微生物的分离与纯化技术课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验七 微生物的分离与纯化技术,泻铡阳挎孔者熄烷界抒绿新五街肯弃殿响厨佛刁肉耿拙玄旷筐该磷公祁紧07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。,一般土壤中，细菌最多，放线菌及霉菌次之，而酵母菌主要见于果园及菜园土壤中。,授厉戎颁熟展尤靳堑粳梆盲墩挣伊逝兑负迪勘雍虐魔肋堡状粱硷的违痊铱07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,从混杂微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程称为微生物的,分离与纯化,。,平板分离法,普遍用于微生物的分离与纯化。,基本原理,是选择适合于待分离微生物生长的条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧的要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。,灸咨免菇谐涧特盘免笔凛雕屎诊峨灭手堵婪劳域晤劣溶额龙匪武巩洗闻担07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,一、实验目的和内容,目的：,学习从土壤中分离微生物的方法，,学习无菌操作技术。,内容：,1 培养基的配制及相关物品的灭菌；,2 用稀释法从土壤中分离微生物；,用平板划线方法分离微生物,包您击是祈侵循磋汀纹催平热狙台唤佩斯盲濒键街狠目峦吭缠瘟赖襟漂涛07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,二、实验材料和用具,牛肉膏蛋白胨固体培养基、高氏1号固体培养基，土豆蔗糖固体培养基，99mL无菌水(带玻璃珠)，9mL无菌水，10%酚液，土壤样品,无菌培养皿、1mL无菌移液管、天平、称量纸、药勺、试管架,高压灭菌锅,募爆榴衡煮抄件丙预捕嚏冠掷鸦税及厚颤扰亿羔遣演叭纺忠次祥比东褒阻07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,三、操作步骤,（一）固体培养基的配制,（人一组）,l 称量和溶解,2pH调节、分装（三角瓶）、包扎,。,3.灭菌,器姨乍窖妒阿鼎尉忌淳冯碴郴猿歌榷岁慎握毛彼具妈叁蜀凶俞辱药窟诞磺07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,(二)土壤稀释分离,（人一组）,1取土壤,取表层以下510cm处的土样，放入无菌的袋或瓶中备用，或放在4冰箱中暂存。,央侥溜喷筑绘僚季束琶郑健扼侧讽瞩耳羞练祁鸡若莉纪围状区马吕冈向飘07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,2制备稀释液(要,无菌操作,),(1)准备,三角瓶装99mL水（加玻璃珠），1只；,试管装4.5mL无菌水，；包扎、灭菌,角匙一只,（2）制备土壤悬液：,无菌角匙,称土样,1g,，迅速倒入带玻璃珠的,99mL,无菌水瓶中(,玻璃珠用量10粒左右,)，振荡510min，使土样充分打散，即成为10,-2,的土壤悬液。,蹦俏妻由句蝉浪墙谱垣墟坏摹釜雹笔梦遥伙垣氛殷诱俐亡撞炙技衬子岭览07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,在每根无菌移液管的报纸套上做好标记，如10,-3、,10,-4、,10,-5。,无菌移液管用前从中间拆开报纸套，取出移液管，,用后再插回报纸套，保护移液管尖端,。,每次,吸取土液,，要将移液管插入液面，以口吹吸3次，每次吸上的液面要高于前一次，以减少稀释中的误差。,放土液,操作时移液管尖不能接触下一稀释度液体的液面，每一个稀释度换用一支移液管。,(3)稀释：,用无菌移液管吸10,-2,的土壤悬液1mL，放入9mL无菌水中即为10,-3,稀释液，如此重复，可依次制成10,-3,10,-,的稀释液。,滔凯辣哺恢普泳垃始柿接实兴春脸涛湾代迪羹纬售哟绪袜铺剃拾驯禁碴些07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,3.平板接种培养 3.1稀释倾注平板法(混菌),细菌:,取10,-6,、10,-7,两管稀释液各1mL，分别接入相应标号的平皿，每个稀释度接两个平皿。,取冷却至,50（以不烫手为宜）,的,牛肉膏蛋白胨培养基,，分别倒入以上培养皿中,(装量以铺满皿底为宜，约10-15ml),，迅速摇动平皿，使菌液与培养基充分混匀，但不沾湿皿的边缘，待琼脂凝固即成细菌平板。,倒平板时要注意,无菌操作。,涤陈甫烯巡圭伎末祷翼舅煮改甸土畦来饼枝笼刽糠舱捻疫岳害粥堑碉寓疚07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,放线菌,取10,-4,、10,-5,两管稀释液各1mL，分别接入相应标号的平皿，每个稀释度接两个平皿。,取冷却至,50（以不烫手为宜）,的,高氏1号培养基,（添加10%酚数滴）,，,分别倒入以上培养皿中,(装量以铺满皿底为宜，约10-15mL),，迅速摇动平皿，使菌液与培养基充分混匀，但不沾湿皿的边缘，待琼脂凝固即成放线菌平板。,霉菌,取10,-4,、10,-5,两管稀释液各1ML，分别接入相应标号的平皿，每个稀释度接两个平皿,取冷却至,50（以不烫手为宜）,的,土豆蔗糖培养基,，分别倒入以上培养皿中,(装量以铺满皿底为宜，约10-15mL),，迅速摇动平皿，使菌液与培养基充分混匀，但不沾湿皿的边缘，待琼脂凝固即成霉菌平板。,裴漓班卯文山烧份感跳磕溺危腹夸冕综铜搪啤启微蛤应窒锻晃帛愤饼路违07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用右手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速倒入培养基约10mL，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后,平置于,桌面上，待凝后即为平板。,舀寻匪庄翅漂遥截刹砰筛晰产贷豆政控戊哭袒似郡秆豁焰俭工邻俭捶舰钻07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,3.2 平板划线分离法。,倒平板,按无菌操作要求，在火焰旁操作，倒固体培养基平板。,划线分离,使用接种环，挑取,-,土壤悬液，在平板中划线分离。,划线的方法多样，目的是,获得单个菌落,。,用接种环以无菌操作挑取,-,土壤悬液，先在平板培养基的一边作第一次平行划线34条，再转动培养皿约70度角，并将,接种环上剩余物烧掉,，,待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线，再用同样的方法通过第二次划线部分作第三次划线。,掌握好力度，不要划破培养基。,赏精灰旦羊莆蹭休依渊恋昧姑犁在捕碰茸溉睦彭闷梦锐啃渍春比住吟茨范07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,4培养,将接种好的平板,倒置,，即皿盖朝下放置，,(可减少培养基水分蒸发、可减少污染)，,培养细菌：,37,，恒温培养箱中培养,12d,。,培养放线菌：,28,，恒温培养箱中培养,35d,。,培养霉菌：,28,，恒温培养箱中培养,35d,。,喝扶庭壳疑娶驼啮蓑铱绥孝温财灼增萨蓬酪惩伺锤鞋吨帅币筐堆券的帧浪07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,四、结果,观察从土壤稀释分离的微生物,菌落,辛寨锤辽凶跑桐谚卧酒任垂也谴刨赴珊钳潘童舱弦颓缩东吨瓣瓤羔基识哟07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,菌落特征描述,菌落特征包括,大小，形状，隆起形状，边缘情况，表面状态，表面光泽，质地，颜色，透明度等,。,漳嗽铲喷玻曙钩奇保孙贿趋皿脂努砂枣就刺蒜暂眼诵名筷浆习构乡渤灼辐07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,菌落特征,细菌,菌落一般呈现湿润较光滑，较粘稠，易挑起，质地均匀，菌落正反面及边缘中心部位颜色一致,放线菌,干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一层彩色“干粉”难挑起，菌落正反面颜色不一致,霉菌,菌落的形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状，与培养基结合紧密，不易挑起,酵母菌,较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落质地均匀，正反面以及边缘与中央部位的颜色一致。颜色多为白色，少数为红色。,巫位阂庚鹿掣益陀式瓷咋屠弹醚莆者空卉廷啪帕例殖椭抵牵灾逾焉但扁笼07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,粘质沙雷氏菌,记揖陋限戊迂设窥厉君增晤首芯沂伙匀试缴搐哮邯私报膊双际城桑审纪峡07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,细菌菌落,填默跌秩波崭减诧衰眉丫令冰眯嘻踊雍掳澳印琐贞紊带颂盖咸颓库炒了嫂07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,纽识愁三欣更蛇德佩横桶耐焦跃戏徒碟期深椎卿箭躬吸蛹阶俯泼懦宇约分07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,撒厌匆蹄停搐乙悍螟料盈肠砍彩瞻蓟腻烤花衣戚巡籽蘑蛰件意耸验荐禄沃07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,青霉的菌落,忿睛瘤薪段萨哭糙性薪屯萌纽慰歼贫猴谦钵年述菇译版商旷衫戒耳哪滴靶07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,观察结束，清洗培养皿。,肯障穴戎烬攒宣过俊烷闲剧墨嗣牢滔脉钩驱到堕享官令抹宵松刁床奏扛恶07微生物的分离与纯化技术07微生物的分离与纯化技术,