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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,HIV病毒与艾滋病实验室检测,生命的渴望,HIV,病原学,中文名称：,人类免疫缺陷病毒,英文名称：,human immunodeficiency virus;HIV,定义：,引起获得性免疫缺陷综合征和相关疾病的,RNA,病毒。,病毒主要侵犯,CD4 T,细胞、,CD4,单核细胞和,B,淋巴细胞。,Introduction,HIV,病毒结构模式图,HIV,病原学,Structural proteins,病毒基因组是两条相同的正股,RNA,，每条,RNA,长约,9.2-9.8kb,。,编码了至少,9,个蛋白，可分为三类：结构蛋白、调控蛋白、辅助蛋白。,结构蛋白,Gag,gag,基因产生,55kD,的蛋白,p55,：,p17,基质、,p24,衣壳、,p9,核衣壳、,p6,。,Pol,Gag-Pol,融合蛋白 ：,p10,蛋白酶、,p50,逆转录酶、,p15 RNA,酶,H,及,p31,整合酶。,Env,Env,起先是,160kD,的蛋白 ：,gp41,与,gp120,。,调控蛋白,辅助蛋白,HIV,病原学,HIV structure & life cycle,HIV,病毒感染病程,现已证实,HIV,感染可分为,4,个阶段，但不是,所有感染,HIV,的患者都一定经历这,4,个阶段。,HIV,感染的急性初期；,HIV,感染的慢性无症状期；,HIV,感染的症状期；,晚期，称为,AIDS,。,艾滋病实验室检测,目前检测,HIV,的方法有,100,多种，总体来说可以分为两大类：,抗体检测,病毒检测,细胞培养,(,病毒分离,),p24,抗原检测,病毒核酸检测,早期对,HIV,的诊断主要是通过血清学试验检测抗,HIV,的抗体,间接地诊断,HIV,感染。,血清学试验分为初筛和确认试验。,最常用的初筛试验：酶联免疫吸附试验（,ELISA,）,最常用的确认试验：免疫印迹试验,(WB),。,艾滋病实验室检测：血清学试验,HIV,病毒感染后血清学动态变化,HIV,病毒感染窗口期,Window Period,艾滋病窗口期是针对艾滋病检测的标志物而言，并非一个,笼统的概念。,人体感染,HIV,后，一般需要,2-3,周，最多,6,周,左右血液中才可检测到,HIV,抗体或者,HIV,抗原。因为从感染,HIV,到机体产生抗体的这一段时间检测不到,HIV,抗体或者,HIV,抗原，故称之为窗口期，又叫做空窗期，是英文,Window Period,的翻译。值得注意的是，,感染艾滋病病毒的个体在窗口期内同样具有传染性。,在病毒感染后,3,个月,，大多数患者的血清学试验为阳性。尽管有报道有感染,1,年后才出现血清阳性化，但实际上，所有患者都是在,6,个月,内出现血清的阳性转化。,HIV,病毒感染窗口期,Window Period,HIV,病毒感染窗口期,Window Period,艾滋病实验室检测：,ELISA,试剂分代情况：,第一代,HIV,诊断试剂原理为间接,ELISA,法，,所用的包被抗原为体外培养的,HIV,裂解物,，含有很多杂抗原，主要,HIV,结构和表达蛋白浓度不能保证，灵敏度和特异性不高，出现许多假阴性和假阳性,第二代使用,基因重组或合成多肽抗原,，利用间接,ELISA,原理，窗口期比第一代诊断试剂缩短了约,20,天，灵敏度和特异性也有所提高。在一次试验中可同时检测,HIV-1,和,HIV-2,抗体 。,第三代利用,双抗原夹心法,检测标本中的抗体，,酶标记物改为特异性,HIV,抗原,，检测,HIV-1,、,HIV-2,和,HIV-10,抗体 。,第四代,HIV,诊断试剂是一种,HIV-1/HIV-2,抗体与,HIV-10,亚群抗体及,p24,抗原的联合检测方法,。,艾滋病实验室检测：,ELISA,艾滋病实验室检测：确证试验,WB,结果判读,艾滋病实验室检测：病毒载量测定,病毒核酸提取 逆转录,PCR,病毒数量预测生存时间,HIV-1,的数量（,ml,）,生存期,（,年,）,1,艾滋病实验室检测：流式细胞术,CD4,淋巴细胞计数不是诊断性检查，主要用于判断免疫抑制的程度。,流式细胞仪（,FCM,）工作原理,艾滋病实验室检测：流式细胞术,用于,HIV,感染的疾病分期表，凡,CD4+T,淋巴细,200mm3,，或者,CD4+T,淋巴细胞,%14%,的,HIV,感染者可归为艾滋病。,艾滋病实验室检测：流式细胞术,一般而言，,CD4+T,淋巴细越少，大部分并发症出现的频率越高。,Thank You !,不尽之处，恳请指正！,
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