风湿病临床科研思维与研究方法课件

风湿病临床科研思维与研究方法风风湿病湿病临临床科研思床科研思维维与研究方法与研究方法风风湿病湿病临临床科研思床科研思维维与研究方法与研究方法风风湿湿北大人民医院风湿免疫科 风湿病学发展的缩影风湿病学发展的缩影3人人+1台显微镜台显微镜 门诊门诊/住院：住院：30,000/900人次人次 梯队：梯队：50人人(正副高职正副高职8名名,优秀团队优秀团队)研究生：研究生：博士等博士等30名名/导师导师6名名 科研经费：科研经费：3,000万万,国家重点基金等国家重点基金等 2北大人民医院北大人民医院风风湿免疫科湿免疫科 3人人+临床免疫中心临床免疫中心3临临床免疫中心床免疫中心3北京市重点实验室北京市重点实验室4北京市重点北京市重点实验实验室室419831987199920022004免疫科成立免疫科成立内科免疫学组成立（贺联印、马本良教授）内科免疫学组成立（贺联印、马本良教授）19871999更名风湿免疫科更名风湿免疫科200719832007主办第一届主办第一届RA国际论坛国际论坛中华风湿病学分会中华风湿病学分会 主任委员主任委员2009 2011 成立成立风湿免疫学系风湿免疫学系 教育部创新团队教育部创新团队学科发展学科发展2009中华风湿病学杂志中华风湿病学杂志主编主编201020112006 临床重点学科临床重点学科临床免疫中心临床免疫中心亚太风湿病联盟亚太风湿病联盟 主席主席中国免疫学会临床免疫分会中国免疫学会临床免疫分会 主任委员主任委员北京市重点实验室北京市重点实验室2012519831987199920022004免疫科成立内科免疫学免疫科成立内科免疫学医学参考报医学参考报 主编及编委主编及编委 栗占国、李茹、苏茵栗占国、李茹、苏茵中国医学论坛报中国医学论坛报 理事及理事及栏目主编栏目主编 栗占国、叶华栗占国、叶华中华风湿病杂志中华风湿病杂志 主编及编委主编及编委 栗占国、苏茵栗占国、苏茵 Intern J Rheum 审稿人审稿人 李茹、穆荣、张学武、何菁李茹、穆荣、张学武、何菁中华内科等（中华内科等（13种）种）编委编委 穆荣、苏茵、张学武穆荣、苏茵、张学武中国医师学会中国医师学会 副会长及副会长及委员委员 栗占国及苏茵栗占国及苏茵 APLAR 候任主席候任主席 栗占国栗占国北京医师学会中西医结合分会北京医师学会中西医结合分会 委员委员 苏茵苏茵中华风湿病青年委员会中华风湿病青年委员会 副主委副主委 苏茵苏茵中国康复学会风湿病学分会中国康复学会风湿病学分会 委员委员 张学武张学武风湿病学分会风湿病学分会 主委主委 栗占国栗占国 副秘书长副秘书长 苏茵苏茵 风湿病学分会中青年委风湿病学分会中青年委 副主委副主委 苏茵苏茵人才梯队人才梯队 973计划计划 首席科学家首席科学家 栗占国栗占国 国自然国自然 杰出青年杰出青年 栗占国栗占国北京市北京市 科技新星科技新星 李茹、何菁李茹、何菁北京大学人民医院北京大学人民医院 学术之星学术之星 何菁何菁北京大学医学部北京大学医学部 青年学者青年学者 李茹李茹教育部教育部 新教师基金新教师基金 李茹李茹 李春李春6医学参考医学参考报报 主主实力最强风实力最强风湿免疫团队湿免疫团队北京大学北京大学军事医学科学院军事医学科学院南开大学南开大学第三军医大学第三军医大学1313家家 科研院所科研院所北大人民医院、南京鼓楼北大人民医院、南京鼓楼 医院等医院等2020多家三甲医院多家三甲医院澳大利亚澳大利亚Monash大学大学美国密执安大学美国密执安大学风湿病致病细胞亚群风湿病致病细胞亚群国自然国际合作重点项目国自然国际合作重点项目科技部国际合作重大项目科技部国际合作重大项目英国英国Glasgow大学大学风湿病致病细胞因子风湿病致病细胞因子973团队团队RA发病机制及治疗发病机制及治疗十一十一五、五、十二十二五团队五团队RARA新型诊断技术的研究新型诊断技术的研究瑞典卡罗林斯卡瑞典卡罗林斯卡医学院医学院风湿病遗传学研究风湿病遗传学研究国自然海外及港澳国自然海外及港澳学者合作研究基金学者合作研究基金国家自然基国家自然基金面上项目金面上项目实力最强风湿实力最强风湿免疫研究团队免疫研究团队7北京大学北大人民医院、南京鼓楼北京大学北大人民医院、南京鼓楼 医院等医院等20多家三甲医院澳大多家三甲医院澳大临床及科研共同发展的团队 正副高级职称正副高级职称16163 3人，主治医师人，主治医师/助研助研1010人人 博士及硕士导师资格：博士及硕士导师资格：9 9人人 博士生，博士后（临床博士生，博士后（临床+科研型）：科研型）：5353人人 硕士生（临床硕士生（临床+科研型）：科研型）：1 16 6人人 已承担国家及部级课题者：12人已在国外发表论文：14人(约60篇)7070余人余人的临床及科研团队的临床及科研团队 8临临床及科研共同床及科研共同发发展的展的团队团队 正副高正副高级职级职称称163人，主治医人，主治医师师/感悟科研；提出问题比解决问题更重要；临床科研思维及研究方法。9 感悟科研；感悟科研；91010临床超越的前提临床超越的前提做优秀学术骨干或学科带头人做优秀学术骨干或学科带头人学科发展的必然条件学科发展的必然条件感悟科研11临临床超越的前提感悟科研床超越的前提感悟科研111212学科发展的必由之路要想举得起，两手都要硬临床科研13学科学科发发展的必由之路要想展的必由之路要想举举得起，得起，临临床科研床科研13通过临床发现问题通过科研解决问题14通通过临过临床床发现问题发现问题14 科研的感悟 临床上未被认识的机制临床上未被认识的机制/现象需要研究现象需要研究 免疫病中自身抗体的地位免疫病中自身抗体的地位 干燥综合征高发淋巴瘤的原因干燥综合征高发淋巴瘤的原因 临床诊治水平的提高需要研究临床诊治水平的提高需要研究 eg，血清阴性，血清阴性SS;早期早期RA 临床医师的职责，临床医师的职责，学术型医师学术型医师，全能型医师，全能型医师 eg，为什么会得免疫病，如何防治，为什么会得免疫病，如何防治 学术界的期望学术界的期望 临床水平提高临床水平提高 杂志交流杂志交流 创造临床科研平台创造临床科研平台15 科研的感悟科研的感悟 临临床上未被床上未被认识认识的机制的机制/现现象需要研究象需要研究15 感悟科研；感悟科研；提出问题比解决问题更重要；提出问题比解决问题更重要；临床科研思维及研究方法。临床科研思维及研究方法。16 感悟科研；感悟科研；16选题的基本原则 创新性创新性：SS新抗原新抗原(M3)；ALA抗体对免疫相抗体对免疫相 关关PLT减少的意义，新抗原筛选。减少的意义，新抗原筛选。科学性：科学性：指严谨性指严谨性,如：患者的性别比例、如：患者的性别比例、诊断标准、用药的影响诊断标准、用药的影响 举例：抗举例：抗CCP阳性率低；阳性率低；HS1基因基因 实用性：实用性：可解决临床实际问题可解决临床实际问题 举例：举例：CD20单抗治疗单抗治疗SS血液系统疾患血液系统疾患 来源于临床，以科学为基础，在科研中寻找答案，再回馈及临床。顶天立地17选题选题的基本原的基本原则则 创创新性：新性：SS新抗原新抗原(M3)；ALA抗体抗体对对免疫免疫类风湿类风湿关节炎关节炎干燥干燥综合征综合征系统性系统性红斑狼疮红斑狼疮从临床来源的题目抗胞衬蛋白抗体在抗胞衬蛋白抗体在SS诊断中的意义诊断中的意义抗抗M3抗体在抗体在SS诊断中的意义诊断中的意义抗抗Lipocalin抗体在抗体在SS诊断中的意义诊断中的意义SS合并肺间质纤维化的特点合并肺间质纤维化的特点青年青年SS的临床特点分析的临床特点分析 抗抗ACF抗体在抗体在RA早期诊断中的作用早期诊断中的作用抗抗MCV抗体在早期抗体在早期RA中的意义中的意义RA早期诊断标准的建立早期诊断标准的建立RA强化治疗的多中心研究强化治疗的多中心研究来氟米特治疗来氟米特治疗RA的多中心研究的多中心研究羟氯喹治疗羟氯喹治疗RA的多中心研究的多中心研究RA流行病学调查流行病学调查 抗膜抗膜DNA抗体在抗体在SLE诊断中的意义诊断中的意义抗核小体抗体在抗核小体抗体在SLE诊断中的意义诊断中的意义CTX小冲击治疗小冲击治疗SLE的临床研究的临床研究神经精神性狼疮激素冲击治疗研究神经精神性狼疮激素冲击治疗研究SLE强化治疗的多中心临床研究强化治疗的多中心临床研究 18类风类风湿干燥系湿干燥系统统性从性从临临床来源的床来源的题题目抗胞目抗胞衬衬蛋白抗体在蛋白抗体在SS诊诊断中的断中的提出问题比解决问题更重要提出问题比解决问题更重要19提出提出问题问题比解决比解决问题问题更重要更重要19自己位置20自己位置自己位置20个人历程种子种子增增添添枝枝叶叶21个人个人历历程种子增程种子增21自身免疫病的发病机制自身免疫病的发病机制诱发因素诱发因素(抗原抗原)TCRHLA免疫炎性反应免疫炎性反应T T细胞反应细胞反应T T细胞活化细胞活化B B细胞反应细胞反应B B细胞活化细胞活化自身抗体自身抗体调亡调亡细胞因子细胞因子 组织损伤组织损伤举例举例22自身免疫病的自身免疫病的发发病机制病机制诱发诱发因素因素(抗原抗原)TCRHLA免疫炎性反免疫炎性反应应97KD14KD双向电泳进行双向电泳进行SS患者及正常人的唾液分析患者及正常人的唾液分析SS患者及正常人唾液的双向电泳分析患者及正常人唾液的双向电泳分析由图可见，及正常人唾液比较，由图可见，及正常人唾液比较，SS患者唾液在低分子量处可见多个特异蛋白，患者唾液在低分子量处可见多个特异蛋白，将进一步通过质谱分析是那种蛋白。将进一步通过质谱分析是那种蛋白。SS患者唾液电泳分析患者唾液电泳分析正常人唾液电泳分析正常人唾液电泳分析2397KD14KD双向双向电电泳泳进进行行SS患者及正常人的唾液分析患者及正常人的唾液分析SS患患利用噬菌体表面展示肽库筛选干燥综合征相关抗原肽利用噬菌体表面展示肽库筛选干燥综合征相关抗原肽SS阳性克隆测序结果阳性克隆测序结果编号编号克隆序列克隆序列重复条数重复条数是否包含共有序列是否包含共有序列1TPTSFYWALHPG4是是2AHNPSSFWTELY2是是3MDTNPSSFYTAL1是是4NPFLDKSLGVRW1否否5GPDPAWFFFNMD1否否6SLDMGKHLGYRF1否否7APEHLYTATLRF1否否8TFTKITPKTAYH1否否共有的核心序列共有的核心序列PTSFXXXL/PSSFXXXL 24利用噬菌体表面展示利用噬菌体表面展示肽库筛选肽库筛选干燥干燥综综合征相关抗原合征相关抗原肽肽SS阳性克隆阳性克隆测测M3RP（2th环）抗体对环）抗体对SS的诊断价值的诊断价值*及其他三组对照相比，及其他三组对照相比，P P0.050.05组别组别例数例数(n)阳性例数阳性例数(n)敏感性敏感性(%)特异性特异性(%)SS1076157.01*82.03SLE841214.29RA951920.00健康对照健康对照6469.3825M3RP（2th环环）抗体）抗体对对SS的的诊诊断价断价值值*及其他三及其他三组对组对照相比照相比干燥动物模型干燥动物模型研究者研究者Dean年份年份1984动物动物LEW大鼠大鼠抗原抗原颌下腺匀浆颌下腺匀浆Yoshiyo1985CRJ:CD-1小鼠小鼠颌下腺匀浆颌下腺匀浆Hayashi1986CRJ:CD-1小鼠小鼠颌下腺匀浆颌下腺匀浆Culter1991LEW大鼠大鼠颌下腺匀浆颌下腺匀浆Suzuki1993C57BL/6小鼠小鼠LP-BM5鼠白血鼠白血病病毒病病毒Mu2001SMA小鼠小鼠颌下腺匀浆颌下腺匀浆QianY*2008Act1基因敲除基因敲除B细胞调控细胞调控Eur J Immunol.2008 Aug;38(8):2219-28.26干燥干燥动动物模型研究者年份物模型研究者年份动动物抗原物抗原Yoshiyo1985CRJ:各组小鼠腺体的病理表现（各组小鼠腺体的病理表现（H&E）PBSGST颌下腺匀浆颌下腺匀浆-胞衬蛋白胞衬蛋白抗抗M3受体蛋白多肽受体蛋白多肽27各各组组小鼠腺体的病理表小鼠腺体的病理表现现（H&E）PBSGST颌颌下腺匀下腺匀浆浆-胞胞282829293030313132323333怎样选题（一）1.临床疑难问题临床疑难问题(诊断、治疗、病因诊断、治疗、病因)是科研选题的源泉。是科研选题的源泉。例如：例如：RA早期诊断；尿微量白蛋白和早期诊断；尿微量白蛋白和LN；SLE月经不调；月经不调；HCQ和和SS治疗。治疗。2.善于在临床上发现问题善于在临床上发现问题 例如：例如：RA肺间质纤维化；肺间质纤维化；SLE低补体；低补体；IgG4RD3.文献阅读是学术型医师的必修课，更是选题的依据。文献阅读是学术型医师的必修课，更是选题的依据。例如：新的诊断标志物；例如：新的诊断标志物；MCV,ALA，Lipocalin抗体。抗体。提出问题比解决问题更重要34怎怎样选题样选题（一）（一）1.临临床疑床疑难问题难问题(诊诊断、治断、治疗疗、病因、病因)是科研是科研选选353536363737383839394.学习班学习班/学术会议和交流可激发灵感，早期了解学术会议和交流可激发灵感，早期了解 研究动态研究动态 例如：例如：FOXP3/小剂量小剂量CTX 5.及其他科室和专业联合及其他科室和专业联合 parvovirus Abs 皮肤型狼疮，亚甲炎，皮肤型狼疮，亚甲炎，MDS 北大化学院，医学部免疫系，微生物所北大化学院，医学部免疫系，微生物所6.转化的艺术转化的艺术科研的长青树科研的长青树 故事更完整，更延续故事更完整，更延续 怎样选题（二）不做重复性选题！提出问题比解决问题更重要404.学学习习班班/学学术术会会议议和交流可激和交流可激发发灵感，早期了解怎灵感，早期了解怎样选题样选题（二（二41414242选题举例SLE:美罗华对美罗华对SLE/SS血小板减少的治疗作用血小板减少的治疗作用 肾小管判定方法肾小管判定方法-抗碳酸酐酶抗碳酸酐酶2抗体抗体 SLE强化治疗强化治疗RA:RA发病危险因素的分析发病危险因素的分析 HCQ在早期在早期RA治疗中的作用治疗中的作用 MRI在在RA治疗效果判定中的价值治疗效果判定中的价值SS:口腔口腔Shirmers试验在试验在SS诊断中意义诊断中意义 M3M3多肽多肽抗体在抗体在SS诊断中价值的研究诊断中价值的研究 43选题举选题举例例SLE:美美罗华对罗华对SLE/SS血小板减少的治血小板减少的治疗疗作作临床研究方法 1.随机随机：性别、年龄、病程、用药性别、年龄、病程、用药(激素、激素、DMARD)化验（化验（ANA）2.客观客观：真实性。客观的数据更可信真实性。客观的数据更可信 （低阳性率、低疗效等）（低阳性率、低疗效等）百忧解治疗风湿病合并抑郁的研究百忧解治疗风湿病合并抑郁的研究 14例（例（SLE,RA,OA,AS等共等共11种）种）例数例数 药物药物 第一周第一周 第四周第四周 激素组激素组 14 强的松强的松 20mg/d 10mg/d 14 扶他林扶他林 150mg/d 50mg/d 对照组对照组 14 强的松强的松 20mg/d 15mg/d 14 扶他林扶他林 150mg/d 100mg/d44临临床研究方法床研究方法 1.随机：性随机：性别别、年、年龄龄、病程、用、病程、用药药(激素、激素、DM3.资料的积累资料的积累 临床为基础临床为基础 疑难病症及现象（病例登记）疑难病症及现象（病例登记）善于提出问题的意识善于提出问题的意识 在重复中求变异，在个别中求规律在重复中求变异，在个别中求规律453.资资料的料的积积累累454.4.资料资料/数据的利用数据的利用(1)充分利用充分利用 及临床特征的关系及临床特征的关系 AnuA阳性阳性 及其他实验室指标的关系及其他实验室指标的关系 其他自身抗体阴性时其他自身抗体阴性时AnuA的阳性率的阳性率(2)正确处理正确处理/对比对比RA表现及冠心病的关系表现及冠心病的关系有冠心病有冠心病（N=34）无冠心病无冠心病(N=926)PRA表现表现 关节疼痛数目关节疼痛数目8.38.77.89.80.780 关节肿胀数目关节肿胀数目5.27.75.06.80.856 皮下结节数目皮下结节数目5290.005 ESR（mm/h）61.329.144.630.60.006（3）统计处理统计处理 P 0.05，P 0.01 具有重要意义具有重要意义464.资资料料/数据的利用数据的利用(1)充分利用充分利用 有冠心病无冠心有冠心病无冠心常见风湿病的大样本流行病学调查常见风湿病的大样本流行病学调查 A cross-sectional study,2009 Peoples Hospital,Peking University47常常见风见风湿病的大湿病的大样样本流行病学本流行病学调查调查47流行病学研究流行病学研究门头沟门头沟区区48流行病学研究流行病学研究门头门头沟区沟区48注重观察身边的一点一滴注重观察身边的一点一滴小规模流调，从点到面小规模流调，从点到面49注重注重观观察身察身边边的一点一滴小的一点一滴小规规模流模流调调，从点到面，从点到面495050 5.真实真实（1）可信度增加可信度增加（2）可引出进一步研究和探索：可引出进一步研究和探索：dsDNA抗体阳性率低抗体阳性率低 方法学比较方法学比较 SSB抗体阳性率低抗体阳性率低 -FA-FA M3受体抗体受体抗体 联合检测联合检测 51 51Fib-RAMCV-RACit-CII-RA-GPI-SLEAECA-BDTCVSLE抗原变构肽抗原变构肽RA免疫净化免疫净化SS强化治疗强化治疗SLECTX小冲击小冲击SLELefRA 11/43(国际为主国际为主)危重危重/疑难集中的学科之一疑难集中的学科之一45张床张床使用率使用率门诊门诊/住院逐年递增住院逐年递增外地患者外地患者50%-67%诊断方法诊断方法危重疑难危重疑难门诊门诊/住院人数住院人数临床药物临床药物研究研究治疗方法治疗方法外地患者外地患者科研临床的动力52Fib-RATCVSLE 11/43危重危重/疑疑难难集中的学集中的学 感悟科研；感悟科研；提出问题比解决问题更重要；提出问题比解决问题更重要；临床科研思维及研究方法。临床科研思维及研究方法。53 感悟科研；感悟科研；53 在认识上提高在认识上提高 科研是医疗水平提高的前提科研是医疗水平提高的前提 从点滴做起从点滴做起 临床资料的积累及思考临床资料的积累及思考 (建立试验方法，病例登记）建立试验方法，病例登记）在探索中进步在探索中进步 做有作为的医师做有作为的医师(医疗科研医疗科研)追求 进步 成功 学术是前提临床科研（研究）的意义临床科研（研究）的意义54 追求追求 进进步步 成成临床临床+科研科研55临临床床+科研科研55谢谢56谢谢谢谢56Thank You世界触手可及世界触手可及携手共携手共进，齐创精品工程精品工程Thank You世界触手可及携手共世界触手可及携手共进进，齐创齐创精品工程精品工程