土壤中微生物的分离

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验五 土壤中微生物的分离,1,实验目的,掌握从样品中分离不同种类的微生物，并进行活菌计数,巩固无菌操作的方法,2,单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的增加,。,微生物生长：,微生物生长的测定：,个体计数,群体重量测定,群体生理指标测定,评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；,评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；,客观地反映微生物生长的规律；,3,第一节 微生物生长的测定,以数量变化对微生物生长情况进行测定,通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况,或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌）,培养平板计数法,4,采用培养平板计数法要求操作熟练,、准确，否则难以得到正确的结果：,样品充分混匀；,每支移液管及涂布棒只能接触一个,稀释度的菌液；,同一稀释度三个以上重复,取平均值；,每个平板上的菌落数目合适，便于,准确计数；,一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用,菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而,不是直接表示为细胞数。,5,实验步骤,将10g土样装入含100ml无菌水的锥形瓶中振荡10min,取1ml移入含9ml无菌水的试管中，吹吸均匀，为稀释10倍的样品,依次进行梯度稀释,倒培养基,取合适稀释度的样品1ml涂布,6,实验安排,10,-5,10,-6,10,-7,稀释度为细菌培养 牛肉膏蛋白胨培养基,10,-3,10,-4,10,-5,稀释度为放线菌培养，注意培养基在倒入平板前先加入数滴重铬酸钾溶液 高氏一号培养基,10,-2,10,-3,10,-4,稀释度为真菌培养 马丁氏培养基,7,