临床标本的细菌学检查课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,一,血液标本,?,血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血,症的基本方法。,?,如从患者血液中检出细菌，一般应视为病,原菌。,?,常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球,菌、链球菌（,A,、,B,群、肺炎链球菌等）、,肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈,瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。,一 血液标本 ?血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本,（一）标本采集,?,1.,采血时间及次数,?,2.,抽血部位及抽血量,(,二,),检验方法和操作流程,1.,操作过程,（一）标本采集 ?1. 采血时间及次数 ?2. 抽血部位,血,液,及,骨,髓,标,本,细,菌,学,检,验,方,法,和,操,作,流,程,血液及骨髓标本细菌学检验方法和操作流程,3.,报告方式,培养,7d,无菌生长者报告“培养,7d,无菌生,长”。查见细菌报告菌名和药敏结果。,4.,菌血症、败血症的诊断标准,1,）两次培养均出现同一种细菌（可排除污染）；,2,）发病星期后血中抗体滴度上升。,2.,培养瓶中有细菌生长时的不同表现。,3. 报告方式 培养7d无菌生长者报告“培养7d无菌生长”,第二节,脑脊液标本,?,脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有,重要价值。,?,正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌,性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。,?,常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆,菌、链球菌（,A,、,B,群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、,产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。,第二节 脑脊液标本 ?脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的,（一）标本的采集,?,脑脊液无论涂片或培养必须于,采集后立即送检不宜将其置于,冰箱保存，否则影响检出率。,（一）标本的采集 ?脑脊液无论涂片或培养必须于采集后立即送检,脑,脊,液,标,本,细,菌,学,检,验,方,法,和,操,作,流,程,图,脑脊液标本细菌学检验方法和操作流程图,（二）检验方法和操作流程,?,1.,涂片检查,(1),一般细菌涂片检查：,例如：革兰阴性、凹面相对的球菌，可能是脑膜,炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形,态性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。,(2),结核分枝杆菌涂片检查,(3),新生隐球菌涂片检查,?,2.,分离培养,?,3.,报告方式,培养,48,小时，仍无菌生长者报告“培养,2,天无细菌生长”。查见细菌报告细菌，报告菌名和,药敏结果。,（二）检验方法和操作流程 ?1. 涂片检查,第三节,呼吸系统标本,?,下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰,带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色链球,菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病,菌，提示有上呼吸道感染。,?,常见的病原菌主要有肺炎链球菌、,A,群链球菌、,金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、,结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、,肠杆菌和军团菌。,第三节 呼吸系统标本 ?下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔,一,痰标本,（一）标本采集,?,1.,痰标本的采集时间,?,2.,标本采集方法,(1),自然咳痰法,(2),气管镜下采集法,(3),气管穿刺法,(4),结核分枝杆菌标本收集法：收集,24H,痰液以,提高阳性检出率。,一 痰标本 （一）标本采集 ?1. 痰标本的采集时间 ?,呼,吸,系,统,标,本,细,菌,学,检,验,方,法,和,操,作,流,程,呼吸系统标本细菌学检验方法和操作流程,（二）检验方法和操作流程,?,1.,肉眼观察,?,2.,涂片检查,其一依据,100,镜下观察白细胞和,上皮细胞数目多少来评定,(,如表,),；其二是初步判,定是否有病原存在。,分级,白细胞（个）,上皮细胞（个）,A,25,25,25,C,25,痰标本镜下分类,注：,A,、,B,两种情况的痰标本适合做培养，,C,不合适，应重新留标本,（二）检验方法和操作流程 ?1. 肉眼观察 ?2. 涂片检,（,1,）一般细菌涂片,（,2,）结核分枝杆菌涂片,（,3,）放线菌及诺卡菌涂片,?,3.,培养,?,（,1,）培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片。,（,2,）痰标本培养前处理：用无菌盐水将痰洗涤,3,次，,加入等量的,1%,胰酶溶液（,PH7.6),，,37,o,C,水浴,90min,，使痰液均质化后备用。,（,3,）分离培养,?,4.,报告方式,痰标本培养,48,小时后仅有草绿色链球,菌生长而无致病菌生长，报告“正常菌群”。查,出的致病菌，报告菌名和药敏结果，同时报告细,菌的量化指标。,（1）一般细菌涂片 （2）结核分枝杆菌涂片 （3）放线菌及诺,分级,划线区菌落数目,第,1,区,第,2,区,第,3,区,少见（,+,）,10,10,5,10,5,5,表,5-3,痰标本在平板上的菌落量化指标,分级 划线区菌落数目 第1区 第2区 第3区 少见（+） 10,5,/ml,，,提示感染（膀胱炎，肾盂肾炎、肾或膀胱结核,等）。,?,常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球,菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。,第五节 泌尿、生殖道标本 一 尿液标本 ?中段尿培养加计数,（一）标本采集,1.,中段尿标本采集法,（,1,）女性：,（,2,）男性,（,3,）儿童、婴儿,（,4,）两侧肾盂尿,（,5,）膀胱穿刺,（一）标本采集 1. 中段尿标本采集法 （1）,（二）检验方法和操作流程,1.,涂片检查,（,1,）一般细菌及淋病奈瑟菌,（,2,）念珠菌,（,3,）结核分枝杆菌,2.,一般细菌培养,如培养,2d,无细菌生长，即可弃,去。,（,1,）倾注平板法,（,2,）平板接种环法,（,3,）标准接种环法：若定量接种环含量为,.001ml,，,则整个平板菌落数超过,100,个，可报告“菌落数,10,5,/ml,”,。,（,4,）,Uricult,半定量法,（二）检验方法和操作流程 1.涂片检查 （1）一般细,尿,液,标,本,细,菌,检,验,方,法,和,操,作,流,程,尿液标本细菌检验方法和操作流程,Uricult,操作步骤,Uricult 操作步骤,Uricult,菌落比密图,Uricult,细菌种类标准模式,图,Uricult 菌落比密图 Uricult 细菌种类标准,?,4.,特殊菌落培养,（,1,）淋病奈瑟菌培养,（,2,）厌氧菌培养,（,3,）结核分枝杆菌培养,?,5.,报告方式,培养,48h,无细菌生长，报告“,2,天无细菌生长”。查见细菌，报告菌名及,其菌落计数（菌落数,/ml,）和药敏结果。,?4.特殊菌落培养 （1）淋病奈瑟菌培养 （2）厌氧菌培养,二,生殖道标本,?,正常的内生殖器是无菌的，而外生殖器,（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细,菌寄生。,?,查见病原菌提示有细菌感染。,?,常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、,链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形,杆菌等。,二 生殖道标本 ?正常的内生殖器是无菌的，而外生殖器（包括,?,（一）标本采集,1.,女性生殖道标本,2.,男性生殖道标本,3.,梅毒螺旋体标本,?（一）标本采集 1.女性生殖道标本 2.男性生,?,（二）检验方法和操作流程,1.,涂片检查,（,1,）革兰染色镜检,（,2,）梅毒螺旋体涂片检查,2.,分离培养,（,1,）普通细菌培养,（,2,）淋病奈瑟菌培养,（,3,）阴道加特纳菌培养,（,4,）报告方式：如查见淋病奈瑟菌、阴道加特,纳菌等病原菌，报告菌名和药敏结果。,?（二）检验方法和操作流程 1.涂片检查,生,殖,道,标,本,细,菌,学,检,验,方,法,和,操,作,流,程,生殖道标本细菌学检验方法和操作流程,第六节,粪便标本,?,正常情况下肠道中有多种细菌。,?,引起感染性腹泻的病原微生物有：,（,1,）细菌性：产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、,食物中毒、慢性腹泻。,（,2,）真菌性,（,3,）病毒性,第六节 粪便标本 ?正常情况下肠道中有多种细菌。 ?引起感,粪,便,标,本,细,菌,学,检,验,方,法,和,操,作,流,程,粪便标本细菌学检验方法和操作流程,?,（一）标本采集,?,1.,自然排便采集,?,2.,直肠试子,?,（二）检验方法和操作流程,?,1.,涂片检查,粪便标本因各种正常菌群含量甚多，,仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌。因此，,粪便标本一般不作涂片检查。,?,2.,培养,?,（,1,）沙门,-,志贺菌培养：直接划线接种于腔选,择性培养基；用接种针挑选,SS,上不发酵乳糖菌,落，分别接种于三糖铁琼脂（,KIA),和尿素,-,动力,-,靛基质培养基；生化,反应，,A-F,多价“,O,”,血清,或因子血清进行鉴定。,?（一）标本采集 ?1.自然排便采集 ?2.直肠试子 ?（二,（,2,）致病性大肠埃细菌培养,（,3,）霍乱弧菌培养,（,4,）副溶血弧菌培养,（,5,）小肠结肠炎耶尔森菌培养,（,6,）空肠弯曲菌培养,（,7,）葡萄球菌培养,（,8,）艰难梭菌培养,（,9,）真菌培养,（,10,）菌群失调的细菌学检验,3.,报告方式,（2）致病性大肠埃细菌培养 （3）霍乱弧菌培养 （4）副溶血,第,7,节,脓液及创伤感染分泌物标本,?,化脓性感染可由单种或多种细菌引起。,?,常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓,性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、,变形杆菌和结核分枝杆菌、诺卡菌，以及,梭杆菌和拟杆菌等。,第7节 脓液及创伤感染分泌物标本 ?化脓性感染可由单种或多,脓,液,和,创,面,分,泌,物,标,本,细,菌,学,检,查,方,法,和,操,作,流,程,脓液和创面分泌物标本细菌学检查方法和操作流程,?,（一）标本采集,1.,开放性脓肿和脓性分泌物,2.,大面积烧伤的创面分泌物,3.,封闭性脓肿,?,（二）检验方法和操作流程,1.,涂片检查,根据形态和染色特点，可报告“查见,革兰性细菌，形似,菌”或报告“未查见习,菌”。,2.,培养,（,1,）普通菌培养,（,2,）厌氧菌培养,（,3,）嗜血杆菌及奈瑟菌培养,（,4,）结核分枝杆菌培养,（,5,）真菌培养,?（一）标本采集 1.开放性脓肿和脓性分泌物,