实验一 清洗 消毒

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验器材的清洗、包装和消毒,1,实验目的,掌握细胞培养常用实验器材（玻璃器皿、橡胶制品、正负压除菌滤器、塑料制品）的清洗要领、清洗步骤和注意事项。,掌握细胞培养常用器材的包装要领和要求,了解灭菌方法，掌握高压湿热灭菌方法及操作注意事项。,掌握正、负压除菌滤器的安装、使用和拆除方法及操作注意事项。,熟悉细胞培养过程中的无菌要求,2,实验内容,常用的实验器材,清洗,包装,消毒,3,玻璃器皿,国产螺旋口培养瓶,培养皿,离心管,注射器,盐水瓶，血清瓶,青霉素瓶,吸管,载玻片,盖玻片,贮存尖吸管用的玻璃筒或金属筒,漏斗,烧杯,量筒,贮蒸馏水瓶,冷冻管,常用的实验器材,4,塑料品,塑料品多孔培养板规格有4、6、12、 24、96孔等，培养皿直径有3厘米、6厘米、10厘米等。,塑料品经消毒灭菌密封包装，供次性使用，重复使用的需经特殊方法清洗消毒,常用的实验器材,5,器械,解剖刀、眼科剪和镊（直头和弯头）、中号圆头镊、止血钳等。,常用的实验器材,6,杂用品,金属饭盒、试管架、各种规格胶塞、记号笔、搪瓷盘、吸头（吸取液体的胶帽）、酒精灯、酒精、碘酒棉球瓶、火柴等。,常用的实验器材,7,常用玻璃器皿清洗要领,清洗,8,常用玻璃器皿清洗要领,清洗,9,常用玻璃器皿清洗步骤,清洗,10,常用玻璃器皿清洗注意事项,清洗,11,常用玻璃器皿清洗注意事项,清洗,12,橡胶制品的清洗,清洗,13,除菌滤器的清洗,清洗,14,塑料制品的清洗,清洗,15,包装,16,器材包装时应注意事项和要求,17,消毒,湿热消毒,干热消毒,紫外线消毒,滤过消毒,消毒剂,塑料器皿消毒,电离辐射消毒,18,湿热消毒的要求,19,湿热消毒的要求,20,湿热消毒的注意事项,21,干热消毒,22,紫外线消毒,23,滤过消毒,大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、酶液等均采用滤过法除菌。常用的除菌滤器有正压式和负压式两种,24,25,滤膜使用时应注意,26,塑料器皿消毒,塑料器皿不耐高温，清洗干净后用,75,酒精（分析纯）浸泡过夜，灭菌三蒸水浸泡两次，甸次,10,分钟，紫外线照射,1,小时再经细胞基础营养液浸泡过渡后，供短期内使用。,27,定期打扫无菌室,:,每周打扫一次,先用自来水拖地,擦桌子,超净工作台等,然后用,3,来苏尔或者新洁尔灭或者,0.5%,过氧乙酸擦拭,.,CO2,孵箱,(,培养箱,),灭菌,:,先用,3,新洁尔灭擦拭,然后用,75%,酒精擦拭或者,0.5%,过氧乙酸,再用紫外灯照射。,实验前灭菌,:,打开紫外灯,三氧杀菌机,空气净化器系统各,20-30,分钟。,实验后灭菌,:,用,75%,酒精,(3,新洁尔灭,),擦拭超净台,边台,倒置显微镜的载物台,.,无菌室的灭菌,28,肥皂洗手,.,穿好隔离衣,带好隔离帽,口罩,放好拖鞋,用,75%,酒精棉球擦净双手,.,实验人员的无菌准备:,29,作业,写出负压除茵滤器安装要求及注意事项,写出细胞培养实验器材包装要领，并阐明其原因,30,