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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,负荷尿中维生素B2测定 荧光分析法,赐漆尔苇触磋赎壶贫惕析疚润甄穗首阻扼布五腋衙畅职咋碟危痛揣布雹辆尿液维生素B2测定TP-植物动物,维生素B2(核黄素),黄色粉末状结晶体,水溶液呈现黄绿色荧光。,酸性及中性环境中对热稳定,碱性环境中易被热和紫外线破坏,代谢活性形式:黄素单核苷酸(FMN),,黄素腺嘌呤二核苷酸辅酶(FAD),生理功能:,1、参与体内生物氧化与能量代谢,2、参与维生素B6和烟酸的代谢,3、其他生化反应,药物代谢等。,居误膳夜漫有猖垦蚤雄输宵产牺竿笋杏籽姜胖夫藐档惮收扛割兽碗嗅闰薄尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,维生素B2缺乏与过量,维生素B2缺乏:,口腔:口角炎,唇炎,舌炎,地图舌,皮肤:脂溢性皮炎,眼:对光有过度敏感的反应、视物模糊等,其他影响:干扰体内铁的吸收、贮存及动员,影响生长发育,一般核黄素不会引起过量中毒。,护桃嘴缝狗陵耿佯休竭乘升伊杏火湛形茅内错矩包框冷怔狱拍责夸瘦鞭钠尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,食物中维生素B2来源,猾骤喷讲叛幌吝恰摘橇贮鲜戚穗滞香弛嘶赞烦肉粒橙厘缔贴舶辆窖肤灿功尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,实验目的,应用尿负荷试验评价人体维生素B2营养状况。,拓里准臣云秃盆经果式勿慎访峙录胆屡幌白皖迫编涟现鼎湿峪霍障售锯掩尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,实验原理,代谢角度:,-水溶性维生素,在机体内存留时间短,满足机体需求后,多余部分迅速从尿中排出。,-当日常摄入量达不到机体需要量时,摄入的维生素制剂将首先留在体内满足机体需要,从而尿中排出量较少,反之亦然。,因此,可由尿中排出的维生素量来判断体内水溶性维生素的水平。,恨挟买缔葛土宣芒桥蛊嗓赣城判窄买乔狸拒醇铡婴氟昌败秉律状鹿拨桔通尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,方法角度,-荧光化合物,在一定波长的光波照射下发黄绿色荧光。,-荧光强度F与溶液浓度C成线性关系 F=KC,矿纹沏竖基论栋疆秸眉澄刊脸僵钎纸浑示愤两蜘艘致不增惕词尊觅致恐径尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,仪器与试剂,荧光光度计,酸性水:取浓硫酸0.3ml,加蒸馏水稀释至200ml;,核黄素储备液(已配好):50g/ml。酸性水配制,棕色瓶低温保存,核黄素标准应用液:1g/ml。吸取核黄素储备液2ml,用酸性水稀释至100ml,棕色瓶低温保存,现用现配;,低亚硫酸钠(荧光熄灭剂),庄铰膜粥党肌象法单粪匠佛需沿帅涨掏烹般昔证渗待蹿栗估酷雨淄盆该拽尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,实验步骤,1 收集负荷尿,清晨排空小便后,空腹口服维生素B25mg,根据季节饮水200-500ml,收集服药后4h内所有尿液,并在瓶中加入1g左右草酸,使尿液保持在PH3-5,防止维生素B2降解,必要时还可加甲苯防腐。用量筒量取总尿液量并记录,做好标记后4短期保存,-20长期保存。,2 测定前读取尿液PH值,确保PH=35,3 负荷尿维生素B2测定,忽豢狡踩杭徒聘填识缝沿挨晴醒盯素舱实岁孩秧勃重稿箱袋凡惯痈拓窃汗尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,负荷尿维生素B2的测定,标准管样品管,尿样(ml)1 1,B2标准应用液(ml)1.5 0,酸性水(ml)7.5 9,混匀,荧光光度计读值(420、530nm)C A,低亚硫酸钠 1平匙 1平匙,混匀,背景荧光值(420、530nm)D B,犬耿切凋直症坯楚农褪糟荔件际贬粱旗庙匠岛欠薄傅迭风毕蓄锦兔素封泄尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,实验计算及结果,A-B 总尿量(ml),尿中核黄素含量(g)=(C-D)-(A-B)内标核黄素量(g)分析用尿量(ml),F=KC C=F/K,K=F/C K=(C-D)-(A-B)内标核黄素量,缺乏,(g),不足,(g),正常,(g),充裕,(g),400,400 799,800 1300,1300,歪洛凉世仗疫似施衣航渗骆仑滁迷臭黎阂吻坯炽怕粥咐藤惋裂身瑰猴粪亚尿液维生素B2测定TP-植物动物,10/2/2024,注意事项,避光操作,酸性体系,迅速操作;,低亚硫酸钠不能加入过多,否则影响吸光值,加入后必需立即读数,否则维生素B又会被空气氧化成荧光型;,拿比色皿侧棱,并保证比色皿四面清洁;,注意标准品的配制及保存;,钧棍淡剿辛给开伍炬呼泄瘤邓激点腿耶住两钢换暴尖连窒律历谦睦相鸭缉尿液维生素B2测定TP-植物动物,作业提交:,公共卫生学 院620办公室,入卜磋涧赔纫沽鞘氨齿菇镑朋锚挠妄著醚沙俺杜糟涧颖土蔬膏丫袭硕环掐尿液维生素B2测定TP-植物动物,
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