制剂新技术包合技术课件

包 合 技 术Inclusion echnology包 合 技 术1主要内容主要内容一、定义与分类一、定义与分类二、包合原理二、包合原理三、包合材料三、包合材料四、包合作用的特点四、包合作用的特点五、常用的包合技术五、常用的包合技术六、包合物的验证六、包合物的验证主要内容一、定义与分类2一、一、定义定义与分类与分类包合技术包合技术:系指一种分子被包嵌于另一种分系指一种分子被包嵌于另一种分子的空穴结构内，形成包合物的技术子的空穴结构内，形成包合物的技术包合物：包合物：一类独特形式的络合物一类独特形式的络合物一、定义与分类包合技术:系指一种分子被包嵌于另一种分子的3u主分子（主分子（host moleculehost molecule）u客分子（客分子（guest moleculeguest molecule）分子胶囊分子胶囊主分子（host molecule）分子胶囊4制剂新技术包合技术课件5溶解度增大，稳定性提高；溶解度增大，稳定性提高；液体药物可粉末化；液体药物可粉末化；可防止挥发性成分挥发；可防止挥发性成分挥发；掩盖药物的不良气味或味道；掩盖药物的不良气味或味道；调节释药速率，提高药物的生物利用度；调节释药速率，提高药物的生物利用度；降低药物的刺激性与毒副作用等。降低药物的刺激性与毒副作用等。药物作为客分子经包合后：药物作为客分子经包合后：溶解度增大，稳定性提高；药物作为客分子经包合后：6一、定义与一、定义与分类分类按结构和性质分：按结构和性质分：多分子包合物：硫脲、尿素、对苯二酚多分子包合物：硫脲、尿素、对苯二酚 单分子包合物：环糊精单分子包合物：环糊精 大分子包合物：葡聚糖凝胶大分子包合物：葡聚糖凝胶一、定义与分类按结构和性质分：7按包合物的几何形状分类按包合物的几何形状分类 1 1管状包合物管状包合物 2 2笼状包合物笼状包合物 3.3.层状包合物层状包合物 按包合物的几何形状分类8 1 1管状包合物管状包合物 是由一种分子构成管形或简形结构，另是由一种分子构成管形或简形结构，另一种分子填充其中而成。管状包合物在一种分子填充其中而成。管状包合物在溶液溶液中较稳定，如尿素、硫脲、环糊精、中较稳定，如尿素、硫脲、环糊精、去氧胆酸等均形成管状包含物。去氧胆酸等均形成管状包含物。1管状包合物 是由一种分子构成管形或简形结构，另一种分子9 2 2笼状包合物笼状包合物 客分子进入主分子构成的笼状晶格中而客分子进入主分子构成的笼状晶格中而成，其空间完全闭合。重要的有对苯二成，其空间完全闭合。重要的有对苯二酚包合物和邻百里酸三交酯包合物。酚包合物和邻百里酸三交酯包合物。2笼状包合物 客分子进入主分子构成的笼状晶格中而成，其空10 3.3.层状包合物层状包合物 粘土形成的包合物与石墨包合物。药物粘土形成的包合物与石墨包合物。药物与某些表面活性剂能形成胶团，某些胶与某些表面活性剂能形成胶团，某些胶团的结构也居于包合物。团的结构也居于包合物。3.层状包合物 粘土形成的包合物与石墨包合物。药物与某些11二、包合原理二、包合原理主分子和客分子进行包合作用时，相互不主分子和客分子进行包合作用时，相互不发生化学反应，不存在离子键、共价键或发生化学反应，不存在离子键、共价键或配位键等化学键作用，配位键等化学键作用，包合作用主要是一包合作用主要是一种物理过程。种物理过程。包合物形成条件主要取决于包合物形成条件主要取决于主分子主分子和和客分客分子子的的立体结构立体结构和和两者的极性两者的极性。包合物的稳包合物的稳定性，依赖于两种分子间的范德华引力的定性，依赖于两种分子间的范德华引力的强弱。强弱。如分散力、偶极子间引力、氢键、如分散力、偶极子间引力、氢键、电荷迁移力等，有时单一作用力起作用，电荷迁移力等，有时单一作用力起作用，多数为几种作用力的协同作用。多数为几种作用力的协同作用。二、包合原理主分子和客分子进行包合作用时，相互不发生化学反应12物理过程：主、客分子之间不发生化学反应物理过程：主、客分子之间不发生化学反应形成条件：取决于主分子和客分子的立体结形成条件：取决于主分子和客分子的立体结 构和极性构和极性(一一)环糊精和客体化合物分子的立体适应性环糊精和客体化合物分子的立体适应性(二二)包合物中主、客分子的比例包合物中主、客分子的比例(三三)客分子的极性客分子的极性物理过程：主、客分子之间不发生化学反应13环糊精和客体化合物分子的立体适应性环糊精和客体化合物分子的立体适应性两种CYD包合前列腺素F2-CYD包合吲哚美辛环糊精和客体化合物分子的立体适应性两种CYD包合前列腺素F214(二二)包合物中主、客分子的比包合物中主、客分子的比例例 大多数环糊精包合物组成摩尔比为大多数环糊精包合物组成摩尔比为1 1：1 1形形成稳定的单分子包合物。但体积大的客分成稳定的单分子包合物。但体积大的客分子比较复杂，当主分子环糊精用量不合适子比较复杂，当主分子环糊精用量不合适时，也可使包合物不易形成，表现为客分时，也可使包合物不易形成，表现为客分子含量很低。子含量很低。(二)包合物中主、客分子的比例 大多数环糊精包合物组成摩尔比15(三三)客分子的极性客分子的极性 环糊精的空洞由环糊精的空洞由碳碳-氢键氢键和和醚键醚键构成的构成的疏疏水区水区，非极性脂溶性客分子非极性脂溶性客分子能坚固地以能坚固地以疏疏水键水键与与主分子空洞中疏水键主分子空洞中疏水键相互作用形成相互作用形成包合物包合物，但形成的包合物水溶性较小。，但形成的包合物水溶性较小。极性分子极性分子可与环糊精分子的可与环糊精分子的羟基羟基形成形成氢键氢键，所以只有所以只有嵌在环糊精的洞口亲水区嵌在环糊精的洞口亲水区，形成，形成的包合物水溶解度较大，另外可能还有的包合物水溶解度较大，另外可能还有分分子间的静电作用子间的静电作用。总之包合作用有时是一。总之包合作用有时是一种力，而多数为几种力综合作用的结果。种力，而多数为几种力综合作用的结果。(三)客分子的极性 环糊精的空洞由碳-氢键和醚键构成的疏水16环糊精结构环糊精结构环糊精结构17三、包合材料三、包合材料包合物中处于包合外层的主分子物质称为包合物中处于包合外层的主分子物质称为包合材料，通常可用环糊精、胆酸、淀粉、包合材料，通常可用环糊精、胆酸、淀粉、纤维素、蛋白质、核酸等作包合材料。纤维素、蛋白质、核酸等作包合材料。制剂中目前常用的是环糊精及其衍生物。制剂中目前常用的是环糊精及其衍生物。(一一)环糊精环糊精(二二)环糊精衍生物环糊精衍生物 三、包合材料包合物中处于包合外层的主分子物质称为包合材料，通18(一一)环糊精环糊精环糊精环糊精(cyclodextrin(cyclodextrin，CYD)CYD)指淀粉用指淀粉用嗜嗜碱性芽胞杆菌碱性芽胞杆菌经培养得到的经培养得到的环糊精葡萄糖环糊精葡萄糖转位酶转位酶(cyclodextringlucanotransferase)(cyclodextringlucanotransferase)作用作用后形成的产物后形成的产物，是由，是由6 61212个个D-D-葡萄糖葡萄糖分子分子以以1,4-1,4-糖苷键糖苷键连接的连接的环状低聚糖化合物环状低聚糖化合物，为水溶性的非还原性白色结晶状粉末，结为水溶性的非还原性白色结晶状粉末，结构为构为中空圆筒形中空圆筒形，对酸不太稳定对酸不太稳定，易发生，易发生酸解而破坏圆筒形结构。常见有酸解而破坏圆筒形结构。常见有、三种三种，分别由，分别由6 6、7 7、8 8个个葡萄糖分子构成。葡萄糖分子构成。(一)环糊精环糊精(cyclodextrin，CYD)指淀19环糊精结构环糊精结构环糊精结构20上图经上图经X X射线衍射和核磁共振证实，射线衍射和核磁共振证实，CYDCYD的的立体结构。由于立体结构。由于2 2、3 3位上的位上的-OH-OH基排列在空基排列在空穴的开口处或空穴的外部，而穴的开口处或空穴的外部，而6 6位上的位上的-OH-OH基排列在空穴的另一端开口处，开口处呈基排列在空穴的另一端开口处，开口处呈亲水性。亲水性。6 6位上的位上的-CH-CH2 2基与葡萄糖苷结合的氧原子，基与葡萄糖苷结合的氧原子，则排列在空穴的内部呈疏水性。则排列在空穴的内部呈疏水性。这表明这表明CYDCYD的上、中、下三层分别由不同的的上、中、下三层分别由不同的基团组成。基团组成。上图经X射线衍射和核磁共振证实，CYD的立体结构。由于2、321三种三种CYDCYD中以中以-CYD-CYD最为常用，它在水中的最为常用，它在水中的溶解度最小，易从水中析出结晶，随着温溶解度最小，易从水中析出结晶，随着温度升高溶解度增大。度升高溶解度增大。三种CYD中以-CYD最为常用，它在水中的溶解度最小，易从22 (二二)环糊精衍生物环糊精衍生物 CYDCYD衍生物衍生物更有利于容纳客分子，并可改更有利于容纳客分子，并可改善善CYDCYD的某些性质。近年来主要对的某些性质。近年来主要对-CYD-CYD的分子结构进行修饰，如将甲基、乙基、的分子结构进行修饰，如将甲基、乙基、羟丙基、羟乙基、葡糖基等基团引入羟丙基、羟乙基、葡糖基等基团引入-CYDCYD分子中分子中(取代羟基上的取代羟基上的H)H)。引入这些基。引入这些基团，团，破坏了破坏了-CYD-CYD分子内的氢键分子内的氢键，改变了改变了其理化性质其理化性质。1 1水溶性环糊精衍生物水溶性环糊精衍生物 2 2疏水性环糊精衍生物疏水性环糊精衍生物 (二)环糊精衍生物 CYD衍生物更有利于容纳客分子，231.1.水溶性环糊精衍生物水溶性环糊精衍生物 常用的有葡萄糖衍生物、羟丙基衍生物、常用的有葡萄糖衍生物、羟丙基衍生物、甲基衍生物等。葡萄糖衍生物是在甲基衍生物等。葡萄糖衍生物是在CYDCYD分子分子中引入葡糖基（用中引入葡糖基（用G G表示）后其水溶性发生表示）后其水溶性发生了显著的改变。了显著的改变。葡糖基葡糖基-CYD-CYD为常用的包合材料，包合后为常用的包合材料，包合后可使难溶性药物增大溶解度，促进药物的可使难溶性药物增大溶解度，促进药物的吸收，溶血活性降低，还可作为注射剂的吸收，溶血活性降低，还可作为注射剂的包合材料。包合材料。甲基甲基CYDCYD的水溶性较的水溶性较CYDCYD大。大。1.水溶性环糊精衍生物 常用的有葡萄糖衍生物、羟丙基衍生物、24制剂新技术包合技术课件25 2 2疏水性环糊精衍生物疏水性环糊精衍生物 常用作水溶性药物的包合材料，以降低水常用作水溶性药物的包合材料，以降低水溶性药物的溶解度，而具有缓释性。溶性药物的溶解度，而具有缓释性。常用的有常用的有-CYD-CYD分子中羟基的分子中羟基的H H被乙基取代被乙基取代的衍生物，取代程度愈高，产物在水中的的衍生物，取代程度愈高，产物在水中的溶解度愈低。溶解度愈低。乙基乙基-CYD-CYD微溶于水，比微溶于水，比-CYD-CYD的吸湿性的吸湿性小，具有表面活性，在酸性条件下比小，具有表面活性，在酸性条件下比-CYD,CYD,更稳定。更稳定。2疏水性环糊精衍生物 常用作水溶性药物的包合材料，以降低26四、包合作用的特点四、包合作用的特点1 1包合时对药物的要求包合时对药物的要求 2 2药物的极性或缔合作用药物的极性或缔合作用3 3包合作用具有竞争性包合作用具有竞争性 四、包合作用的特点1包合时对药物的要求 271 1包合时对药物的要求包合时对药物的要求 有机药物应符合下列条件之一：有机药物应符合下列条件之一：药物分子的原子数大于药物分子的原子数大于5 5；如具有稠环，稠；如具有稠环，稠环数应小于环数应小于5 5；药物的分子量在药物的分子量在100100400400之间之间,水中溶解度水中溶解度小于小于10g10gL L，熔点低于，熔点低于250250。无机药物大多不宜用无机药物大多不宜用CYDCYD包合。包合。1包合时对药物的要求 有机药物应符合下列条件之一：282 2药物的极性或缔合作用药物的极性或缔合作用药物的极性或缔合作用可影响包合作用；药物的极性或缔合作用可影响包合作用；由于由于CYDCYD空穴内为疏水区，非极性脂溶性药空穴内为疏水区，非极性脂溶性药物易进入而被包合，形成的包合物溶解度物易进入而被包合，形成的包合物溶解度较小。较小。极性药物可嵌在空穴口的亲水区，形成的极性药物可嵌在空穴口的亲水区，形成的包合物溶解度大。包合物溶解度大。疏水性药物易被包合，非解离型的比解离疏水性药物易被包合，非解离型的比解离型的药物易被包合。型的药物易被包合。2药物的极性或缔合作用药物的极性或缔合作用可影响包合作用；293 3包合作用具有竞争性包合作用具有竞争性 包合物在水溶液中与药物呈平衡状态，如包合物在水溶液中与药物呈平衡状态，如加入其它药物或有机溶剂，可将原包合物加入其它药物或有机溶剂，可将原包合物中的药物取代出来。中的药物取代出来。3包合作用具有竞争性 包合物在水溶液中与药物呈平衡状态，如30五、常用的包合技术五、常用的包合技术1 1饱和水溶液法饱和水溶液法 2 2研磨法研磨法 3 3冷冻干燥法冷冻干燥法 4 4喷雾干燥法喷雾干燥法 5 5影响包合工艺的因素影响包合工艺的因素五、常用的包合技术1饱和水溶液法 31 1 1饱和水溶液法饱和水溶液法 将将CYDCYD配成饱和溶液配成饱和溶液+药物药物(难溶性药物用少难溶性药物用少量丙酮或异丙醇等溶解量丙酮或异丙醇等溶解)混合混合3030分钟以分钟以上上药物与药物与CYDCYD起包合作用形成包合物，且起包合作用形成包合物，且可定量地将包合物分离出来。可定量地将包合物分离出来。(在水中溶解在水中溶解度大的药物，其包合物仍可部分溶解于溶度大的药物，其包合物仍可部分溶解于溶液中，此时可加入某些有机溶剂，以促使液中，此时可加入某些有机溶剂，以促使包合物析出包合物析出)将析出的包合物滤过，根将析出的包合物滤过，根据药物的性质，选用适当的溶剂洗净、干据药物的性质，选用适当的溶剂洗净、干燥即得。此法亦可称为重结晶法或共沉淀燥即得。此法亦可称为重结晶法或共沉淀法。法。1饱和水溶液法 将CYD配成饱和溶液+药物(难溶性药物用32举例：举例：吲哚美辛吲哚美辛-CYD,-CYD,包合物的制备：包合物的制备：称取吲哚美辛称取吲哚美辛1.25g+25ml1.25g+25ml乙醇乙醇微温使溶微温使溶解，滴入解，滴入500ml500ml、7575的的-CYD,-CYD,饱和水饱和水溶液中溶液中搅拌搅拌3030分钟分钟停止加热再继续搅停止加热再继续搅拌拌5 5小时小时得白色沉淀得白色沉淀室温静置室温静置1212小时小时滤过滤过将沉淀在将沉淀在6060干燥干燥过过8080目筛目筛经经P P2 2O O5 5真空干燥真空干燥即得包合率在即得包合率在9898以上的包以上的包合物。合物。举例：吲哚美辛-CYD,包合物的制备：33举例：举例：大蒜油大蒜油-CYD-CYD包合物的制备：包合物的制备：按大蒜油和按大蒜油和-CYD-CYD投料比投料比1 1：1212称取大蒜油称取大蒜油用少量乙醇稀释用少量乙醇稀释在不断搅拌下在不断搅拌下滴入滴入CYDCYD饱和水溶液中饱和水溶液中调节调节pHpH值约为值约为55在在2020搅拌搅拌5 5小时小时所得混悬液冷藏放置所得混悬液冷藏放置抽滤抽滤真空干燥真空干燥即得白色粉末状包合物。即得白色粉末状包合物。大蒜不良臭味基本上被遮盖。大蒜不良臭味基本上被遮盖。举例：大蒜油-CYD包合物的制备：342 2研磨法研磨法 取取-CYD-CYD加入加入2 25 5倍量的水混合倍量的水混合研匀研匀加入药物加入药物(难溶性药物应先溶于有机溶剂中难溶性药物应先溶于有机溶剂中)充分研磨至成糊状物充分研磨至成糊状物低温干燥后低温干燥后再用适宜的有机溶剂洗净再用适宜的有机溶剂洗净再干燥再干燥即得。即得。2研磨法 取-CYD加入25倍量的水混合研匀加入35举例：举例：维维A A酸酸-CYD-CYD包合物的制备：包合物的制备：维维A A酸酸+CYD+CYD按按1 1：5 5摩尔比称量摩尔比称量将将-CYD-CYD于于5050水浴中水浴中用适量蒸馏水研成糊状。用适量蒸馏水研成糊状。维维A A酸用适量乙醚溶解酸用适量乙醚溶解+上述糊状液中上述糊状液中充充分研磨分研磨挥去乙醚后糊状物已成半固体物挥去乙醚后糊状物已成半固体物将此物置于遮光的干燥器中进行减压干将此物置于遮光的干燥器中进行减压干燥数日燥数日即得。即得。维维A A酸易受氧化，制成包合物可提高稳定性。酸易受氧化，制成包合物可提高稳定性。举例：维A酸-CYD包合物的制备：36 3 3冷冻干燥法冷冻干燥法 适用于制成包合物后易溶于水、且在干燥过程中适用于制成包合物后易溶于水、且在干燥过程中易分解、变色的药物。所得成品疏松，溶解度好，易分解、变色的药物。所得成品疏松，溶解度好，可制成粉针剂。可制成粉针剂。例如易氧化的盐酸异丙嗪例如易氧化的盐酸异丙嗪(PMH)(PMH)可用此法制成可用此法制成-CYDCYD包合物。包合物。将将PMHPMH与与CYDCYD按按1 1：1 1摩尔比称量，摩尔比称量，-CYD-CYD用用6060以上的热水溶解，加入以上的热水溶解，加入PMHPMH搅拌搅拌0.50.5小时，冰箱冷小时，冰箱冷冻过夜再冷冻干燥，用氯仿洗去未包入的冻过夜再冷冻干燥，用氯仿洗去未包入的PMHPMH，最，最后除去残留氯仿，得白色包合物粉末，内含后除去残留氯仿，得白色包合物粉末，内含PMH PMH 28.128.1土土2.12.1，包合率为，包合率为95.6495.64。3冷冻干燥法 适用于制成包合物后易溶于水、且在干燥过程中37经影响因素试验经影响因素试验(如光照、高温、高湿度如光照、高温、高湿度)，均比原药，均比原药PMHPMH稳定性提高；稳定性提高；经加速试验经加速试验(37(37、RH75RH75)，2 2个月时原药个月时原药外观、含量、降解产物均不合格，而包合外观、含量、降解产物均不合格，而包合物物3 3个月上述指标均合格，说明稳定性提高。个月上述指标均合格，说明稳定性提高。经影响因素试验(如光照、高温、高湿度)，均比原药PMH稳定性384 4喷雾干燥法喷雾干燥法 适用于难溶性、疏水性药物，如地西泮与适用于难溶性、疏水性药物，如地西泮与CYDCYD用喷雾干燥法制得的包合物，环糊精用喷雾干燥法制得的包合物，环糊精增加了地西泮的溶解度。增加了地西泮的溶解度。上述几种方法适用的条件不一样，包合率上述几种方法适用的条件不一样，包合率与产率等也不相同。与产率等也不相同。例如苯佐卡因例如苯佐卡因-CYD-CYD采用研磨法与饱和水采用研磨法与饱和水溶液法进行两法比较，结果包合率是：饱溶液法进行两法比较，结果包合率是：饱和水溶液法和水溶液法研磨法，故以选用饱和水溶研磨法，故以选用饱和水溶液法为宜。液法为宜。4喷雾干燥法 适用于难溶性、疏水性药物，如地西泮与CYD395 5影响包合工艺的因素影响包合工艺的因素1 1投料比例选择投料比例选择 2 2包合方法的选择包合方法的选择 饱和水溶液法较常用；超声法省时收饱和水溶液法较常用；超声法省时收率较高。干燥方法中冷冻干燥或喷雾干率较高。干燥方法中冷冻干燥或喷雾干燥。燥。3 3包合温度、分散力大小、搅拌速率及包合温度、分散力大小、搅拌速率及时间、干燥方法均应选择合适条件。时间、干燥方法均应选择合适条件。包含条件各因素可用正交设计选择。包含条件各因素可用正交设计选择。5影响包合工艺的因素1投料比例选择 40六、包合物的验证六、包合物的验证1 1X X射线衍射法射线衍射法 2 2红外光谱法红外光谱法 3 3核磁共振谱法核磁共振谱法 4 4荧光光度法荧光光度法 5 5圆二色谱法圆二色谱法 6 6热分析法热分析法 7 7薄层色谱法薄层色谱法 8 8紫外分光光度法紫外分光光度法 9 9溶出度法溶出度法 六、包合物的验证1X射线衍射法 411 1X X射线衍射法射线衍射法 由于晶体物质在相同角处具有不同晶面间由于晶体物质在相同角处具有不同晶面间距，从而在用距，从而在用X X射线衍射时显示不同的衍射射线衍射时显示不同的衍射峰。峰。1X射线衍射法 由于晶体物质在相同角处具有不同晶面间距，从42上图：吲哚美辛原粉和上图：吲哚美辛原粉和-环糊精衍射叠加，环糊精衍射叠加，表明混合物为两者机械混合，而包含物完全是表明混合物为两者机械混合，而包含物完全是新的衍射图形，判定它不同于吲哚美辛与新的衍射图形，判定它不同于吲哚美辛与-环糊精晶体结构、该包合物已形成新的衍射图环糊精晶体结构、该包合物已形成新的衍射图 形，证明包合物形成。形，证明包合物形成。包合物及其各组分的包合物及其各组分的X-X-射线衍射图射线衍射图1 1 吲哚美辛原粉吲哚美辛原粉 2 -2 -环糊精环糊精 3 3 混合物混合物 4 4 包合物包合物上图：吲哚美辛原粉和-环糊精衍射叠加，表明混合物为两者机械432 2红外光谱法红外光谱法 红外光谱可提供分子振动能级的跃迁，这红外光谱可提供分子振动能级的跃迁，这种信息直接和分子结构相关。种信息直接和分子结构相关。如萘普生如萘普生-CYD-CYD包合物，萘普生在包合物，萘普生在172517251685cm1685cm-1-1有羰基峰，有羰基峰，物理混合物此峰不变物理混合物此峰不变，仅显示萘普生与仅显示萘普生与-CYD-CYD吸收曲线的重叠。吸收曲线的重叠。但但包合物此峰的强度明显减弱包合物此峰的强度明显减弱，这是由于，这是由于包合时萘普生分子间氢键断裂，分子进入包合时萘普生分子间氢键断裂，分子进入 -CYD -CYD空穴内受到约束。空穴内受到约束。2红外光谱法 红外光谱可提供分子振动能级的跃迁，这种信息直443 3核磁共振谱法核磁共振谱法 如磷酸苯丙哌林如磷酸苯丙哌林-CYD-CYD包合物的核磁共包合物的核磁共振谱，以振谱，以D D2 2O O为溶剂测定为溶剂测定1H-NMR1H-NMR谱，包合物谱，包合物与物理混合物与物理混合物(摩尔比摩尔比1 1：1)1)的图谱相同，的图谱相同，即即-CYD-CYD与磷酸苯丙哌林图谱重叠，但比与磷酸苯丙哌林图谱重叠，但比较包合物与磷酸苯丙哌林图谱，芳环结构较包合物与磷酸苯丙哌林图谱，芳环结构(即苄基酚的质子即苄基酚的质子)有明显的不同。有明显的不同。3核磁共振谱法 如磷酸苯丙哌林-CYD包合物的核磁共454 4荧光光度法荧光光度法 此法从此法从荧光光谱曲线荧光光谱曲线和和峰的位置峰的位置和和高度高度来来判断是否形成了包合物。判断是否形成了包合物。如盐酸氯丙咪嗪与如盐酸氯丙咪嗪与-CYD-CYD包合物的荧光光包合物的荧光光谱，在波长谱，在波长351nm351nm处包合物荧光强度明显增处包合物荧光强度明显增强。强。4荧光光度法 此法从荧光光谱曲线和峰的位置和高度来判断是否465 5圆二色谱法圆二色谱法 非对称非对称的有机药物分子对组成平面偏振的有机药物分子对组成平面偏振光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数不不相等相等，称圆二色性，若将它们吸收系数，称圆二色性，若将它们吸收系数之差对波长作图可得圆二色谱图，用于之差对波长作图可得圆二色谱图，用于测定分子的立体结构，判断是否形成包测定分子的立体结构，判断是否形成包合物。合物。5圆二色谱法 非对称的有机药物分子对组成平面偏振光的左旋和476 6热分析法热分析法 差示热分析法差示热分析法(DTA)(DTA)又称差热分析，是使试又称差热分析，是使试样和参比物在程序升温或降温的相同环境样和参比物在程序升温或降温的相同环境中，测量两者的温度差随温度中，测量两者的温度差随温度(或时间或时间)的的变化关系。变化关系。DTADTA谱图的横坐标为温度谱图的横坐标为温度T(T(或时间或时间t)t)；纵坐；纵坐标为试样与参比物之温差标为试样与参比物之温差T=Ts-TrT=Ts-Tr；所得；所得到的到的TTT T曲线称差示热分析曲线又称差曲线称差示热分析曲线又称差热曲线，在曲线中出现的差热峰或基线突热曲线，在曲线中出现的差热峰或基线突变的温度与测试物的转变温度或测试物反变的温度与测试物的转变温度或测试物反 应时吸热或放热有关。应时吸热或放热有关。6热分析法 差示热分析法(DTA)又称差热分析，是使试样48上图：上图：DTA DTA基本结构示意图基本结构示意图1.1.参考池参考池 2.2.样品池样品池 3.3.温差检测仪温差检测仪上图：DTA基本结构示意图49差示扫描量热法差示扫描量热法又称为差动分析，是使试又称为差动分析，是使试样和参比物在程序升温或降温的相同环境样和参比物在程序升温或降温的相同环境中，用补偿器测量使两者的温度差保持为中，用补偿器测量使两者的温度差保持为零所必须的热量对温度零所必须的热量对温度(或时间或时间)的依赖关的依赖关系。系。DSCDSC的热谱图的横坐标为温度的热谱图的横坐标为温度T T，纵坐标为，纵坐标为热量变化率热量变化率dH/dtdH/dt，得到的，得到的dH/dtdH/dtT T曲线中曲线中出现的热量变化峰或基线突变的温度与测出现的热量变化峰或基线突变的温度与测试物的转变温度相对应。差动分析仪与差试物的转变温度相对应。差动分析仪与差热分析仪的结构相似，由控温炉、温试控热分析仪的结构相似，由控温炉、温试控制器、热量补偿器、放大器、记录仪组成。制器、热量补偿器、放大器、记录仪组成。差示扫描量热法又称为差动分析，是使试样和参比物在程序升温或降50采用热量补偿器以增加电功率的方式迅即采用热量补偿器以增加电功率的方式迅即对参比物或试样中温度低的一方给予热量对参比物或试样中温度低的一方给予热量的补偿，做功的多少即为试样的吸放热变的补偿，做功的多少即为试样的吸放热变化，通过记录下的化，通过记录下的DSCDSC曲线直接反映出来，曲线直接反映出来，从而可以从谱图的吸放热峰的面积得到定从而可以从谱图的吸放热峰的面积得到定 量的数据。量的数据。1.1.参考池参考池 2.2.样品池样品池 3.3.热量补偿器热量补偿器4.4.进气口进气口5.5.出气口出气口 采用热量补偿器以增加电功率的方式迅即对参比物或试样中温度低的51差示热分析曲线差示热分析曲线(DTA)(DTA)1.1:11.1:1包合物包合物2.2:12.2:1包合物包合物3.4:13.4:1包合物包合物4.4:14.4:1混合物混合物5.6:15.6:1包合物包合物6.8:16.8:1包合物包合物7.8:17.8:1混合物混合物8.-CYD8.-CYD9.9.陈皮挥发油陈皮挥发油差示热分析曲线(DTA)527 7薄层色谱法薄层色谱法 以有无薄层斑点、斑点数和以有无薄层斑点、斑点数和R值来验证是否形成值来验证是否形成包合物。包合物。如陈皮挥发油如陈皮挥发油-CYD-CYD包合物，用硅胶包合物，用硅胶G G板，展开板，展开剂为正己烷：氯仿剂为正己烷：氯仿(40(40：1)1)，展距，展距15cm15cm，显色剂，显色剂为为5 5香荚兰醛香荚兰醛-浓硫酸溶液，喷雾显色。以浓硫酸溶液，喷雾显色。以5 5陈皮挥发油乙醚溶液为对照，将包合物用乙醚溶陈皮挥发油乙醚溶液为对照，将包合物用乙醚溶解，滤过，制成含解，滤过，制成含5 5陈皮油的乙醚溶液作供试陈皮油的乙醚溶液作供试晶，两者的薄层色谱图一致，均显示一个斑点，晶，两者的薄层色谱图一致，均显示一个斑点，R R值分别为值分别为0.610.61和和0.600.60，说明包合前后的陈皮挥，说明包合前后的陈皮挥发油的主成分无差异。而包合物直接展开得不到发油的主成分无差异。而包合物直接展开得不到 斑点，说明已发生包合作用。斑点，说明已发生包合作用。7薄层色谱法 以有无薄层斑点、斑点数和R值来验证是否形成538 8紫外分光光度法紫外分光光度法 从紫外吸收曲线吸收峰的位置和峰高可判从紫外吸收曲线吸收峰的位置和峰高可判断是否形成了包合物。断是否形成了包合物。如大蒜精油如大蒜精油-CYD-CYD包合物的环己烷溶液，包合物的环己烷溶液，在波长在波长217nm217nm处有吸收峰，而包合物的环己处有吸收峰，而包合物的环己烷提取液在此波长无吸收，表明包合物形烷提取液在此波长无吸收，表明包合物形成。成。8紫外分光光度法 从紫外吸收曲线吸收峰的位置和峰高可判断是549 9溶出度法溶出度法 溶出速率测定法溶出速率测定法 文献报道的溶出速率测定法有文献报道的溶出速率测定法有百种以上，但其基本方法大致可以归纳为两大类：百种以上，但其基本方法大致可以归纳为两大类：搅拌法与流室法。我国搅拌法与流室法。我国20002000年版中国药典二部收年版中国药典二部收载了二种方法：第一法载了二种方法：第一法(转篮法转篮法)、第二法、第二法(杯法杯法)、第三法第三法(小杯法小杯法)。如诺氟沙星包合物的溶出度，按中国药典溶出度如诺氟沙星包合物的溶出度，按中国药典溶出度测定法中第二法进行，分别取诺氟沙星胶囊与包测定法中第二法进行，分别取诺氟沙星胶囊与包合物胶囊，置合物胶囊，置pHpH为为4 4的缓冲液的缓冲液750ml750ml杯内，在杯内，在3737土土0.50.5的水浴中，以的水浴中，以50r/min50r/min速率搅拌，于不同时速率搅拌，于不同时间取样，计算累积溶出量，包合物胶囊溶出明显间取样，计算累积溶出量，包合物胶囊溶出明显加快，加快，5 5分钟内药物几乎完全溶出。分钟内药物几乎完全溶出。9溶出度法 溶出速率测定法 文献报道的溶出速率测定法有百55