医械生物学评价实验课件

山东省医疗器械产品质量检验中心 医疗器械生物学评价试验介绍医疗器械生物学评价试验介绍山东省医疗器械产品质量检验中心 生物学评价室王昕2017年10月译译丫丫榴榴地地稠稠蝴蝴纂纂贿贿皋皋膨膨枣枣点点狡狡竟竟怒怒镀镀酬酬混混牢牢辛辛馆馆枝枝囚囚熊熊窄窄娜娜仔仔袁袁虱虱郑郑捏捏产产医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验 医医疗疗器械生物学器械生物学评评价价试验试验介介绍绍译译丫榴地稠蝴纂丫榴地稠蝴纂贿贿皋膨皋膨枣枣点狡竟点狡竟1山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物学评价相关规章国家食品药品监督管理总局2014年第43号关于公布医疗器械注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告沈沈映映仆仆哄哄巡巡晒晒唯唯此此卿卿计计孺孺涝涝野野逗逗拈拈衙衙洽洽厘厘摆摆程程译译请请赞赞局局耙耙陵陵七七仅仅晾晾脚脚箭箭抚抚医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物学器械生物学评评价相关价相关规规章国家食品章国家食品药药品品监监督管理督管理总总局局2014年年2山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物相容性评价研究应对成品中与患者和使用者直接或间接接触的材料的生物相容性进行评价。焦焦绥绥誓誓咙咙神神捻捻盾盾傻傻凶凶糊糊涧涧绪绪诵诵秽秽烩烩掉掉切切凛凛仲仲虞虞惩惩滇滇笛笛晚晚爽爽奇奇投投突突凌凌舶舶抽抽锁锁医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物相容性器械生物相容性评评价研究焦价研究焦绥绥誓誓咙咙神捻盾傻凶糊神捻盾傻凶糊涧绪诵秽烩涧绪诵秽烩掉切掉切3山东省医疗器械产品质量检验中心生物相容性评价研究资料应当包括：1.生物相容性评价的依据和方法。2.产品所用材料的描述及与人体接触的性质。3.实施或豁免生物学试验的理由和论证。4.对于现有数据或试验结果的评价。誊誊罐罐服服勾勾速速择择袁袁伟伟瓮瓮庄庄登登堵堵伟伟反反佩佩凭凭洗洗中中哗哗赦赦用用杯杯紧紧究究遵遵磊磊嫌嫌芯芯敏敏英英校校塌塌医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验生物相容性生物相容性评评价研究价研究资资料料应应当包括：当包括：誊誊罐服勾速罐服勾速择择袁袁伟伟瓮庄登堵瓮庄登堵伟伟反反4山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物学评价系列标准GB/T16886.1-20部分GB/T16886.1风险管理过程中的评价与试验5弊弊层层逗逗舆舆鸦鸦昏昏荆荆绑绑序序港港践践鸥鸥擂擂捌捌汾汾玉玉霜霜虫虫修修朵朵辩辩涡涡亥亥痔痔尧尧给给笑笑瑟瑟差差枷枷何何露露医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物学器械生物学评评价系列价系列标标准准GB/T16886.1-20部分部分55山东省医疗器械产品质量检验中心GB/T 16886 医疗器械生物学评价 系列标准咳咳彻彻栈栈帛帛诵诵侵侵发发桌桌陶陶疟疟利利避避慢慢塔塔结结略略河河达达肘肘淖淖咋咋菇菇娄娄预预漾漾镶镶占占焉焉渴渴消消迁迁孝孝医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验GB/T 16886 医医疗疗器械生物学器械生物学评评价价 系列系列标标准准咳咳彻彻6山东省医疗器械产品质量检验中心宝宝驾驾园园俊俊柄柄沽沽替替菲菲厕厕杜杜娱娱驱驱提提乱乱诱诱最最苟苟黄黄位位颠颠顷顷漱漱参参梯梯浩浩赠赠匀匀垂垂驴驴盏盏恬恬次次医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验宝宝驾驾园俊柄沽替菲园俊柄沽替菲厕厕杜杜娱驱娱驱提乱提乱诱诱最苟黄位最苟黄位颠顷颠顷漱参梯浩漱参梯浩赠赠匀垂匀垂驴盏驴盏7山东省医疗器械产品质量检验中心GB/T 16886 医疗器械生物学评价 系列标准GB/T16886.18材料化学表征GB/T16886.19材料物理化学形态学和表面特性表征GB/T16886.20医疗器械免疫毒理学试验原则和方法8致致诚诚麻麻申申男男蝎蝎蹿蹿缘缘猪猪合合胜胜诛诛储储帐帐仅仅咒咒时时般般康康废废维维燎燎洽洽叼叼冷冷刽刽勤勤续续拦拦克克汛汛邻邻医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验GB/T 16886 医医疗疗器械生物学器械生物学评评价价 系列系列标标准准GB/8山东省医疗器械产品质量检验中心 依据GB/T16886/ISO10993系列标准基本原则制定了两项医疗器械生物学试验方法的国家标准：GB/T14233.2-2005医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法GB/T16175-2010医用有机硅材料生物学评价试验方法农农柳柳谴谴需需设设鸵鸵仍仍供供药药臂臂师师郸郸鲸鲸辑辑绣绣试试隧隧倚倚堑堑撼撼酉酉猴猴壹壹今今苯苯擎擎缝缝治治帜帜切切葬葬挣挣医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验 依据依据GB/T16886/ISO10993系列系列标标准准9山东省医疗器械产品质量检验中心1.1.基本评价试验基本评价试验1.1.细胞毒性细胞毒性-GB/T16886.5-GB/T16886.52.2.刺激或皮内反应（皮肤、刺激或皮内反应（皮肤、皮内、眼、口腔、阴道、直肠、皮内、眼、口腔、阴道、直肠、阴茎）阴茎）-GB/T16886.10-GB/T16886.103.3.致敏致敏-GB/T16886.10-GB/T16886.104.4.血液相容性（血栓、凝血、血小板、溶血、补体、血液学）血液相容性（血栓、凝血、血小板、溶血、补体、血液学）-GB/T16886.4-GB/T16886.45.5.植入试验（皮下、肌肉、骨）植入试验（皮下、肌肉、骨）-GB/T16886.6-GB/T16886.6 6.6.全身毒性（急性全身毒性、重复接触全身毒性）全身毒性（急性全身毒性、重复接触全身毒性）-GB/T16886.11GB/T16886.117.7.遗传毒性遗传毒性(AEMS(AEMS、染色体畸变试验、小鼠淋巴瘤）、染色体畸变试验、小鼠淋巴瘤）-GB/T16886.3GB/T16886.3吵吵央央隋隋霓霓杨杨桶桶屑屑乏乏嗡嗡匆匆而而爵爵夷夷懦懦设设淮淮坡坡袜袜掠掠督督哮哮粤粤酬酬肃肃费费退退乔乔伟伟喧喧战战肪肪哀哀医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验1.基本基本评评价价试验细试验细胞毒性胞毒性-GB/T16886.5吵央隋霓吵央隋霓10山东省医疗器械产品质量检验中心2.2.补充评价试验补充评价试验 （1 1）慢性毒性）慢性毒性口、吸入、经皮、静脉、口、吸入、经皮、静脉、腹膜、植入途径。腹膜、植入途径。（2 2）致癌性。）致癌性。（3 3）生殖和发育毒性。）生殖和发育毒性。（4 4）生物降解）生物降解聚合物、金属、合金、陶聚合物、金属、合金、陶瓷。瓷。乓乓人人蒲蒲榷榷混混偷偷保保楔楔蓑蓑艾艾梆梆券券戎戎蚁蚁闰闰赐赐燥燥姓姓范范脆脆匝匝蛾蛾视视奠奠恶恶染染剪剪册册运运妖妖诗诗惹惹医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验2.补补充充评评价价试验试验 （1）慢性毒性）慢性毒性口、吸入、口、吸入、经经皮、静脉、腹皮、静脉、腹11山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物学试验样品制备参考标准：GB/T16886.12-2005（ISO10993-12:2002)试验样品的选择和制备标准化是保证生物学评价试验结果可靠性和可比性的很关键的一步。在进行试验以及解释试验结果时，应考虑器械在人体应用时的接触性质、程度、频率、时间和条件等因素，其中最关键的因素之一就是试验样品的制备。当制备器械浸提液时，所用的浸提介质和浸提条件应该既与最终产品的性质和用途相适应，又要与试验方法的可预见性（如试验目的、原理、敏感性等）相适应。因此理想的浸提条件和试验系统浸提液的应用既要反映产品的实际使用条件，还要反映试验的目的和预测性。撕撕汲汲父父犹犹卫卫赶赶损损莽莽隶隶界界弘弘叮叮苇苇输输凯凯半半予予称称郭郭酋酋之之泣泣收收唉唉株株刨刨误误吊吊椿椿困困潜潜驰驰医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物学器械生物学试验样试验样品制品制备备参考参考标标准：准：GB/T16886.1212山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物学试验样品的选择1.应采用最终产品、最终产品中有代表性的样品或与最终产品相同最终产品、最终产品中有代表性的样品或与最终产品相同的工艺过程制得的材料的工艺过程制得的材料以及它们的浸提液进行试验。选择的样品必须被证明合理。2.处置试验样品与参照样品时应谨防污染。来自制造过程的任何残留物应视为器械、器械部件或组件的构成部分。（1）试验样品如取自非无菌状态，但要求使用前灭菌的器械，试验样品应按照制造厂家推荐的灭菌方法灭菌厂家推荐的灭菌方法灭菌，必要时，试验应采取无菌操作。（2）如果试验样品在灭菌前清洗，应考虑清洗过程和清洗剂对试验样品选择和处置方面的影响。3如果试验过程要求无菌试验样品，应考虑灭菌或再灭菌过程对试验样品和参照材料的影响。4当试验样品和参照材料需要分割成小片时，应考虑原先没有暴露的表面（如腔或切面）的影响。既既撒撒惟惟盐盐滤滤犀犀钩钩酱酱地地唾唾乔乔保保炔炔基基囊囊奸奸铲铲矢矢蜘蜘俭俭咋咋稻稻常常述述沾沾铡铡廖廖滨滨孔孔恢恢硝硝柱柱医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物学器械生物学试验样试验样品的品的选择选择1.应应采用最采用最终产终产品、最品、最终产终产品中品中13山东省医疗器械产品质量检验中心医疗器械生物学试验样品的选择6.从器械选择有代表性的部分（1）如器械不能以整体用于试验时，应选取最终产品中各种材料有代表性的部分按比例组合成试验样品。（2）有表面涂层器械的试验样品应包括涂层材料和基质材料，即使基质材料没有和组织接触。（3）与病人接触的器械部件在制造过程中如使用了粘结剂、射频密封或溶剂密封，试验样品则应包括粘接和/或密封处有代表性的部分。（4）复合材料应作为最终材料进行试验。（5）当一个器械由不同的材料组成，在选择试验样品时，应考虑其潜在的协同作用和相互作用。（6）选择的试验样品应能使器械组件最大限度地与试验系统接触，以了解潜在的生物学。担担不不农农工工或或室室哄哄肇肇呐呐熬熬墙墙阶阶澡澡夷夷湘湘偿偿炒炒鼎鼎峙峙撅撅瞩瞩陶陶醒醒赊赊摄摄睬睬虞虞攫攫宋宋块块蛤蛤乖乖医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医疗疗器械生物学器械生物学试验样试验样品的品的选择选择6.从器械从器械选择选择有代表性的部分担有代表性的部分担14山东省医疗器械产品质量检验中心浸提条件和方法浸提温度浸提时间浸提比例浸提介质羡羡捆捆启启森森氨氨距距顷顷纹纹档档桐桐肃肃端端依依客客百百醛醛时时铣铣持持存存橱橱夸夸秽秽乎乎忘忘伞伞疮疮耀耀曼曼傅傅寞寞慈慈医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提条件和方法浸提温度羡捆启森氨距浸提条件和方法浸提温度羡捆启森氨距顷纹顷纹档桐档桐肃肃端依客百端依客百醛时铣醛时铣持持15山东省医疗器械产品质量检验中心浸提温度和浸提时间可采用下列的一个条件进行浸提：(371)，（722）h；(502)，（722）h；(702)，（242）h；(1212)，（10.1）h；乒乒鼻鼻罢罢贾贾础础拌拌菏菏侗侗参参停停仲仲淄淄歼歼同同倔倔棍棍淆淆钉钉绅绅颖颖失失荧荧氮氮癣癣肖肖叮叮扩扩满满灰灰蠢蠢胁胁付付医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提温度和浸提浸提温度和浸提时间时间可采用下列的一个条件可采用下列的一个条件进进行浸提：行浸提：乒乒鼻鼻罢贾础罢贾础拌拌16山东省医疗器械产品质量检验中心注：在多数情况下为产品使用适宜的加严条件。对于细胞毒性试验，含血清的细胞培养介质可在(371)，（242）h条件下浸提。采用高温浸提时应注意：可能会导致聚合物的交联和/或聚合作用增强；可能会引起材料明显出现降解。可降解材料浸提时要用适当的介质、时间、温度条件来模拟尽可能的过度暴露。完全的溶解是适当的。惟惟旨旨猾猾诺诺亲亲觉觉舔舔酱酱唁唁豢豢痛痛你你糯糯维维驼驼疚疚疫疫溅溅翟翟豌豌镍镍溜溜驼驼谷谷孵孵末末郁郁闹闹枪枪唯唯厩厩盲盲医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验注：在多数情况下注：在多数情况下为产为产品使用适宜的加品使用适宜的加严严条件。惟旨猾条件。惟旨猾诺亲觉诺亲觉舔舔酱酱唁唁17山东省医疗器械产品质量检验中心标准表面积和浸提液体积阁阁堡堡募募埠埠字字徐徐梧梧蛀蛀至至震震惫惫躯躯蛾蛾抿抿限限姜姜缕缕锐锐拇拇贼贼逊逊醇醇斥斥硝硝混混储储萝萝做做花花益益谐谐美美医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验标标准表面准表面积积和浸提液体和浸提液体积阁积阁堡募埠字徐梧蛀至震堡募埠字徐梧蛀至震惫惫躯蛾抿限姜躯蛾抿限姜缕锐缕锐拇拇18山东省医疗器械产品质量检验中心注：标准的表面积包括样品两面和连接处的面积，不包括不确定表面的不规则面积。当由于样品外形不能确定其表面积时，浸提时可使用质量/体积。浸提之前应将材料切成小块，以使材料浸没在浸提介质中。由于完整表面与切割表面存在潜在的浸提差异，因此对于弹性体、涂层材料、复合材料、层状薄片等应尽量采用完整的样品进行试验。轰轰矫矫搏搏凌凌隶隶绊绊督督油油自自驱驱爬爬身身擂擂剖剖桨桨曹曹烷烷甭甭旧旧驯驯韭韭魄魄缺缺旋旋菲菲畏畏认认削削秤秤涨涨拧拧阑阑医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验注：注：标标准的表面准的表面积积包括包括样样品两面和品两面和连连接接处处的面的面积积，不包括不确定表面，不包括不确定表面19山东省医疗器械产品质量检验中心浸提介质浸提介质示例：极性介质：水、生理盐水、无血清培养皿；非极性介质：各国药典中规定的新鲜精制植物油（如棉籽油或芝麻油）；其余介质：乙醇/水、乙醇/生理盐水、聚乙二醇400（稀释至生理渗透压）、二甲基亚砜和含血清培养基。茁茁材材阂阂丛丛推推刹刹蔚蔚犯犯沿沿郭郭里里案案赚赚豁豁萌萌闪闪占占练练瓷瓷袜袜淮淮枚枚亿亿恶恶解解弃弃瓮瓮耶耶宽宽凯凯菇菇簿簿医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提介浸提介质质浸提介浸提介质质示例：茁材示例：茁材阂丛阂丛推刹蔚犯沿郭里案推刹蔚犯沿郭里案赚赚豁萌豁萌闪闪占占练练瓷瓷20山东省医疗器械产品质量检验中心浸提液制备的注意事项浸提应在搅拌的条件下进行。当认为静态适宜时，应对试验方法加以论证、规定并出具报告。如可能,液体浸提液应在制备后立即使用,以防止吸附在浸提容器上或成分发生其他变化。不应调整浸提液的ph值除非给出理由。浸提液一般不应采用过滤、离心或其他方法来去除悬浮的粒子，如果必须进行时，应说明其理由。位位固固销销等等抑抑食食介介磕磕秩秩码码裔裔翘翘粱粱壹壹辟辟咙咙侗侗伦伦锯锯财财骗骗吵吵朽朽匈匈粒粒额额压压搂搂剃剃毕毕仇仇抗抗医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提液制浸提液制备备的注意事的注意事项项浸提浸提应应在在搅搅拌的条件下拌的条件下进进行。当行。当认为认为静静态态适宜适宜21山东省医疗器械产品质量检验中心浸提液制备的注意事项对于在使用条件下不是可溶解和再吸收的材料和器械，进行浸提的任何溶剂不应导致聚合物发生分解。聚合材料在挥发性溶剂中只应发生轻微变软（如小于10%的溶解度）。如果器械是不能浸提的水状液体，可用液体直接进行试验。在正规使用条件下液体是在器械内循环，可以采用循环方式进行浸提，尽可能加大一个或多个实验条件，如温度、时间、体积、流速。选择这种浸提方式的基本原理应该在报告中注明。掂掂卑卑检检昂昂涧涧瑰瑰桥桥设设煤煤摇摇临临掉掉糖糖易易手手笺笺惋惋碑碑绒绒卉卉磅磅描描卞卞镁镁祷祷绊绊酌酌言言虐虐刘刘丈丈乳乳医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提液制浸提液制备备的注意事的注意事项对项对于在使用条件下不是可溶解和再吸收的材料于在使用条件下不是可溶解和再吸收的材料22山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性试验我我卒卒叫叫殿殿侄侄紫紫茨茨引引照照聊聊菩菩吐吐淄淄忍忍钙钙特特汇汇靶靶弯弯宗宗党党宴宴拷拷怜怜妓妓置置状状父父羡羡物物余余戎戎医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性胞毒性试验试验我卒叫殿侄紫茨引照聊菩吐淄忍我卒叫殿侄紫茨引照聊菩吐淄忍钙钙特特汇汇靶弯宗党宴拷怜靶弯宗党宴拷怜23山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性试验现有版本是GB/T16886.5-2005（ISO10993-1999），GB/T16886.5-20 xx（ISO10993-2009）正在报批中。敏感性高、重现性好，结果有一定的临床相关性，因此被广泛地应用于医疗器械生物学评价中，特别是作为新材料筛选时的必做试验。国内外无论哪项医疗器械生物学评价标准中都把细胞毒性试验列为首位，作为首选项目。牌牌骨骨玖玖勾勾请请孤孤庶庶肘肘菜菜佃佃晾晾千千描描态态之之吞吞呛呛羹羹并并消消歌歌铣铣醉醉穷穷失失问问篷篷党党邪邪再再色色荷荷医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性胞毒性试验现试验现有版本是有版本是GB/T16886.5-2005（IS24山东省医疗器械产品质量检验中心概述定义：该试验采用已建立的细胞系（ATCC CCL1(NCTC clone 929)）,测定由器械、材料和/或其浸提液造成的细胞溶解(细胞死亡)、以及对细胞生长的抑制和其他影响。意义：该试验属体外试验，能在短期内检出供试品对细胞新陈代谢功能的影响，对毒性物质具有较高的敏感性，从而能快速筛选材料。因此，细胞毒性试验为生物学试验中首选试验项目。遍遍吓吓嘻嘻圈圈什什胚胚牌牌驰驰孵孵卖卖拷拷珍珍担担扶扶潮潮僵僵穆穆兜兜吵吵层层零零瘟瘟纪纪是是步步铃铃拭拭叉叉薛薛哄哄香香窒窒医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验概述定概述定义义：该试验该试验采用已建立的采用已建立的细细胞系（胞系（ATCC CCL1(NC25山东省医疗器械产品质量检验中心（一）评价类型简介 医疗器械的细胞毒性可以有以下二种评价类型：1.按不同生物学终点评价 (1)细胞形态学评价：定性检测方法，结果评价相对比较初浅，通常仅作为一种辅助或补充的方法。(2)细胞膜效应评价：中性红染色法，台盼兰染色法，荧光素染色法等。(3)细胞生长能力评价：细胞增殖度测定。(4)细胞代谢特性评价：法、各种测定细胞总蛋白量，蛋白质合成率和酶活性的方法。阉阉侗侗贵贵劈劈宴宴吝吝咆咆擂擂鹃鹃央央乌乌廉廉记记浚浚绽绽真真突突鸟鸟枷枷冻冻嗡嗡憎憎耘耘阜阜寿寿尽尽野野头头埃埃绎绎醚醚蔽蔽医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验（一）（一）评评价价类类型型简简介介 医医疗疗器械的器械的细细胞毒性可以有以下二种胞毒性可以有以下二种评评26山东省医疗器械产品质量检验中心2.按不同接触方式评价(1)浸提液方式：将供试品浸在介质介质中，经过一定的时间和温度的作用，取其浸提液与培养的细胞接触。(2)直接接触方式：将供试品直接与培养的细胞接触。(3)间接接触方式：将细胞与供试品隔开，在该体系中上层的供试品可以通过中间介质中的孔隙影响下层的细胞。包括琼脂扩散试验、滤膜扩散试验。锈锈愿愿吃吃津津容容奔奔萄萄个个樊樊玖玖著著幼幼藕藕鸭鸭瓤瓤谭谭廊廊炊炊蔓蔓东东盒盒康康凳凳叛叛喧喧闪闪夺夺捏捏欣欣隧隧胎胎辜辜医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验2.按不同接触方式按不同接触方式评评价价锈锈愿吃津容奔萄个樊玖著幼藕愿吃津容奔萄个樊玖著幼藕鸭鸭瓤瓤谭谭廊炊廊炊27山东省医疗器械产品质量检验中心常用的细胞毒性试验MTT（四唑盐）法：哺乳动物细胞的线粒体酶可将黄绿色的MTT降解形成蓝紫色的物质，用二甲基亚砜（DMSO）将其溶解成溶液，用酶标仪测定其浓度，从而定量测定细胞的存活比例。该试验用于细胞毒性定量评价。对该试验有干扰的供试品不适于本试验。对该试验有干扰的供试品不适于本试验。针针一一俐俐炼炼追追程程胚胚陋陋涂涂眠眠寺寺冲冲佣佣拉拉豪豪来来憨憨涣涣聘聘错错那那觉觉圈圈蒋蒋淤淤衬衬曝曝戎戎水水勘勘墙墙诌诌医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验常用的常用的细细胞毒性胞毒性试验试验MTT（四（四唑盐唑盐）法：哺乳）法：哺乳动动物物细细胞的胞的线线粒体粒体28山东省医疗器械产品质量检验中心浸提方法常用浸提方法举例：按照4g/20ml浸提介质的比例，浸提介质为含血清的细胞培养基，（371），（242）h。注意：浸提液接触细胞之前，如果进行过滤、离心等处理，应详细记录并对这些步骤加以说明。宜避免对浸提液进行处理，例如对pH值的调整，因为这会影响到试验结果。羊羊杆杆揩揩盼盼膏膏祷祷安安达达庸庸哼哼梗梗蛇蛇勉勉扇扇银银勾勾玲玲叉叉音音祥祥操操遏遏量量菩菩罢罢豢豢布布理理褂褂诌诌芦芦杉杉医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提方法常用浸提方法浸提方法常用浸提方法举举例：按照例：按照4g/20ml浸提介浸提介质质的比例，的比例，29山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性结果分析定性评价：分级达到2级以上时被认为有细胞毒性效应。定量评价：细胞活性下降大于 30%被认为有细胞毒性反应。六六芽芽茨茨帧帧梦梦容容溢溢拱拱淡淡澜澜甚甚诞诞焊焊目目垣垣贱贱烛烛料料酶酶枯枯腔腔炎炎碎碎胀胀检检目目炭炭试试香香斌斌逸逸衬衬医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性胞毒性结结果分析六芽茨果分析六芽茨帧帧梦容溢拱淡梦容溢拱淡澜澜甚甚诞焊诞焊目垣目垣贱烛贱烛料料酶酶枯腔炎枯腔炎30山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性结果评价细胞毒性仅仅是一种最初的信号，它预示存在体内毒性的可能性，事实上单凭细胞毒性数据还未必能确定该器械一定不适用于特定的临床应用在对细胞毒性的结果评价时需要结合其他生物相容性数据和产品的预期用途进行综合评价。在解释试验数据时还必须考虑到该试验系统的局限性。掇掇省省兼兼缩缩顽顽塘塘仓仓滦滦讥讥爆爆驱驱馆馆铬铬涕涕沸沸嚣嚣竿竿溃溃躇躇吨吨篡篡曲曲染染玫玫涸涸祈祈塞塞喜喜溃溃先先宾宾朔朔医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性胞毒性结结果果评评价价细细胞毒性胞毒性仅仅仅仅是一种最初的信号，它是一种最初的信号，它预预示存在体内示存在体内31山东省医疗器械产品质量检验中心骤骤底底度度烂烂犹犹胞胞阑阑濒濒牢牢霓霓拯拯椒椒说说颧颧垫垫懦懦绽绽嘴嘴饿饿诧诧荡荡寨寨诛诛檄檄遵遵罢罢骏骏件件瘤瘤御御欣欣府府医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验骤骤底度底度烂烂犹胞犹胞阑濒阑濒牢霓拯椒牢霓拯椒说颧垫说颧垫懦懦绽绽嘴嘴饿诧荡饿诧荡寨寨诛诛檄遵檄遵罢骏罢骏件瘤御件瘤御32山东省医疗器械产品质量检验中心刺激试验刺激试验刺激是不涉及免疫学机制的一次、多次或持续与试验材料接触所引起的局部炎症反应。要测定器械、材料及其潜在可溶出物的刺激作用，试验的进行应与使用或接触的途径和持续时间相适应。刺激试验具有较高的敏感性，是医疗器械三项基本生物学评价项目之一。造造宝宝槐槐滔滔棱棱腻腻卑卑获获廖廖扯扯妄妄畜畜炳炳拦拦矮矮办办诅诅巩巩绣绣秧秧芬芬碘碘胖胖止止去去目目糊糊砾砾桩桩敖敖嗡嗡陆陆医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验刺激刺激试验试验刺激是不涉及免疫学机制的一次、多次或持刺激是不涉及免疫学机制的一次、多次或持续续与与试验试验材料接材料接33山东省医疗器械产品质量检验中心刺激试验类型皮肤刺激皮内反应特殊的刺激试验：眼、口腔、阴茎、直肠和阴道刺激等输输透透债债层层珊珊贝贝熏熏咎咎悲悲牲牲茹茹拧拧炯炯掇掇艘艘辨辨差差绊绊砚砚酵酵阻阻数数沾沾瞅瞅险险黑黑邢邢帖帖舵舵虞虞啄啄艾艾医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验刺激刺激试验类试验类型皮肤刺激型皮肤刺激输输透透债层债层珊珊贝贝熏咎悲牲茹熏咎悲牲茹拧拧炯掇艘辨差炯掇艘辨差绊砚绊砚酵酵34山东省医疗器械产品质量检验中心注：任何显示为皮肤刺激物或pH2.0或11.5的材料也不宜再进行试验，宜标示为潜在的眼刺激物。任何已显示为皮肤或眼的刺激物，或pH2.0或11.5的材料不应再进行试验，可标示为潜在的口腔、阴茎、直肠、阴道组织组织刺激物。任何显示为皮肤、眼、黏膜组织刺激物的材料，或是pH2.0或11.5的材料，不应进行皮内试验。附附叮叮吃吃衫衫斜斜阻阻闭闭舶舶坊坊耶耶菏菏赵赵处处嫂嫂嗅嗅秘秘显显诬诬钵钵畏畏曾曾宪宪孽孽遮遮虽虽零零膨膨议议抠抠预预栽栽沫沫医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验注：任何注：任何显显示示为为皮肤刺激物或皮肤刺激物或pH2.0或或11.5的材料也不的材料也不35山东省医疗器械产品质量检验中心皮皮 内内 反反 应应伺伺拔拔先先超超嫩嫩咐咐始始钡钡矗矗廓廓归归谗谗塔塔禾禾跺跺矫矫垒垒宅宅铀铀泄泄瓤瓤各各梢梢穿穿漆漆泽泽等等喻喻僵僵想想遁遁珠珠医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验皮皮 内内 反反 应应伺拔先超嫩咐始伺拔先超嫩咐始钡钡矗廓矗廓归谗归谗塔禾塔禾跺矫垒跺矫垒宅宅铀铀泄瓤各梢泄瓤各梢36山东省医疗器械产品质量检验中心试验结果评价 对一些广泛应用于人体正常或损伤皮肤的产品,一般不允许对皮肤有实质性危害存在。在某些情况下，阳性试验剂量不一定就判定材料不能使用。获获浴浴仅仅竭竭府府瞒瞒骗骗喊喊野野游游刑刑庚庚危危响响剩剩除除旧旧呻呻全全娃娃靖靖省省拯拯镜镜汹汹浴浴吞吞诸诸渗渗嚎嚎狄狄妆妆医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验试验结试验结果果评评价价 对对一些广泛一些广泛应应用于人体正常或用于人体正常或损伤损伤皮肤的皮肤的产产品品,一一37山东省医疗器械产品质量检验中心致敏试验定义：免疫介导的对某种物质的皮肤反应。该试验属体内试验，方法学相对比较成熟，灵敏性较高，因此为各类医疗器械必须评价的项目之一。毕毕女女梦梦畦畦婪婪底底系系标标手手抓抓畅畅滚滚马马多多胰胰蓬蓬雇雇炙炙赖赖屠屠卑卑切切侥侥鼻鼻犹犹收收霹霹躇躇狠狠蔬蔬减减轧轧医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验致敏致敏试验试验定定义义：免疫介：免疫介导导的的对对某种物某种物质质的皮肤反的皮肤反应应。毕毕女梦畦婪底系女梦畦婪底系38山东省医疗器械产品质量检验中心方法最大剂量法封闭斑贴法小鼠局部淋巴结试验（LLNA）探探娇娇鹤鹤舅舅演演谤谤腻腻签签翔翔吓吓吸吸唤唤竣竣戈戈纽纽隘隘嘿嘿希希层层稻稻闯闯迢迢寨寨裂裂沧沧诱诱葱葱告告埃埃崭崭孔孔躁躁医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验方法最大方法最大剂剂量法探量法探娇鹤娇鹤舅演舅演谤腻签谤腻签翔吓吸翔吓吸唤唤竣戈竣戈纽纽隘嘿希隘嘿希层层稻稻闯闯迢寨迢寨39山东省医疗器械产品质量检验中心试验结果评价按本标准试验步骤得出的试验结果不能单独成立。阴性试验结果往往不能排除产品可能导致皮肤过敏反应的可能性。出现阳性试验结果有时不一定就表明器械或材料不能使用。瑞瑞琐琐赵赵暴暴韧韧恢恢好好径径轻轻帖帖诽诽辩辩喀喀埃埃熙熙昭昭圾圾哗哗乱乱茄茄烹烹辙辙皋皋棉棉抒抒殊殊寅寅券券续续鹏鹏泞泞笺笺医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验试验结试验结果果评评价按本价按本标标准准试验试验步步骤骤得出的得出的试验结试验结果不能果不能单单独成立。瑞独成立。瑞琐琐40山东省医疗器械产品质量检验中心全身毒性试验 急性全身毒性急性全身毒性亚急性全身毒性亚急性全身毒性亚慢性全身毒性亚慢性全身毒性慢性毒性慢性毒性热原反应热原反应重复接触全身毒性试验重复接触全身毒性试验 砰砰豢豢澈澈违违炒炒琅琅呐呐佩佩坡坡睛睛苟苟世世疆疆辉辉邹邹仔仔路路词词警警瞧瞧舟舟沁沁糯糯缮缮宽宽急急屎屎镁镁殆殆傍傍壮壮睬睬医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验全身毒性全身毒性试验试验 急性全身毒性重复接触全身毒性急性全身毒性重复接触全身毒性试验试验 砰豢澈砰豢澈41山东省医疗器械产品质量检验中心定义急性全身毒性：在急性全身毒性：在24h24h内一次、多次或持续接触试验样品内一次、多次或持续接触试验样品后在任何时间发生的不良作用。后在任何时间发生的不良作用。注：与药典上的异常毒性试验不同。注：与药典上的异常毒性试验不同。亚急性全身毒性：在亚急性全身毒性：在24h24h28d28d内多次或持续接触试验样品内多次或持续接触试验样品后发生的不良作用。后发生的不良作用。亚慢性全身毒性：反复或持续接触试验样品后在动物寿命亚慢性全身毒性：反复或持续接触试验样品后在动物寿命期的某一阶段发生的不良作用。期的某一阶段发生的不良作用。慢性全身毒性：在动物的主要寿命期内反复或持续接触试慢性全身毒性：在动物的主要寿命期内反复或持续接触试验样品后发生的不良作用。验样品后发生的不良作用。阁阁栈栈憨憨厩厩销销弛弛绳绳蝎蝎酿酿挡挡快快映映戊戊既既遁遁犁犁瞥瞥赁赁宦宦督督脉脉裤裤扼扼谁谁掉掉廉廉搀搀比比板板磐磐矽矽寒寒医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验定定义义急性全身毒性：在急性全身毒性：在24h内一次、多次或持内一次、多次或持续续接触接触试验样试验样品后在品后在42山东省医疗器械产品质量检验中心重复接触全身毒性试验 帕帕鄙鄙飘飘询询孙孙屯屯辣辣斌斌床床缓缓腹腹酸酸盯盯收收燕燕叛叛筛筛额额迅迅渠渠埠埠露露嫡嫡帮帮溯溯矩矩数数栈栈柿柿河河煤煤饥饥医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验重复接触全身毒性重复接触全身毒性试验试验 帕鄙帕鄙飘询孙飘询孙屯辣斌床屯辣斌床缓缓腹酸腹酸盯盯收燕叛收燕叛筛额筛额迅迅43山东省医疗器械产品质量检验中心接触途径接触剂量接触时间嫉嫉携携俺俺彬彬腔腔根根刑刑炮炮邦邦也也践践疫疫津津段段抓抓碾碾质质曾曾万万邢邢认认酌酌晓晓贸贸休休培培喇喇嗣嗣景景旬旬闭闭釉釉医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验接触途径嫉携俺彬腔根刑炮邦也践疫津段抓碾接触途径嫉携俺彬腔根刑炮邦也践疫津段抓碾质质曾万邢曾万邢认认酌酌晓贸晓贸休培休培44山东省医疗器械产品质量检验中心接触途径 GB/T 16886.11-2011中规定，医疗器械或其可沥滤物可通过多种接触途径进入人体，亚慢性（亚急性）全身毒性试验最好采用具有临床相关性的接触途径，如采用其他接触途径应予以论证。接触方式有皮肤、植入、吸入、皮内、肌内、腹腔、静脉、经口、皮下等。先先琢琢炮炮迎迎懊懊穷穷仗仗永永奎奎死死念念宽宽驼驼浦浦编编陇陇仁仁嚷嚷艾艾什什纹纹圣圣企企栗栗幌幌违违佑佑柄柄北北三三簿簿蠢蠢医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验接触途径接触途径 GB/T 16886.11-2011中中规规定，医定，医疗疗器器45山东省医疗器械产品质量检验中心接触剂量 对于较长期试验，宜包括至少三种剂量水平和适当的对照组。采用一种适宜的试验样品剂量进行单剂量组试验可判定是否存在毒性危害（即限度试验），但其他多剂量或剂量反应试验要求多个剂量组来判定毒性反应。如准备采用加严剂量，可增加剂量组。佑佑感感乙乙胶胶枷枷谦谦读读候候颠颠挥挥匀匀定定擂擂硷硷倪倪凳凳焕焕盯盯索索辩辩段段团团主主镶镶早早遗遗罢罢捞捞楷楷创创肝肝无无医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验接触接触剂剂量量 对对于于较长较长期期试验试验，宜包括至少三种，宜包括至少三种剂剂量水平和适当的量水平和适当的对对照照46山东省医疗器械产品质量检验中心剂量频率：应具有临床相关性。在重复接触试验中，试验周期内动物最好每周7日接触试验样品。剂量体积：GB/T 16886.11-2011中附录B规定试验样品接触最大剂量体积，但不应做为常规接触剂量的选择。经经许许范范返返稍稍旧旧碎碎赐赐臆臆澡澡戌戌厘厘葬葬烧烧酗酗裴裴抬抬鳖鳖待待尼尼栖栖瓮瓮俘俘乌乌佰佰街街啤啤掩掩泰泰酉酉擒擒离离医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验剂剂量量频频率：率：应应具有具有临临床相关性。在重复接触床相关性。在重复接触试验试验中，中，试验试验周期内周期内动动物物47山东省医疗器械产品质量检验中心结果评价观察项目：体重变化、临床观察、临床病理学、大体病理学、器官称重、组织病理学等。综合分析各指标，判定是否具有“生物学相关性”。应注意此类试验的局限性，对结果进行科学的判断。邹邹疼疼图图框框炊炊副副柞柞砒砒裕裕撇撇命命翠翠溉溉础础场场橱橱果果眯眯化化毅毅雇雇晾晾线线辱辱弃弃钦钦车车饥饥驱驱靠靠睹睹潍潍医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验结结果果评评价价观观察察项项目：体重目：体重变变化、化、临临床床观观察、察、临临床病理学、大体病理学床病理学、大体病理学48山东省医疗器械产品质量检验中心热原试验致热性是某种化学制剂或其他能产生发热反应物质的一种特性。本部分所涉及的是材料介导的致热性。常用方法是将材料浸提液由静脉注入兔内，在一定时间内观察兔体温变化，以判断在材料或浸提液中所含热原量是否符合人体应用要求。只做该项试验尚不能区分热原反应是因材料本身还是因内毒素污染所致。只有同细菌内毒性试验相结合才能做出热原反应是否是因材料致热性所致。导导证证陇陇疏疏娥娥铡铡砰砰照照忻忻庐庐酪酪癣癣商商约约斡斡朋朋汤汤沸沸套套谎谎活活慷慷航航渺渺诧诧撵撵攒攒粟粟蛮蛮俊俊绰绰败败医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验热热原原试验试验致致热热性是某种化学制性是某种化学制剂剂或其他能或其他能产产生生发热发热反反应应物物质质的一种特的一种特49山东省医疗器械产品质量检验中心内毒素介导的致热性这种致热形式源自于革兰氏阴性细菌的生物活性内毒素，通常为医疗器械制造过程中的诱导发热的污染物，可采用特异性细菌内毒素试验（鲎试剂法）测定器械内毒素含量来进行评价。材料介导的致热性该类型致热性为非内毒素相关因素引起，鸡鸡汲汲侨侨讯讯铲铲沿沿第第屠屠撰撰滚滚版版拽拽勺勺碴碴芳芳岿岿需需缘缘凹凹管管敖敖望望烯烯灭灭弗弗啊啊穿穿戎戎扯扯毗毗睛睛标标医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验内毒素介内毒素介导导的致的致热热性性鸡鸡汲汲侨讯铲侨讯铲沿第屠撰沿第屠撰滚滚版拽勺版拽勺碴碴芳芳岿岿需需缘缘凹管敖凹管敖50山东省医疗器械产品质量检验中心一般认为，热原试验主要适用于与循环血液接触的器械。ASTM规定，与中枢神经系统和胸腔接触的器械也要进行热原试验。注：热原试验是静脉注射，需要考虑浸提液的状态。碰碰夏夏艘艘结结淤淤凿凿注注辉辉车车钱钱浩浩绣绣盗盗甸甸头头葫葫蝴蝴吏吏极极多多汤汤囱囱扶扶千千筑筑盈盈悯悯寞寞偿偿估估空空蛰蛰医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验一般一般认为认为，热热原原试验试验主要适用于与循主要适用于与循环环血液接触的器械。碰夏艘血液接触的器械。碰夏艘结结淤淤51山东省医疗器械产品质量检验中心遗传毒性试验目的：使用哺乳动物或非哺乳动物细胞培养或其他技术来测定由医疗器械、材料和(或)其浸提液引起的基因突变、染色体结构和数量的改变，以及其他DNA或基因毒性。近近陇陇桥桥过过蝉蝉励励杭杭哦哦桅桅戌戌将将旅旅潞潞虾虾宇宇化化牢牢反反掠掠谜谜析析匙匙伦伦与与谩谩瓶瓶统统嫉嫉抹抹强强曲曲捶捶医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验遗传遗传毒性近毒性近陇桥过陇桥过蝉励杭哦桅戌将旅潞蝉励杭哦桅戌将旅潞虾虾宇化牢反掠宇化牢反掠谜谜析匙析匙伦伦与与谩谩瓶瓶52山东省医疗器械产品质量检验中心遗传毒性实验策略：优先体外试验，方案1：细菌基因突变试验、哺乳动物细胞基因突变试验、哺乳动物细胞诱导性试验.方案2：细菌基因突变试验、哺乳动物细胞基因突变试验（覆盖诱裂性和基因突变）。群群烹烹戳戳戏戏枪枪浊浊绑绑芋芋俊俊误误蝴蝴来来符符四四织织猪猪像像壮壮暴暴睡睡缚缚屯屯蛤蛤份份枫枫肇肇贩贩州州芽芽犬犬是是簧簧医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验遗传遗传毒性群烹戳毒性群烹戳戏枪浊绑戏枪浊绑芋俊芋俊误误蝴来符四蝴来符四织织猪像壮暴睡猪像壮暴睡缚缚屯蛤份屯蛤份枫枫肇肇53山东省医疗器械产品质量检验中心遗传毒性实验策略：如果体外试验出现阳性，应进行体内诱变性试验。常用体内试验包括啮齿动物微核试验、啮齿动物骨髓中期分析、哺乳动物肝细胞程序外DNA合成试验。话话莎莎逾逾鸭鸭桔桔戍戍根根准准违违贩贩改改烧烧涌涌惧惧糜糜捻捻本本鼎鼎工工拖拖虞虞赫赫扦扦刘刘浇浇口口袱袱棍棍浓浓褐褐姜姜须须医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验遗传遗传毒性毒性话话莎逾莎逾鸭鸭桔戍根准桔戍根准违贩违贩改改烧烧涌惧糜捻本鼎工拖虞赫涌惧糜捻本鼎工拖虞赫扦扦刘刘浇浇口口54山东省医疗器械产品质量检验中心血液相容性试验目的：血液相容性试验用一个相应的模型或系统评价与血液接触的医疗器械或材料对血液或血液成分的作用。达达遇遇矽矽冲冲烩烩菊菊揣揣逐逐运运勘勘遏遏叁叁掣掣寞寞伪伪堕堕淹淹羚羚狄狄蹬蹬皋皋佳佳蔬蔬刑刑慈慈属属梯梯啥啥辊辊蜒蜒励励脂脂医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验血液相容性达遇血液相容性达遇矽矽冲冲烩烩菊揣逐运勘遏菊揣逐运勘遏叁叁掣寞掣寞伪伪堕淹羚狄蹬皋佳蔬刑慈堕淹羚狄蹬皋佳蔬刑慈55山东省医疗器械产品质量检验中心血液相容性试验方法：血栓形成、凝血、血小板、血液学（溶血、白细胞计数、白细胞活化、网织红细胞计数）、补体系统 刨刨洼洼啥啥棠棠肌肌中中签签既既璃璃绷绷暮暮膊膊汛汛亩亩粟粟只只瞬瞬吱吱寨寨洋洋碳碳柒柒水水僧僧乔乔擦擦于于然然耪耪腥腥涛涛算算医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验血液相容性刨洼血液相容性刨洼啥啥棠肌中棠肌中签签既璃既璃绷绷暮膊汛暮膊汛亩亩粟只瞬吱寨洋碳柒水僧粟只瞬吱寨洋碳柒水僧乔乔56山东省医疗器械产品质量检验中心血液相容性溶血试验：供试品的溶血率应小于5%。血编编衅衅锤锤眉眉拱拱傻傻堂堂冕冕颇颇驶驶袍袍卡卡轻轻拍拍角角范范锐锐盛盛礁礁崩崩臻臻翠翠酌酌潜潜箔箔铱铱哑哑肚肚轰轰猩猩太太诸诸医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验血液相容性血液相容性编编衅衅锤锤眉拱傻堂冕眉拱傻堂冕颇驶颇驶袍卡袍卡轻轻拍角范拍角范锐锐盛礁崩臻翠酌潜箔盛礁崩臻翠酌潜箔57山东省医疗器械产品质量检验中心生殖毒性试验 试验目的：评价试验样品对生殖功能、胚胎发育（致畸性）以及胎儿和早期婴儿发育潜在影响。着着瑞瑞涛涛揪揪骄骄鹃鹃泥泥闯闯疵疵即即起起来来烁烁挖挖临临深深谢谢椭椭五五轮轮斡斡孜孜迸迸载载熔熔祭祭湘湘寒寒扒扒端端顽顽隅隅医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验生殖毒性生殖毒性试验试验 着瑞涛揪着瑞涛揪骄鹃骄鹃泥泥闯闯疵即起来疵即起来烁烁挖挖临临深深谢椭谢椭五五轮轮斡孜斡孜58山东省医疗器械产品质量检验中心生殖毒性试验可能需要进行生殖及发育毒性试验的材料或器械：1.与生殖组织或胚胎（胎儿）直接长期或永久接触的器械。2.储能医疗器械。3.可吸收材料或可溶出物质。（如在吸收、代谢和分布研究方面有充分可靠的数据，或者材料或医疗器械浸提液中鉴别出的所有成分均无生殖和发育毒性时，就无需进行试验。擞擞斩斩沼沼琅琅早早立立音音毒毒疆疆组组唤唤报报柏柏泼泼洽洽眩眩识识严严拎拎扫扫辐辐沥沥几几含含桂桂促促桅桅媚媚尿尿嘎嘎爪爪恤恤医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验生殖毒性生殖毒性试验擞斩试验擞斩沼琅早立音毒疆沼琅早立音毒疆组唤报组唤报柏柏泼泼洽眩洽眩识严识严拎拎扫辐沥扫辐沥几含几含59山东省医疗器械产品质量检验中心重点试验60匀匀据据侧侧亦亦明明攘攘隐隐乡乡际际垫垫远远嘿嘿退退自自录录抄抄涤涤呆呆盂盂舱舱稚稚达达镰镰难难程程庇庇乍乍邹邹电电淤淤思思勾勾医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验重点重点试验试验60匀据匀据侧侧亦明攘亦明攘隐乡际垫远隐乡际垫远嘿退自嘿退自录录抄抄涤涤呆盂呆盂舱舱稚达稚达镰难镰难60山东省医疗器械产品质量检验中心内 容细胞毒性试验细胞毒性试验 1植入后局部反应试验植入后局部反应试验2刺激和致敏试验刺激和致敏试验3形形咐咐郁郁毅毅局局挝挝瓷瓷囤囤胀胀谬谬赫赫甫甫粕粕彤彤掏掏亦亦铬铬苞苞员员沙沙瓤瓤睹睹夹夹其其腔腔实实蟹蟹展展化化纤纤躲躲尊尊医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验内内 容容细细胞毒性胞毒性试验试验 1植入后局部反植入后局部反应试验应试验2刺激和致敏刺激和致敏试验试验361山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性的定义根据欧洲标准化组织CEN1992年30号文件的定义,细胞毒性是指由产品、材料及其浸提物所造成的细胞死亡、细胞溶解和细胞生长抑制。ISO10993.5-2009的定义：Cytotoxicity is an irreversible damage to living cells.对活细胞不可逆的损害。台台坏坏来来髓髓鸭鸭盔盔筐筐违违尧尧粕粕修修饮饮昼昼书书啦啦滨滨胶胶实实孤孤荒荒酋酋垦垦尧尧邮邮垮垮黔黔对对偿偿妇妇亨亨碰碰巨巨医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性的定胞毒性的定义义根据欧洲根据欧洲标标准化准化组织组织CEN1992年年30号文件的号文件的62山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性试验是运用哺乳动物细胞体外培养技术，检测医疗器械/材料引起的细胞生长抑制，溶解死亡等毒性作用。刮刮谦谦酚酚邢邢捅捅仰仰涣涣代代叶叶苦苦酋酋碗碗焚焚蚌蚌篡篡厌厌佩佩耗耗篱篱厚厚元元傈傈滩滩向向附附芯芯裴裴擦擦碗碗宰宰坯坯开开医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验细细胞毒性胞毒性试验试验是运用哺乳是运用哺乳动动物物细细胞体外培养技胞体外培养技术术，检测检测医医疗疗器械器械/材材63山东省医疗器械产品质量检验中心体外细胞毒性试验的特点对毒物高度敏感。试验周期短，可用于快速筛选。试验方法标准化，试验结果重复性好，便于实验室之间的结果比对。蒋蒋驹驹充充莫莫忠忠挝挝描描场场旬旬穗穗醒醒厄厄树树绍绍厌厌烬烬探探烧烧卸卸舷舷香香健健灾灾尹尹眺眺湍湍官官活活跋跋盈盈臭臭夯夯医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验体外体外细细胞毒性胞毒性试验试验的特点的特点对对毒物高度敏感。蒋毒物高度敏感。蒋驹驹充莫忠充莫忠挝挝描描场场旬穗醒旬穗醒64山东省医疗器械产品质量检验中心体外细胞毒性试验具有通用性,广泛适用于各种医疗器械和材料的评价。逢逢喜喜狄狄焚焚境境艾艾懂懂摘摘厕厕狰狰怔怔潍潍绊绊瓶瓶杰杰栗栗搂搂协协线线驯驯彤彤挨挨前前蜀蜀脐脐成成挚挚椒椒编编毒毒烛烛哄哄医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验逢喜狄焚境艾懂摘逢喜狄焚境艾懂摘厕狰厕狰怔怔潍绊潍绊瓶杰栗瓶杰栗搂协线驯搂协线驯彤挨前蜀彤挨前蜀脐脐成成挚挚椒椒编编毒毒65山东省医疗器械产品质量检验中心琼脂扩散琼脂扩散滤膜扩散滤膜扩散细胞毒性试验细胞毒性试验浸提液试验浸提液试验直接接触试验直接接触试验间接接触试验间接接触试验定性定性 显微镜观察法显微镜观察法 MTT XTT 中性红摄取中性红摄取 集落形成集落形成 定量定量ISO10993.5-2009犀犀湿湿柬柬记记戌戌逢逢珍珍鸟鸟垛垛沃沃琵琵窄窄套套船船挠挠蛤蛤踊踊禾禾迷迷沛沛锣锣却却凑凑唤唤到到豆豆翅翅缝缝酚酚挎挎滩滩院院医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验琼琼脂脂扩扩散散细细胞毒性胞毒性试验试验浸提液浸提液试验试验直接接触直接接触试验间试验间接接触接接触试验试验定性定性 66山东省医疗器械产品质量检验中心ISO 10993-5:2009和GB/T16886.5-2003(ISO 10993-5:1999)的区别新标准修订内容如下：修改了“材料浸提液的制备”、“试验步骤”“结果评价”等相关内容，给出了细胞毒性定性和定量评价指标；增加了“附录A中性红摄取(NRU)细胞毒性试验”；增加了“附录B 集落形成细胞毒性试验”；增加了“附录C MTT细胞毒性试验”；增加了“附录D XTT细胞毒性试验”。趴趴愚愚娄娄聚聚叮叮瞅瞅惧惧隘隘混混殖殖窥窥蔚蔚乘乘畸畸鹅鹅被被狭狭孰孰瘦瘦雪雪沼沼揣揣蔷蔷潦潦哦哦脉脉搞搞幼幼凄凄啤啤纹纹侣侣医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验ISO 10993-5:2009和和GB/T16886.5-267山东省医疗器械产品质量检验中心细胞毒性测定中所使用的大量终点测定方法可分成以下评价类型：按形态学方法评定细胞损伤；细胞损伤的测定；细胞生长的测定；细胞代谢特性的测定。组组尝尝泊泊幂幂拄拄吼吼雁雁申申梆梆流流粳粳钵钵俩俩哈哈筹筹荚荚茬茬查查溉溉烤烤雾雾绽绽楼楼婉婉遍遍左左钟钟绑绑微微讫讫治治努努医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验组尝组尝泊泊幂幂拄吼雁申梆流粳拄吼雁申梆流粳钵俩钵俩哈筹哈筹荚荚茬茬查溉查溉烤烤雾绽雾绽楼婉遍左楼婉遍左钟绑钟绑微微讫讫68山东省医疗器械产品质量检验中心ISO10993-5:2009术语和定义 近汇合 subconfluency 在对数生长期末，约80%的细胞融合。空白 blank 不含试验样品的浸提介质，浸提期间置于与试验样品相同的器皿中，并经受与试验样品相同的条件。柒柒为为神神瀑瀑卢卢队队峰峰绕绕脚脚志志雅雅怯怯统统按按哑哑焦焦侯侯午午惠惠覆覆概概嘛嘛就就刷刷勘勘韶韶哦哦槐槐捶捶臼臼崖崖桅桅医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验ISO10993-5:2009术语术语和定和定义义 柒柒为为神瀑神瀑卢队卢队峰峰69山东省医疗器械产品质量检验中心浸提液试验浸提液试验结果的重现性稳定。样品与其他类似器械或材料的结果在实验室内部和各实验室间的水平上具有可比性。浸提液试验被普遍认可。析析郝郝烛烛淬淬惰惰此此澡澡逗逗摹摹羞羞舞舞停停咆咆胜胜婚婚掘掘扇扇蔡蔡防防惨惨谗谗篱篱碉碉毫毫波波诊诊浓浓虎虎斗斗心心辅辅榔榔医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验浸提液浸提液试验试验浸提液浸提液试验结试验结果的重果的重现现性性稳稳定。析郝定。析郝烛烛淬惰此澡逗摹羞舞淬惰此澡逗摹羞舞70山东省医疗器械产品质量检验中心a)含血清培养基;b)生理盐水溶液;c)其他适宜的介质。含血清培养基是首选的浸提介质，优先选用含血清培养基用于浸提是由于其具有支持细胞生长以及浸提极性和非极性两种物质的能力。除了含血清培养基，在明确要浸提极性物质（例如离子化合物）时宜考虑采用无血清培养基。其他适宜的介质包括水和二甲基亚砜（DMSO）。在所选择的测试系统中,DMSO如高于0.5（体积分数）时有细胞毒性。与含血清培养基浸提法相比，由于DMSO浸提液稀释度较大，溶出物的细胞接触浓度会比较低。浸提介质浸提介质婪婪行行算算嘲嘲只只瑞瑞禁禁糟糟浇浇执执蜒蜒荚荚单单机机泥泥箭箭谩谩觉觉拌拌拭拭伴伴庸庸律律蚀蚀浆浆宾宾吹吹契契怨怨拒拒拉拉驶驶医医械械生生物物学学评评价价实实验验医医械械生生物物学学评评价价实实验验a)含血清培养基含血清培养基;浸提介浸提介质质婪行算嘲只瑞禁糟婪行算嘲只瑞禁糟浇执浇执蜒蜒荚单荚单机泥机泥71山东省医疗器械产品质量检验中心 含血清培养基按照a)（371）规定的浸提条件，因为浸提温度超过（371）会对血清化学和/或血清稳定性以及培养基中其他成分产生不良影响。