微量分光光度计

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,NanoDrop 2000,超微量分光光度计,内容简介,一,.NanoDrop 2000,超微量分光光度计,(1),仪器描述及规格,(2),检测原理及优点,二,.,软件,(1),使用前准备工作及软件操作界面介绍,三,.,应用,NanoDrop 2000,分光光度计可以检测,0.5-2ul,的样本，而且检测是非常高的准确性和重复性。样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间，这使得仪器可以检测较高浓度的样本而不用稀释。应用这个技术，,NanoDrop 2000,分光光度计检测样本的最高浓度是标准比色皿的,200,倍。,样品臂,检测基座,一,.NanoDrop 2000,超微量分光光度计,(1),仪器描述,仪器类型：分光光度计,最小样品量：,0.5ul,波长：,1mm,（可以自动调整到,0.05mm,）,光源：氙闪烁灯,检测器类型：,2048,象素线型硅,CCD,阵列,波长范围：,190,840nm,波长准确性：,1 nm,光谱分辨率：,1.8nm,吸收光精确性：,0.002,吸光值（,1mm,光程）,吸收光准确性：,2,（,257nm,波长下，,0.76,个吸光值）,吸光值范围：,0.02300,（等同于,10mm,光程时）,检测极限：,2ng/ul dsDNA,最大检测浓度：,15,000ng/ul,（,dsDNA,）,检测时间：,5,秒,仪器占地面积,;14cm20cm,重量：,2kg,样本基座材料：,303,不锈钢以及石英光纤,工作电压,;12V,工作功率,;12,18W,（最大,30W,）,软件兼容性,;Windows XP,和,Vista,（,32bit,仪器规格,(2),检测原理,利用表面张力保持样本形态的专利技术进行检测。只需使用加样器将,1ul,的样品直接加在检测表面上，而无需其他容器或检测装置。使用两根光纤将样本拉开，形成固定光程的检测通路，自动进行检测。,优点,1.,检测所需样微量，,0.5-2ul,，可以节省辛苦得到的样品,2.,检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高,200,倍，吸光度,0.02-300,，对于多数样品而言，无需稀释,3.,无需检测容器，日常消耗低，直接将样品加在检测面上，检测完以后把检测表面擦干净即可，保证样品间无交叉污染，也不干扰后续检测,4.,全波长,190-840nm,，分辨率,1nm,，对于任何一个样品的测量，仪器都自动给出全波长的扫描结果,190-840nm,5.,使用方便快速，,1,个样品只需,5,秒,6.,无需预热，直接测量,二,.,软件,(1),在使用仪器进行样品检测前，需要使用,USB,连接线把仪器和电脑相连，把,12V,的电源线接到仪器背面的插口上，并连接电源。,任务栏,工具栏,功能选择,使用,NanoDrop 2000/2000c,分光光度计可以方便的使用微量样品进行紫外可见分光检测。,NanoDrop 2000,可以应用于如下检测：,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,1.,核酸的浓度和质量,2.,筛选有效的荧光标记杂交探针,3.,功能同普通的紫外,-,可见分光光度计,4.,检测细胞悬液的光散射,5.,蛋白定量,6.,蛋白定量,(,主要检测还有还原剂或去污剂的总蛋白含量,),7.,检测非纯蛋白的浓度,8.,蛋白的浓度和荧光染料的浓度,9.,蛋白,A280,检测,10.,编辑新程序,11.,蛋白定量,(,区别于,5,，测试浓度较低,),例：核酸,Sample ID-,输出样品名称,Type-DNA-50,做,dsDNA,检测，,RNA-40,做,RNA,检测，,ssDNA-33,做单链,DNA,Conc,-,结果,A260,显示,10mm,光程下的,260nm,处的吸光值,A280,显示,10mm,光程下的,280nm,处的吸光值。,260/280,260nm,和,280nm,处的吸光值的比值（,DNA1.8RNA2.0,）,核酸浓度检测,1,在主菜单中选择核酸模式，如果显示波长校准窗口，放,下基座臂点击,OK,。,2,选择检测的样品类型，默认的设定为,DNA-50,。,3,选择浓度单位，默认的为,ng/ul,。,4,默认的校准波长为,340nm,，重新选择一个校准波长或者,去选择,Baseline,来不选择校准波长。,5,选择,Add to Report,自动把检测结果添加到当前报告中,去，默认设置是把每个样品都添加到报告中。要把样,品数据保存到工作薄中，在检测前必须选上,Add to report,。,6,选择,Overlay spectra,可以在同一时间显示多个光谱。,7,使用合适的液体建立空白对照，空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的,pH,值和离子浓度应和检测样品一样。,注意：,1.,每次检测的样品都必须是新加的。,2.,使用干净的无尘纸擦干净上下基座，这样仪器就可以进行下一个样品检测了。,Oligo Calc,用来计算特定核酸序列的分子量，消光系数，浓度因子,要使用,Oligo Calc,：,1.,使用如下方法来输入一个碱基序列：,使用碱基序列显示框下的按键。键盘（仅仅能使用,A,，,C,，,G,，,T,，和,U,来输入碱基）复制和粘贴一个序列到显示框（仅仅能使用,A,，,C,，,G,，,T,，和,U,来输入碱基）清除碱基序列框中的序列，点击序列框右侧的,Clear,键，单个可以手动来删除。,2.,选择磷酸化程度，可以选择：,DNA,单磷酸化，,RNA,单磷酸化和三磷酸化。,3.,如果需要可以选择双链，互补的双链序列能够包括在计算中。,4.,在下拉框中，选择检测的核酸类型，默认的为,DNA,。,5.,如果要添加序列选择,Modification,并输入相关的分子量。,thanks,