱性较弱的生物碱,（,3,）酸滴定液返提后剩余滴定法 用于对热不稳定的生物碱,1.,碱化试剂,最常用氨水,2.,提取溶剂,（,1,）提取溶剂选择的原则,（,2,）常用的提取溶剂 最常用氯仿,（二）测定条件的选择,（,3,）提取溶剂的用量及提取次数,通常应提取,4,次，第一次用量至少应为水液体积的一半，以后几次应各为第一次的一半,3.,提取终点的确定,用合适的沉淀反应确定,4.,指示剂的选择,（一）基本原理,在适当的,pH,介质中,三、酸性染料比色法,制剂,步骤：水相中反应有机溶剂提取比色法测定,1.,水相的最适,pH,值,如果水相,pH,值过小，酸性染料几乎仍以分子状态存在；如果水相,pH,值过大，则生物碱几乎全部以游离碱的形式存在,2.,有机溶剂的选择,CHCl,3,、,CH,2,Cl,2,（二）影响定量分析的因素,3.,酸性染料的选择,常用溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝（,BTB,）等,4.,水分的影响,严防水分的混入,有机层可加入无水硫酸钠等脱水剂或经干燥滤纸滤过,5.,有色杂质的排除,五、色谱法,（一）高效液相色谱法,1,反相,HPLC,分析生物碱类和有机含氮药物的特点,色谱峰拖尾，保留时间过长，甚至长期地保留在色谱柱上。,2,解决方法,（,1,）加扫尾剂法,最常用的扫尾剂是三乙胺,（,2,）用硅胶作固定相法,（,3,）用金刚烷基硅烷化硅胶作固定相法,四、紫外,可见分光光度法,大多数 生物碱分子结构中含有生色团，可在紫外区产生吸收。,97,：,83,咖啡因和茶碱的特征鉴别反应是,(),A.,双缩脲反应,B.Vitali,反应,C.Marquis,反应,D.,紫脲酸铵反应,E.,绿奎宁反应,96,：,136,用非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，应使用的试剂是,(),A.5,醋酸汞冰醋酸液,B.,盐酸,C.,冰醋酸,D.,二甲基甲酰胺,E.,高氯酸,99,：,78.,非水溶液滴定法测定硫酸奎宁,原料,的含量时，可以用高氯酸直接滴定冰醋酸介质中的供试品，,1,摩尔硫酸奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为,(),A.1 B.2 C.3 D.4 E.5,97,：,130.,非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反应条件为,(),A,冰醋酸一醋酐为溶剂,B.,高氯酸滴定液（,0.1mol/L,）滴定,C,1mol,的高氯酸与,mol,的硫酸奎宁反应,D.,仅用电位法指示终点,E,溴酚蓝为指示剂,96,：,77.,酸件染料比色法中，水相的,pH,值过小，则,(),A.,能形成离子对,B.,有机溶剂提取能完全,C.,酸性染料以阴离子状态存在,D.,生物碱几乎全部以分子状态存在,E.,酸性染料以分子状态存在,99x,：,116120,滴定反应中,A.,被测物与,HClO4,的摩尔比为,11,B.,被测物与,HClO4,的摩尔比为,13,C.,均不是,99x,：,116,硫酸奎宁片经碱化、氯仿提取后用,HClO4,滴定,(),99x,：,117,硫酸阿托品在冰醋酸中用,HClO,4,滴定,(),99x,：,118.,硫酸奎宁原料药用,HClO,4,滴定,(),99x,：,119.,磷酸可待因用,HClO,4,滴定,（）,99x,：,120.,硝酸士的宁用,HClO,4,滴定,（）,95:87.,酸性染料比色法测定生物碱类药物，有机溶剂萃取测定的有色物是,(),A.,离子对和指示剂的混合物,B.,生物碱盐,C.,指示剂,D.,离子对,E.,游离生物碱,95,：,111114,可选择的药物：,A.,阿托品,B.,吗啡,C.,两者均可,D.,两者均不可,95,：,111.,具有酯结构,（）,95,：,112.,为两性化合物,（）,95,：,113.,显较强碱性,（）,95,：,114.,用提取容量法测定,（）,例,.,用非水溶液滴定法测定二盐酸奎宁时，二盐酸奎宁和,HClO,4,的摩尔比是,(),A.11 B.12 C.13 D.14 E.11.5,例,.,检查硫酸阿托品中莨菪碱时，应采用,(),A.,色谱法,B.,红外分光法,C.,旋光度法,D.,显色法,E.,直接检查法,例,.,能够发生,Vitali,反应的药物是,(),A.,盐酸吗啡,B.,硫酸奎宁,C.,磷酸可待因,D.,盐酸麻黄碱,E.,硫酸阿托品,例,1,5,A.,双缩脲反应,B.Marquis,反应,C.,两者皆是,D.,两者皆不是,1.,盐酸麻黄碱,（）,2.,某些生物碱类药物,（）,3.,盐酸吗啡,（）,4.,咖啡因,（）,5.,硫酸奎尼丁,（）,