微生物感染与检查课件

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,1,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第一节 细菌的感染,一、 细菌的致病机制,构成感染的条件：,病原菌,宿主,环境,（一）细菌的毒力物质,致病性 （质）,细菌引起疾病的性质,毒力 （量）,表示病原菌致病性的强弱程度,半数致死量（,L D50）,半数感染量（I D50）,？,侵袭力,毒素,毒力,侵入数量,侵入门径：,病,原,菌,黏附、定居、入侵、繁殖、扩散,细菌毒素,呼吸道、消化道、皮肤伤口,1.荚膜、微荚膜等抗吞噬结构,微荚膜:M蛋白、vi抗原,2.粘附素:,菌毛:,非菌毛粘附素:LTA-M、P1蛋白,侵袭力,3、侵袭性物质,（1）侵袭性酶,凝固酶,透明质酸酶,链激酶,链道酶,（,2,）菌体效应蛋白,毒 素,外 毒 素,exotoxin,合成代谢产物,G,+,菌和部分G,-,菌产生,释放到菌体外，或溶,解释放,外毒素特征,蛋白质,理化稳定性差,毒性作用强,选择性强,抗原性强,活性单位,结合单位,A,细胞表面,B,蛋白质，由两个亚单位组成,A亚单位为活性蛋白,B亚单位为结合蛋白,外毒素,外毒素,例如：霍乱毒素分子结构,肾上腺出血、心肌损伤、外周神经麻痹,呕吐、腹泻,呕吐、腹泻,细菌,外毒素,疾病,作用机制,症状和体征,破伤风梭菌,痉挛毒素,破伤风,封闭抑制性神经元,骨骼肌强直性痉挛,肉毒梭菌,肉毒毒素,肉毒中毒,阻止乙酰胆碱释放,肌肉松驰性麻痹,神经毒素,白喉棒状杆菌,白喉毒素,白喉,抑制蛋白质合成,细胞毒素,霍乱弧菌,肠毒素,霍乱,激活肠粘膜腺苷环化酶，增高细胞内cAMP水平,腹泻、呕吐,产毒型大肠埃希菌,肠毒素,腹泻,金葡菌,肠毒素,食物中毒,刺激呕吐中枢,肠毒素,白喉,霍乱,破伤风梭菌引起的肌肉痉挛,类毒素,（无毒抗原）,外毒素,（极毒抗原）,抗毒素,（抗毒抗体）,免疫动物,脱毒,0.3-0.4%,甲醛,外毒素抗原性,类毒素（toxoid,）,受甲醛作用可使其活性蛋白灭活而不影响接合蛋白的抗原性,抗毒素（,antitoxin,）,外毒素刺激机体产生的中和抗体,内毒素 endotoxin,脂多糖 LPS,寡糖重复,单位,核心多糖,脂质A,外膜,主要毒性成份,O,抗原决定簇,脂多糖 LPS,lipopolysacharide,菌体裂解释放,化学稳定性,不能成为类毒素,免疫原性弱,内毒素 endotoxin,内毒素 endotoxin,内毒素的生物学作用：,败血症的皮肤表现,发热反应,白细胞反应,内毒素血症与内毒性休克,弥漫性血管内凝血,外毒素与内毒素的对比,区别,外 毒 素,内 毒 素,来源,G,+,菌与部分G,-,G,-,菌,存在,部位,分泌到菌外，少数是崩解释出,细胞壁组分，菌裂解后释出,化学,成分,蛋白质,脂多糖,稳定性,6080，30分钟,160，24小时,作用,方式,与受体结合,刺激细胞分泌细胞因子、血管活性物质,毒性,作用,强，对组织器官有选择性，引起特殊临床表现,较弱，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等,抗原性,强，刺激机体产生抗毒素；脱毒形成类毒素,弱，抗体作用弱,二、细菌感染的发生与发展,（一）细菌感染的来源,1.外源性感染：,：,病人及带菌者；病畜和带菌动物。,正常菌群及曾经感染而潜伏在体内的微生物。,1、概念：在人体各部位正常寄居而对人无害的细菌,人体各部位正常细菌数量,正常菌群,2、正常菌群的生理作用,生物拮抗,竞争黏附（占位性保护）,产生有害代谢产物,营养竞争,营养作用,促进消化吸收,参与营养物质转化,合成维生素供人体利用,免疫作用,抗衰老作用,双歧杆菌、乳杆菌及肠球菌等产生过氧化物歧化酶，消除自由基毒性，抗氧化损伤，抗衰老。,机会致病菌,细菌方面,机体方面,正常菌群,/,非致病菌,条件致病菌,？,寄生部位改变,菌群失调,免疫功能下降,1. 寄居部位改变,2. 机体免疫功能低下,3. 菌群失调,条件,菌群失调：,是正常菌群各种细菌之间的比例失调现象。,菌群失调症：,菌群失调达到一定程度，出现临床表现。,菌群失调是量的改变，细菌定量出现明显改变，但无临床表现；菌群失调症是质的改变，不仅细菌定量出现明显改变，而且有临床表现。,（二）传播的途径,途 径,方 式,疾 病 举 例,呼吸道感染,气溶胶，飞沫方式吸入,肺结核、白喉、百日咳,消化道感染,粪-口方式，食入,伤寒、痢疾、食物中毒,泌尿生殖道感染,性接触，血液或粘膜损伤,淋病、梅毒等,创伤性感染,皮肤、粘膜创伤、破损,皮肤化脓感染，破伤风,节肢动物叮咬感染,密切接触、叮咬,鼠疫，沙门菌病,（三）感染的类型,不感染,潜伏感染,隐性感染,显性感染,带菌状态,急性感染,慢性感染,局部感染,全身感染,细菌在局部繁殖，不入血，仅外毒素入血引起全身中毒症状,病原菌由原发部位侵入血流，但未在血中大量繁殖，到达其它部位，再繁殖致病。,毒血症,菌血症,败血症,脓毒血症,内毒素血症,全 身 感 染,化脓性细菌入血，在其中繁殖，又播散至其他许多组织或器官，引起转移性化脓病灶,-在宿主体内感染使血液中出现内毒素引起的症状。,细菌侵入血流后并在血中大量繁殖，产生毒性产物，造成机体严重损伤和全身中毒症状者。,问题,细菌的侵袭力包括哪些因素？,内与外毒素的主要区别？,细菌显性感染有哪些类型？,第二节 病毒的感染,一、病毒的致病机制,（一）病毒感染对宿主细胞的致病作用,溶细胞型感染,稳定状态感染,细胞凋亡,病毒基因组的整合,细胞的增生与转化,包涵体的形成,溶细胞型感染,1、概念：病毒进入易感细胞后，可以复制出大量子代病毒，在很短时间内一次释放子代病毒，细胞被裂解而死亡。,2、常见病毒：,无包膜病毒、杀伤性强的病毒,3、机制：,（1）抑制宿主细胞核酸、蛋白质的合成,（2）破坏宿主细胞的溶酶体,（3）损伤宿主细胞器,稳定状态感染,1、概念：病毒在细胞内增殖的过程中，细胞不受破坏，病毒不断地通过出芽方式释放子代病毒。,2、常见病毒：包膜病毒,3、细胞变化：细胞膜,新抗原：,细胞膜融合：多核巨细胞,细胞凋亡：,1,、概念：当细胞受到诱导因子的激发并,将信号传入细胞内部，细胞内部的死亡,基因被激活，经过一系列生物化学反应,最终使细胞死亡。,2,、共同特征：,细胞膜出现鼓泡、细胞核浓缩,病毒基因组的整合,病毒的遗传物质核酸可以结合到宿主细胞,染色体DNA中，称为整合（integration）,细胞增生与转化,有少数病毒感染细胞后不但不抑制宿主细胞DNA的合成，反而促进细胞DNA的合成，如体外细胞培养证实，SV40病毒可促进细胞增殖，并使细胞形态发生变化，失去细胞间接触性抑制，而成堆生长。这些细胞生物学行为的改变，称为细胞转化（cell transformation）,包涵体的形成,细胞被病毒感染后，在细胞浆或,细胞核内出现光镜下可见的斑块状,结构，称为包涵体,。,（二）,病毒感染对机体的致病作用,1病毒对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤,2免疫病理损伤,（1）体液免疫病理作用,（2）细胞免疫病理作用,3病毒对免疫系统的致病作用,自身免疫反应,抑制免疫系统功能,水平传播：在人群不同个体间的传播，是大多数病毒的传播方式。,垂直传播：由宿主的亲代传给子代的传播方式。主要通过胎盘或产道，如风疹病毒、巨细胞病毒、人类免疫缺陷病毒（HIV）及乙型肝炎病毒等。,二、病毒的传播途径,人类病毒的感染途径,三、病毒感染的类型,隐性感染,显性感染,急性感染,持续性感染,慢性感染,潜伏感染,慢发病毒感染,持续性感染,慢性感染,：病毒感染机体后，病毒持续在体内，并不断排出体外,潜伏感染,：病毒潜伏在体内，机体间歇发病。非发作期一般无病毒排出，如单纯疱疹病毒,慢发病毒感染或迟发感染,：潜伏期相当长，一旦发病则呈亚急性进行性，病死率高如,SSPE。,（,1,）慢性感染,v,（,2,）潜伏感染,v,（,3,）慢发病毒感染,v,潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹,潜伏性病毒感染：带状疱疹,慢发病毒感染：库鲁病,第五章 微生物检查方法与,防治原则,第 一节,细菌感染的微生物学检查法,标本采集时应注意无菌操作，避免杂菌污染；,根据不同病程，致病菌在体内分布和排出部位，采取不同标本；,应在使用抗菌药物前采集标本，否则在培养时应加入拮抗剂；,尽可能采集病变明显部位的材料；,标本必须新鲜，采集后尽快送检；,送检过程中要采取适当的保存方式。,（一）标本采集与送检原则,一、细菌学诊断,（二）致病菌检验程序,致病菌的检验程序,标本,生化试验,血清学试验,动物试验,药敏试验,直接涂片检查,分离培养,分子生物学技术,（核酸杂交、,PCR）,其它,(,ELISA,),人体受致病菌感染后，其免疫系统被刺激后发生免疫应答而产生特异性抗体。抗体的量常随感染过程而增多，表现为效价（滴度）的升高。因此，用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验，故称为血清学诊断(serological diagnosis)。,二、血清学诊断,血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标本，当后者的抗体效价比前者升高大于等于4倍时方有意义。,常用方法：直接凝集试验、乳胶 凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、中和试验、,ELISA。,第二节,病毒感染的检查方法,一、标本的采集与送检,病毒分离标本的采集原则,1、早期取材：急性期,2、注意无菌操作与正确处理含菌标本,3、低温保存与尽快运送,血清学诊断标本,双份血清,病毒感染的检查方法,检测内容,查病毒,查特异性,抗体,病毒颗粒,病毒抗原,病毒核酸,病毒酶类：如逆转录酶,电镜直接观察,光镜检查包含体,分离培养,二、病毒的分离培养与鉴定,（一）病毒的分离培养,细胞培养,（,cell,culture,）,鸡胚接种,（,egg inoculation,）,动物接种,（,animal inoculation,）,病毒的细胞培养,细胞培养瓶,单层细胞,鸡胚培养,采用孵化,9,14,天的鸡胚,绒毛尿囊膜（,allantocherion,）,痘苗病毒、人类疱疹病毒,尿囊腔（,allantoic cavity,）,接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒,羊膜腔（,amniotic cavity,）,流感病毒的初次分离,卵黄囊（,yolk sac,）,嗜神经病毒,第三节 微生物感染的预防原则,一、人工免疫,（一）人工主动免疫,（二）人工被动免疫,（一）人工主动免疫(,artificial active immunity)：,将疫苗(,vaccine),或类毒素接种于人体，使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施，主要用于预防。,死疫苗：选用免疫原性强的细菌，经人工大量培养后，用理化方法杀死而成。,活疫苗：用减毒或无毒力的活病原体制成。,类毒素：细菌外毒素经0.3%-0.4%甲醛液作用3-4周后，毒性消失但仍保持免疫原性。,亚单位疫苗：根据细菌抗原分析，查明不同致病菌的主要保护性免疫原存在的组分，然后将之制成的疫苗。,疫苗种类,DNA,重组疫苗：通过,DNA,重组技术制备所需的疫苗。,核酸疫苗：即,DNA,疫苗，是将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫原基因片段和质粒载体直接注射入宿主体以表达目的免疫原，进而诱导出体液和细胞免疫的新型疫苗。,（二）人工被动免疫,人工被动免疫(,artificial passtive immunity)：,注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白，或细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫。作用及时，但这些免疫物质不是病人自己产生的，故维持时间短。主要用于治疗或紧急预防。,抗毒素,抗菌血清,胎盘球蛋白、丙种球蛋白,细胞免疫制剂,细胞因子：,FN-、,（三）主动免疫与被动免疫的比较,区别要点,人工主动免疫,人工被动免疫,免疫物质,抗原,抗体或细胞因子等,免疫出现时间,慢，2-4周,快，立即,免疫维持时间,长，数月-数年,短，2-3周,主要用途,预防,治疗或紧急预防,