细胞膜的通透性

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2012/11/13,#,实验六、细胞膜的通透性,讲解人：赵鹏飞,一、实验目的,了解相对分子质量、脂溶性大小、电解质和电解质溶液对细胞膜透性的影响。,二、实验原理,细胞膜具有选择通透性。,溶血现象：。水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境时，水分子大量渗带细胞内，使细胞膨胀，进而细胞破裂，血红蛋白释放到介质中由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液。,溶血现象可作为测量物质进入红血细胞速度的一种指标。,溶血现象发生的快慢与进入细胞的物质的分子量大小有关。相对分子质量大的进入细胞慢，发生溶血所需时间也长。,非极性化合物易溶于脂溶剂，但在水中溶解度很小。碳链越长，脂溶性越大。一种化合物在脂溶剂中的溶解度与其在水中溶解度之比，称为分配系数。,各种非电解质溶液，只要单位面积中所含的分子数相同，就具有相同的渗透压。电解质溶液，如,NaCl,与葡萄糖分子数相等时，,NaCl,产生的渗透压要大得多。具有相同渗透压的某非电解溶液与某电解质溶液浓度之比，成为等渗系数。用,i,来表示：,i =,葡萄糖的等渗物质的量浓度,/NaCl,的等渗物质的量浓度（发生溶血者为低渗液，所以把发生溶血的前一管溶液的浓度近似视为红细胞等渗）。,三、实验用品,用品：小烧杯、试管、试管架、刻度吸管、注射器、秒表等。,材料：小鼠的血。,试剂：,1mol/L,乙二醇水溶液、,1mol/L,丙三醇水溶液、,1mol/L,葡萄糖水溶液、,3mol/L,甲醇、,3mol/L,乙醇、,3mol/L,丙醇、,1/8mol/L,、,1/9mol/L,、,1/10mol/L,、,1/12mol/L,、,1/14mol/L,葡萄糖溶液、,1/12mol/L,、,1/14mol/L,、,1/16mol/L,、,1/18mol/LNaCl,溶液。,四、实验步骤,准备工作：,小鼠采血,剪尾采血、 摘除眼球采血,、心脏采血,、断头采血、眼眶静脉丛采血,（一）相对分子质量大小对膜通透性的影响,1.,在编号的,3,支试管中，分别用吸管吸入,2ml 1mol/L,乙二醇、,1mol/L,丙三醇、,1mol/L,葡萄糖高渗液。,2.,先后分别用注射器滴加两滴血液，用手指按住管口，倒置一次。,3.,观察血溶时间，最长延至,10min,，填表。,（二）脂溶性大小对细胞膜透性的影响,1.,编号的,3,支试管分别加入,2ml 3mol/L,的甲醇、乙醇、丙醇。,2.,分别先后加入两滴血液，按住管口倒置一次。,3.,观察溶血时间。做实验记录。,（三）电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响,1.,将试管编号，注明溶质名称及物质的量浓度。,2.,按编号分别加入不同浓度的葡萄糖及氯化钠溶液,2ml,。,3.,每管各加入两滴血液，按住管口，倒置一次。,4.,室温放置,15min,，观察发生溶血的浓度，确定等渗浓度。,5.,按下表记录实验结果。,6.,计算等渗摩尔浓度。,TANK YOU!,1,剪尾采血 小鼠每次采血量,0.1ml,左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，鼠保定后将其尾巴置于,50,热水中浸泡数分钟，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖,1-2mm,，用试管接流出的血液，同时自尾根部向尾尖按摩。取血后用棉球压迫止血并用,6%,液体火棉胶涂在伤口处止血。,2,摘除眼球采血 小鼠采血量,0.6-1ml,左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位，左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球突出。用眼科弯镊迅速夹去眼球，将鼠倒立，用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压迫止血。大鼠少用。,3,心脏采血 小鼠采血量,0.5-0.6ml,鼠仰卧位固定，剪去胸前区被毛，皮肤消毒后，用左手食指在左侧第,3-4,肋间触摸到心搏处，右手持带有,4-5,号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当刺中心脏时，血液会自动进入注射器。,4,断头采血 小鼠采血,0.8-1.2ml,左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，右手用剪刀剪断鼠颈部约,1/2-4/5,，让血液流入试管。,5,眼眶静脉丛采血 小鼠采血量为,0.2-0.3ml,取内径为,1.0-1.5mm,的玻璃毛细管，临用前折断成,1,1.5cm,长的毛细管段，浸入,1,肝素溶液中，干燥后用。取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部，轻轻向下压迫颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血，右手持毛细管由内眦部插入结膜，再轻轻向眼底部方向推进，轻轻旋转毛细管以划破静脉丛，让血液顺毛细管流出，接收入事先准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。刺入深度小鼠为,2-3mm,，可采血,0.2-0.3ml,；大鼠为,4-5mm,，可采血,0.4-0.6ml,。,