抗核抗体检测及临床意义ppt课件

风湿免疫性疾病诊断方法风湿免疫性疾病诊断方法症状、体征症状、体征自身抗体自身抗体影像学检查影像学检查病理病理抗核抗体检测及临床意义课件2风湿免疫性疾病诊断方法抗核抗体检测及临床意义课件2风湿免疫性疾病相关自身抗体风湿免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（抗核抗体谱（ANAsANAs）类风湿关节炎相关抗体类风湿关节炎相关抗体(RF,(RF,抗抗CCPCCP等等)抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAANCA）抗自身免疫性肌炎谱抗自身免疫性肌炎谱自身免疫性肝病相关抗体谱自身免疫性肝病相关抗体谱抗磷脂抗体谱抗磷脂抗体谱抗核抗体检测及临床意义课件3风湿免疫性疾病相关自身抗体抗核抗体谱（ANAs）抗核抗体检测抗核抗体谱检测的意义抗核抗体谱检测的意义有助于弥漫性结缔组织病弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体；抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体；抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体抗核抗体检测及临床意义课件4抗核抗体谱检测的意义有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断抗核抗基本概念基本概念ANA荧光核型荧光核型ANAs中的常见抗体中的常见抗体抗核抗体检测及临床意义课件5基本概念抗核抗体检测及临床意义课件5抗核抗体抗核抗体自身抗体自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体ANAANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱。ANAANA新概念新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体总称某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)抗核抗体检测及临床意义课件6抗核抗体自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体抗核ANAANA检测方法检测方法-IIF-IIF法法ANAANA滴度滴度ANAANA核型核型抗核抗体检测及临床意义课件7ANA检测方法-IIF法ANA滴度抗核抗体检测及临床意义课件ANAANA滴度的意义滴度的意义结缔组织病的粗筛（1:160）阳性标本还需进一步识别感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性ANA阴性基本可以除外SLEANA滴度与疾病活动性无明确相关性抗核抗体检测及临床意义课件8ANA滴度的意义结缔组织病的粗筛（1:160）抗核抗体检测荧光显微镜下荧光显微镜下ANAANA的染色型别的染色型别均质型（均质型（H H）核膜型（核膜型（M)M)斑点型（斑点型（S S）核仁型（核仁型（N N）着丝点型（着丝点型（ACAACA）胞浆型（胞浆型（C C）混合型混合型抗核抗体检测及临床意义课件9荧光显微镜下ANA的染色型别均质型（H）抗核抗体检测及临床意 均均 质质 型型 (H)抗抗组蛋白组蛋白抗抗ds/ssDNAds/ssDNA抗抗核小体核小体主要出现在主要出现在SLESLE中中抗核抗体检测及临床意义课件10均质型(H均均 质质 型型 (H)抗核抗体检测及临床意义课件11均质型(H)抗核抗体检测及临床意义课件11核膜核膜 型型(M)主要与抗主要与抗dsDNAdsDNA有关有关与与抗原底物片固定方法和备制过程抗原底物片固定方法和备制过程有关有关出现在出现在SLESLE中中部分与抗核包膜蛋白有关部分与抗核包膜蛋白有关抗板层素抗板层素抗抗gp210gp210 出现在出现在PBCPBC中中抗核抗体检测及临床意义课件12核膜型(M)主要与抗dsDNA有关抗核抗体检测及临床核膜核膜 型型(M)抗核抗体检测及临床意义课件13核膜型(M)抗核抗体检测及临床意义课件13与抗与抗ENAENA成分有关成分有关 抗抗SmSm 抗抗RNPRNP 抗抗SS-ASS-A 抗抗SS-BSS-B出现在出现在SLESLE、MCTDMCTD、pSSpSS、SScSSc、PM/DMPM/DM等等 斑斑 点点 型型 (S)抗核抗体检测及临床意义课件14与抗ENA成分有关斑点型(S)抗核抗体检测斑斑 点点 型型 (S)抗核抗体检测及临床意义课件15斑点型(S)抗核抗体检测及临床意义课件15与抗与抗核仁蛋白核仁蛋白有关有关 抗抗Scl-70Scl-70 抗抗RNARNA多聚酶多聚酶I I 抗抗PM-SclPM-Scl出现在出现在SScSSc中中核核 仁仁 型型 (N)抗核抗体检测及临床意义课件16与抗核仁蛋白有关核仁型(N)抗核抗体检测及临床核核 仁仁 型型 (N)抗核抗体检测及临床意义课件17核仁型(N)抗核抗体检测及临床意义课件17与抗与抗着丝点着丝点染色质有关染色质有关 存在于有丝分裂期存在于有丝分裂期出现在出现在SScSSc、CRESTCREST综合征等综合征等中中着着 丝丝 点点 型型(ACA)抗核抗体检测及临床意义课件18与抗着丝点染色质有关着丝点型(ACA)抗核着着 丝丝 点点 型型(ACA)抗核抗体检测及临床意义课件19着丝点型(ACA)抗核抗体检测及临床意义课与抗与抗胞浆成分胞浆成分有关有关抗抗核糖体核糖体P P蛋白（蛋白（rRNPrRNP）：出现在：出现在SLESLE中中抗抗合成酶合成酶：Jo-1Jo-1、PL-12PL-12、PL-7PL-7、OJOJ、EJEJ抗抗信号识别颗粒（信号识别颗粒（SRP)SRP)抗抗线粒体线粒体：出现在：出现在PBCPBC中中抗高尔基体抗高尔基体抗溶酶体抗溶酶体等等等等 胞胞 浆浆 型型(C)见于见于PM/DMPM/DM抗核抗体检测及临床意义课件20与抗胞浆成分有关胞浆型 胞胞 浆浆 型型 (C)抗核抗体检测及临床意义课件21胞浆型(C)抗核抗体检测及临床意义课件ANAANA荧光核型小结荧光核型小结均质型（均质型（H H）：）：像大饼，像大饼，SLESLE相关相关核膜型（核膜型（M)M)：像圈圈，像圈圈，SLESLE相关相关斑点型（斑点型（S S）：）：像藕片，抗像藕片，抗ENAENA核仁型（核仁型（N N）：）：像纽扣，像纽扣，SDSD相关相关着丝点型（着丝点型（ACAACA）：）：像满天星，抗像满天星，抗ACAACA胞浆型（胞浆型（C C）：）：像空心大饼像空心大饼,SLE PM/DM PBC,SLE PM/DM PBC相关相关混合型：混合型：稀释后检测有助于区分稀释后检测有助于区分抗核抗体检测及临床意义课件22ANA荧光核型小结均质型（H）：像大饼，SLE相关抗核抗体检抗核抗体谱抗核抗体谱（ANAs）ANAsANAs抗核不溶成分抗核不溶成分抗核可溶成分抗核可溶成分（抗（抗ENA）抗染色体抗染色体DNADNA蛋白蛋白抗核仁抗体抗核仁抗体 抗抗DNADNA抗体抗体 抗核小体抗体抗核小体抗体 抗组蛋白抗组蛋白 H1,H2A,H2B,H3,H4 抗抗Sm,USm,U1 1RNP,SSA,SSBRNP,SSA,SSB抗抗Scl-70,Jo-1Scl-70,Jo-1,PM-1,PM-1抗抗rRNPrRNP,PCNA.,PCNA.dsDNAdsDNAssDNAssDNA抗着丝点抗体抗着丝点抗体（ACA)ACA)抗抗5sRNA5sRNA抗核抗体检测及临床意义课件23抗核抗体谱（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗DNA抗体抗S抗抗dsDNA检测方法检测方法以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)：1:5短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。优点：特异性好 抗核抗体检测及临床意义课件24抗dsDNA检测方法以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法抗抗dsDNA检测方法检测方法酶联免疫吸附法（ELISA）:100IU/ml100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强 放射免疫法(Farr):20%优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响蛋白印迹法（WBWB）缺点：dsDNAdsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,ssDNA,导致假阳性结果不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果：everything is possible 至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。如：IIF法+ELISA法 抗核抗体检测及临床意义课件25抗dsDNA检测方法酶联免疫吸附法（ELISA）:100抗核抗体检测及临床意义课件26抗核抗体检测及临床意义课件26抗核抗体检测及临床意义课件27抗核抗体检测及临床意义课件27抗抗dsDNAdsDNA抗体临床意义抗体临床意义SLE 的血清特异性抗体多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90 可用于SLE 疾病活动期判断药物疗效观察与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关抗核抗体检测及临床意义课件28抗dsDNA抗体临床意义SLE的血清特异性抗体抗核抗体检测抗核抗体检测及临床意义课件29抗核抗体检测及临床意义课件29抗组蛋白抗体（AHA）（酶联免疫吸附法X2SD)可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性SLE：50%活动期SLE 可达90.2%与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性药物性狼疮（DIL）：90%如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL其他结缔组织病：23-30%如：RA、PBC、SSc等 抗核抗体检测及临床意义课件30抗组蛋白抗体（AHA）（酶联免疫吸附法X2SD)可出现核小体是真核细胞染色质的基核小体是真核细胞染色质的基本复制单位，由组蛋白与本复制单位，由组蛋白与DNA组成。组成。参与参与SLE发病机制：发病机制：多克隆多克隆B细胞活化剂细胞活化剂产生产生ANuA，先于其他，先于其他ANA促进抗促进抗dsDNA与与AHA形成形成参与参与LN的发生的发生 抗核小体抗体（ANuA）抗核抗体检测及临床意义课件31抗核小体抗体（ANuA）抗核抗体检测及临床抗核小体抗体临床意义SLE标记性/高特异性自身抗体 敏感性：58%-66%（优于抗dsDNA及抗Sm）特异性：98%-100%（与抗dsDNA相当）用于SLE的早期诊断 ANuA 的产生早于抗dsDNA、AHA 抗dsDNA阴性者有1/41/2 ANuA阳性与LN相关，用于SLE疾病活动性监测抗核抗体检测及临床意义课件32抗核小体抗体临床意义抗核抗体检测及临床意义课件32ANuA、抗dsDNA、AHA联合检测意义抗核抗体检测及临床意义课件33ANuA、抗dsDNA、AHA联合检测意义抗核抗体检测及临床抗抗ENAENA抗体抗体 extractable nuclear antigen 可提取性核抗原成分：核酸与核蛋白，不含染色质成分功能：参与细胞内DNA复制、RNA转录、蛋白翻译 合成来源：无种属差异，有组织不均一性理化特性：对温度和RNA酶敏感（U1RNP、SS-A）意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的 一簇抗体，与疾病活动性大多无相关抗核抗体检测及临床意义课件34抗ENA抗体extractablenuclearan 抗抗ENAENA抗体检测方法抗体检测方法免疫双扩散法(ID)对流免疫电泳法(CIE)免疫印迹法(IBT)酶联免疫吸附法(ELISA)蛋白芯片（Protein chip）抗核抗体检测及临床意义课件35抗ENA抗体检测方法免疫双扩散法(ID)抗核抗体检测及 抗抗SmSm抗体与抗抗体与抗U1RNPU1RNP抗体抗体靶抗原：位于细胞核内的一组含尿嘧啶丰富的核糖核蛋白，Sm和U1RNP是同一分子复合物中的不同位点抗核抗体检测及临床意义课件36抗Sm抗体与抗U1RNP抗体靶抗原：位于细胞核内的一组抗抗SmSm抗体与抗抗体与抗U1RNPU1RNP抗体抗体抗Sm：SLE的标记性抗体，是前瞻性及回顾性诊断的指标。阳性率低：SLE（30%）抗U1RNP：多种CTD均可出现，与手指肿胀、雷诺现象、肌炎、指端硬化等相关，但肾炎发生率低。阳性率：40-60%，其中SLE(30-40%),SSc(14%),pSS(12%),PM/DM(15%)高滴度抗U1RNP+抗Sm-MCTD抗U1RNP+抗Sm+SLE抗U1RNP-抗Sm+实验室误差?U1RNP丢失?抗核抗体检测及临床意义课件37抗Sm抗体与抗U1RNP抗体抗Sm：SLE的标记性抗体，是前抗抗rRNPrRNP抗体抗体靶抗原：胞浆中60S核糖体大亚基上的磷酸化蛋白 抗核抗体检测及临床意义课件38抗rRNP抗体靶抗原：胞浆中60S核糖体大亚基上的磷酸化蛋白抗抗rRNPrRNP抗体抗体SLE的高度特异性抗体，与SLE脑病相关常在SLE活动期存在,但不会随病情的缓解立即消失,可持续1-2年后才转阴。阳性率：24%可出现在SLE 早期（ANA及抗dsDNA阴性）抗核抗体检测及临床意义课件39抗rRNP抗体SLE的高度特异性抗体，与SLE脑病相关抗核抗抗抗SSASSA与抗与抗SSBSSB抗体抗体靶抗原：位于同一小分子核糖核蛋白上的相邻结构 在不同的细胞周期，在细胞内的定位不同 （细胞核内和胞浆中均可存在）pSS的SS-A存在于细胞核内 SLE的SS-A存在于胞浆中 SS-B主要位于细胞核内45KD 47KD48KD抗核抗体检测及临床意义课件40抗SSA与抗SSB抗体靶抗原：位于同一小分子核糖核蛋白上的相抗抗SSASSA与抗与抗SSBSSB抗体抗体抗SS-A：结缔组织病中出现频率最高的抗体（60 -75%），见于pSS（75%）SLE（25%）RA（10%）SSc（24%）PBC（20%）等抗SSB：常与抗SSA相伴出现，诊断pSS更特异，见于 pSS（40%）、SLE（10%）临床意义：与新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞、平 滑肌受累、光过敏、血管炎、皮损、紫癜、淋巴结肿大、WBC减少有关ANA阴性的SCLE：常为抗SSA 抗体阳性。抗核抗体检测及临床意义课件41抗SSA与抗SSB抗体抗SS-A：结缔组织病中出现频率最高抗核抗体检测及临床意义课件42抗核抗体检测及临床意义课件42抗核抗体检测及临床意义课件43抗核抗体检测及临床意义课件43抗抗Jo-1Jo-1抗体抗体(抗抗PL-1PL-1抗体抗体)靶抗原：组氨酸tRNA合成酶 胞浆中的磷酸蛋白抗核抗体检测及临床意义课件44抗Jo-1抗体(抗PL-1抗体)靶抗原：组氨酸tRNA合成酶抗抗Jo-1Jo-1抗体抗体(抗抗PL-1PL-1抗体抗体)PM/DM的标记抗体，阳性率20-30%抗体效价与疾病活动性相关抗Jo-1抗体综合征：急性发热,对称性关节炎,技工手,雷诺现象,肌炎（相对轻）,肺间质病变 其他抗合成酶抗体：抗PL-7PL-7、抗PL-12PL-12、抗OJOJ、抗EJEJ抗核抗体检测及临床意义课件45抗Jo-1抗体(抗PL-1抗体)PM/DM的标记抗体，阳性率抗抗ScL-70ScL-70抗体抗体靶抗原：DNA拓朴异构酶I的降解产物 主要存在核仁中SSc的标记抗体，阳性率20-30%多见于dSSc，病情进展快，提示预后不良与ILD、弥漫性皮肤硬化有关，而PAH少见抗核抗体检测及临床意义课件46抗ScL-70抗体靶抗原：DNA拓朴异构酶I的降解产物抗核抗主要靶抗原：着丝点蛋白-B多见于ISSc，病程缓慢，提示预后较好CREST综合征：软组织钙化（C）,雷诺现象（R）,食道功能障碍（E）,指端硬化（S）,毛细血管扩张（T），但并非标记抗体，也见于孤立性雷诺现象、SS、PBC、AIH等国外文献：与PAH相关，而ILD少见 中国人群：未发现与PAH相关，但ILD少见白伊娜，王迁等.中国系统性硬化症患者硬皮病相关自身抗体的检测及其临床意义.中华微生物学和免疫学杂志.2011（5）:452-455.抗着丝点抗体抗着丝点抗体(ACA)抗核抗体检测及临床意义课件47主要靶抗原：着丝点蛋白-B白伊娜，王迁等.中国系统性硬化症患Take Home MassageTake Home MassageANA荧光核型光核型对抗体性抗体性质范范围有一定提示作用，有一定提示作用，尤尤其其在靶抗原阴性在靶抗原阴性时。ANA阴阴性性而而靶靶抗抗原原阳阳性性主主要要见于于抗抗胞胞浆成成分分抗抗体体，如：如：SS-A、Jo-1、rRNP、线粒体等。粒体等。抗抗核仁核仁型抗体常与型抗体常与SSc有关。有关。抗抗均均质型或型或核膜核膜型抗体常与型抗体常与SLE有关。有关。抗核抗体检测及临床意义课件48TakeHomeMassageANA荧光核型对抗体性质范Take Home MassageTake Home Massage抗抗dsDNA：SLE特异性抗体特异性抗体，与，与LN及疾病活及疾病活动度度 有关，至少有关，至少两种方法两种方法联合合检测（如：（如：IIF法法+ELISA法）。法）。抗核小体抗核小体、抗抗组蛋白蛋白、抗抗dsDNA三抗体阳性者三抗体阳性者强烈烈 提示增殖性提示增殖性LN。与疾病活与疾病活动性相关的抗体：性相关的抗体：抗抗dsDNA、抗核小体、抗核小体、抗抗组蛋白、抗蛋白、抗Jo-1、抗、抗rRNP与与预后相关的抗体：后相关的抗体：抗Scl-70（差）、ACA（好）抗核抗体检测及临床意义课件49TakeHomeMassage抗dsDNA：SLE特异性案例1女性，34岁游走性多关节痛，雷诺现象半年RF 56U/L；抗CCP抗体阴性；ANA 1：320胸部CT：轻度肺间质病变诊断？治疗？（核仁型）UCTD ILD 发展为 SSc可能性大Pred+CTX抗核抗体检测及临床意义课件50案例1女性，34岁（核仁型）UCTDILD发展为S案例2男性，50岁双腕关节炎、雷诺现象半年ANA全套：阴性；抗CCP、RF：阴性胸部CT：轻度肺间质病变 右腕关节MRI：骨髓水肿和滑膜炎诊断？复查：ANA阴性，抗Jo-1弱阳性诊断：抗Jo-1抗体综合征Pred+T抗核抗体检测及临床意义课件51案例2男性，50岁复查：ANA阴性，抗Jo-1弱阳性抗核抗体案例3女性 32岁 手指关节痛2月 ANA（+）S1:80 抗SSA（+）135 抗Ro52（+）110三大常规正常；ESR CRP 正常；补体正常；RF 87IU/ml；诊断？治疗？抗核抗体检测及临床意义课件52案例3女性32岁手指关节痛2月抗核抗体检测及临床意义课CTD SLE待随诊，重用HCQ抗核抗体检测及临床意义课件53CTDSLE待随诊，重用HCQ抗核抗体检测及临床意义课件案例4女性，40岁4年前多浆膜腔积液、低补体血症、ANA 1：320、抗SS-A+、抗SS-B+，诊断为“系统性红斑狼疮可能性大”，予“pred+CTX”治疗好转后“pred 10mg qod +HCQ”维持。15天前新发面部皮疹（丘疹鳞屑型）、脱发；尿常规：PRO 阴性；尿四蛋白：轻度增高；补体下降（C3 50mg/dl C4 7.4mg/dl）；抗dsDNA（IF）1：320 抗核小体+抗组蛋白+；诊断？治疗？SLE，SLEDAI 8分，pred1mg/kg/day+CTX抗核抗体检测及临床意义课件54案例4女性，40岁SLE，SLEDAI8分，pred1m案例5女，28岁，面部红斑，尿蛋白（+）；ANA 1:1280H；抗dsDNA（IF/ELISA）：1:40/800；C3 40mg/dl C4 6mg/dl；诊断？治疗？治疗半年后蛋白尿（+）；ANA1:320H；抗dsDNA（IF/ELISA）：1:20/400；C3 66mg/dl C4 8mg/dl；治疗？治疗1年后蛋白尿（-）；ANA1:160H；抗dsDNA（IF/ELISA）：阴性/250；C3 86mg/dl C4 12mg/dl；治疗？抗核抗体检测及临床意义课件55案例5女，28岁，面部红斑，尿蛋白（+）；抗核抗体检测及Thanks抗核抗体检测及临床意义课件56Thanks抗核抗体检测及临床意义课件56此课件下载可自行编辑修改，供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！抗核抗体检测及临床意义课件57此课件下载可自行编辑修改，供参考！抗核抗体检测及临床意义课件