山梨酸苯甲酸课件

6、食品添加剂的检测、食品添加剂的检测1.1.甜味剂的测定（糖精钠）甜味剂的测定（糖精钠）2.2.防腐剂的测定（山梨酸、苯甲酸）防腐剂的测定（山梨酸、苯甲酸）3.3.发色剂的测定（亚硝酸盐、硝酸盐）发色剂的测定（亚硝酸盐、硝酸盐）4.4.漂白剂的测定（二氧化硫及亚硫酸盐）漂白剂的测定（二氧化硫及亚硫酸盐）5.5.抗氧化剂的测定（抗氧化剂的测定（BHABHA、BHTBHT）6.6.合成着色剂的测定合成着色剂的测定6、食品添加剂的检测16.1 概述食品添加剂定义：食品添加剂定义：食品添加剂定义：食品添加剂定义：所谓食品添加剂是指在食品生产、加工或贮所谓食品添加剂是指在食品生产、加工或贮所谓食品添加剂是指在食品生产、加工或贮所谓食品添加剂是指在食品生产、加工或贮存过程中，添加进去的天然或化学合成的物质。存过程中，添加进去的天然或化学合成的物质。存过程中，添加进去的天然或化学合成的物质。存过程中，添加进去的天然或化学合成的物质。对食品的色、香、味或质量起到一定的作用，本对食品的色、香、味或质量起到一定的作用，本对食品的色、香、味或质量起到一定的作用，本对食品的色、香、味或质量起到一定的作用，本身不作为食用目的，也不一定具有营养价值。身不作为食用目的，也不一定具有营养价值。身不作为食用目的，也不一定具有营养价值。身不作为食用目的，也不一定具有营养价值。特点：无营养性特点：无营养性特点：无营养性特点：无营养性 功能：保持食品营养、防止腐败变质，增强食品功能：保持食品营养、防止腐败变质，增强食品功能：保持食品营养、防止腐败变质，增强食品功能：保持食品营养、防止腐败变质，增强食品 感官性状、满足加工工艺要求，提高食品感官性状、满足加工工艺要求，提高食品感官性状、满足加工工艺要求，提高食品感官性状、满足加工工艺要求，提高食品 质量。质量。质量。质量。6.1 概述食品添加剂定义：2食品添加剂分类食品添加剂分类食品添加剂分类食品添加剂分类（1 1）按来源分为两大类：）按来源分为两大类：）按来源分为两大类：）按来源分为两大类：天然食品添加剂和化学天然食品添加剂和化学天然食品添加剂和化学天然食品添加剂和化学合成添加剂。合成添加剂。合成添加剂。合成添加剂。天然食品添加剂是利用动物与植物组织或分泌物天然食品添加剂是利用动物与植物组织或分泌物天然食品添加剂是利用动物与植物组织或分泌物天然食品添加剂是利用动物与植物组织或分泌物及以微生物的代谢产物为原料，经过提取、加工及以微生物的代谢产物为原料，经过提取、加工及以微生物的代谢产物为原料，经过提取、加工及以微生物的代谢产物为原料，经过提取、加工所得到的物质。如辣椒红色素、番茄红色素等是所得到的物质。如辣椒红色素、番茄红色素等是所得到的物质。如辣椒红色素、番茄红色素等是所得到的物质。如辣椒红色素、番茄红色素等是从植物中提取出来的。天然食品添加剂一般对人从植物中提取出来的。天然食品添加剂一般对人从植物中提取出来的。天然食品添加剂一般对人从植物中提取出来的。天然食品添加剂一般对人体无害。体无害。体无害。体无害。化学合成添加剂是通过一系列化学手段所得到的化学合成添加剂是通过一系列化学手段所得到的化学合成添加剂是通过一系列化学手段所得到的化学合成添加剂是通过一系列化学手段所得到的有机或无机物质，或多或少都有毒性，在剂量上有机或无机物质，或多或少都有毒性，在剂量上有机或无机物质，或多或少都有毒性，在剂量上有机或无机物质，或多或少都有毒性，在剂量上应该严格掌握。应该严格掌握。应该严格掌握。应该严格掌握。食品添加剂分类3（2)2)按食品添加剂的按食品添加剂的按食品添加剂的按食品添加剂的功能、用途功能、用途功能、用途功能、用途划分，各国分类划分，各国分类划分，各国分类划分，各国分类不尽相同，我国食品添加剂使用卫生标准不尽相同，我国食品添加剂使用卫生标准不尽相同，我国食品添加剂使用卫生标准不尽相同，我国食品添加剂使用卫生标准将其分为将其分为将其分为将其分为22222222大类：甜味剂、抗氧化剂、防腐剂、大类：甜味剂、抗氧化剂、防腐剂、大类：甜味剂、抗氧化剂、防腐剂、大类：甜味剂、抗氧化剂、防腐剂、着色剂、护色剂、香精香料、酸度调节剂、抗着色剂、护色剂、香精香料、酸度调节剂、抗着色剂、护色剂、香精香料、酸度调节剂、抗着色剂、护色剂、香精香料、酸度调节剂、抗结剂、消泡剂、漂白剂、膨胀剂、胶姆糖基础结剂、消泡剂、漂白剂、膨胀剂、胶姆糖基础结剂、消泡剂、漂白剂、膨胀剂、胶姆糖基础结剂、消泡剂、漂白剂、膨胀剂、胶姆糖基础剂、乳化剂、酶制剂、增味剂、面粉处理剂、剂、乳化剂、酶制剂、增味剂、面粉处理剂、剂、乳化剂、酶制剂、增味剂、面粉处理剂、剂、乳化剂、酶制剂、增味剂、面粉处理剂、被膜剂、水分保持剂、营养强化剂、稳定剂和被膜剂、水分保持剂、营养强化剂、稳定剂和被膜剂、水分保持剂、营养强化剂、稳定剂和被膜剂、水分保持剂、营养强化剂、稳定剂和凝固剂、增稠剂和其他类添加剂。凝固剂、增稠剂和其他类添加剂。凝固剂、增稠剂和其他类添加剂。凝固剂、增稠剂和其他类添加剂。（2)按食品添加剂的功能、用途划分，各国分类不尽相同，我国4食品添加剂的安全使用及管理食品添加剂的安全使用及管理 WHO/FAOWHO/FAO规定了规定了规定了规定了使用食品添加剂的一般原则使用食品添加剂的一般原则使用食品添加剂的一般原则使用食品添加剂的一般原则，就食品添加剂的安全性和维护消费者利益方面制定了就食品添加剂的安全性和维护消费者利益方面制定了就食品添加剂的安全性和维护消费者利益方面制定了就食品添加剂的安全性和维护消费者利益方面制定了严格的管理办法，并订出它们的严格的管理办法，并订出它们的严格的管理办法，并订出它们的严格的管理办法，并订出它们的ADI ADI 值（成人每天值（成人每天值（成人每天值（成人每天每公斤允许的最大摄入量，每公斤允许的最大摄入量，每公斤允许的最大摄入量，每公斤允许的最大摄入量，mg/Kgmg/Kg体重体重体重体重.日）日）日）日）食品添加剂法典委员会（食品添加剂法典委员会（食品添加剂法典委员会（食品添加剂法典委员会（CCFACCFA）每年定期召开会议，）每年定期召开会议，）每年定期召开会议，）每年定期召开会议，对食品添加剂制定统一的规格和标准，确定统一的试对食品添加剂制定统一的规格和标准，确定统一的试对食品添加剂制定统一的规格和标准，确定统一的试对食品添加剂制定统一的规格和标准，确定统一的试验方法和评价方法，对食品添加剂联合专家委员会验方法和评价方法，对食品添加剂联合专家委员会验方法和评价方法，对食品添加剂联合专家委员会验方法和评价方法，对食品添加剂联合专家委员会（JECFAJECFA）所通过的各种食品添加剂的标准、安全）所通过的各种食品添加剂的标准、安全）所通过的各种食品添加剂的标准、安全）所通过的各种食品添加剂的标准、安全性评价方法等进行审议和认可，在提交食品法典委员性评价方法等进行审议和认可，在提交食品法典委员性评价方法等进行审议和认可，在提交食品法典委员性评价方法等进行审议和认可，在提交食品法典委员会（会（会（会（CACCAC）复审后公布。）复审后公布。）复审后公布。）复审后公布。我国我国我国我国19951995年颁布年颁布年颁布年颁布食品卫生法食品卫生法食品卫生法食品卫生法；19971997年颁布年颁布年颁布年颁布食品食品食品食品添加剂使用卫生标准添加剂使用卫生标准添加剂使用卫生标准添加剂使用卫生标准（GB2760GB2760）食品添加剂的安全使用及管理5测定意义测定意义测定意义测定意义食食食食品品品品添添添添加加加加剂剂剂剂是是是是食食食食品品品品工工工工业业业业的的的的基基基基础础础础原原原原料料料料，对对对对食食食食品品品品的的的的生生生生产产产产工工工工艺艺艺艺、产产产产品品品品质质质质量量量量、安安安安全全全全卫卫卫卫生生生生都都都都起起起起到到到到至至至至关关关关重重重重要要要要的的的的作作作作用用用用。但但但但毕毕毕毕竟竟竟竟不不不不是是是是食食食食品品品品的的的的基基基基本本本本成成成成分分分分，尽尽尽尽管管管管在在在在用用用用于于于于食食食食品品品品之之之之前前前前已已已已在在在在实实实实验验验验室室室室中中中中进进进进行行行行多多多多次次次次安安安安全全全全性性性性测测测测试试试试，但但但但违违违违禁禁禁禁、滥滥滥滥用用用用以以以以及及及及超超超超范范范范围围围围、超超超超标标标标准准准准使使使使用用用用添添添添加加加加剂剂剂剂，都都都都会会会会给给给给食食食食品品品品质质质质量量量量、安安安安全全全全卫卫卫卫生生生生以以以以及及及及消消消消费费费费者者者者的的的的健健健健康康康康带带带带来来来来巨巨巨巨大大大大的的的的损损损损害害害害。食食食食品品品品添添添添加加加加剂剂剂剂的的的的种种种种类类类类和和和和数数数数量量量量越越越越来来来来越越越越多多多多，对对对对人人人人们们们们健健健健康康康康的的的的影影影影响响响响也也也也就就就就越越越越来来来来越越越越大大大大。随随随随着着着着研研研研究究究究的的的的不不不不断断断断改改改改进进进进和和和和发发发发展展展展，原原原原来来来来认认认认为为为为无无无无害害害害的的的的添添添添加加加加剂剂剂剂，近近近近年年年年来来来来发发发发现现现现还还还还可可可可能能能能存存存存在在在在慢慢慢慢毒毒毒毒性性性性、致致致致癌癌癌癌作作作作用用用用、致致致致畸畸畸畸作作作作用用用用及及及及致致致致突突突突变变变变作作作作用用用用等等等等各各各各种种种种潜潜潜潜在在在在的的的的危危危危害害害害，因因因因而而而而更更更更加加加加不能忽视。不能忽视。不能忽视。不能忽视。食食食食品品品品添添添添加加加加剂剂剂剂的的的的检检检检测测测测，目目目目的的的的在在在在于于于于监监监监督督督督、保保保保证证证证和和和和促促促促进进进进正正正正确确确确合合合合理理理理地地地地使使使使用用用用食食食食品品品品添添添添加加加加剂剂剂剂，确确确确保保保保人人人人民民民民的的的的身身身身体体体体健健健健康。康。康。康。测定意义6食品添加剂的检测内容食品添加剂的检测内容食品添加剂的检测内容食品添加剂的检测内容 食品添加剂的检测除已列入国家标准的食品添加剂的检测除已列入国家标准的品种外，不断有新的品种、新的卫生标准出品种外，不断有新的品种、新的卫生标准出现。随着技术的进步，许多快速的新检测方现。随着技术的进步，许多快速的新检测方法也相继出现。法也相继出现。n n1.1.甜味剂的测定（糖精钠）甜味剂的测定（糖精钠）n n2.2.防腐剂的测定（山梨酸、苯甲酸）防腐剂的测定（山梨酸、苯甲酸）n n3.3.发色剂的测定（亚硝酸盐、硝酸盐）发色剂的测定（亚硝酸盐、硝酸盐）n n4.4.漂白剂的测定（二氧化硫及亚硫酸盐）漂白剂的测定（二氧化硫及亚硫酸盐）n n5.5.抗氧化剂的测定（抗氧化剂的测定（BHABHA、BHTBHT）n n6.6.合成着色剂的测定合成着色剂的测定食品添加剂的检测内容 食品添加剂的检测除76.2.6.2.甜味剂（糖精钠）的测定甜味剂（糖精钠）的测定6.2.16.2.1概述概述定义：甜味剂是指能够赋予食品甜味的食品添加剂。定义：甜味剂是指能够赋予食品甜味的食品添加剂。定义：甜味剂是指能够赋予食品甜味的食品添加剂。定义：甜味剂是指能够赋予食品甜味的食品添加剂。按其来源可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂，按按其来源可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂，按按其来源可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂，按按其来源可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂，按其营养价值可分为营养型与非营养型甜味剂，通常其营养价值可分为营养型与非营养型甜味剂，通常其营养价值可分为营养型与非营养型甜味剂，通常其营养价值可分为营养型与非营养型甜味剂，通常所讲的甜味剂系指人工合成的非营养型甜味剂，如所讲的甜味剂系指人工合成的非营养型甜味剂，如所讲的甜味剂系指人工合成的非营养型甜味剂，如所讲的甜味剂系指人工合成的非营养型甜味剂，如糖精钠、环己氨基磺酸钠糖精钠、环己氨基磺酸钠糖精钠、环己氨基磺酸钠糖精钠、环己氨基磺酸钠(甜蜜素甜蜜素甜蜜素甜蜜素)、乙酰磺胺酸钾、乙酰磺胺酸钾、乙酰磺胺酸钾、乙酰磺胺酸钾(安塞蜜安塞蜜安塞蜜安塞蜜)、天冬酰苯丙氨甲酯、天冬酰苯丙氨甲酯、天冬酰苯丙氨甲酯、天冬酰苯丙氨甲酯(甜味素、阿斯巴甜甜味素、阿斯巴甜甜味素、阿斯巴甜甜味素、阿斯巴甜)等。等。等。等。6.2.甜味剂（糖精钠）的测定6.2.1概述8性质：糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，糖精性质：糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，糖精性质：糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，糖精性质：糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，糖精为白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，味极甜。为白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，味极甜。为白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，味极甜。为白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，味极甜。对热不稳定，长时间加热失去甜味。在水中溶解度极对热不稳定，长时间加热失去甜味。在水中溶解度极对热不稳定，长时间加热失去甜味。在水中溶解度极对热不稳定，长时间加热失去甜味。在水中溶解度极小，故在食品生产中常用其钠盐，糖精钠为无色结晶，小，故在食品生产中常用其钠盐，糖精钠为无色结晶，小，故在食品生产中常用其钠盐，糖精钠为无色结晶，小，故在食品生产中常用其钠盐，糖精钠为无色结晶，浓度低时呈甜味，浓度高时有苦味，易溶于水。糖精浓度低时呈甜味，浓度高时有苦味，易溶于水。糖精浓度低时呈甜味，浓度高时有苦味，易溶于水。糖精浓度低时呈甜味，浓度高时有苦味，易溶于水。糖精钠是限制使用的甜味剂，进入人体后不分解，不供给钠是限制使用的甜味剂，进入人体后不分解，不供给钠是限制使用的甜味剂，进入人体后不分解，不供给钠是限制使用的甜味剂，进入人体后不分解，不供给热能，无营养价值，对其使用的安全性至今尚未有定热能，无营养价值，对其使用的安全性至今尚未有定热能，无营养价值，对其使用的安全性至今尚未有定热能，无营养价值，对其使用的安全性至今尚未有定论。论。论。论。在凉果、蜜饯等产品的检验过程中，经常会出现在凉果、蜜饯等产品的检验过程中，经常会出现在凉果、蜜饯等产品的检验过程中，经常会出现在凉果、蜜饯等产品的检验过程中，经常会出现其含量超标现象。其含量超标现象。其含量超标现象。其含量超标现象。性质：糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，糖精为白色结晶或粉9 我国食品添加剂使用卫生标准规定，糖精我国食品添加剂使用卫生标准规定，糖精我国食品添加剂使用卫生标准规定，糖精我国食品添加剂使用卫生标准规定，糖精钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，最大使用量最大使用量最大使用量最大使用量(以糖精计以糖精计以糖精计以糖精计)为为为为0.150.150.150.15g g g gkgkgkgkg；高糖果高糖果高糖果高糖果汁汁汁汁(果味果味果味果味)饮料按稀释倍数的饮料按稀释倍数的饮料按稀释倍数的饮料按稀释倍数的80%80%80%80%加入，瓜子的加入，瓜子的加入，瓜子的加入，瓜子的最大使用量为最大使用量为最大使用量为最大使用量为1.21.21.21.2g g g gkgkgkgkg；话梅、陈皮等的最大话梅、陈皮等的最大话梅、陈皮等的最大话梅、陈皮等的最大使用量为使用量为使用量为使用量为5.05.05.05.0g g g gkgkgkgkg。106.2.26.2.2糖精钠的测定方法糖精钠的测定方法n n高效液相色谱法高效液相色谱法n n薄层色谱法薄层色谱法6.2.2糖精钠的测定方法116.2.2.16.2.2.1高效液相色谱法高效液相色谱法n n原理：原理：原理：原理：样品经加温除去二氧化碳和乙醇后，调节样品经加温除去二氧化碳和乙醇后，调节样品经加温除去二氧化碳和乙醇后，调节样品经加温除去二氧化碳和乙醇后，调节pHpHpHpH至近至近至近至近中性，过滤后进高效液相色谱仪。经反相色谱柱分离中性，过滤后进高效液相色谱仪。经反相色谱柱分离中性，过滤后进高效液相色谱仪。经反相色谱柱分离中性，过滤后进高效液相色谱仪。经反相色谱柱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。n n 仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂(1)(1)(1)(1)仪器：高效液相色谱仪，带紫外检测器仪器：高效液相色谱仪，带紫外检测器仪器：高效液相色谱仪，带紫外检测器仪器：高效液相色谱仪，带紫外检测器 (2)(2)(2)(2)试剂：甲醇试剂：甲醇试剂：甲醇试剂：甲醇=+=+=+=+水（水（水（水（1+11+11+11+1）：氨水加等体积的水混合）：氨水加等体积的水混合）：氨水加等体积的水混合）：氨水加等体积的水混合 0.02 0.02 0.02 0.02mol/Lmol/Lmol/Lmol/L乙酸铵：称取乙酸铵：称取乙酸铵：称取乙酸铵：称取1.541.541.541.54g g g g乙酸铵加水乙酸铵加水乙酸铵加水乙酸铵加水 1000 1000 1000 1000mLmLmLmL溶解溶解溶解溶解,过滤过滤过滤过滤 糖精钠标准溶液：国家标物中心购买，无须糖精钠标准溶液：国家标物中心购买，无须糖精钠标准溶液：国家标物中心购买，无须糖精钠标准溶液：国家标物中心购买，无须 自己配制自己配制自己配制自己配制6.2.2.1高效液相色谱法12操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤(1)(1)(1)(1)样品处理：样品处理：样品处理：样品处理：汽水和配制酒类：汽水和配制酒类：汽水和配制酒类：汽水和配制酒类：微热搅拌除去二氧化碳和乙醇，再用微热搅拌除去二氧化碳和乙醇，再用微热搅拌除去二氧化碳和乙醇，再用微热搅拌除去二氧化碳和乙醇，再用氨氨氨氨 水水水水(1:1)(1:1)(1:1)(1:1)调调调调 节节节节PHPHPHPH约为约为约为约为7 7 7 7，加水定容，过滤；，加水定容，过滤；，加水定容，过滤；，加水定容，过滤；饮料、果汁类：饮料、果汁类：饮料、果汁类：饮料、果汁类：用氨水用氨水用氨水用氨水(1:1)(1:1)(1:1)(1:1)调节调节调节调节PHPHPHPH约为约为约为约为7 7 7 7，加水定容，加水定容，加水定容，加水定容，离心沉淀，离心沉淀，离心沉淀，离心沉淀，过滤；过滤；过滤；过滤；固体样品：固体样品：固体样品：固体样品：如凉果、蜜饯等，将样品捣碎，称取适量用如凉果、蜜饯等，将样品捣碎，称取适量用如凉果、蜜饯等，将样品捣碎，称取适量用如凉果、蜜饯等，将样品捣碎，称取适量用 温水浸泡，冷却后定容，过滤。温水浸泡，冷却后定容，过滤。温水浸泡，冷却后定容，过滤。温水浸泡，冷却后定容，过滤。操作步骤13(2)(2)(2)(2)高效液相色谱分析参考条件：高效液相色谱分析参考条件：高效液相色谱分析参考条件：高效液相色谱分析参考条件：检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器 检测波长：检测波长：检测波长：检测波长：230230230230nmnmnmnm 色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱：C18C18C18C18柱柱柱柱 流动相：甲醇流动相：甲醇流动相：甲醇流动相：甲醇+0.02+0.02+0.02+0.02mol/Lmol/Lmol/Lmol/L乙酸铵（乙酸铵（乙酸铵（乙酸铵（5+955+955+955+95）流速：流速：流速：流速：1.01.01.01.0mL/minmL/minmL/minmL/min 进样量：进样量：进样量：进样量：20202020L L L L (3)(3)(3)(3)测定：测定：测定：测定：仪器稳定后，分别将仪器稳定后，分别将仪器稳定后，分别将仪器稳定后，分别将20202020L L L L标准溶液和样品溶标准溶液和样品溶标准溶液和样品溶标准溶液和样品溶 液注入色液注入色液注入色液注入色 谱系统，根据保留时间定性，峰面谱系统，根据保留时间定性，峰面谱系统，根据保留时间定性，峰面谱系统，根据保留时间定性，峰面 积定量。积定量。积定量。积定量。(2)高效液相色谱分析参考条件：14n n结果计算结果计算：A A A A样样样样样品的峰面积样品的峰面积样品的峰面积样品的峰面积A A A A标标标标标样的峰面积标样的峰面积标样的峰面积标样的峰面积C C C C标标标标标样的浓度标样的浓度标样的浓度标样的浓度(ug/mLug/mLug/mLug/mL）V V V V样样样样样品的定容体积（样品的定容体积（样品的定容体积（样品的定容体积（mLmLmLmL）M M M M样样样样样品质量样品质量样品质量样品质量(g)g)g)g)15说明：说明：（1 1 1 1）本方法国家标准检验方法，适用于各类食本方法国家标准检验方法，适用于各类食品中糖精钠含量的测定。另外，本方法可同品中糖精钠含量的测定。另外，本方法可同时测定食品中糖精钠、苯甲酸、山梨酸的含时测定食品中糖精钠、苯甲酸、山梨酸的含量。量。2.2.被测溶液的被测溶液的PHPH值对测定和色谱柱使用寿值对测定和色谱柱使用寿命均有影响，命均有影响，PH8 PH8或或PH2PH2时会影响被测组时会影响被测组分的保留时间，对仪器有腐蚀作用，以中性分的保留时间，对仪器有腐蚀作用，以中性为宜。为宜。说明：166.2.2.26.2.2.26.2.2.26.2.2.2薄层色谱法薄层色谱法薄层色谱法薄层色谱法n n原理原理原理原理样品经处理除去蛋白质、果胶、样品经处理除去蛋白质、果胶、样品经处理除去蛋白质、果胶、样品经处理除去蛋白质、果胶、CO2CO2CO2CO2、酒精等杂质、酒精等杂质、酒精等杂质、酒精等杂质后，在酸性条件下，用乙醚提取食品样品中的糖精钠，后，在酸性条件下，用乙醚提取食品样品中的糖精钠，后，在酸性条件下，用乙醚提取食品样品中的糖精钠，后，在酸性条件下，用乙醚提取食品样品中的糖精钠，经薄层层析分离后用溴甲酚绿一溴甲酚蓝混合指示剂经薄层层析分离后用溴甲酚绿一溴甲酚蓝混合指示剂经薄层层析分离后用溴甲酚绿一溴甲酚蓝混合指示剂经薄层层析分离后用溴甲酚绿一溴甲酚蓝混合指示剂显色后，与标准样品的斑点进行比较定性。在经薄层显色后，与标准样品的斑点进行比较定性。在经薄层显色后，与标准样品的斑点进行比较定性。在经薄层显色后，与标准样品的斑点进行比较定性。在经薄层色谱分离、显色后与标准比较，进行半定量测定。色谱分离、显色后与标准比较，进行半定量测定。色谱分离、显色后与标准比较，进行半定量测定。色谱分离、显色后与标准比较，进行半定量测定。n n 仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂 (1)(1)(1)(1)仪器仪器仪器仪器 (2)(2)(2)(2)试剂试剂试剂试剂 n n 操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤(1)(1)(1)(1)样品的提取样品的提取样品的提取样品的提取(2)(2)(2)(2)薄层板的制备薄层板的制备薄层板的制备薄层板的制备 (3)(3)(3)(3)点样点样点样点样 (4)(4)(4)(4)展开与显色展开与显色展开与显色展开与显色 n n 结果计算结果计算结果计算结果计算6.2.2.2薄层色谱法176.2.3 6.2.3 环己氨基磺酸钠（甜蜜素）的测定环己氨基磺酸钠（甜蜜素）的测定n n原理：在酸性介质中，甜蜜素与亚硝酸钠反应，生原理：在酸性介质中，甜蜜素与亚硝酸钠反应，生原理：在酸性介质中，甜蜜素与亚硝酸钠反应，生原理：在酸性介质中，甜蜜素与亚硝酸钠反应，生成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱进行定量和定性。成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱进行定量和定性。成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱进行定量和定性。成环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱进行定量和定性。n n测定步骤测定步骤测定步骤测定步骤:样品处理样品处理样品处理样品处理(液体样品除液体样品除液体样品除液体样品除COCOCOCO2 2 2 2和酒精；固体样和酒精；固体样和酒精；固体样和酒精；固体样品用水浸泡品用水浸泡品用水浸泡品用水浸泡)冰浴中加入亚硝酸钠和硫酸冰浴中加入亚硝酸钠和硫酸冰浴中加入亚硝酸钠和硫酸冰浴中加入亚硝酸钠和硫酸,反应反应反应反应30min 30min 30min 30min 正己烷萃取正己烷萃取正己烷萃取正己烷萃取气相色谱分析气相色谱分析气相色谱分析气相色谱分析,采用标准曲线采用标准曲线采用标准曲线采用标准曲线法定量。法定量。法定量。法定量。6.2.3 环己氨基磺酸钠（甜蜜素）的测定186.2.46.2.4、乙酰磺胺酸钾（安塞蜜、乙酰磺胺酸钾（安塞蜜、AKAK糖）的测定糖）的测定n n采用液相色谱法采用液相色谱法(GB/T16345-1996)n n样品处理条件同糖精钠。样品处理条件同糖精钠。n n该方法可同时测定糖精钠、咖啡因、阿斯巴甜。该方法可同时测定糖精钠、咖啡因、阿斯巴甜。6.2.4、乙酰磺胺酸钾（安塞蜜、AK糖）的测定采用液相色谱196.3 6.3 防腐剂（山梨酸、苯甲酸）的测定防腐剂（山梨酸、苯甲酸）的测定6.3.1.6.3.1.6.3.1.6.3.1.概述：概述：概述：概述：n n定义：防腐剂是指能防止食品腐败、变质，抑制定义：防腐剂是指能防止食品腐败、变质，抑制定义：防腐剂是指能防止食品腐败、变质，抑制定义：防腐剂是指能防止食品腐败、变质，抑制食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂。随着是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂。随着是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂。随着是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂。随着食品保藏新工艺、新设备的完善，防腐剂将逐步食品保藏新工艺、新设备的完善，防腐剂将逐步食品保藏新工艺、新设备的完善，防腐剂将逐步食品保藏新工艺、新设备的完善，防腐剂将逐步减少使用，甚至不用。目前，我国允许使用的品减少使用，甚至不用。目前，我国允许使用的品减少使用，甚至不用。目前，我国允许使用的品减少使用，甚至不用。目前，我国允许使用的品种主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对种主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对种主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对种主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢乙酸等。乙酸等。乙酸等。乙酸等。6.3 防腐剂（山梨酸、苯甲酸）的测定6.3.1.概述：20 性性性性质质质质：（1 1 1 1）苯苯苯苯甲甲甲甲酸酸酸酸，为为为为白白白白色色色色有有有有丝丝丝丝光光光光的的的的鳞鳞鳞鳞片片片片或或或或针针针针状状状状结结结结晶晶晶晶，微微微微溶溶溶溶于于于于水水水水，易易易易溶溶溶溶于于于于氯氯氯氯仿仿仿仿、丙丙丙丙酮酮酮酮、乙乙乙乙醇醇醇醇、乙乙乙乙醚醚醚醚等等等等有有有有机机机机溶溶溶溶剂剂剂剂，化化化化学学学学性性性性质质质质较较较较稳稳稳稳定定定定。苯苯苯苯甲甲甲甲酸酸酸酸钠钠钠钠易易易易溶溶溶溶于于于于水水水水，难难难难溶溶溶溶于于于于有有有有机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。（2 2 2 2）山山山山梨梨梨梨酸酸酸酸为为为为无无无无色色色色、无无无无臭臭臭臭的的的的针针针针状状状状结结结结晶晶晶晶，山山山山梨梨梨梨酸酸酸酸难难难难溶溶溶溶于于于于水水水水，易易易易溶溶溶溶于于于于乙乙乙乙醇醇醇醇、乙乙乙乙醚醚醚醚、氯氯氯氯仿仿仿仿等等等等有有有有机机机机溶溶溶溶剂剂剂剂。山山山山梨梨梨梨酸酸酸酸钾钾钾钾易易易易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸。（3 3 3 3）苯苯苯苯甲甲甲甲酸酸酸酸与与与与山山山山梨梨梨梨酸酸酸酸两两两两种种种种防防防防腐腐腐腐剂剂剂剂主主主主要要要要用用用用于于于于酸酸酸酸性性性性食食食食品品品品的的的的防防防防腐腐腐腐。山山山山梨梨梨梨酸酸酸酸是是是是一一一一种种种种不不不不饱饱饱饱和和和和的的的的脂脂脂脂肪肪肪肪酸酸酸酸，在在在在机机机机体体体体内内内内可可可可参参参参加加加加正正正正常常常常的的的的新新新新陈陈陈陈代代代代谢谢谢谢，最最最最后后后后被被被被氧氧氧氧化化化化为为为为二二二二氧氧氧氧化化化化碳碳碳碳和和和和水水水水，因因因因此此此此，山山山山梨酸是一种比苯甲酸更安全的防腐剂。梨酸是一种比苯甲酸更安全的防腐剂。梨酸是一种比苯甲酸更安全的防腐剂。梨酸是一种比苯甲酸更安全的防腐剂。性质：（1）苯甲酸，为白色有丝光的鳞片或针状结晶，微溶于21 6.3.2 6.3.2 6.3.2 6.3.2 酸碱滴定法测定苯甲酸及苯甲酸钠酸碱滴定法测定苯甲酸及苯甲酸钠酸碱滴定法测定苯甲酸及苯甲酸钠酸碱滴定法测定苯甲酸及苯甲酸钠 n n 原理：原理：原理：原理：试样中加入饱和氯化钠溶液，在碱性条件下进行萃试样中加入饱和氯化钠溶液，在碱性条件下进行萃试样中加入饱和氯化钠溶液，在碱性条件下进行萃试样中加入饱和氯化钠溶液，在碱性条件下进行萃取，分离出蛋白质、脂肪等，然后酸化，用乙醚提取试取，分离出蛋白质、脂肪等，然后酸化，用乙醚提取试取，分离出蛋白质、脂肪等，然后酸化，用乙醚提取试取，分离出蛋白质、脂肪等，然后酸化，用乙醚提取试样中的苯甲酸，再将乙醚蒸去，溶于中性醚醇混合液中，样中的苯甲酸，再将乙醚蒸去，溶于中性醚醇混合液中，样中的苯甲酸，再将乙醚蒸去，溶于中性醚醇混合液中，样中的苯甲酸，再将乙醚蒸去，溶于中性醚醇混合液中，最后以标准碱液滴定。最后以标准碱液滴定。最后以标准碱液滴定。最后以标准碱液滴定。n n 仪器和试剂：仪器和试剂：仪器和试剂：仪器和试剂：中性醚醇混合液中性醚醇混合液中性醚醇混合液中性醚醇混合液 0.05 0.05 0.05 0.05mol/L mol/L mol/L mol/L 氢氧化钠标准滴定溶液氢氧化钠标准滴定溶液氢氧化钠标准滴定溶液氢氧化钠标准滴定溶液 22操作步骤操作步骤 ：(1)(1)(1)(1)样品处理样品处理样品处理样品处理:固体样品：固体样品：固体样品：固体样品：称称称称100100100100g g g g样于样于样于样于500500500500mlmlmlml容量瓶中容量瓶中容量瓶中容量瓶中加加加加200200200200mlmlmlml水水水水加加加加AR NaClAR NaClAR NaClAR NaCl直到不溶解为止（降低苯甲酸在水中溶解度，直到不溶解为止（降低苯甲酸在水中溶解度，直到不溶解为止（降低苯甲酸在水中溶解度，直到不溶解为止（降低苯甲酸在水中溶解度，以减少在提取及水洗过程中的损失）以减少在提取及水洗过程中的损失）以减少在提取及水洗过程中的损失）以减少在提取及水洗过程中的损失）用用用用10%10%10%10%NaOHNaOHNaOHNaOH调为调为调为调为碱性（这时苯甲酸生成苯甲酸钠，并以苯甲酸钠状态存碱性（这时苯甲酸生成苯甲酸钠，并以苯甲酸钠状态存碱性（这时苯甲酸生成苯甲酸钠，并以苯甲酸钠状态存碱性（这时苯甲酸生成苯甲酸钠，并以苯甲酸钠状态存在）在）在）在）用饱和用饱和用饱和用饱和NaClNaClNaClNaCl定容定容定容定容500500500500mlmlmlml静置静置静置静置2 2 2 2小时小时小时小时过滤过滤过滤过滤弃去弃去弃去弃去初液初液初液初液收集滤液收集滤液收集滤液收集滤液 含酒精的样品：含酒精的样品：含酒精的样品：含酒精的样品：吸取吸取吸取吸取250250250250mLmLmLmL样品用样品用样品用样品用10%10%10%10%NaOHNaOHNaOHNaOH调为碱性调为碱性调为碱性调为碱性水浴蒸发至水浴蒸发至水浴蒸发至水浴蒸发至100100100100mLmLmLmL用饱和用饱和用饱和用饱和NaClNaClNaClNaCl定容定容定容定容250250250250mlmlmlml 过滤过滤过滤过滤弃弃弃弃去初液去初液去初液去初液收集滤液收集滤液收集滤液收集滤液 含脂肪多的样品：含脂肪多的样品：含脂肪多的样品：含脂肪多的样品：乙醚除脂肪乙醚除脂肪乙醚除脂肪乙醚除脂肪 操作步骤：23 (2)(2)(2)(2)提取及滴定：提取及滴定：提取及滴定：提取及滴定：吸滤液吸滤液吸滤液吸滤液100100100100mlmlmlml于于于于500500500500mlmlmlml分液漏斗分液漏斗分液漏斗分液漏斗加加加加1 1 1 11 1 1 1 HCl 5mlHCl 5mlHCl 5mlHCl 5ml酸化酸化酸化酸化用用用用150150150150mlmlmlml乙醚分三次提取乙醚分三次提取乙醚分三次提取乙醚分三次提取每次每次每次每次振荡不能太激烈以防乳化振荡不能太激烈以防乳化振荡不能太激烈以防乳化振荡不能太激烈以防乳化合并醚层合并醚层合并醚层合并醚层连接蒸馏装置连接蒸馏装置连接蒸馏装置连接蒸馏装置回收乙醚（回收乙醚（回收乙醚（回收乙醚（50505050水浴）水浴）水浴）水浴）用用用用10101010mlmlmlml中性醚醇中性醚醇中性醚醇中性醚醇+10+10+10+10mlmlmlml水溶解水溶解水溶解水溶解残渣残渣残渣残渣加加加加2 2 2 2滴酚酞滴酚酞滴酚酞滴酚酞用用用用0.050.050.050.05mol/L NaOHmol/L NaOHmol/L NaOHmol/L NaOH滴出微红色（同滴出微红色（同滴出微红色（同滴出微红色（同时要求做空白实验）时要求做空白实验）时要求做空白实验）时要求做空白实验）(3)(3)(3)(3)结果计算：结果计算：结果计算：结果计算：样品中苯甲酸钠的含量样品中苯甲酸钠的含量样品中苯甲酸钠的含量样品中苯甲酸钠的含量山梨酸苯甲酸课件24说明：说明：说明：说明：（1 1 1 1）预处理时用）预处理时用）预处理时用）预处理时用NaClNaClNaClNaCl饱和，作用是除去蛋白质及其饱和，作用是除去蛋白质及其饱和，作用是除去蛋白质及其饱和，作用是除去蛋白质及其水解产物，及降低苯甲酸钠的溶解度降低苯甲酸在水水解产物，及降低苯甲酸钠的溶解度降低苯甲酸在水水解产物，及降低苯甲酸钠的溶解度降低苯甲酸在水水解产物，及降低苯甲酸钠的溶解度降低苯甲酸在水中溶解度，以减少在提取及水洗过程中的损失中溶解度，以减少在提取及水洗过程中的损失中溶解度，以减少在提取及水洗过程中的损失中溶解度，以减少在提取及水洗过程中的损失 （2 2 2 2）采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品）采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品）采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品）采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法测定误差较大。测定误差较大。测定误差较大。测定误差较大。（3 3 3 3）适用于样品中苯甲酸含量为）适用于样品中苯甲酸含量为）适用于样品中苯甲酸含量为）适用于样品中苯甲酸含量为0.1%0.1%0.1%0.1%以上的分析。以上的分析。以上的分析。以上的分析。说明：25 6.3.3 6.3.3气相色谱法测定山梨酸、苯甲酸气相色谱法测定山梨酸、苯甲酸n n 测定原理测定原理 （1 1 1 1）气相色谱原理：）气相色谱原理：）气相色谱原理：）气相色谱原理：气相色谱法是采用惰性气体为流动相（称为载气）的气相色谱法是采用惰性气体为流动相（称为载气）的气相色谱法是采用惰性气体为流动相（称为载气）的气相色谱法是采用惰性气体为流动相（称为载气）的一种色谱法。即载气载着一种色谱法。即载气载着一种色谱法。即载气载着一种色谱法。即载气载着“气化气化气化气化”的试样，通过色谱柱的试样，通过色谱柱的试样，通过色谱柱的试样，通过色谱柱中的固定相，使试样中各组分分离，并先后从柱中流出。中的固定相，使试样中各组分分离，并先后从柱中流出。中的固定相，使试样中各组分分离，并先后从柱中流出。中的固定相，使试样中各组分分离，并先后从柱中流出。其检测流程：其检测流程：其检测流程：其检测流程：被测样品被气化后，在流速保持一定的惰被测样品被气化后，在流速保持一定的惰被测样品被气化后，在流速保持一定的惰被测样品被气化后，在流速保持一定的惰性气体的带动下，进入填有固定相的色谱柱。在色谱柱性气体的带动下，进入填有固定相的色谱柱。在色谱柱性气体的带动下，进入填有固定相的色谱柱。在色谱柱性气体的带动下，进入填有固定相的色谱柱。在色谱柱中样品被分离成一个个单一组分，并以一定的次序从色中样品被分离成一个个单一组分，并以一定的次序从色中样品被分离成一个个单一组分，并以一定的次序从色中样品被分离成一个个单一组分，并以一定的次序从色谱柱中流出，进入检测器，转变为电信号，再经放大后谱柱中流出，进入检测器，转变为电信号，再经放大后谱柱中流出，进入检测器，转变为电信号，再经放大后谱柱中流出，进入检测器，转变为电信号，再经放大后由记录仪记录下来并进行数据处理。由记录仪记录下来并进行数据处理。由记录仪记录下来并进行数据处理。由记录仪记录下来并进行数据处理。26 定性：定性：定性：定性：根据保留时间定性根据保留时间定性根据保留时间定性根据保留时间定性 定量：定量：定量：定量：通常使用标准曲线法。取纯物质配成标准系通常使用标准曲线法。取纯物质配成标准系通常使用标准曲线法。取纯物质配成标准系通常使用标准曲线法。取纯物质配成标准系列，分别取一定体积注入色谱仪，得到色谱峰，以标准列，分别取一定体积注入色谱仪，得到色谱峰，以标准列，分别取一定体积注入色谱仪，得到色谱峰，以标准列，分别取一定体积注入色谱仪，得到色谱峰，以标准溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制的关系曲溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制的关系曲溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制的关系曲溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制的关系曲线，即标准曲线。然后在相同的条件下注入样品处理液，线，即标准曲线。然后在相同的条件下注入样品处理液，线，即标准曲线。然后在相同的条件下注入样品处理液，线，即标准曲线。然后在相同的条件下注入样品处理液，根据色谱图的峰面积在标准曲线上查得待测组分的浓度。根据色谱图的峰面积在标准曲线上查得待测组分的浓度。根据色谱图的峰面积在标准曲线上查得待测组分的浓度。根据色谱图的峰面积在标准曲线上查得待测组分的浓度。27山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定原理：山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定原理：山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定原理：山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定原理：样品经酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用样品经酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用样品经酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用样品经酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用带氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，带氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，带氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，带氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，然后与标准系列进行比较定量。然后与标准系列进行比较定量。然后与标准系列进行比较定量。然后与标准系列进行比较定量。仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂仪器和试剂 ：（1 1 1 1）乙醚、石油醚：沸程）乙醚、石油醚：沸程）乙醚、石油醚：沸程）乙醚、石油醚：沸程3030303060 60 60 60（2 2 2 2）山梨酸、苯甲酸标准溶液：用石油醚山梨酸、苯甲酸标准溶液：用石油醚山梨酸、苯甲酸标准溶液：用石油醚山梨酸、苯甲酸标准溶液：用石油醚-乙醚（乙醚（乙醚（乙醚（3 3 3 3：1 1 1 1）混合溶剂配制溶液每毫升相当）混合溶剂配制溶液每毫升相当）混合溶剂配制溶液每毫升相当）混合溶剂配制溶液每毫升相当2 2 2 2mgmgmgmg山梨酸或苯甲酸。山梨酸或苯甲酸。山梨酸或苯甲酸。山梨酸或苯甲酸。（3 3 3 3）山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量山梨酸、苯）山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量山梨酸、苯）山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量山梨酸、苯）山梨酸、苯甲酸标准使用液：吸取适量山梨酸、苯甲酸标准溶液，以石油醚甲酸标准溶液，以石油醚甲酸标准溶液，以石油醚甲酸标准溶液，以石油醚-乙醚（乙醚（乙醚（乙醚（3 3 3 3：1 1 1 1）混合溶剂稀释）混合溶剂稀释）混合溶剂稀释）混合溶剂稀释至每毫升相当于至每毫升相当于至每毫升相当于至每毫升相当于50505050、100100100100、150150150150、200200200200、250250250250gggg山梨酸或山梨酸或山梨酸或山梨酸或苯甲酸。苯甲酸。苯甲酸。苯甲酸。（4 4 4 4）仪器：气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器）仪器：气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器）仪器：气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器）仪器：气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器山梨酸、苯甲酸的气相色谱测定原理：28 操作步骤操作步骤 (1)(1)(1)(1)样品的处理：样品的处理：样品的处理：样品的处理：称取称取称取称取2.52.52.52.5g g g g事先混合均匀的样品，置事先混合均匀的样品，置事先混合均匀的样品，置事先混合均匀的样品，置于于于于 25 25 25 25mLmLmLmL带塞试管中，加带塞试管中，加带塞试管中，加带塞试管中，加0.50.50.50.5mL 6molmL 6molmL 6molmL 6molL HCIL HCIL HCIL HCI酸化，用酸化，用酸化，用酸化，用15151515、10101010mLmLmLmL乙醚提取乙醚提取乙醚提取乙醚提取2 2 2 2 次，每次振摇次，每次振摇次，每次振摇次，每次振摇1min1min1min1min，将上层醚提取液吸将上层醚提取液吸将上层醚提取液吸将上层醚提取液吸入另一个入另一个入另一个入另一个25252525mLmLmLmL一带塞试管中，合并乙醚提取液。用一带塞试管中，合并乙醚提取液。用一带塞试管中，合并乙醚提取液。用一带塞试管中，合并乙醚提取液。用 3 3 3 3mL mL mL mL 4 4 4 4氯化钠酸性溶液洗涤氯化钠酸性溶液洗涤氯化钠酸性溶液洗涤氯化钠酸性溶液洗涤2 2 2 2次，静置次，静置次，静置次，静置15151515minminminmin，用滴管将乙用滴管将乙用滴管将乙用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入醚层通过无水硫酸钠滤入醚层通过无水硫酸钠滤入醚层通过无水硫酸钠滤入25252525mLmLmLmL容量瓶中。加乙醚至刻度，容量瓶中。加乙醚至刻度，容量瓶中。加乙醚至刻度，容量瓶中。加乙醚至刻度，混匀。准确吸取混匀。准确吸取混匀。准确吸取混匀。准确吸取5mL5mL5mL5mL乙醚提取液于乙醚提取液于乙醚提取液于乙醚提取液于5mL 5mL 5mL 5mL 带塞刻度试管中，带塞刻度试管中，带塞刻度试管中，带塞刻度试管中，置置置置40404040水浴上挥干，加入水浴上挥干，加入水浴上挥干，加入水浴上挥干，加入2 2 2 2mLmLmLmL石油醚石油醚石油醚石油醚-乙醚（乙醚（乙醚（乙醚（3 3 3 3：1 1 1 1）混合）混合）混合）混合溶液溶解残渣，备用。溶液溶解残渣，备用。溶液溶解残渣，备用。溶液溶解残渣，备用。思考：思考：思考：思考：用用用用GCGCGCGC法测定山梨酸和苯甲酸的含量时为什么要经法测定山梨酸和苯甲酸的含量时为什么要经法测定山梨酸和苯甲酸的含量时为什么要经法测定山梨酸和苯甲酸的含量时为什么要经 过酸化处理？过酸化处理？过酸化处理？过酸化处理？操作步骤29(2)(2)(2)(2)色谱参考条件色谱参考条件色谱参考条件色谱参考条件 色谱柱：玻璃柱，内径色谱柱：玻璃柱，内径色谱柱：玻璃柱，内径色谱柱：玻璃柱，内径3 3 3 3mmmmmmmm，长长长长2m2m2m2m，气流速度：载气、氮气，气流速度：载气、氮气，气流速度：载气、氮气，气流速度：载气、氮气，50505050mLmLmLmLminminminmin（氮气和空气、氮气和空气、氮气和空气、氮气和空气、氢气比按各仪器型号不同选择各自的最氢气比按各仪器型号不同选择各自的最氢气比按各仪器型号不同选择各自的最氢气比按各仪器型号不同选择各自的最 佳比例条件）。佳比例条件）。佳比例条件）。佳比例条件）。温度：进样口温度：进样口温度：进样口温度：进样口 230 230 230 230 ，检测器检测器检测器检测器230 230 230 230 ，柱温柱温柱温柱温170 170 170 170 。(2)色谱参考条件30（3 3 3 3）测定：）测定：）测定：）测定：进样进样进样进样2222L L L L标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰面积，以浓度中，可得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰面积，以浓度中，可得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰面积，以浓度中，可得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰面积，以浓度为横坐标，相应峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。为横坐标，相应峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。为横坐标，相应峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。为横坐标，相应峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。同时进样同时进样同时进样同时进样2222L L L L样品溶液，测得峰面积可从标准曲线相应样品溶液，测得峰面积可从标准曲线相应样品溶液，测得峰面积可从标准曲线相应样品溶液，测得峰面积可从标准曲线相应的山梨酸、苯甲酸的浓度。的山梨酸、苯甲酸的浓度。的山梨酸、苯甲酸的浓度。的山梨酸、苯甲酸的浓度。山梨酸和苯甲酸的标准色谱图如图所示山梨酸和苯甲酸的标准色谱图如图所示山梨酸和苯甲酸的标准色谱图如图所示山梨酸和苯甲酸的标准色谱图如图所示（3）测定：31n n结果计算结果计算结果计算结果计算式中：式中：式中：式中：X X X X样品中山梨酸或苯甲酸的含量，样品中山梨酸或苯甲酸的含量，样品中山梨酸或苯甲酸的含量，样品中山梨酸或苯甲酸的含量，g g g gkgkgkgkg；标准曲线上查得山梨酸或苯甲酸的量，标准曲线上查得山梨酸或苯甲酸的量，标准曲线上查得山梨酸或苯甲酸的量，标准曲线上查得山梨酸或苯甲酸的量，g/mLg/mLg/mLg/mL；V1 V1 V1 V1加入石油醚加入石油醚加入石油醚加入石油醚-乙醚乙醚乙醚乙醚(3+1)(3+1)(3+1)(3+1)混合溶剂的体积，混合溶剂的体积，混合溶剂的体积，混合溶剂的体积，mLmLmLmL：mmmm样品的质量，样品的质量，样品的质量，样品的质量，g g g g；5555测定时吸取乙醚提取液的体积，测定时吸取乙醚提取液的体积，测定时吸取乙醚提取液的体积，测定时吸取乙醚提取液的体积，mLmLmLmL；25252525样品乙醚提取液的总体积，样品乙醚提取液的总体积，样品乙醚提取液的总体积，样品乙醚提取液的总体积，mLmLmLmL。山梨酸苯甲酸课件32说明及注意事项：说明及注意事项：说明及注意事项：说明及注意事项：1 1 1 1、由测得苯甲酸的量乘以相对分子质量比、由测得苯甲酸的量乘以相对分子质量比、由测得苯甲酸的量乘以相对分子质量比、由测得苯甲酸的量乘以相对分子质量比1.181.181.181.18，即为样，即为样，即为样，即为样品中苯甲酸钠含量。品中苯甲酸钠含量。品中苯甲酸钠含量。品中苯甲酸钠含量。2 2 2 2、由测得山梨酸的量乘以相对分子质量比、由测得山梨酸的量乘以相对分子质量比、由测得山梨酸的量乘以相对分子质量比、由测得山梨酸的量乘以相对分子质量比1.341.341.341