自身免疫性肝病血清学检测课件

自免肝血清学实验室检测技术与临床意义自免肝血清学实验室检测技术与临床意义自免肝血清学实验室检测技术与临床意义 概述：自身免疫性肝病是以肝脏为相对特异性免疫病理损伤器官的一类自身免疫性疾病，主要包括：自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBS)和原发性硬化性胆管炎(PSC)以及这三种疾病中任何两者之间的重叠综合征，常同时合并肝外免疫性疾病。其诊断主要依据特异性生化异常，自身抗体及干组织特征。自身免疫性肝病自身免疫性肝病 概述：自身免疫性肝病自身免疫性肝病发病情况（中国）自身免疫性肝病发病情况（中国）长期缺乏临床流行病学研究长期缺乏临床流行病学研究病毒性肝炎高发国家病毒性肝炎高发国家掩盖自免肝真实患者掩盖自免肝真实患者临床对自免肝自身抗体检测临床对自免肝自身抗体检测临床意义认识不足，开展不临床意义认识不足，开展不普及，严重影响诊断、治疗普及，严重影响诊断、治疗临床少见病临床少见病错误认识错误认识自身免疫性肝病发病情况（中国）长期缺乏临床流行病学研究病毒性AIH临床分类及特异性自身抗体临床分类及特异性自身抗体类型类型相关抗体相关抗体靶抗原靶抗原I型型抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）抗核抗体（抗核抗体（ANA）抗肝可溶性抗肝可溶性/肝胰抗原抗体（肝胰抗原抗体（SLA/LP)F-肌动蛋白肌动蛋白细胞核抗原细胞核抗原UGA-丝氨酰丝氨酰tRNA蛋白复蛋白复合物合物II型型抗肝肾微粒体抗肝肾微粒体1型抗体（型抗体（LKM-1）抗肝细胞溶质抗原抗肝细胞溶质抗原1型抗体（型抗体（LC-1)细胞色素细胞色素P450 IID6亚胺甲基转移酶和环化脱亚胺甲基转移酶和环化脱氨酶氨酶AIH临床分类及特异性自身抗体类型相关抗体靶抗原I型抗平滑肌PBC相关自身抗体及抗原相关自身抗体及抗原荧光表现荧光表现相关抗体相关抗体对应靶抗原对应靶抗原胞浆颗粒胞浆颗粒型型抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（2型常见）型常见）（AMA-2）丙酮酸脱氢酶复合物丙酮酸脱氢酶复合物核点型核点型抗抗sp100抗体抗体sp100核膜型核膜型抗抗gp210抗体抗体抗抗Lamin蛋白及受体抗体蛋白及受体抗体核孔复合体糖蛋白核孔复合体糖蛋白Lamin蛋白及其受体蛋白及其受体PBC相关自身抗体及抗原荧光表现相关抗体对应靶抗原胞浆颗粒型lPBC主要为女性高发（男女比例为主要为女性高发（男女比例为1:9），且年龄在），且年龄在50岁左右岁左右l90-95%患者可检测到患者可检测到AMA，而且抗体早于临床症状出现，而且抗体早于临床症状出现（50-60%患者通常无症状）患者通常无症状）l2-4年后，年后，2/3患者开始出现明显临床表现患者开始出现明显临床表现l应用重组抗原检测应用重组抗原检测AMA阳出现阳性时，事实上可以诊断为阳出现阳性时，事实上可以诊断为PBC或者至少可以提示该患者在或者至少可以提示该患者在5-10年内具有年内具有PBC发病的高发病的高风险风险AMA与与PBC诊断诊断N Engl J Med 2005;353:1261-73.PBC主要为女性高发（男女比例为1:9），且年龄在50岁左右IFAIFA：多个基质组合：多个基质组合大鼠肝大鼠肾大鼠胃肾实质肾髓质肝组织胃组织IFA：多个基质组合大鼠肝大鼠肾大鼠胃肾实质肾髓质肝组织胃组LIA：靶抗原确认实验：靶抗原确认实验l几乎涵盖所有自免肝相关抗体l每膜条对应一份样本l一次实验完成多个指标检测l结果稳定可靠l可肉眼判读，也借助软件实现数字化判读LIA：靶抗原确认实验几乎涵盖所有自免肝相关抗体微孔板微孔板ELISA微孔板ELISA间接免疫荧光法（IFA）：是检测自身免疫性肝病相关自身抗体的常规方法，结合多种不同组织基质的荧光表现，可区分多种不同的自身抗体，但该方法要求实验工作人员具有足够的荧光结果判读经验才能避免主观性和随意性，还有荧光设备的要求。实验室方法学比较（一）间接免疫荧光法（IFA）：实验室方法学比较（一）条带酶免分析法(LIA)：多个抗原同时包被在一个膜条上，一次血清温育实现多个靶抗原的确认实验；几乎涵盖了所有常见的自免肝相关抗体；操作简单，易于判读；每一膜条检测一份样本，最大限度降低试剂成本；通过软件实现结果的数字判读和保存。实验室方法学比较（二）条带酶免分析法(LIA)：实验室方法学比较（二）酶联免疫吸附法(ELISA)：可特异性的开展靶抗原确认实验；筛查产品在一个微孔中同时包被了6种抗原，一次实验可完成6种最常见的抗体筛查检测；操作简单，可实现定量结果；实验室方法学比较（三）酶联免疫吸附法(ELISA)：实验室方法学比较（三）姓名姓名性别性别年龄年龄科室科室采样时间采样时间检测项目检测项目样本特点样本特点病案号病案号申请医生申请医生送检时间送检时间项目编号项目编号项目名称项目名称结果结果参考值参考值单位标识单位标识 1AMA-2阳性阳性阴性阴性 2LKM-1阴性阴性阴性阴性 3LC-1阴性阴性阴性阴性 4SLA/LP阳性阳性阴性阴性 5sp100阴性阴性阴性阴性 6gp210阳性阳性阴性阴性 7Ro52阴性阴性阴性阴性 8CENP阴性阴性阴性阴性正确解读自免肝实验报告单正确解读自免肝实验报告单姓名性别年龄科室采样时间检测项目样本特点病案号申请医生送检时抗核抗体（ANA）：是AIH最常见的自身抗体，主要出现在型AIH中（阳性率75%），并且常与抗平滑肌抗体ASMA同时出现（85-90%）；ANA对AIH不具有诊断特异性，可见于多种结缔组织疾病和其它自身免疫性疾病。如果ANA与ASMA同时出现，则高度提示AIH。抗平滑肌抗体（ASMA）：主要出现在型AIH中（阳性率40-90%），在AIH中，ASMA表现为高滴度（1:320），以IgG型为主，特异性靶抗原为F-肌动蛋白。抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗体：是自身免疫性肝炎（AIH）最特异的诊断标志。虽然它的阳性率只有10-30%，但其阳性预告值几乎为100%。如果出现相应的临床症状，每一个阳性结果基本上可诊断AIH。抗肝肾微粒体（LKM-1）抗体：已知的抗LKM抗体的靶抗原有3型（LKM-1、LKM-2、LKM-3）.其中LKM-1抗体为型AIH的标志，阳性率为7%，在儿童中的阳性率略高。自免肝实验室检测意义（一）抗核抗体（ANA）：是AIH最常见的自身抗体，主要出现在型抗肝细胞溶质抗原1型（LC-1）抗体：抗LC-1抗体为型AIH的另一个特异性标志，在型AIH中的阳性率为48%，特异性高达99%，抗LC-1抗体在型AIH中既可单独出现（30-40%），也可与抗LKM-1抗体等其它自身抗体一起出现（60-70%），抗LC-1抗体对AIH的特异性高于抗LKM-1抗体。抗线粒体抗体M2：是诊断原发性胆汁性肝硬化（PBC）的高度特异性和敏感的指标，阳性率为94%。抗核点（sp100）抗体：通常间接免疫荧光法可在三分之一的PBC患者中检测到ANA抗体，部分被确认为PBC患者特异性ANA靶抗原，包括核点型荧光表现的早幼粒细胞白血病蛋白（PML）和Sp100，以及与核膜型特异性相关的核孔复合体组分gp210.抗GP210抗体的检测有助于PBC的早期诊断,并且与PBC的预后有关,该抗体对PBC预后的影响与其持续的时间有关。自免肝实验室检测意义（二）抗肝细胞溶质抗原1型（LC-1）抗体：抗LC-1抗体为型A抗SS-A（Ro52）抗体在自身免疫性疾病中是一个非特异性指标，与多种自身免疫性疾病都有相关性，在很多疾病处于稳定期、控制好的情况下会显示阴性；如果阳性会提示复发或者优先于其它指标预警，起到预防提示作用。此指标合并其它指标阳性，常会提示预后不好。抗着丝点抗体：1、为了从靶抗原确认实验方面，非常准确和客观地帮助实验室确认核点型和着丝点型两种不同的结果，而不需要依赖类似荧光这样的主观判断；2、着丝点抗体在PBC的患者中出现阳性的话，会提示肝门静脉高压。具有明确的临床意义和价值；自免肝实验室检测意义（三）抗SS-A（Ro52）抗体在自身免疫性疾病中是一个非特异性指谢 谢！谢 谢！