肿瘤标志物的临床检测及临床应用(硕士研究生)学习课件

肿瘤标志物检测及临床应用1肿瘤标志物检测及临床应用1前言近年，肿瘤标志物的研究与应用已成为肿瘤防治的重点和热点。实际应用中存在哪些问题？2前言近年，肿瘤标志物的研究与应用已成为肿疑问肿瘤标志物的检测能否达到早期诊断的效果？在人群中进行普查或筛查有何价值？临床意义如何解释？检测中方法学存在哪些问题？怎样规范与合理应用TM？3疑问肿瘤标志物的检测能否达到早期诊断的效果？3早在2002年至2004年时，中华医学会检验分会肿瘤标志物专家委员会分别召开3次专家研讨会。起草制定了“肿瘤标志物临床检测的基本原则（建议稿）”。4早在2002年至2004年时，中华医学会检验分会肿瘤标志物专一、肿瘤标志物的定义肿瘤标志物（TumorMarker，TM）是指在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生和/或升高的反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因产物因产物等。TM可以存在于肿瘤患者的血液、体液、细胞或组织中等5一、肿瘤标志物的定义肿瘤标志物（TumorMarker，TTM的存在形式细胞TM 位于细胞中的与肿瘤相关的物质或抗原，如激素受体、生长因子受体、白血病表型、基因等。体液TM 肿瘤细胞分泌或脱落于血液、尿液或其他体液中、或是宿主对体内新生物反应而产生并进入体液的物质。6TM的存在形式细胞TM6二、TM的分类TMTM没有统一分类标准，一般分类：没有统一分类标准，一般分类：胚胎抗原标志物胚胎抗原标志物:AFPAFP、CEACEA等等 糖链抗原类糖链抗原类 :CA19-9:CA19-9、CA15-3CA15-3、CA242CA242等等 酶和同工酶类酶和同工酶类:NSE,PAP,CK-BBNSE,PAP,CK-BB，癌时GT等等 激素类：激素类：小细胞肺癌可分泌促肾上腺皮质激素（ACTH），患甲状腺髓样癌时降钙素升高，患绒毛膜上皮细胞癌时hCG明显升高。蛋白质类：蛋白质类：2微球蛋白，铁蛋白，本-周蛋白.癌基因产物类：癌基因产物类：ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白7二、TM的分类TM没有统一分类标准，一般分类：7三、TM临床检测的基本原则1、TM对肿瘤的辅助诊断价值：对肿瘤的辅助诊断价值：由于目前临床常用的TM在诊断恶性肿瘤时，灵敏度和特异性不够高，只能用于肿瘤的辅助诊断辅助诊断；不能作为肿瘤诊断的主要依据不提倡对无症状人群进行普查8三、TM临床检测的基本原则1、TM对肿瘤的辅助诊断价值：8三、TM临床检测的基本原则2、应用TM对高危人群进行筛查时应遵循下列原则：该肿瘤标志物对早期肿瘤的发现有较高的灵敏度测定方法的灵敏度、特异性高、重复性好AEP、PSA筛查费用经济、合理筛查发现肿瘤标志物异常升高，但无症状和体征时，必须复查和随访9三、TM临床检测的基本原则2、应用TM对高危人群进行筛查时三、TM临床检测的基本原则3、TM的器官定位价值：的器官定位价值：由于绝大多数TM对器官特异性不强，因此，TM阳性不能对肿瘤进行绝对定位。但少数肿瘤标志物（如前列腺特异性抗原、甲胎蛋白和甲状腺球蛋白等对器官定位有一定的价值）10三、TM临床检测的基本原则3、TM的器官定位价值：10三、TM临床检测的基本原则4、TM在判断肿瘤的大小和临床分期的价值：大多数情况下，TM浓度与肿瘤的大小和临床分期之间存在着一定的关联。但各期肿瘤的TM浓度变化范围较宽，会有互相重叠。因此，不能根据TM浓度高低来判断肿瘤的大小及进行临床分期11三、TM临床检测的基本原则4、TM在判断肿瘤的大小和临床分三、TM临床检测的基本原则5、TM在肿瘤监测中的价值：TM的主要临床应用价值是判断肿瘤治疗疗效和复发监测。临床可通过对肿瘤患者治疗前后及随访中 TM 浓度变化的监测，了解肿瘤治疗是否有效，并判断其预后，为进一步治疗提供参考依据。为确定何种 TM 适用于对肿瘤患者进行治疗监测，在患者治疗前应做相关TM检测12三、TM临床检测的基本原则5、TM在肿瘤监测中的价值：12三、TM临床检测的基本原则6、TM浓度变化对肿瘤的疗效判断价值：恶性肿瘤治疗后TM浓度的变化与疗效之间有一定的相关性，治疗后TM浓度变化，常有三种类型：TM浓度下降到参考范围，提示肿瘤治疗有效TM浓度下降但仍持续在参考范围以上，提示有肿瘤残留和/或肿瘤转移TM浓度下降到参考范围一段时间后，又重新升高，提示肿瘤复发或转移13三、TM临床检测的基本原则6、TM浓度变化对肿瘤的疗效判断 疗效监测：疗效监测：许多许多TMTM能明确手术、放疗或药能明确手术、放疗或药物治疗是否有效，有的物治疗是否有效，有的TMTM可反映肿瘤的残存量，可反映肿瘤的残存量，这种定量关系具有重要临床应用价值。疗效观这种定量关系具有重要临床应用价值。疗效观察可参照下列标准：察可参照下列标准：无效：TM浓度与治疗前相比下降50改善：TM浓度与治疗前相比下降50有效：TM浓度与治疗前相比下降90显效：TM浓度下降至临界值以下14疗效监测：许多TM能明确手术、放疗或药物治疗是否有效三、TM临床检测的基本原则7、TM的定期随访原则：恶性肿瘤治疗结束后，应根据病情对治疗前升高的TM作定期随访监测。不同的TM半衰期不同，所以监测的时间和周期也不同大部分国内外专家建议：治疗后6W做首次测定；3年内每3个月测定一次；3至5年:每半年测定一次；5至7年:每年测定一次；随访中如发现有明显升高，应1月后复测一次，连续2次升高，可预示复发或转移。此预示常早于临床症状和体征，而有助于临床及时处理15三、TM临床检测的基本原则7、TM的定期随访原则：15三、TM临床检测的基本原则8、TM的联合检测原则：同一种肿瘤或不同类型的肿瘤可有一种或几种TM异常；同一种TM可在不同的肿瘤中出现。为提高TM的辅助诊断价值和确定何种TM可作为治疗后的随访监测指标，可进行联合检测，但联合检测的指标须经科学分析、严格筛选。在上述前提下，合理选择几项灵敏度、特异性能互补的TM构成最佳组合，进行联合检测。经过临床应用，以循证医学的观点来评价和修改联合检测的TM组合16三、TM临床检测的基本原则8、TM的联合检测原则：16四、测定TM的实验室应遵循的基本原则1.实验室必须使用国家有关机构批准的仪器和试剂，做好室内质控和参加室间质评，以保证试验结果的准确性、重复性和可比性2.使用不同方法、不同试剂测定同一种TM时，其结果可能出现差异。为此同一患者在治疗前后及随访中，应采用同一种方法和试剂17四、测定TM的实验室应遵循的基本原则1.实验室必须使用国家有四、测定TM的实验室应遵循的基本原则3.在更换检测方法和试剂时，应作比对试验4.检验医学工作者应了解TM的方法学评价，并积极参加对TM的评估和临床应用的讨论5.检验医学学术团体应制定相应的TM应用原则18四、测定TM的实验室应遵循的基本原则3.在更换检测方法和试剂理想的肿瘤标志物理想的肿瘤标志物灵敏度高特异性强定位性好反应病情监测肿瘤疗效监测肿瘤复发预测肿瘤预后 至今，还没有一至今，还没有一种肿瘤标志物能种肿瘤标志物能完全满足上述各完全满足上述各项要求项要求!19理想的肿瘤标志物灵敏度高至今，还没有一种肿瘤标志物能完正确应用肿瘤标志物原则正确应用肿瘤标志物原则联合诊断动态检查和观察综合分析正常参考值的确定20正确应用肿瘤标志物原则联合诊断20五、临床上一些常用的TM1.AFP 一种糖蛋白，由卵黄囊及胚胎干细胞产生；作为一种糖蛋白，由卵黄囊及胚胎干细胞产生；作为原发性肝癌的标志物原发性肝癌的标志物,特异性和敏感性相对较高，特异性和敏感性相对较高，阳性阳性率可达率可达70 慢性肝炎、肝硬化、卵巢癌、肺癌和其他消化道慢性肝炎、肝硬化、卵巢癌、肺癌和其他消化道癌也可升高，但升高的程度不及原发性肝癌，也有少癌也可升高，但升高的程度不及原发性肝癌，也有少数原发性肝癌的病人数原发性肝癌的病人AFP不升高，非肝癌升高不升高，非肝癌升高 常与常与AFU、AFP异质体联合检测诊断肝癌异质体联合检测诊断肝癌21五、临床上一些常用的TM1.AFP212.CEA 糖蛋白，存在于胚胎胃肠粘膜上皮与一些糖蛋白，存在于胚胎胃肠粘膜上皮与一些恶性组织的细胞表面，多种肿瘤的标志物恶性组织的细胞表面，多种肿瘤的标志物,特特异性较差异性较差 结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、小细胞及非小结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、小细胞及非小细胞肺癌、甲状腺髓样癌及某些肺癌患者均可细胞肺癌、甲状腺髓样癌及某些肺癌患者均可见见CEA升高。升高。因此，因此，CEA作为早期诊断的价值作为早期诊断的价值不大，但有助于分析疗效、判断预后、预测复不大，但有助于分析疗效、判断预后、预测复发及转移发及转移222.CEA223.CA19-9（胃肠癌抗原）（胃肠癌抗原）一种含唾液酸的神经节苷脂，主要由消化道肿瘤细胞一种含唾液酸的神经节苷脂，主要由消化道肿瘤细胞所分泌。所分泌。为为胰腺癌的胰腺癌的TM；肠癌、胆囊癌、胃癌、肝癌和肺癌；肠癌、胆囊癌、胃癌、肝癌和肺癌也可增高，但以胰腺癌增高更为明显，也可增高，但以胰腺癌增高更为明显，阳性率达阳性率达 80左右。左右。部分胆囊炎和肝硬化患者部分胆囊炎和肝硬化患者CA19-9也可能升高。也可能升高。CA19-9和和CEA联合检测可增加对胰腺癌的敏感性和联合检测可增加对胰腺癌的敏感性和特异性，因此，可用于对胰腺癌的早期筛查。特异性，因此，可用于对胰腺癌的早期筛查。233.CA19-9（胃肠癌抗原）一种含唾液酸的神经节苷脂，主要4.CA12-5（卵巢癌抗原）卵巢癌抗原）一种糖蛋白一种糖蛋白,妇科肿瘤的标志物妇科肿瘤的标志物,对卵巢上皮癌的敏对卵巢上皮癌的敏感性最高，但感性最高，但 特异性不高，肝癌和肺癌患者特异性不高，肝癌和肺癌患者CA12-5也明显高于正常。也明显高于正常。不少妇科良性疾病，如子宫内膜异位、子宫肌瘤以不少妇科良性疾病，如子宫内膜异位、子宫肌瘤以及一些导致腹水的疾病都可致及一些导致腹水的疾病都可致CA12-5升高，肝肾功升高，肝肾功能障碍也可明显影响能障碍也可明显影响CA12-5的水平。的水平。CA12-5水平的升高与肿瘤的复发有关。水平的升高与肿瘤的复发有关。244.CA12-5（卵巢癌抗原）一种糖蛋白,妇科肿瘤的标志物5.人附睾蛋白4（HE4）HE4 基因最早从人附睾上皮细胞中发现，在卵巢组织中不表达或低表达，但在卵巢癌组织中高表达。在鉴别卵巢肿瘤良、恶性时灵敏度90.8%，特异性95%。对于 I 期卵巢癌 HE4 的灵敏度高达45.9%，明显高于CA125，这为卵巢癌早期筛查提供了新的方向。255.人附睾蛋白4（HE4）HE4基因最早从人附睾上皮细胞中卵巢恶性肿瘤风险评估法则26卵巢恶性肿瘤风险评估法则26自然对数自然指数27自然对数自然指数27EOC:早期上皮性卵巢癌LMP:卵巢低度恶性潜能肿瘤良性组患癌组28EOC:早期上皮性卵巢癌良患28未检出例数29未检出例数296.CA15-3（乳腺癌抗原）乳腺癌抗原）为多形上皮粘蛋白。为多形上皮粘蛋白。乳腺癌的肿瘤标志物，诊断乳腺癌的灵敏度较乳腺癌的肿瘤标志物，诊断乳腺癌的灵敏度较低，但对乳腺癌进展期、复发及转移的患者有低，但对乳腺癌进展期、复发及转移的患者有显著的临床价值，阳性率可达显著的临床价值，阳性率可达80左右。左右。除乳腺癌外，除乳腺癌外，CA15-3还存在于肺腺癌、卵巢癌还存在于肺腺癌、卵巢癌和胰腺癌。和胰腺癌。在识别乳腺癌的敏感性与特异性方面，在识别乳腺癌的敏感性与特异性方面，CA15-3的作用优于的作用优于CEA。306.CA15-3（乳腺癌抗原）为多形上皮粘蛋白。307.CA24-2是一种粘蛋白类型的糖蛋白。是一种粘蛋白类型的糖蛋白。消化道恶性肿瘤的消化道恶性肿瘤的TM，对胰腺癌、结直肠癌，对胰腺癌、结直肠癌的诊断和预后监测有一定的价值，敏感性的诊断和预后监测有一定的价值，敏感性4085。作为作为腺癌腺癌的单项指标，的单项指标，CA242优于优于CEA。二者。二者联合检测可用于联合检测可用于 手术前评估预后。手术前评估预后。317.CA24-2是一种粘蛋白类型的糖蛋白。318.神经元特异性烯醇化酶（NSE）烯醇化酶是一种糖酵解途径中的酶烯醇化酶是一种糖酵解途径中的酶,催化催化2 2磷酸甘油酸向磷酸烯醇式丙酮酸的转化。该酶磷酸甘油酸向磷酸烯醇式丙酮酸的转化。该酶由三种亚基（由三种亚基（、）组成，分布于全身组成，分布于全身各组织中，其中各组织中，其中型仅存在于神经元和神经内分型仅存在于神经元和神经内分泌细胞中。泌细胞中。NSENSE是神经胶质细胞瘤、小细胞肺癌和恶性是神经胶质细胞瘤、小细胞肺癌和恶性黑色素瘤的黑色素瘤的TMTM。常用于监测病情、评价疗效和预。常用于监测病情、评价疗效和预报复发。报复发。328.神经元特异性烯醇化酶（NSE）烯醇化酶是一种糖9.前列腺特异性抗原(PSA)PSA PSA是由前列腺上皮细胞分泌的一种糖蛋是由前列腺上皮细胞分泌的一种糖蛋白，具有严格的组织特异性，仅存在于白，具有严格的组织特异性，仅存在于正常或正常或肥大的前列腺癌组织中肥大的前列腺癌组织中。PSAPSA是前列腺癌较特异的是前列腺癌较特异的TMTM，阳性率达，阳性率达6363以上，用于诊断前列腺癌、鉴别转移性癌的以上，用于诊断前列腺癌、鉴别转移性癌的来源，以及判断疗效和预后。在区别良性与恶来源，以及判断疗效和预后。在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游离性前列腺疾病时测定游离PSAPSA（f-PSAf-PSA）与总）与总PSAPSA（tPSA)tPSA)的比率更有临床价值的比率更有临床价值。339.前列腺特异性抗原(PSA)PSA是由前列腺上在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游离离PSAf-PSA/tPSAPSAf-PSA/tPSA的比率的比率f-PSAf-PSAtPSAtPSA 大于大于25%25%：多为良性病人。多为良性病人。f-PSAf-PSAtPSAtPSA 小于小于10%10%：多为前列腺癌。多为前列腺癌。34在区别良性与恶性前列腺疾病时测定游离PSAf-PSA/tPS10.铁蛋白(Ferritin)铁蛋白是一种铁结合蛋白铁蛋白是一种铁结合蛋白,为机体内一种贮存为机体内一种贮存铁的可溶组织蛋白，铁的可溶组织蛋白，存在于各种组织。病理状存在于各种组织。病理状态下释放到血液中。态下释放到血液中。男性：80-130ng/ml，女性：35-55ng/ml铁蛋白不是肿瘤特异的标志，铁蛋白不是肿瘤特异的标志，在多种癌症患者在多种癌症患者血液中有不同程度的阳性率血液中有不同程度的阳性率,国内报道，肝癌国内报道，肝癌患者的铁蛋白阳性率可达在患者的铁蛋白阳性率可达在90%90%以上以上,FerritinFerritin检测可以辅助肝癌的诊断。某些良性的疾病也检测可以辅助肝癌的诊断。某些良性的疾病也可见铁蛋白的升高。可见铁蛋白的升高。3510.铁蛋白(Ferritin)铁蛋白是一种铁结合蛋白,为机11.HCG由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，它是由和二聚体的糖蛋白组成。多种妇科恶性肿瘤以及多种妇科恶性肿瘤以及6060以上的以上的非精原细胞瘤患者体内非精原细胞瘤患者体内HCGHCG上升。上升。在受孕后1014天开始分泌。第8孕周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义与妊娠相关疾病滋养细胞肿瘤等疾病的诊断鉴别和病程观察3611.HCG由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，它是由和HCG检测的意义1诊断早期妊娠：孕后3550天HCG可升至大于2500IU/L。6070天可达80000IU/L2异常妊娠与胎盘功能的判断：异位妊娠：如宫外孕时，HCG常为312625IU/L。鉴别流产诊断与治疗：不完全流产，保胎的参考依据。先兆流产：如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产3滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾丸畸胎瘤等患者血、尿中HCG可达10万到数百万IU/L。如男性尿中HCG升高，要考虑睾丸肿瘤如精原细胞癌、畸形及异位HCG瘤等。滋养层细胞肿瘤患者术后观察。812周呈阴性，预后判断37HCG检测的意义1诊断早期妊娠：孕后3550天HCG可升12.人生长激素(HGH)是腺垂体细胞分泌的蛋白质，是一种肽类激素。主要生理功能是促进神经组织以外的所有其他组织生长；促进机体合成代谢和蛋白质合成；促进脂肪分解；对胰岛素有拮抗作用；抑制葡萄糖利用而使血糖升高等作用。HGS升高与肿瘤诊断：垂体肿瘤：肢端肥大症、脑垂体性巨人症非垂体肿瘤：胰腺癌等多种恶性肿瘤3812.人生长激素(HGH)是腺垂体细胞分泌的蛋白质，是一种13.b b2-微球蛋白（微球蛋白（b b2-MG）表达在大多数有核细胞的表面，是表达在大多数有核细胞的表面，是HLA I 类类抗原分子中的一条链。抗原分子中的一条链。b b2-MG的检测：的检测：多用于证实多种血液系统的多用于证实多种血液系统的恶性肿瘤，如白血病、淋巴瘤以及多发性骨髓瘤，恶性肿瘤，如白血病、淋巴瘤以及多发性骨髓瘤，其水平与肿瘤细胞的数量、生长速度、预后及疾其水平与肿瘤细胞的数量、生长速度、预后及疾病活动性有关。病活动性有关。3913.b2-微球蛋白（b2-MG）表达14.14.鳞状上皮癌相关抗原鳞状上皮癌相关抗原（SCC-SCC-AgAg）1977年 子宫颈鳞状细胞癌中获得参考值：2.5 ug/L临床意义：（1）SCC-Ag在子宫颈癌、肺癌、食道癌、头颈部癌等各种鳞癌中升高。可用于监测其疗效、复发、转移、预后等 子宫颈癌的阳性率 80%肺鳞癌的阳性率 46.5%食道癌的阳性率 31%（2）肝炎、肝硬化、肺炎、肾衰、结核等，有一定的SCC-Ag阳性率4014.鳞状上皮癌相关抗原（SCC-Ag）1977年子宫颈15.胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)胃蛋白酶原，由泌酸腺的主细胞合成，胃蛋白酶原，由泌酸腺的主细胞合成，在胃腔内经盐酸或已有活性的胃蛋白酶在胃腔内经盐酸或已有活性的胃蛋白酶作用变成胃蛋白酶，将蛋白质分解成膘、作用变成胃蛋白酶，将蛋白质分解成膘、胨及少量多肽。胨及少量多肽。该酶作用的最适该酶作用的最适pH=2pH=2，进入小肠后，酶，进入小肠后，酶活性丧失。活性丧失。4115.胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)胃蛋白酶原胃蛋白酶原（PG）-用于胃癌高位人群筛查的标志物42胃蛋白酶原（PG）-用于胃癌高位人群筛查的标志物42PG的三大临床应用43PG的三大临床应用434444META分析45META分析45464647474848胃蛋白酶原PG临床意义血清PG水平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能PGI是检测胃泌酸腺细胞功能的指针：胃酸分泌增多PGI升高，分泌减少或胃粘膜腺体萎缩PGI降低PGII与胃底粘膜病变的相关性较大（相对于胃窦粘膜）：其升高与胃底腺管萎缩、胃上皮化生或假幽门腺化生、异型增殖有关PGI/II比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关：联合测定PGI和PGII比值可起到胃底腺粘膜“血清学活检”的作用 49胃蛋白酶原PG临床意义血清PG水平反映了不同部位胃粘膜的胃蛋白酶原（PG）对胃部疾病的发展历程：一般可表述为：浅表性胃炎胃粘膜糜烂溃疡萎缩性胃炎胃癌。具有良好的诊断和筛选作用。胃蛋白酶原/检测：用于检测血清或者用于检测血清或者血浆中的胃蛋白酶原血浆中的胃蛋白酶原/的含量，具有简便、的含量，具有简便、快速的优势，避免了快速的优势，避免了X-X-射线对人体的侵害和胃射线对人体的侵害和胃镜的不便。镜的不便。50胃蛋白酶原（PG）对胃部疾病的发展历程：一般可表述为：浅表性TM联合检测的常用组合(仅供参考）1、肝癌：AFP+AFP异质体2、食道鳞癌：CYFR21-1（细胞角蛋白19片断）+TPS（组织多肽特异抗原）+SCC（磷状细胞相关抗原）食道腺癌：CA199+CEA+TPS3、胃癌：CA724+CEA+CA199+PGI+PGII4、结直肠癌：CA242+CEA+CA199+TPS5、胰腺癌：CA242+CA1996、乳腺癌：CA153+CEA+CA1997、卵巢癌：CA125+CA724+TPS+AFP+HE48、宫颈癌：SCC+CYFRA21-1+TPS51TM联合检测的常用组合(仅供参考）1、肝癌：AFP+AFP异肿瘤标志物检测中存在的问题方法学问题试剂盒的标准化和评价确定参考值及判断结果的问题TM测定的影响因素肿瘤标志物的临床价值评价TM的临床应用问题？52肿瘤标志物检测中存在的问题方法学问题52TM TM 常用的检测方法常用的检测方法 1 放射免疫测定放射免疫测定:灵敏度高灵敏度高、但特异性差，阳性率较高，且方法繁、但特异性差，阳性率较高，且方法繁琐、放射污染、需特殊实验室、测定时间长。琐、放射污染、需特殊实验室、测定时间长。2 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)：应用较广、费用较低应用较广、费用较低，但手工，但手工ELISA方法仍繁琐方法仍繁琐，定量测定不够精确；全自动酶免分析仪，定量测定不够精确；全自动酶免分析仪,可在一定程可在一定程度上解决反应时间、温度、洗涤力度等标准化问题，度上解决反应时间、温度、洗涤力度等标准化问题，减少人为误差。减少人为误差。53TM常用的检测方法1放射免疫测定:533 3 自动化仪器测定自动化仪器测定:如如全自动快速微粒子酶免疫分析系全自动快速微粒子酶免疫分析系统统、时间分辨免疫荧光分析技术时间分辨免疫荧光分析技术，全自全自动化学发光（动化学发光（Chemiluminescence)Chemiluminescence)分析分析系统，这类方法测定速度快、精度高，系统，这类方法测定速度快、精度高，但仪器和试剂的成本较高，经济欠发达但仪器和试剂的成本较高，经济欠发达地区和标本量较少的实验室难以开展。地区和标本量较少的实验室难以开展。543自动化仪器测定:54无论哪种方法，在TM检测中，同一个患者尽力选择同一中方法，同样的仪器设备检测，这样才有可比性。动态观察才有作用。55无论哪种方法，在TM检测中，同一个患者尽力选择同一中方法，同试剂盒的标准化和评价问题试剂盒应该经过药检所检定，并获得SFDA 批准证书和生产许可证试剂盒可消除鼠源性单抗的干扰试剂盒的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值应符合要求56试剂盒的标准化和评价问题试剂盒应该经过药检所检定，并获得SF确定参考值及判断结果的问题说明书的参考值与自己实验室的参考值存在一定的差异。实验室应该在应用之前，做一批正常人，计算参考值范围。有时实验室参考值与临床诊断相差甚远。需要与临床沟通，对被检者在不同时间，即治疗中和治疗前后测定值进行比较。57确定参考值及判断结果的问题说明书的参考值与自己实验室的参考值TM 测定的影响因素有那些？1肿瘤的大小和肿瘤细胞的数量。2肿瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度3肿瘤组织的血供情况4肿瘤细胞是否有坏死和坏死的程度5.肿瘤细胞的分化程度和肿瘤的分期6.肿瘤细胞是否表达和合成肿瘤标志物7.肿瘤标志物在体内的降解和排泄速度58TM测定的影响因素有那些？1肿瘤的大小和肿瘤细胞的数量。1.体内因素:1)1)肝肾功能异常和胆汁淤积等可造成肝肾功能异常和胆汁淤积等可造成TMTM浓度浓度增高。增高。2 2）风湿病时）风湿病时CA19-9CA19-9浓度可升高。浓度可升高。3 3）强烈的治疗作用（如手术、放疗、化疗）强烈的治疗作用（如手术、放疗、化疗）和连续的细胞死亡、肿瘤部位供血障碍等均可和连续的细胞死亡、肿瘤部位供血障碍等均可导致导致TMTM浓度变化。浓度变化。4 4）某些药物会影响）某些药物会影响TMTM的浓度，如前列腺癌抗的浓度，如前列腺癌抗雄激素治疗可抑制雄激素治疗可抑制PSAPSA的产生。的产生。5 5）直肠和肛检可致）直肠和肛检可致PSAPSA和和PAPPAP升高。升高。591.体内因素:592.体外因素:1)1)血液的稀释作用可使血液的稀释作用可使TMTM的阳性率下降的阳性率下降,如如直接采集肿瘤组织或其附近组织分泌的体液进直接采集肿瘤组织或其附近组织分泌的体液进行测定可提高检测灵敏度和特异性。行测定可提高检测灵敏度和特异性。2 2）红细胞、浆细胞和血小板中存在）红细胞、浆细胞和血小板中存在NSENSE，因，因此未及时分离血清的标本有可能使血清此未及时分离血清的标本有可能使血清NSENSE浓浓度升高。抗凝剂的使用应注意。度升高。抗凝剂的使用应注意。如：采血管不如：采血管不同对结果的影响。同对结果的影响。602.体外因素:603 3）血清放置于室温中有些）血清放置于室温中有些TMTM如如PAPPAP可因其不稳定可因其不稳定而降解。而降解。4 4）CA15-3CA15-3对蛋白酶和神经酰胺酶很敏感，应避对蛋白酶和神经酰胺酶很敏感，应避免微生物的污染，以免影响测定结果。免微生物的污染，以免影响测定结果。5 5）“HookHook”效应的影响。效应的影响。6 6）同一病人甚至同一份血清使用不同的试剂盒）同一病人甚至同一份血清使用不同的试剂盒测定，有时结果会相差很大。测定，有时结果会相差很大。613）血清放置于室温中有些TM如PAP可因其不稳定而降解。617)7)异嗜性抗体的影响异嗜性抗体的影响:大多数的大多数的TMTM试剂盒使试剂盒使用两种鼠的单克隆抗体用两种鼠的单克隆抗体,如血清中出现嗜如血清中出现嗜异性抗体异性抗体,特别是已知的人抗鼠嗜异性抗特别是已知的人抗鼠嗜异性抗体时体时,可能在两种鼠的单抗间起可能在两种鼠的单抗间起“桥梁桥梁”作用作用,导致假阳性。避免的办法是在样品导致假阳性。避免的办法是在样品中事先加入鼠的中事先加入鼠的IgG,IgG,用用PEGPEG沉淀沉淀,去除嗜去除嗜异性抗体异性抗体,或进行其他的预处理。或进行其他的预处理。627)异嗜性抗体的影响:大多数的TM试剂盒使用两种鼠的单克隆抗TM最主要的用处在于最主要的用处在于鉴别诊断鉴别诊断病程分析病程分析疗效监测疗效监测复发或转移复发或转移疗效和预后判断疗效和预后判断63TM最主要的用处在于鉴别诊断63TM测定的合理应用及注意事项1.1.动态记录动态记录TMTM的浓度变化的浓度变化:TMTM测定的临床价值重要的在于动态观察测定的临床价值重要的在于动态观察,有时有时候即使在参考范围内的浓度变化候即使在参考范围内的浓度变化,可能也是有可能也是有价值的价值的2.2.定期测定定期测定TMTM的浓度的浓度:应根据不同的患者、不同的肿瘤制定不应根据不同的患者、不同的肿瘤制定不 同的测定时间表同的测定时间表64TM测定的合理应用及注意事项1.动态记录TM的浓度变化:64一般的原则：一般的原则：治疗前：治疗前：应测定每个病人应测定每个病人TM的原始值的原始值 治疗后第治疗后第1年至第年至第2年：年：应每月测定应每月测定 TM浓度明显下降后：浓度明显下降后：每三个月测定一次每三个月测定一次 第第3年至第年至第5年：年：每年测定每年测定12次次 第第6年起：年起：每年一次每年一次 此外，每次改变治疗方案、此外，每次改变治疗方案、TM浓度增加浓度增加或怀疑复发和转移时，均应及时测定或怀疑复发和转移时，均应及时测定TM浓度浓度65一般的原则：653.3.合理的选用合理的选用TM:TM:同一肿瘤可能含有一种或多种同一肿瘤可能含有一种或多种TM,TM,而不同或同而不同或同种肿瘤的不同组织类型既可有共同的种肿瘤的不同组织类型既可有共同的TM,TM,也可也可有不同的有不同的TMTM4.TM4.TM的组合（联合）测定的组合（联合）测定:合理的组合将有助于提高检测的灵敏度合理的组合将有助于提高检测的灵敏度,但常但常导致特异性的下降导致特异性的下降,因此因此,TMTM的组合测定应同时的组合测定应同时考虑灵敏度和特异性考虑灵敏度和特异性663.合理的选用TM:66TM检测的质控问题1.首先要选择一个可靠的方法和仪器首先要选择一个可靠的方法和仪器好的分析系统（仪器）有很高的灵敏度和特异性，足以保证目前常用肿瘤标志物的临床检测需要其系统及试剂的稳定性可以保证结果的重复性。从卫生部临床检验中心提供的标志物室间质评(2009年2010年)中统计84份结果中，在所有参评的6种方法(放射免疫法、化学发光法、微粒子酶免法、电化学发放射免疫法、化学发光法、微粒子酶免法、电化学发光法、时间分辨荧光法、酶联免疫吸附法光法、时间分辨荧光法、酶联免疫吸附法)中按变异系数CV值从小到大排列，微粒子酶免法排第一位67TM检测的质控问题1.首先要选择一个可靠的方法和仪器67TM检测的质控问题2.严格做好室内质控工作严格做好室内质控工作免疫定量分析影响因素较多，只有严格免疫定量分析影响因素较多，只有严格认真做好室内质控，才能使好的室间质认真做好室内质控，才能使好的室间质评成绩代表实验室的真实水平，在商品评成绩代表实验室的真实水平，在商品复合质控品代价较高及原厂仅提供单项复合质控品代价较高及原厂仅提供单项质控品而使用不方便的情况下，自制复质控品而使用不方便的情况下，自制复合质控品仍可达到优质廉价的效果合质控品仍可达到优质廉价的效果尽量使用第三方室内质控品尽量使用第三方室内质控品68TM检测的质控问题2.严格做好室内质控工作68TM检测的质控问题3.做好室间质评工作做好室间质评工作结果回报在一定程度上可以评价指导日常检测结果回报在一定程度上可以评价指导日常检测工作工作回报结果应妥善保管回报结果应妥善保管,可以通过回顾性的分析可以通过回顾性的分析来评价测试项目结果的可靠性。使实验室发出来评价测试项目结果的可靠性。使实验室发出的报告结果做到心中有数的报告结果做到心中有数同时卫生部临床检验中心已开展网上质评工作同时卫生部临床检验中心已开展网上质评工作,可以使参评单位及时得到质评信息反馈可以使参评单位及时得到质评信息反馈,及时及时找出并调整自己实验室存在的问题找出并调整自己实验室存在的问题69TM检测的质控问题3.做好室间质评工作69TM检测需要做好以下几个方面工作流程、检测方法的标准化，质控的程序化和认真开展TM的规范、合理使用工作人员的责任心和认知度70TM检测需要做好以下几个方面工作流程、检测方法的标准化，质控Thank you for your attention!71Thankyouforyourattention!7