棒状薄层色谱简介及在分析脂类组成上的应用课件

棒状薄层色谱简介及在分析脂棒状薄层色谱简介及在分析脂类组成上的应用类组成上的应用周 波棒状薄层色谱简介及在分析脂类组成上的应用周 波1 1相关概念 薄层色谱薄层色谱(thin layer chromatography(thin layer chromatography，TLC)TLC)是一是一种简便、快速的微量色谱方法种简便、快速的微量色谱方法原理：组分不断被吸附剂（固定相）吸附，又被展开剂（流动相）溶解而解吸附，且随之向前移动。组成吸附剂（固定相）展开剂（流动相）种类：常规的薄层色谱、高效薄层色谱、棒状薄层棒状薄层色谱色谱、加压薄层色谱、胶束薄层色谱等等相关概念 薄层色谱(thin layer chromat2 2流出曲线和色谱峰流出曲线和色谱峰3 3棒状薄层色谱构成原理 板薄层 棒薄层 色谱棒（组份分离工具）色谱棒（组份分离工具）氢火焰离子化检测技术氢火焰离子化检测技术棒状薄层色谱棒状薄层色谱构成原理色谱棒（组份分离工具）氢火焰离子化检测技4 4C:Documents and Settingszhoubo桌面色谱分离的过程原理.swfzhoubo桌面色谱分离的过程原理.swfC:Documents and Settingszhou5 5氢火焰离子化检测技术 1976 1976 年英国年英国Padley Padley 发明了棒状薄层色谱发明了棒状薄层色谱/氢火焰扫描法氢火焰扫描法 原理：化合物燃烧裂解,形成离子碎片和自由电子,再由电极收集它们并产生与化合物量成正比的电流信号而测出各物质的含量 氢火焰离子化检测技术 1976 年英国Padley 发明6 6利用棒状色谱分析脂类组成仪器：雅 特 隆 薄 层 色 谱分 析 仪 展开剂：正己烷：乙醚：甲酸=42：28：0.3（分析纯即可）具体展开剂的选择依据不同样品而定利用棒状色谱分析脂类组成仪器：雅 特 隆 薄 层 色 谱分7 7分析步骤前期处理：1、采用Folch法取得总脂2、待测样品用氯仿稀释至1020mg/ml分析步骤前期处理：8 8流程图空白扫描点 样展开分离干燥脱除展开剂扫描检测原点扫描流程图空白扫描点 样展开分离干燥脱除展开剂扫描检测原点扫描9 9相关参数 1.空白扫描次数根据色谱棒的实际情况大致为35次2.点样时用微量点样器吸取1ul3.展开槽中放入70ml左右展开剂，用滤纸润湿，形成饱和蒸汽4.在60下，烘干5分钟5.氢火焰，氢气流量为160ml/min,空气流量2L/min相关参数 1.空白扫描次数根据色谱棒的实际情况大致为35次1010数据处理和分析根据显示的组份离子流图上峰的保留时间和出现的先后顺序，比照标准品的保留时间和先后顺序确定种类燃烧离化后得到对应的组份离子流图，对出现的各组分对应的峰，积分得到峰与峰基线所包围的面积成为峰面积。成分()=(峰面积总峰面积)x100数据处理和分析根据显示的组份离子流图上峰的保留时间和出现的先1111事例事例1212棒状薄层色谱简介及在分析脂类组成上的应用课件1313注意事项由于温度以及展开时间等的影响实际操作中每次得到的离子流图与标准品的离子流图有着差异，可以根据峰出现的先后顺序确定组分。样品浓度必须控制在1020mg/ml，点样斑控制在3mm左右。每次点样时保留一个空白，可以知道色谱棒是否被污染。分析时根据标准图谱剔除杂峰，计算总面积注意事项由于温度以及展开时间等的影响实际操作中每次得到的离子1414