临床生物化学绪论--课件

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生化改变的机理、体液中生化组分的质与量的变化为疾病的诊断、治疗、病情监测、药物疗效、预后及疾病的预防提供信息和决策依据的一门学科。,5,一、临床生物化学的含义（Clinical Biochem,二、临床生物化学的特点,理论性、实践性强：说明疾病发生机理、,开发新的检测技术,边缘性、应用性学科（交叉学科）：与多种学科和技术有密切联系。,生物学、物理学、数学、生理学、药理学、病理生理学、毒理学,基础学科,6,二、临床生物化学的特点理论性、实践性强：说明疾病发生机理、,生物化学、免疫学、血液学、输血学、遗传学、微生物学、分子生物学,专业学科。,仪器学、电子技术、计算机技术、免疫学技术、生化技术、及分子生物学技术,技术应用。,7,生物化学、免疫学、血液学、输血学、遗传学、微生物学、分子生,三、临床生物化学的发展,临床生物化学,一门年轻正在发展的学科,8,三、临床生物化学的发展临床生物化学一门年轻正在发展的学科,1918,年：“临床生物学”专著,1931,年出版了“临床生物学” 教科书,标志临床生物化学的初步形成。,20,世纪四十年代：蛋白质、氨基酸、营养与健康、酶学等方面,进行了研究，并取得了较大成果。,20,世纪,50,年代,分子生物学的研究。,9,1918年：“临床生物学”专著9,生物化学技术的发展：,肉眼观察：,3000,年前,中国：记载“泡沫尿”,竹条搅动尿液泡沫,出现说明尿液有蛋白诊断疾病。,埃及：（公元前,500,年）,尿液倒在干沙上数蚂蚁数目尿糖,10,生物化学技术的发展：肉眼观察：3000年前10,18,世纪后期,体液分析,重量法及容量法,分析体液的血糖、尿素、电解质。,缺点：耗时、耗料、方法繁琐、灵敏度低,11,18世纪后期体液分析11,20,世纪,50,年代：比色分析技术,使生化检验发生根本性改观。,测定物,+,试剂 显色 比色,可见光：,400nm700nm,波长,光度法：紫外分析技术,蛋白质 定性、定量,核酸 定性、定量,280nm,260nm,12,20世纪50年代：比色分析技术使生化检验发生根本性改观,形成：光谱分析技术,发射光谱、吸收光,谱、散色光谱。,准确度：血糖、血脂、酶类、尿素、尿酸、,肌酐等等。,13,形成：光谱分析技术发射光谱、吸收光 13,电化学分析技术：离子选择电极,分析,电解质。,电泳技术：薄层电泳、凝胶电泳、等电聚,焦电泳、转移电泳、毛细管电,泳。,14,电化学分析技术：离子选择电极分析14,层析技术：离子交换层析、凝胶层析、亲,和层析、高效液相层析。气相,层析。,离心技术：差速离心法、密度梯度离心法。,同位素技术,放射性：检验微量成分。,15,层析技术：离子交换层析、凝胶层析、亲15,免疫技术：免疫电泳法、免疫扩散法、免,疫沉淀法、酶免疫法。,酶试剂法：提供了更可靠更灵敏的检测分,析技术。,分子生物学技术,基因诊断,分子杂交技术、,PCR,技术、,RFLP,技术、,DNA,序列分析技术等。,16,免疫技术：免疫电泳法、免疫扩散法、免16,自动化分析仪的应用,20,世纪后期,:,计算机技术的应用全自动生化,分析仪的产生将取样、加试剂、,去干扰物、混合、保温反应、检,测数据处理、打印、清洗等步骤,通过仪器完成。,17,自动化分析仪的应用20世纪后期:计算机技术的应用全自动生,特点：快速、简便、灵敏、准确、标准化、 微量化。,第一代：流动式自动生化分析仪,第二代：分立式自动生化分析仪,第三代：离心式自动生化分析仪,18,特点：快速、简便、灵敏、准确、标准化、,例如：,COBAS 800,型全自动多功能生化分析 系统。,检测速度,:855,测试,/,小时,同时测定,72,相,标本用量,:210,微升,/,测试,标本类型：血清、血浆、尿、脑脊液、溶血,物、全血。,分析方法：,4,种,19,例如：COBAS 800型全自动多功能生化分析,分光光度法,酶类、底物类,透射比浊法,特种蛋白、滥用药物,荧光偏振法,治疗药物检测、甲状腺功能,检测,离子选择电极法,钠、钾、氯、锂离子。,20,分光光度法酶类、底物类20,目前检验科用：目标式、一体化分析系统,将临床化学及免疫化学检测项目结合于,一个模块平台进行检测。,临床化学模块,样本：血清、血浆、尿、脑脊液、溶血物、,全血。,检测能力：,10002000,项次,/,小时,同时上机项目：,60120,个,21,目前检验科用：目标式、一体化分析系统21,免疫模块：,检测能力：,170340,项次,/,小时,同时上机项目：,2550,个项目,检测项目：,750,个免疫项目,22,免疫模块：22,四、研究领域,阐述疾病的生化基础,了解疾病的发生机理。,例如：糖尿病及其代谢紊乱,疾病时血浆蛋白质变化,高脂血症,肝脏疾病的生化改变,化学病理学（,Chemical Pathology,）,23,四、研究领域阐述疾病的生化基础了解疾病的发生机理。23,研究基因与疾病的防治,基因突变疾病发生,美、英、中、俄、法等,6,国完成的（,2001,年）,人类基因组计划（,HGP,）,：,3.5,万基因的核苷酸序列测定使人类进入基因王国对遗传与疾病的相关性研究开辟一条通道更深入了解人类疾病的分子生物学基础形成基因诊断技术。,24,研究基因与疾病的防治基因突变疾病发生24,功能基因组学,深入研究各基因的功能,蛋白质组学,基因表达产物的研究,25,功能基因组学深入研究各基因的功能25,探讨生化检测的临床意义、指标的选择及评价,诊断化学：,(Diagnostic Clinical Chemistry),例如：血清酶学检测,心肌疾病的生化标志物检测,肿瘤标志物检测,常规生化检测：,肝功能、肾功能、血糖、血脂等。,26,探讨生化检测的临床意义、指标的选择及评价诊断化学：(Dia,急诊生化检测：检测结果需迅速回收,血糖、尿素、电解质、,酶、血气分析、心肌标,志物。,特殊生化检测：毒物检测、激素检测、,治疗药物检测、,DNA,分,析、羊水分析,27,急诊生化检测：检测结果需迅速回收27,床旁生化检测：急诊室、监护室、手术室、,事故现场、农村等,微量、小型仪器，现场操作,快捷、方便。,28,床旁生化检测：急诊室、监护室、手术室、28,对各种检测方法进行评价,对检测项目进行检测,对检测结果进行分析,29,对各种检测方法进行评价29,五、影响生化检测结果的生物学因素,生理因素,年龄：新生儿：,HBF,（主）胎儿型,胆红素浓度,青春期：,ALP,活性,成年期：生化指标稳定,老年期：胰岛素对糖反应，血,尿素,30,五、影响生化检测结果的生物学因素生理因素30,性别：醇脘,H,酶活性：女性男性,妊娠：,AFP,运动：,LDH,、,CK,31,性别：醇脘H酶活性：女性男性31,食物,饮酒：,TG,-GT,AST,餐后：血,G,，钾离子,，,TG,，,ALP,药物：,利尿药：血钾,避孕药：,Ch,，,ALT,，转氨酶,，,TG,吸毒：淀粉酶,，,ALP,，胆红素,，,血钾,，尿素,32,食物饮酒：TG,-GT,AST32,标本保存不妥,血清、血浆保存中：,ACP,失活、血氨、血,P,冰冻六个月：,ALP,、血,G,、氮含量明显改变,33,标本保存不妥血清、血浆保存中：ACP失活、血氨、血P3,不稳定血清（血浆）成分保存法,成分 保存法,氨 採血后直接冰冻（几小时到,1,天）,尿素,4,（,3,天），冷冻（数月）,胆红素 避光，,4,（数月），冷冻（,1,月）,酮体 冷冻（数月）,G NaF,抗凝剂，全血,4,（,2,周）,ChE 4,（,1,周），冷冻（,2,周）,ALP,迅速分离，,4,（,1,周），不可冷冻,ACP,迅速分离，,4,（,1,周），隔绝空气,CK 4,（数日），冷冻（,2,周）,LD,室温，不可冰箱保存,34,不稳定血清（血浆）成分保存法34,干扰物,内源性干扰物：,Hb,，胆红素，脂类，异物,蛋白,溶血：,溶血稀释出,Hb340nm,吸收峰直接干,扰胆红素结果。,溶血红细胞内成分释放影响结果,RBC,：,LD,钾离子，镁离子弄故分别比血浆高,160,倍、,22,倍、,3,倍。,35,干扰物内源性干扰物：Hb，胆红素，脂类，异物35,RBC,与血浆（血清）某些物质浓度差异,生化成分,RBC,血浆（血清）,RBC/,血浆,精氨酸酶（,U/L 37,）,61201428 3.9,（,0.87.9,）,1569.2,MDH,（,U/L 25,）,300223714 160,（,80310,）,187.6,LD,（,U/L 37,）,680009010 208378 179.9,AST,（,U/L 25,）,42592 11.1 38.3,CK,（,U/L 25,）,124153 80 15.5,钾离子（,mmol/L,）,88,（,76100,）,4.4,（,3.55.5,）,20.0,肌酸（,mol/L,）,618.0 314.3 18.0,36,RBC与血浆（血清）某些物质浓度差异36,脂血：干扰血,G,、,TG,、,P,、总胆红素、尿,酸、,TP,、纳离子测定。,黄疸：干扰血,G,、尿酸、,Ch,、,TG,测定。,37,脂血：干扰血G、TG、P、总胆红素、尿37,外源性干扰物,药物、添加剂、实验材料等,抗凝剂：草酸盐、柠檬酸盐、,EDTA,钙离子,抑制淀粉酶、,CK,、,5,羟色氨,38,外源性干扰物药物、添加剂、实验材料等38,六、生化学检验的任务,检验人员素质的提高,对检测质量保证的认识,对检测结果分析能力的提高,信息化管理,网络化,设置实验室信息系统，进行实验数据储,存，处理及管理。,39,六、生化学检验的任务检验人员素质的提高39,临床对话：与临床医师交流，参加病案讨,论，提供检测项目的选择。,研究开发：新技术新项目的开发；,配套实验正确组合，进行科研,项目的申报及研究。,人才培养：培养硕士、博士研究生，定期,进行学术交流。,40,临床对话：与临床医师交流，参加病案讨40,七、参考资料,中文：中华检验医学杂志,国际检验医学杂志,中国检验医学杂志,41,七、参考资料中文：中华检验医学杂志41,外文：,Tietz Textbook of clinical,Chemistry and Molecular.,Clinical Chemistry,（美国）,Annuals of clinical,Biochemistry,（英国）,Clinical Chemistry Acta,（荷兰）,Clincal Chemistry Review,（加拿大）,42,外文：Tietz Textbook of clinica,43,Thank you!,43Thank you!,