螺旋体细菌学培训课件

序言第一节钩端螺旋体属钩端螺旋体属第二节密螺旋体属密螺旋体属 一、苍白密螺旋体苍白亚种一、苍白密螺旋体苍白亚种二、其它密螺旋体二、其它密螺旋体第三节疏螺旋体属疏螺旋体属一、伯氏疏螺旋体一、伯氏疏螺旋体二、其它二、其它疏螺旋体螺旋体1螺旋体细菌学7/21/2024重点难点熟悉了解掌握主要致病性螺旋体种类与结构特点及其所致疾病主要致病性螺旋体种类与结构特点及其所致疾病1.钩端螺旋体病传染源与流行特点及标本采集与检查钩端螺旋体病传染源与流行特点及标本采集与检查2.梅毒临床和病理特征及实验室诊断梅毒临床和病理特征及实验室诊断3.莱姆病传播媒介与临床特征及实验室诊断莱姆病传播媒介与临床特征及实验室诊断螺旋体概念与分类及其它致病性螺旋体所致疾病螺旋体概念与分类及其它致病性螺旋体所致疾病2螺旋体细菌学7/21/2024螺旋体分类及致病性螺旋体分类及致病性序言3螺旋体细菌学7/21/2024 螺旋体螺旋体(spirochete)是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物，生物学地位介于细菌与原虫之间。微生物，生物学地位介于细菌与原虫之间。概念与定义概念与定义生物学特性生物学特性 基本结构及生物学性状与细菌相似，有原始核质、类似革兰阴性菌的细基本结构及生物学性状与细菌相似，有原始核质、类似革兰阴性菌的细胞壁、二分裂方式繁殖、对多种抗生素敏感。胞壁、二分裂方式繁殖、对多种抗生素敏感。分布与致病分布与致病 分布广泛，种类繁多，部分螺旋体可引起人类疾病。分布广泛，种类繁多，部分螺旋体可引起人类疾病。4螺旋体细菌学7/21/2024分类及依据分类及依据 分类依据：菌体大小、螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距。分类依据：菌体大小、螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距。钩端螺旋体钩端螺旋体(Leptospira)：螺旋细密规则，一端或两端弯曲成钩状，螺旋细密规则，一端或两端弯曲成钩状，部分钩端螺旋体等对人和动物致病。部分钩端螺旋体等对人和动物致病。密螺旋体属密螺旋体属(Treponema)：螺旋较为细密规则，两端尖细，苍白密螺螺旋较为细密规则，两端尖细，苍白密螺旋体苍白亚种、苍白密螺旋体极细亚种和品他螺旋体对人致病。旋体苍白亚种、苍白密螺旋体极细亚种和品他螺旋体对人致病。疏螺旋体属疏螺旋体属(Borrelia)：3-10个稀疏不规则螺旋，伯氏疏螺旋体、回个稀疏不规则螺旋，伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体、赫姆疏螺旋体和奋森疏螺旋体对人致病。归热螺旋体、赫姆疏螺旋体和奋森疏螺旋体对人致病。5螺旋体细菌学7/21/2024形态与结构特点形态与结构特点 菌体菌体细长细长、弯曲弯曲有有螺旋螺旋，内外膜之间有，内外膜之间有内鞭毛内鞭毛 (endoflagella)。螺旋体与螺形螺旋体与螺形菌形态学比较菌形态学比较6螺旋体细菌学7/21/2024钩端螺旋体第一节7螺旋体细菌学7/21/2024生物学性状生物学性状 形状形状：一或两端弯曲呈一或两端弯曲呈C、S或问号状。或问号状。结构结构：柱形原生质体、内鞭毛、外膜。：柱形原生质体、内鞭毛、外膜。动力动力：旋转状活泼运动，暗视野显微镜观察。：旋转状活泼运动，暗视野显微镜观察。染色染色：镀银染色法，菌体呈金黄色或棕褐色。：镀银染色法，菌体呈金黄色或棕褐色。培养培养：Korthof 或或EMJH培养基培养基28培养。培养。基因组基因组：有大、小两个染色体。：有大、小两个染色体。A：暗视野显微镜；：暗视野显微镜；B：镀：镀银染色银染色BA8螺旋体细菌学7/21/2024分类及依据分类及依据 基因型分类基因型分类：近：近年根据年根据DNA-DNA杂交结果和杂交结果和16S rRNA序列，将钩端序列，将钩端螺旋体分为螺旋体分为致病性致病性、中间型中间型和和腐生性腐生性三大类三大类。1.致病性钩端螺旋体致病性钩端螺旋体：10个基因种个基因种(genospecies)，其中，其中问号钩端螺旋问号钩端螺旋体体(L.interrogans)基因种流行最广。基因种流行最广。2.中间型钩端螺旋体中间型钩端螺旋体：5个基因种，偶对人和动物致病。个基因种，偶对人和动物致病。3.腐生性钩端螺旋体腐生性钩端螺旋体：6个基因种，不致病。个基因种，不致病。血清学分类血清学分类：根据抗原性差异分类，可将基因种进一步分为：根据抗原性差异分类，可将基因种进一步分为血清群血清群及及其其血清型血清型，临床上主要采用血清学分类法。，临床上主要采用血清学分类法。9螺旋体细菌学7/21/2024流行特征流行特征致致病病性性钩钩端端螺螺旋旋体体动动物物宿宿主主众众多多，其其中中野野鼠鼠和和家家畜畜危害较大。危害较大。动动物物感感染染后后病病情情轻轻微微或或不不发发病病，但但持持续续从从尿尿液液排排出出钩钩端端螺螺旋旋体体，直直接接或或经经土土壤壤间间接接污污染染水水形形成成疫疫水水，人接触疫水感染后均发病。人接触疫水感染后均发病。根根据据流流行行特特征征和和传传染染源源差差异异分分为为稻稻田田型型（鼠鼠）、雨雨水水型型（家家畜畜）和和洪洪水水型型（鼠鼠与与家家畜畜）。我我国国以以稻稻田型田型和和洪水型洪水型为主，为主，7-9月月为高发季节。为高发季节。10螺旋体细菌学7/21/2024我国钩端螺旋体病分布我国钩端螺旋体病分布红色红色和和粉红色粉红色为高流行区域为高流行区域绿色绿色为中等程度流行区域为中等程度流行区域兰色兰色为无该病流行的区域为无该病流行的区域11螺旋体细菌学7/21/2024致病性致病性黏附素、内毒素、溶血素、侵袭性酶。黏附素、内毒素、溶血素、侵袭性酶。皮皮肤肤或或黏黏膜膜钩钩端端螺螺旋旋体体血血症症（发发热热、头头痛痛、肌肌痛痛、眼眼结结膜膜充充血血、浅浅表表淋淋巴巴结结肿肿大大等等）侵侵入入多多种种脏脏器器，因主要受损脏器不同，临床上有多种病型。因主要受损脏器不同，临床上有多种病型。主主要要依依赖赖于于特特异异性性体体液液免免疫疫，对对同同一一血血清清型型钩钩端端螺螺旋旋体体有有持持久久免免疫疫力，但不同血清群之间无明显的交叉保护作用。力，但不同血清群之间无明显的交叉保护作用。1.致病物质致病物质2.所致疾病所致疾病免疫性免疫性12螺旋体细菌学7/21/2024微生物学检查微生物学检查 病病原原学学检检查查：发发病病710天天取取外外周周血血，两两周周后后取取尿尿液液，离离心心集集菌菌后暗视野显微镜检查。后暗视野显微镜检查。血血清清学学检检查查：单单份份血血清清显显微微镜镜凝凝集集试试验验(MAT)效效价价1：400、双双份血清份血清MAT效价呈效价呈4倍及以上增长为阳性。倍及以上增长为阳性。防治原则防治原则 预预防防：各各血血清清群群交交叉叉保保护护作作用用有有限限，故故采采用用多多价价疫疫苗苗。口口服服强强力力霉素可用于紧急预防。霉素可用于紧急预防。治疗：治疗：首选青霉素，过敏者用庆大霉素或强力霉素。首选青霉素，过敏者用庆大霉素或强力霉素。13螺旋体细菌学7/21/2024密螺旋体第二节14螺旋体细菌学7/21/2024致病性密螺旋体致病性密螺旋体 苍苍白白密密螺螺旋旋体体苍苍白白亚亚种种(T.pallidumsubsp.pallidum)：人人类类梅梅毒毒病病原原体体，故故又又称称梅梅毒毒螺螺旋旋体体。梅梅毒毒（syphilis）是是我我国国人人群群中中危危害害较较为为严严重重的的性性传传播播疾疾病病(sexual transmitted disease,STD)。苍苍白白密密螺螺旋旋体体地地方方亚亚种种(T.pallidumsubsp.endemicum)：地地方方性性梅梅毒毒(endemic syphilis)或或称称非非性性病病梅梅毒毒病病原原体体，非非洲洲、西西亚亚和和中中东东地地区区流流行行，我我国国无病例报道。无病例报道。苍苍白白密密螺螺旋旋体体极极细细亚亚种种(T.pallidumsubsp.pertenue)：雅雅司司病病(yaws)病病原体，中非、南美、东南亚热带地区流行，目前我国无此病。原体，中非、南美、东南亚热带地区流行，目前我国无此病。品品他他密密螺螺旋旋体体(T.carateum)：品品他他病病(pinta)病病原原体体，中中美美和和南南美美地地区区流行，我国无病例报道。流行，我国无病例报道。15螺旋体细菌学7/21/2024苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种梅毒螺旋体梅毒螺旋体 生物学性状生物学性状形状形状：两端尖直。：两端尖直。结构结构：与钩端螺旋体相似，但螺旋较少。：与钩端螺旋体相似，但螺旋较少。动力动力：移行、曲伸、滚动等方式运动。：移行、曲伸、滚动等方式运动。染色法染色法：与钩端螺旋体相同。：与钩端螺旋体相同。培养培养：不能在无生命的人工培养基上生长繁殖。：不能在无生命的人工培养基上生长繁殖。抵抗力抵抗力：干燥：干燥2小时、小时、505分钟、分钟、43天即死亡。天即死亡。A：暗视野显微镜；：暗视野显微镜；B：镀银染色：镀银染色BA16螺旋体细菌学7/21/2024致病性致病性1.致病物质致病物质荚膜样物质、黏附因子、侵袭性酶。荚膜样物质、黏附因子、侵袭性酶。获得性梅毒获得性梅毒 I 期期梅毒：梅毒：外生殖器外生殖器硬下疳硬下疳(hard chancre)，传染性强。，传染性强。II期期梅毒：梅毒：皮肤及粘膜皮肤及粘膜梅毒疹梅毒疹(syphilid)，传染性强、组织破坏小。，传染性强、组织破坏小。III期期梅梅毒毒：皮皮肤肤和和黏黏膜膜结结节节性性梅梅毒毒疹疹(nodular syphilid)和和树树胶胶肿肿(gumma)、心血管梅毒和神经梅毒、心血管梅毒和神经梅毒，传染性小，组织破坏大。，传染性小，组织破坏大。2.所致疾病所致疾病获得性梅毒、先天性梅毒。获得性梅毒、先天性梅毒。17螺旋体细菌学7/21/2024梅毒疹梅毒疹硬硬下下疳疳梅梅毒毒瘤瘤18螺旋体细菌学7/21/2024先天性梅毒先天性梅毒 流流产产、早早产产或或死死胎胎，新新生生儿儿皮皮肤肤病病变变、马马鞍鞍鼻鼻、锯锯齿齿牙牙、骨骨软软骨骨炎炎、先先天性耳聋等体征，俗称梅毒儿。天性耳聋等体征，俗称梅毒儿。骨骨软软骨骨炎炎锯齿牙锯齿牙19螺旋体细菌学7/21/2024免疫性免疫性 传传染染性性免免疫疫或或有有菌菌性性免免疫疫：已已感感染染梅梅毒毒螺螺旋旋体体的的个个体体对对梅梅毒毒螺螺旋旋体体再感染有抵抗力，若体内梅毒螺旋体被清除，免疫力也随之消失。再感染有抵抗力，若体内梅毒螺旋体被清除，免疫力也随之消失。迟发型超敏反应为主的细胞免疫迟发型超敏反应为主的细胞免疫：抗梅毒螺旋体感染。抗梅毒螺旋体感染。自身抗体自身抗体：常出现抗淋巴细胞抗体、类风湿因子、冷凝集素等。常出现抗淋巴细胞抗体、类风湿因子、冷凝集素等。20螺旋体细菌学7/21/2024微生物学检查微生物学检查 病病原原学学检检查查：硬硬下下疳疳、梅梅毒毒疹疹渗渗出出液液标标本本用用暗暗视视野野显显微微镜镜、直直接接免免疫疫荧光法或荧光法或ELISA检查。检查。血清学检查：血清学检查：RPR或或TRUST初筛，初筛，TPHA或或TPPA确诊。确诊。防治原则防治原则 预防：预防：加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。治疗：治疗：青霉素类药物长程治疗。青霉素类药物长程治疗。21螺旋体细菌学7/21/2024疏螺旋体第三节22螺旋体细菌学7/21/2024致病性疏螺旋体致病性疏螺旋体 伯伯氏氏疏疏螺螺旋旋体体(Borrelia burgdorferi)：莱莱姆姆病病(Lyme disease)病病原原体体，我国北方林区为该病主要疫源地，我国北方林区为该病主要疫源地，20余个省和自治区证实有该病存在。余个省和自治区证实有该病存在。回回归归热热螺螺旋旋体体：引引起起回回归归热热(relapsing fever)，病病原原体体有有回回归归热热疏疏螺螺旋旋体体(Borreliarecurrentis)、杜杜通通疏疏螺螺旋旋体体(Borreliaduttonii)和和赫赫姆姆斯斯疏疏螺螺旋旋体体(Borrelia hermsii)，我国流行虱传回归热。，我国流行虱传回归热。奋奋森森疏疏螺螺旋旋体体(Borrelia vincentii)：与与梭梭形形梭梭杆杆菌菌(Fusobecteriurnfusiforme)协同引起协同引起奋森咽峡炎奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等疾病。、牙龈炎、口腔坏疽等疾病。23螺旋体细菌学7/21/2024一、伯氏疏螺旋体一、伯氏疏螺旋体 生物学性状生物学性状 形状形状：两端稍尖。：两端稍尖。结构结构：与钩端螺旋体相似，但螺旋少且不规则。：与钩端螺旋体相似，但螺旋少且不规则。动力动力：扭转、翻滚、抖动等方式运动。：扭转、翻滚、抖动等方式运动。染色法染色法：镀银染色法、：镀银染色法、Giemsa或或Wright染色法。染色法。培养培养：微需氧，：微需氧，BSK-II培养基培养基32-35培养。培养。A：荧光显微镜；：荧光显微镜；B：镀银染色：镀银染色BA24螺旋体细菌学7/21/2024抗原构造及分类抗原构造及分类抗抗原原构构造造：外外膜膜表表面面的的外外表表蛋蛋白白(outer surface protein，Osp)OspA、OspB和和OspC为主要表面抗原。为主要表面抗原。分分类类：目目前前根根据据DNA-DNA杂杂交交结结果果和和5-23S rRNA序序列列将将莱莱姆姆病病病病原原体体分分为为19个个基基因因种种(genospecies)，已已确确定定对对人人致致病病的的有有伯伯氏氏疏疏螺螺旋旋体体、伽伽氏氏疏疏螺螺旋体旋体(B.garinii)和和埃氏疏螺旋体埃氏疏螺旋体(B.afelii)三个基因种。三个基因种。我国主要为伽氏疏螺旋体，其次为埃氏疏螺旋体，伯氏疏螺旋体少见。我国主要为伽氏疏螺旋体，其次为埃氏疏螺旋体，伯氏疏螺旋体少见。目前将伯氏疏螺旋体作为莱姆病病原体的统称，为广义的伯氏疏螺旋体。目前将伯氏疏螺旋体作为莱姆病病原体的统称，为广义的伯氏疏螺旋体。25螺旋体细菌学7/21/2024流行特征流行特征动物宿主：动物宿主：宿主众多，以野鼠和鹿较为重要。宿主众多，以野鼠和鹿较为重要。传播媒介：传播媒介：多种硬蜱多种硬蜱，如亚洲全沟硬蜱，如亚洲全沟硬蜱。流流行行地地区区和和高高发发季季节节：我我国国东东北北和和内内蒙蒙古古等等林林区，区，5-6月为高发季节。月为高发季节。亚洲全沟硬蜱亚洲全沟硬蜱 26螺旋体细菌学7/21/2024致病性致病性1.致病物质致病物质OspB等黏附和侵袭因子、内毒素样物质等黏附和侵袭因子、内毒素样物质。2.所致疾病所致疾病慢性全身性感染，病程分三期。慢性全身性感染，病程分三期。早早期期局局部部性性感感染染：疫疫蜱蜱叮叮咬咬处处出出现现移移行行性性红红斑斑(erythema chronicum migrans，ECM)，伴有发热、肌肉和关节疼痛、局部淋巴结肿大。，伴有发热、肌肉和关节疼痛、局部淋巴结肿大。早期播散性感染早期播散性感染：继发性红斑、面神经麻痹、脑膜炎。继发性红斑、面神经麻痹、脑膜炎。晚期持续性感染晚期持续性感染：慢性关节炎、神经炎和萎缩性肌皮炎。慢性关节炎、神经炎和萎缩性肌皮炎。27螺旋体细菌学7/21/2024erythema chronicum migrans(ECM)移行性红斑移行性红斑ECM初为红色斑疹初为红色斑疹或丘疹，继而扩大为或丘疹，继而扩大为圆形皮损，边缘鲜红，圆形皮损，边缘鲜红，中央呈退行性变，多中央呈退行性变，多个个ECM重叠在一起重叠在一起可形成枪靶形可形成枪靶形28螺旋体细菌学7/21/2024微生物学检查微生物学检查 病病原原学学检检查查：体体内内螺螺旋旋体体数数量量较较少少，难难以以分分离离培培养养，可可用用PCR检检测测皮皮损及血液、关节液等标本中损及血液、关节液等标本中DNA片段，但阳性率不高。片段，但阳性率不高。血血清清学学检检查查：常常用用ELISA和和免免疫疫荧荧光光法法，但但结结果果仍仍需需用用免免疫疫印印迹迹法法(immunoblotting assay)确定其特异性。确定其特异性。防治原则防治原则 预防：预防：避免蜱叮咬，目前尚无疫苗。避免蜱叮咬，目前尚无疫苗。治疗：治疗：强力霉素、青霉素和头孢菌素类药物。强力霉素、青霉素和头孢菌素类药物。29螺旋体细菌学7/21/2024二、回归热疏螺旋体二、回归热疏螺旋体 生物学性状生物学性状：细长有疏松螺旋：细长有疏松螺旋，运动活泼。，运动活泼。致病性致病性：回归热，反复周期性急起急退高热。：回归热，反复周期性急起急退高热。虱传虱传回归热：回归热：病原体为病原体为回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体。蜱蜱传传回回归归热热：病病原原体体为为杜杜通通疏疏螺螺旋旋体体和和赫赫姆斯疏螺旋体姆斯疏螺旋体。免疫性免疫性：主要依赖特异性体液免疫。主要依赖特异性体液免疫。微生物学检查微生物学检查：发热期外周血标本涂片：发热期外周血标本涂片Giemsa染色镜检。染色镜检。防防治治原原则则：避避免免虱虱和和蜱蜱叮叮咬咬，青青霉霉素素、红红霉霉素素、多多西西环环素素治治疗疗。目目前前尚无疫苗产品尚无疫苗产品。回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体30螺旋体细菌学7/21/2024u螺旋体为原核细胞型微生物，根据螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋螺旋体为原核细胞型微生物，根据螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距等可分为钩端间距等可分为钩端螺旋体螺旋体属属、密密螺旋体螺旋体属属和和疏螺旋体属，其中疏螺旋体属，其中少数少数螺旋体可引起人类疾病螺旋体可引起人类疾病。u致病性钩端螺旋体经疫水传播，引起人兽共患钩端螺旋体病致病性钩端螺旋体经疫水传播，引起人兽共患钩端螺旋体病。u苍白密螺旋体苍白亚种引起人类性传播疾病苍白密螺旋体苍白亚种引起人类性传播疾病梅毒梅毒。u伯氏疏螺旋体是人类莱姆病病原体，硬蜱为主要传播媒介伯氏疏螺旋体是人类莱姆病病原体，硬蜱为主要传播媒介。本章小结本章小结31螺旋体细菌学7/21/2024u螺旋体结构特点、主要致病性种类及其所致疾病。螺旋体结构特点、主要致病性种类及其所致疾病。u钩端螺旋体病传染源、流行特点及标本采集、实验室诊断主要方法。钩端螺旋体病传染源、流行特点及标本采集、实验室诊断主要方法。u梅毒临床和病理特征及实验室初筛、确诊主要方法。梅毒临床和病理特征及实验室初筛、确诊主要方法。u莱姆病传播媒介、临床特征及实验室诊断主要方法。莱姆病传播媒介、临床特征及实验室诊断主要方法。复习思考复习思考32螺旋体细菌学7/21/2024