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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,冰巴细胞表面抗原检测,免疫荧光法,2014-11-13硕士班,基本概念,所有参与免疫应答以及与免疫应答相关的细胞均被称为免疫细胞,包括淋巴细胞、单核一巨噬细胞、DC、各种粒细胞、红细胞、肥,大细胞、干细胞,NK细胞,单核细胞/巨噬细胞,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞碱性粒妇胞,肥大细胞,红细胞,血小板,免疫细胞种类,免疫细胞分离方法:,1.根据不同免疫细胞表面标志:FACS、MACS,2.根据细胞理化性质,1)根据细胞比重差异:自然沉降法、密度梯度离心法、改变细,胞密度法,2)根据细胞黏附特性:B细胞黏附于尼龙棉,3)根据细胞对渗透压变化的敏感度:红细胞对低渗敏感,淋巴细胞,淋巴细胞是指在适应性免疫中起关键作用的白细胞,由淋巴器官产生,机体免疫应答功能的重要细胞成分。主要指B淋巴细胞和T淋巴细胞,二,者表面抗原受体具有高度多样性,经抗原激发可分化为抗原特异性效应,细胞,分别介导体液免疫和细胞免疫,淋巴器官根据其发生和功能的差异可分为,中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官):包括胸腺、腔上囊或其相当器官,它们无须抗原刺激即可不断増殖淋巴细胞,成熟后将其转送至周围淋,巴器官。,周围淋巴器官(又名次级淋巴器官):包括脾、淋巴结等,成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化増殖,继而发挥其免疫功能,在此我们将要讨论CD4+和CD8+T淋巴细胞检测的方法和意义,201810/28,T淋巴细胞,T淋巴细胞是机体免疫系统中的主要调节及效应细胞,在正常机体内,各淋巴细胞亚群相互作用,可通过对抗原识别、处理、递呈引起多种,细胞因子同多种细胞之间的网络联系,构成维持免疫功能的生理平衡,维持着机体正常免疫功能。当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生,异常时,可导致机体免疫功能紊乱并发生一系列病理变化。因此,T,淋巴细胞亚群的免疫分型能够提供有关患者免疫状态的重要信息,Peptide-MHKC,渐,TGFB and IL-,1adl2习,画,早期将T细胞中的CD4T细胞分为Th和Th2两个亚群。,Th细胞通过分泌-2、-12、IFN-y和TNF-a等细胞因子,介导与细,胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应。在抗感,染、抗肿瘤反应中发挥重要作用,Th2细胞则通过分泌-4、-5、-6、-10和13等细胞因子,其主要,功能为刺激B细胞増殖并产生抗体,促进机体的体液免疫应答,201810/28,hl/Th2亚群及其相互之间的平衡在免疫应答的调节中起着关键的作用,Thl/Th2平衡的失调与多种疾病的发生发展和预后有着密切的关系。目前,已发现许多感染性疾病、自身免疫性疾病、过敏性疾病以及移植排斥反应,等都与Th1/h2平衡有关,建立稳定有效的细胞内因子检测方法对于准确说明Th/h2细胞的作用非,常重要,目前检测的主要方法,酶联免疫法、 ELISPOT法、荧光定量法及原位杂交等方法,201810/28,人体内的淋巴细胞在光学显微镜下的形态基本是一样的,但其功能各异,对T细胞、B细胞和酝细胞及其有关的亚群的相应表面标志检测,藉,以判断机体的免疫水平,、T淋巴细胞表面标志的检测,T细胞表面标志,抗体致敏细胞花环法,免疫细胞化学法,免疫荧光法,T细胞亚群检测,201810/28,
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