FISH技术在血液肿瘤中的应用主题讲座ppt课件

,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,FISH,-,目前新兴的,分子遗传学技术,，原理是,采用荧光标记的,DNA,探针,，利用探针与检测样本中,DNA,碱基对的互补性，在探针与标本的,DNA,杂交后，通过荧光显微镜检测荧光信号而得出结果，从而检测细胞、组织样本中的染色体和基因异常。,荧光原位杂交,Fluorescence In Situ Hybridization, FISH,探针,DNA,加入荧光标记,解螺旋，杂交,FISH-目前新兴的分子遗传学技术，原理是采用荧光标记的DN,1,样本预处理,探针、样本变性,探针样本杂交,杂交后洗涤,结果观察,FISH,基本实验过程,样本预处理FISH基本实验过程,2,FISH,探针种类,根据标记颜色的不同，常用探针主要有：,单色探针,（,single color probe, SC,）,双色探针,（,dual color probe, DC,）,三色探针,（,triple color probe, TC,）,双色分离探针,（,dual color, break apart probe, DC, BCR,）,双色单融合探针,（,dual color, single fusion probe, DC, SF Trans,）,额外信号探针,（,extra signal, ES,）,双色双融合探针,（,dual color, dual fusion probe, DC, DF Trans,）,FISH探针种类根据标记颜色的不同，常用探针主要有：,3,单色探针,（,SC,）：,双色探针,（,DC,）：,三色探针,（,TC,）：,D7S486,CEP7,CEP18,Y,X,正常,正常,正常,异常,异常,异常,D7S486CEP7CEP18YX正常正常正常异常异常异常,4,FISH,技术的应用,FISH,检测在临床上主要应用于：,血液系统疾病：白血病、,MDS,、,MM,等；,实体瘤：乳腺癌、膀胱癌等；,产前遗传筛查：唐氏综合症（,21,三体）等,临床意义：,从遗传学角度检测,染色体和基因,的异常,辅助诊断，判断预后，疗效检测及微小残留检测,FISH技术的应用FISH检测在临床上主要应用于：,5,FISH,技术在血液肿瘤中的应用,血液系统肿瘤是我国十大高发肿瘤之一。大量研究表明，不同类型的,血液肿瘤往往有其特异的染色体异常,，对肿瘤分型、诊断、治疗和预测用预后都具有重要意义。常规细胞遗传学分析（,CC,）方法只能分析中期染色体，而对间期细胞、复杂核型细胞和染色体微缺失无法进行诊断。,FISH,技术弥补了,CC,在这方面的不足，因此被广泛应用于血液肿瘤的研究、诊断等方面。,FAB,分型,细胞遗传学异常,分子异常,M0,核型异常常见且复杂，常累及,5,、,7,、,8,和,13,染色体,M1,t(9;22), inv(3),M2,t(8;21), t(6;9),t(12p),AML1-ETO,M3,t(15;17),PML-RARA,M4,+4, 11q23,重排，,M4Eo inv(16)/t(16;16),MLL-AF9,M5,t(11q), t(8;16),Pre-B/B-ALL(L1/L2),t(9;22)(q34;q11),BCR-ABL,B-ALL(L3),t(8;14)(q24;q32),MYC-IGH,白血病的细胞遗传学异常,FISH技术在血液肿瘤中的应用 血液系,6,血液肿瘤的,FISH,检测,临床上对血液肿瘤的,FISH,检测主要集中在以下几个方面：,染色体易位形成的融合基因检测,：,如,CML,的,BCR-ABL,、,M3,的,PML-RARA,、,M2b,的,AML1-ETO,融合基因等；,基因缺失检测：,如,CLL,的,P53,基因缺失提示患者预后很差，而,13q,单一缺失则提示预后较好；,对异性间造血干细胞移植的植入状态检测：,通过性染色体计数探针动态监测供,/,受者混合性嵌合体比例变化对异性间异基因造血干细胞移植后植入状态进行监测；,微小残留病灶（,MRD,）的检测：,通过对肿瘤细胞特异的染色体异常进行跟踪监测，预测疾病进展和有无复发迹象。,血液肿瘤的FISH检测临床上对血液肿瘤的FISH检测主要集中,7,血液肿瘤荧光原位杂交探针,疾病名称,探针名称,浆细胞疾病,多发性骨髓瘤（,MM,）,GLP P53,，,GLP RB1,，,GLP D13S319 GLP IGH,，,GLP 1q21,白,血,病,慢性淋巴细胞白血病（,CLL,）,GLP P53 GLP RB1 GLP D13S25 GLP ATM CSP 12,慢性粒细胞白血病（,CML,）,GLP BCR/GLP ABL,；,GLP ASS,急性早幼粒细胞白血病（,AML-M3,）,GLP PML/GLP RARA,急性原始粒细胞白血病部分分化型（,AML-M2,）,GLP AML1/GLP ETO,粒单核细胞白血病,(AML-M4),GLP CBFB,小儿急性淋巴细胞白血病（,ALL,）,GLP 4/10,GLP 17, GLP BCR/GLP ABL,GLP MLL GLP TEL/AML1,MDS,骨髓增生异常综合症,GLP CSF1R/ GLP D5S23,，,D5S721GLP EGR1/ GLP D5S23,，,D5S721GLP D7S486/CSP7;GLP D7S522/CSP7;,GLP D20S108/CSP8 ;CSP X/CSP Y,；,性染色体错配骨髓移植,CSP X/CSP Y,淋,巴,瘤,B,细胞淋巴瘤,GLP IGH,滤泡性淋巴瘤（,FL,）,GLP IGH/GLP BCL2,套细胞淋巴瘤（,MCL,）,GLP IGH/GLP CCND1,弥漫性大,B,细胞淋巴瘤（,DLBCL,）,GLP BCL6,伯基特淋巴瘤（,BL,）,GLP C-MYC,粘膜相关淋巴组织淋巴瘤（,MALT,）,GLP MALT1,GLP MALT1/GLP API2,血液肿瘤荧光原位杂交探针疾病名称探针名称浆细胞疾病多发性骨髓,8,多发性骨髓瘤（,MM,）检测,MM,常涉及多种染色体异常，主要为数目异常，分为超二倍体（,+3,、,+5,、,+7,、,+9,等）和非超二倍体（,-8,、,-13,、,-14,、,-17,等）；染色体结构异常较少见，主要有,1,号（,1p,、,1q,，部分缺失或,1q,三体）、,13q-,、,14q,（多为与,14q32,有关的几种互补易位）等。,MM FISH,检测位点：,P53,、,RB1,、,D13S319,、,IGH,基因及,1q21,位点,。,推荐样本：骨髓,适用人群：,已确诊为,MM,，需评估预后、进行个体化治疗的患者,多发性骨髓瘤（MM）检测MM常涉及多种染色体异常，主要为数目,9,以,p53,探针模式图为例，,17,号染色体,1,区,3,带,1,亚带包含,p53,的区域标记了一段含绿色荧光的,260kb DNA,序列；,D13S319,指,13,号染色体上独一无二的编号,319,的,DNA,片段，标记了一段含红色荧光的,220kb DNA,序列。正常情况下显示,2R2G,信号，发生,D13S319,位点缺失时显示,1R2G,。,IGH,的探针在基因的两端分别标记了红色和绿色荧光，正常情况下显示红色绿色重叠信号或黄色信号，当,IGH,发生易位时显示为红色和绿色的分离荧光信号。,P53/D13S319,探针,（双色探针：,D13S319,红,/ P53,绿）,D13S319,P53,正常,异常,IGH,探针（双色分离探针）,14,16,14,16,以p53探针模式图为例，17号染色体1区3带1亚带包含p53,10,临床意义,判断生存期,预后较差：,P53,缺失（,24.7,个月）,1q21,扩增（,21.9,个月）,IGH,发生,t(4;14),，,t(14;16),易位（,24.7,个月）,预后中等（,42.3,个月）：,RB1,缺失,D13S319,缺失,预后较好（,50.5,个月）：,IGH,发生,t(11,；,14),易位或者其他遗传改变,指导临床用药（个体化治疗）,：,MM,的初治治疗多选用化疗，包括,MP,方案（马法兰、泼尼松）、,VAD,方案（长春新碱、多柔比星、地塞米松）等；对于难治和复发的多发性骨髓瘤，多采用联合化疗和沙利度胺进行治疗；干扰素主要用于维持治疗，对上述治疗方法无效者可进行造血干细胞移植。对于预后好的患者，使用,干扰素、环磷酰胺或联合化疗没有明显的区别；对于预后中等的患者，使用,干扰素治疗反而会缩短患者总生存期。可见，多发性骨髓瘤基因异常的检测对临床有效开展个性化治疗提供了重要依据。,临床意义判断生存期,11,白血病,FISH,检测,1,、,慢性淋巴细胞白血病（,CLL,）检测,检测位点：,P53,、,RB1,、,D13S25,、,ATM,基因以及,12,号染色体,。,推荐样本：,外周血,临床意义：,判断生存期：,预后差，,P53,缺失（,32,个月）,预后较差，,ATM,缺失（,79,个月）,预后中等，,CSP 12,三体（,114,个月）,预后较好，,RB1,缺失、,D13S25,缺失（,133,个月）,指导临床用药（个体化治疗）,7-11%CLL,伴有,P53,缺失，预后不良，漂吟类似物治疗无效，应选用不涉及,p53,信号传导系统的药物；,ATM,位于染色体,11q22-23,，,11q22.3,缺失是,CLL,另外一个预后较差的核型异常，发生率,12-20%,，,ATM,缺失与,CLL,进展密切相关；,+12,是最早发现的,B-CLL,常见染色体异常，发生率,15-35%,，常伴有其他核型异常；,13q,缺失是,CLL,最常见的染色体异常，,40-60%,的,CLL,出现该异常。,RB1,和,D13S25,位于此位点，单纯,del(13q14),预后较好，若伴有,+12,、,11q-,等其他染色体异常，则预后通常较差。,白血病FISH检测1、 慢性淋巴细胞白血病（CLL）检测,12,2,、 慢性粒细胞白血病（,CML,）检测,检测位点：,BCR/ABL,融合基因、,ASS,基因,。,推荐样本：,骨髓,适用人群：,CML,初诊及治疗监测的患者,慢性粒细胞性白血病是一种发生在早期多能造血干细胞上的恶性骨髓增生性疾病（获得性造血干细胞恶性克隆性疾病）。,对,CML,的检测主要针对,BCR/ABL,融合基因，这种融合基因是通过（,9,；,22,）号染色体的基因重排及易位而形成的。,2、 慢性粒细胞白血病（CML）检测慢性粒细胞性白血病是,13,BCR/ABL,融合基因检测,BCR/ABL,融合基因通过,t(9;22),号染色体易位而形成。,9,号染色体上原癌基因,(ABL),的断裂点比较恒定，,22,号上断裂点簇集区,(BCR),的断裂点不恒定。,BCR-ABL-210,见于,95,的,CML(,主要断裂点断裂形成,),，,BCR-ABL-190,见于,17%-30%,的成人急性淋巴细胞白血病和,2%-6%,的儿童急性淋巴细胞白血病,(,次要断裂点断裂形成,),，但从染色体组型与慢性粒细胞白血病的费城染色体在形态上看不出区别，,FISH,检测,BCR/ABL,融合基因可以区分。,检测探针：,额外信号探针（,ES,）：可区分,BCR/ABL,融合基因形成于主要断裂点（,M-BCR,位点）或次要断裂点（,m-BCR,位点） 。,双色双融合探针（,DF,） ：只可检测是否有,BCR/ABL,融合基因，不能区分主次断裂点。,BCR/ABL融合基因检测,14,1. ES,探针,可区分,BCR/ABL,融合基因形成于主要断裂点或次要断裂点，用于初诊和指导格列卫用药。异常结果显示为两红、一绿、一黄荧光信号。,在典型的阳性细胞中，如果有,BCR/ABL,融合基因且,BCR,断裂位点为,M-BCR,，其信号类型体现为,2R1G1F,；断裂位点为,m-BCR,，其信号类型体现为,1R1G2F,（其中一个融合信号中的绿点相对较小）；无,BCR/ABL,融合基因，其信号类型体现为,2R2G,。,1. ES探针在典型的阳性细胞中，如果有BCR/ABL融合,15,2. DF,探针,只可检测是否有,BCR/ABL,融合基因，不能区分主、次断裂点，可用于治疗效果监测及用药指导。异常结果显示为一红、一绿、两黄荧光信号。,2. DF探针,16,BCR/ABL,融合基因检测意义,辅助诊断,CML,NCCN,肿瘤学临床实践指南（,2010,年第二版）指出，,BCR/ABL,融合基因阴性的患者不是,CML,。这些患者的预后比,BCR/ABL,融合基因阳性的患者明显差。因此，对于,BCR/ABL,融合基因阴性的患者需要进一步考虑其他疾病。,指导格列卫使用,格列卫是在研究出,CML,患者高表达,BCR/ABL,融合基因蛋白产物的基础上，进一步研发出的特异性抑制,BCR/ABL,融合基因产物的分子靶向药物。采用,FISH,技术对,CML,患者,BCR/ABL,融合基因进行检测，一旦确定了,BCR/ABL,融合基因的存在，就可以考虑使用格列卫进行治疗。,药物使用效果评估,骨髓移植效果评估,鉴别诊断：鉴别,CML,急变和,AL,BCR/ABL,融合基因检测显示，,AL,的,BCR/ABL,融合基因由次要断裂点断裂形成，,CML,急变患者的,BCR/ABL,融合基因由主要断裂点断裂形成。检测,BCR/ABL,融合基因，区别其主要断裂点和次要断裂点，达到鉴别诊断的目的。,BCR/ABL融合基因检测意义,17,ASS,基因异常检测,ASS,为精氨基琥珀酸合成基因,位于,9q34.1,。,ASS,基因检测意义：评估,CML,患者预后,9-28,CML,患者伴有含,ASS,基因的,9q34,区段的缺失，此种患者预后差，慢性期易急变。,ASS基因异常检测,18,3,、急性原始粒细胞白血病部分分化型（,M2,）检测,检测位点：,AML1/ETO,融合基因,。,推荐样本：,骨髓,AML1/ETO,融合基因：竞争性抑制,AML1,靶基因的活化，干扰细胞正常的增殖与分化。,AML1,ETO,3、急性原始粒细胞白血病部分分化型（M2）检测 AM,19,AML1/ETO,融合基因检测意义,辅助诊断,M2,型,AML,AML1/ETO,融合基因可见于,92%,的,M2,型,AML,患者中，特别是和我国首先提出的,M2b,型密切相关。,判断预后,AML1/ETO,融合基因阳性是预后好的标志，患者对治疗反应佳，完全缓解率可达,90%,，,5,年无病生存可达,50%-70%,。,AML1/ETO融合基因检测意义,20,4,、急性早幼粒细胞白血病（,M3,）检测,检测位点：,PML/RAR,A,融合基因,。,推荐样本：,骨髓,PML,基因：早幼粒细胞白血病基因，位于,15,号染色体上。,RAR,A,基因：维甲酸受体基因，位于,17,号染色体上。,15,号染色体和,17,号染色体发生特异位点的断裂易位，形成,PML/RAR,A,融合基因，此融合基因可以抑制正常的,RAR,基因功能，从而阻断早幼粒细胞的进一步分化成熟，产生大量幼稚的早幼粒细胞，发生肿瘤。,4、急性早幼粒细胞白血病（M3）检测PML基因：早幼粒细胞白,21,PML/RAR,A,融合基因检测意义,辅助诊断急性早幼粒细胞白血病,PML/RAR,A,融合基因可见于,90,以上的,APL,中，成为,APL,的一个特异标志。,指导全反式维甲酸（,All trans-retinoic acid,，,ATRA,）用药,ATRA,治疗,APL,的主要机制是靶向降解,PML/RARA,融合蛋白，促进阻滞在早幼粒细胞阶段的白血病细胞分化成熟。,ATRA,是治疗,APL,的首选药物,缓解率能达,90%,。,PML/RARA融合基因检测意义,22,5,、粒,-,单核细胞白血病检测,检测位点：,CBFB,基因断裂重组,。,推荐样本：,骨髓,CBFB,基因（,Core binding factor ,，,CBFB,）：核心结合因子,位于,16,号染色体上。,CBFB,也是早期造血所必需的转录因子，通过与,AML1,的,Runt,同源结构域结合，由,AML1,将其带至胞核，增强,AML1,与,DNA,的结合能力，使,AML1,依赖的基因转录得以进行。,5、粒-单核细胞白血病检测CBFB基因（Core bindi,23,CBFB,基因断裂重组检测意义,辅助诊断,M4,型,AML,CBFB,基因断裂重组是,AML,的特征性染色体异常，占总,AML,患者的,5%-10%,和,23,的,M4,患者，通常见于,AML-M4E0,亚型。现在认为,CBFB,基因断裂重组是,M4E0,特征性的遗传学改变。,评估预后,CBFB,基因断裂重组的,AML,患者对化疗敏感、预后较好。,CBFB基因断裂重组检测意义,24,6,、小儿急性淋巴细胞白血病检测,急性淋巴细胞白血病是儿童中发病率最高的恶性肿瘤，我国,l5,岁以下小儿白血病的发病率为,2.73/10,万。,儿童急性淋巴细胞白血病在儿童白血病中占,75%,之多，是儿童白血病中最常见的类型。,探针介绍：,序号,检测探针,标记颜色,探针定位,异常染色体,1,GLP 4/GLP 10,绿,/,红,GLP 4: 4p11.1-q11.1,GLP 10: 10p11.1-q11.1,+4,，,+10,2,GLP 17,红,GLP 17: 17q11,+17,3,GLP TEL/GLP AML1,红,/,绿,GLP AML1,：,21q22,GLP TEL,：,12p13,t(12;21),4,GLP MLL,红绿,GLP MLL,：,11q23,t(11;v),5,GLP BCR/GLP,ABL(DF),绿,/,红,GLP BCR: 22q11.2,GLP ABL: 9q34,t(9;22),6、小儿急性淋巴细胞白血病检测序号检测探针标记颜色探针定位异,25,4,、,10,、,17,号染色体检测,儿童,ALL,约,25%,有染色体数目增加，以,4,、,10,、,17,号染色体受累较为多见。,4,、,10,和,17,染色体三体是独立的预后良好的指标，这类患者,7,年,EFS,大于,90%,。,TEL/AML1,融合基因检测,TEL/AML1,在儿童,ALL,中的发生率高达,20,-25,，是目前儿童,ALL,最常见的染色体重排。但由于,t(12;21),十分微小，不易被常规细胞遗传学发现。,大多数研究发现,TEL/AML1,阳性的儿童,ALL,治疗效果很好，,5,年,EFS,和总生存率达到,89,和,97,，是预后良好的指标之一。,MLL,基因断裂重组检测,MLL,基因改变在急性白血病中的发生率约为,5,10,，在婴儿,ALL,中则高达,79,，是预后不良的标志。,BCR/ABL,融合基因检测,BCR/ABL,融合基因占儿童,ALL,的,3,5,，是最重要的预后不良因素之一。一旦检测出,BCR/ABL,融合基因，患儿需接受更为强烈的化疗或造血干细胞移植。但大多数患儿仍会治疗失败，,5,年,EFS,只有,28.6,。,4、10、17号染色体检测,26,临床意义,预后评估,TEL/AML1,基因融合或,4,、,10,、,17,号染色体三体的患者预后较好；,MLL,基因重排的患者预后较差；,BCR/ABL,基因融合的患者预后非常差。,美国儿童肿瘤组（,Children oncology group, COG,）根据发病年龄、初诊白细胞数、染色体和融合基因、初诊时,CNS,或睾丸白血病以及诱导化疗的骨髓原始幼稚细胞比例或,MRD,水平，将儿童,ALL,分为低危,t(12;21)/TEL-AML1,或,4,、,10,、,17,号染色体三体,、标危、高危（,MLL,重排）和高高危,t(9,；,22)/BCR-ABL4,组。,临床意义美国儿童肿瘤组（Children oncology,27,骨髓增生异常综合征,FISH,检测,骨髓增生异常综合征（,MDS,）是一组起源于造血干细胞，以血细胞病态造血、高风险向急性白血病转化为特征的难治性血细胞质、量异常的异质性疾病。,发病率：,3/10,万,分类：难治性贫血（,RA,）,难治性贫血伴环形铁粒幼细胞（,RARS,）,难治性血细胞减少伴多系发育异常（,RCMD,）,难治性贫血伴原始细胞增多（,RAEB,）,骨髓增生异常综合征，无法分类（,MDS,，,U,）,5q-,综合征（,MDS,，,5q-,）,骨髓增生异常综合征FISH检测骨髓增生异常综合征（MDS）是,28,临床症状及转归,MDS,亚型,临床症状,中位生存期,白血病转化率,RA,、,RAS,贫血为主、,病情进展缓慢,3-6yr,5%-15%,RAEB,、,RAEB-t,贫血、出血、感染、病情进展快,12mo(RAEB),5mo(RAEB-t),40%(RAEB),60%(RAEB-t),CMML,贫血为主、可有感染、出血,20mo,30%,20%,的,MDS,患者死于感染,临床症状及转归MDS亚型临床症状中位生存期白血病转化率RA、,29,预后,染色体核型,好,5q-,、,20q-,、,-Y,、正常核型,中,其它异常,差,-7/7q-,复杂染色体核型异常,(3,种异常,),MDS,染色体核型预后分组,预后染色体核型好5q-、20q- 、-Y、正常核型中其它异常,30,MDS,染色体及基因异常,FISH,检测探针,序号,检测探针,标记颜色,探针定位,异常染色体,1,GLP CSF1R/GLP,D5S23,D5S721,红,/,绿,CSF1R,：,5q33,D5S23,，,D5S72,：,5p15,-5/5q-,2,GLP EGR1/GLP,D5S23,D5S721,红,/,绿,EGR1,：,5q31,D5S23,，,D5S72,：,5p15,-5/5q-,3,GLP D7S486/CSP7,红,/,绿,D7S486,：,7q31,CSP7,：,7p11-q11,-7/7q-,4,GLP D7S522/CSP7,红,/,绿,D7S522:,7q31,CSP7:,7p11-q11,-7/7q-,5,GLP D20S108/CSP8,红,/,绿,D20S108:,20q12,CSP8,：,8p11-q11,20q-,、,+8,6,CSP X/CSP Y,红,/,绿,CSP X,：,Xp11-q11,CSP Y,：,Yp11-q11,-Y,适用人群：,临床经常规检测排除常见原因导致的贫血，需经骨穿进一步诊断的患者。,需借助细胞遗传学异常确诊的可疑,MDS,患者,临床已经诊断为,MDS,，需结合遗传学异常判断预后的患者。,MDS染色体及基因异常FISH检测探针序号检测探针标记颜色探,31,临床意义,鉴别诊断,染色体异常是,MDS,与其他非克隆性血液系统疾病所致贫血如再生障碍性贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞贫血等鉴别诊断的主要依据之一。,辅助诊断,MDS,MDS,患者存在的克隆性,染色体异常多为缺失性改变,，,40%-70%,的,MDS,患者可有细胞遗传学异常，以,-5/5q-,、,-7/7q-,、,+8,、,20q-,最为常见。,染色体异常是,MDS,维也纳诊断标准的三大确定标准之一。根据建议，,MDS,诊断满足两个必要标准和一个确定标准即可。,预后评估，指导临床个体化治疗,正常核型、,5q-,、,20q-,、,-Y,的,MDS,患者预后较好；,-7/7q-,、复杂异常的,MDS,患者预后差；,低危组,MDS,采用促进造血、诱导分化和生物反应调节剂,;,高危组,MDS,采用,AML,的联合化疗方案和造血干细胞移植。,临床意义,32,性染色体检测,用于监测异性异基因造血干细胞移植效果,男性患者骨髓移植前 男性患者骨髓移植后,探针：,CSP X/CSP Y,性染色体检测用于监测异性异基因造血干细胞移植效果男性患者骨髓,33,淋巴瘤,FISH,检测,淋巴瘤类型,探针名称,涉及基因,发生率,临床意义,B,细胞淋巴瘤,GLP IGH,IGH,50%-85%,鉴别,B,细胞恶性淋巴瘤和淋巴组织良性增生性病变,滤泡性淋巴瘤,GLP IGH/,GLP BCL2,IGH/BCL2,90%,辅助诊断滤泡性淋巴瘤,套细胞淋巴瘤,GLP IGH/,GLP CCND1,IGH/CCND1,95%,辅助诊断套细胞淋巴瘤,弥漫性大,B,细胞淋巴瘤,GLP BCL6,BCL6,40%,辅助诊断弥漫性大,B,细胞淋巴瘤,伯基特淋巴瘤,GLP C-MYC,C-MYC,100%,辅助诊断伯基特淋巴瘤,粘膜相关淋巴组织淋巴瘤,GLP MALT1,MALT1,10%-20%,辅助诊断,MALT,淋巴瘤,GLP API2/,GLP MALT1,API2/MALT1,40%,指导抗,HP,治疗,间变性大细胞淋巴瘤,GLP ALK,ALK,60%-80%,评估预后,淋巴瘤FISH检测淋巴瘤类型探针名称涉及基因发生率临床意义B,34,FISH,检测结果统计,异常模式,异常例数,阳性率,5q-/-5,8,7.07%,7q-/-7,8,7.07%,+8,8,7.07%,20q-,13,11.5%,-Y,2,1.77%,-8,2,1.77%,FISH-MDS,在,113,例,MDS,确诊病例中，,FISH,检测发现,26,例存在染色体异常改变,FISH检测结果统计异常模式异常例数阳性率5q-/-587.,35,MDS,（,FISH,）检测报告单,姓名： 年龄：,性别： 病例号：,申请单号：,科别：,标本种类： 临床诊断： 送检时间：,CSFIR/D5S23,探针,EGR1/D5S23,探针,D7S486/CSP7,探针,（,5q33,红,/5p,绿）,(5q31,红,/5p,绿,),（,7q31,红,/CSP7,绿）,D7S522/CSP7,探针,X/Y,探针,D20S108/CSP8,探针,（,7q31,红,/CSP7,绿） （,X,绿,/Y,红） （,20q12,红,/CSP8,绿）,结果分析：本次试验分别计数,200,个细胞，各异常细胞百分比分别为：,GLP CSFIR,探针：,50%,，,GLP D5S23,探针：,0%,；,GLP EGR1,探针：,50%,，,GLP D5S23,探针：,0%,；,GLP D7S486,探针：,0 %,，,CSP 7,探针：,0%,；,GLP D7S522,探针：,0%,，,CSP 7,探针：,0 %,；,GLP D20S108,探针：,0 %,，,CSP8,探针：,0%,；,CSP X,：,0%,，,CSP Y,：,0%,。,实验诊断提示,:,46,，,XX,5q-,， 请结合其它检测结果和临床症状综合判断。,MDS（FISH）检测报告单CSFIR/D5S23探针,36,FISH,检测结果统计,总例数,异常例数,阳性率,34,13,38.2%,FISH-CML (,BCR/ABL,),总例数,异常例数,阳性率,11,6,54.5%,FISH-IGH,FISH检测结果统计总例数 异常例数阳性率341338.2%,37,BCR/ABL,（,FISH,）检测报告,IGH,基因（,FISH,）检测报告,结果分析：本次试验分别计数,200,个细胞，,异常细胞百分比为,90%,。检测值阈值,(5.0%),，判定为阳性结果。,实验诊断提示：,该标本检测到,BCR/ABL,基因融合比例为,90%,（主要断裂点），,请结合其它检测结果和临床症状综合判断。,正常信号模式：,2,红,2,绿,异常信号模式：,1,黄,1,绿,1,红,BCR/ABL-210,融合基因,BCR/ABL (ES),(BCR,绿,/ABL,红,),信号模式,检测靶基因,探针名称,结果分析：本次试验计数,200,个细胞，各信号模式细胞百分比分别如下：,2,黄：,87%,；,1,黄,1,绿,1,红（典型异常信号）：,13.0%,。,实验诊断提示：检测到该标本,IGH,基因断裂重组，请结合其它检测结果和临床症状综合判断。,正常信号模式：,2,黄,异常信号模式：,1,黄,1,绿,1,红,IGH,基因断裂重组,GLP IGH,信号模式,检测靶基因,探针名称,BCR/ABL（FISH）检测报告 结果分析：本次试验分别计,38,FISH,检测结果统计,异常模式,异常例数,阳性率,1q21,扩增,6,31.6%,RB1,缺失,5,26.3%,D13S319,缺失,5,26.3%,P53,缺失,2,10.5%,IGH,断裂重组,3,15.8%,FISH-MM,在,19,例,MM,患者中，,FISH,检测发现,9,例存在染色体异常改变,FISH检测结果统计异常模式异常例数阳性率1q21扩增 63,39,MM,（,FISH,）检测报告单,姓名： 年龄：,性别： 病例号：,申请单号：,科别：,标本种类： 临床诊断： 送检时间：,结果分析：,本次试验分别计数,200,个细胞，各异常细胞百分比分别为：,GLP 1q21,：,21.0%,，,GLP RB1,：,17.0%,；,GLP D13S319,：,2.0%,，,GLP P53,：,3.0%,；,GLP IGH,探针：,1.0 %,。各探针检测阈值均为,5%,。,实验诊断提示,:,1q21,扩增，,RB1,缺失，,请结合其它检测结果和临床症状综合判断。,1q21/RB1,探针,IGH,探针,P53/D13S319,探针,（,1q21,红,/RB1,绿） （,D13S319,红,/ P53,绿）,结果分析：本次试验分别计数200个细胞，各异常细胞百分比分别,40,FISH,是细胞遗传学和分子遗传学之间的桥梁，极大地,提高了染色体分析的敏感性、准确性和可靠性,，成为精确的染色体分析不可缺少的手段。是常规显带技术的,重要补充,。,染色体核型能明确核型的异常，而,FISH,仅能提示与检测位点相关的变化。所以两者均有其特点及适用范围，,不能相互替代,。,常规显带核型分析,仍然是筛选恶性血液病染色体异常的,首选技术。,FISH技术在血液肿瘤中的应用主题讲座ppt课件,41,Thank You !,Thank You !,42,