微生物接种技术

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,微生物接种技术,一、实验目的,掌握倒平板、斜,面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种,等各种微生物接种的基本操作技术。,倒平板的方法,将培养基加热融化，待冷却至,55,60,0,C,时，倒平板。,三、实验步骤,将有菌的材料或纯粹的菌种转移到另一无菌的培养基上，这个过程就称为,接种,。,常用的几种方法如下：,斜,面接种,液体接种,穿刺接种,平板接种,1.,斜面接种：,从已长好微生物移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。,左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。,试管斜面接种,1.,两支试管呈,“,V,”,字形,2.,拔下试管塞,3.,火焰上微烧一周,4.,接种环灼烧、冷却,5.,接种,、划线,6.,塞上塞子，灼烧接种环,2.,液体接种：,将菌接种到液体培养基（试管、三角瓶等）中的方法。,操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。 如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或接种环接种。,3.,穿刺接种：,用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基内，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。,4.,平板接种：,将菌种接至培养皿的方法，平板接种的目的是观察菌落形态、分离纯化菌种，活菌计数以及在平板上进行各种试验时采用的一种接种方法，可分为下面几种：,（,1,）,斜面接平板,a.,划线法,：见平板划线分离法。,b.,点种法,：一般用于观察霉菌和酵母细胞，轻轻点在平板的表面即可。,（,2,）,平板接斜面,：一般是将经平板分散培养得到的单菌落接种到斜面，以便作鉴定或扩大培养、保存之用。,（,3,）平板涂布法,倒培养基，制成平板。,凝固后，另取一支吸管吸取相应的菌液0.2,mL,放至平板上。,用无菌三角玻棒将稀释液在平板表面涂抹均匀。倒置于3,7,条件下培养,1,2d，,观察菌落形态及计数菌落。,凝固后,37,培养,涂布法流程图,思考题,（,1,）用接种环接种时有哪些注意事项,（,2,）涂布棒消毒方法有哪些？各应注意什么？,