4.2 高效液相色谱仪

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第,四,章高效液相色谱法和超临界流体色谱法,4.2.1,高效液相色谱,仪与结构流程,4.2.2,主要部件,4.2.3,检,测器,第二节高效液相色谱仪,instrument of HPLC,High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography,2024/10/2,4.2.1,液相色谱仪与结构流程,2024/10/2,液相色谱仪（2）,2024/10/2,液相色谱仪（3）,2024/10/2,液相色谱仪（4）,2024/10/2,液相色谱仪（5）,2024/10/2,液相色谱仪（6）,2024/10/2,1.,结构流程,2024/10/2,2024/10/2,4.2.2,主要部件,(1)高压输液泵,主要部件之一，压力：15010,5,35010,5,Pa,。,为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(10,m)，,液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。,应具有压力平稳，脉冲小，流量稳定可调，耐腐蚀等特性。,（动画）,2024/10/2,(2)梯度淋洗装置,外梯度（高压梯度）:,利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。,内梯度（低压梯度）:,一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。,2024/10/2,(3)进样装置,流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，,结构如图所示：,2024/10/2,(4)高效分离柱,柱体为直形不锈钢管，内径16,mm，,柱长540,cm。,发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。,2024/10/2,(5)检测器,紫外检测器,示差折光检测器 荧光检测器,光电二极管阵列检测器,2024/10/2,4.2.3,检测器,a.,紫外检测器,应用最广，对大部分有机化合物有响应。,特点：,灵敏度高；,线性范围宽；,流通池可做得很小(1,mm 10mm，,容积 8,L)；,对流动相的流速和温度变化不敏感；,波长可选，易于操作；,可用于梯度洗脱。,2024/10/2,b.,光电二极管阵列检测器,紫外检测器的重要进展；,光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。,2024/10/2,2024/10/2,光电二极管阵列检测器,2024/10/2,三维：光谱-色谱图,2024/10/2,c.,示差折光检测器,（,Differential refractive index detector）,除紫外检测器之外应用最多的检测器。,可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度成正比。,通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数）。,灵敏度低，对温度敏感，,不能用于梯度洗脱,。,偏转式、反射式和干涉型三种。,2024/10/2,示差折光检测器,2024/10/2,d.,荧光检测器,（,Fluorescence detector）,高灵敏度，高选择性。,对多环芳烃，维生素,B,，黄曲霉素，卟啉类化合物，农药，药物，氨基酸，甾类化合物等有响应。,2024/10/2,请选择内容,结束,4.1,高效液相色谱法的特性,4.2,高效液相色谱仪,4.3,液相色谱的固定相与流动相,4.4,液相色谱中的主要分离类型,4.5,液相色谱分析条件的选择,4.6,高效液相色谱法的应用,4.7,离子色谱法,4.8,超临界流体色谱法,2024/10/2,