染色体病诊断技术课件

染色体病的诊断技术一、人类染色体的形态二、染色体畸变三、常染色体病诊断技术四、性染色体病诊断技术五、荧光原位杂交技术染色体病的诊断技术一、人类染色体的形态1一、人类染色体的形态1、染色体标本的制备2、染色体的形态3、染色体的分组一、人类染色体的形态1、染色体标本的制备21、染色体标本的制备（1）取材）取材n n外周血淋巴细胞外周血淋巴细胞n n骨髓细胞骨髓细胞n n羊水细胞羊水细胞n n绒毛膜细胞绒毛膜细胞n n皮肤成纤维细胞皮肤成纤维细胞n n癌肿细胞癌肿细胞n n进入母体循环的胎儿淋巴细胞进入母体循环的胎儿淋巴细胞(1/5 000-1/20 000)(1/5 000-1/20 000)n n妊娠妊娠12-1612-16周周,18ml,18ml母血中可收集到母血中可收集到1-221-22个胎儿有核个胎儿有核RBCRBC1、染色体标本的制备（1）取材3(2)制备的关键步骤(2)制备的关键步骤4Fig 7.1 Preparation of cells for cytological analysisFig 7.1 Preparation of cells for cytological analysis 2003 John Wiley and Sons PublishersFig 7.1 Preparation of cells 5染色体病诊断技术课件6染色体病诊断技术课件7染色体病诊断技术课件82、染色体的形态2、染色体的形态92、染色体的形态(1)秋水仙素中期染色体n n染色单体（染色单体（chromatid)chromatid)n n着丝粒着丝粒(centromere)(centromere)n n短臂短臂(short arm)(short arm)n n长臂长臂(long arm)(long arm)n n随体随体(satellite)(satellite)n n次级缢痕次级缢痕(secondary constriction)(secondary constriction)n n端粒（端粒（telomere)telomere)(TTAGGG)(TTAGGG)n n n=2-3x10 n=2-3x104 42、染色体的形态(1)秋水仙素中期染色体102、染色体的形态(2)三种染色体类型:n n中着丝粒染色体中着丝粒染色体 (metacentric chromosom)(metacentric chromosom)n n亚中着丝粒染色体亚中着丝粒染色体 (submetacentric chromosome)(submetacentric chromosome)n n近端着丝粒染色体近端着丝粒染色体 (acrocentric chromosome)(acrocentric chromosome)2、染色体的形态(2)三种染色体类型:113、染色体的分组（1）染色体分组指标：染色体分组指标：n n相对长度（Relative length)=n n臂比率(arm ratio)=n n着丝粒指数(centromere index)=n n有无随体(with or without satellite)3、染色体的分组（1）染色体分组指标：12（2）染色体的分组）染色体的分组各组染色体对数为:3 2 7 3 3 2 2+性染色体 A B C D E F G（2）染色体的分组各组染色体对数为:3 2 7 3 13返回返回返回返回14返回返回15（3）正常男女核型（karyotype)n n核型(karyotype)个体体细胞的染色体组成。n n核型分析（karyotyping)用显微摄影或显微描绘的方法得到单个细胞中所有的染色体，并按照编号顺序系统地排列。（3）正常男女核型（karyotype)核型(karyoty16（3）正常男女核型）正常男女核型(karyotype)正常男性核型：46,XY正常女性核型：46,XX（3）正常男女核型(karyotype)正常男性核型：4174、显带技术的命名和书写(1)染色体带的描述：染色体带的描述：n n界标（landmark)n n区(region)n n带(band)n n亚带(sub-band).4、显带技术的命名和书写(1)染色体带的描述：184、显带技术的命名和书写(2)书写方式书写方式:染色体号数、臂的符号、区号、带号、亚带号、亚亚带号例如：2p13 2q31 21q22.124、显带技术的命名和书写(2)书写方式:19染色体病诊断技术课件20二、染色体畸变（chromosome aberration)（一）染色体畸变的原因（二）染色体畸变的类型（三）人类染色体畸变的国际命名体制(An International System for human Cytogenetic Nomenclature,ISCN)二、染色体畸变（chromosome aberration)21（一）染色体畸变的原因1 1、环境因素：、环境因素：、环境因素：、环境因素：（1 1）化学诱变）化学诱变）化学诱变）化学诱变药物、农药、工业毒物、食品添加剂、霉菌毒素药物、农药、工业毒物、食品添加剂、霉菌毒素（2 2）射线诱变）射线诱变）射线诱变）射线诱变X X射线、射线、射线、射线、粒子、粒子、粒子、中子粒子、中子（3 3）病毒诱变）病毒诱变）病毒诱变）病毒诱变SV40SV40病毒、病毒、RousRous肉瘤病毒肉瘤病毒2 2 2 2、遗传因素、遗传因素、遗传因素、遗传因素：母亲年龄母亲年龄（一）染色体畸变的原因1、环境因素：22（二）染色体畸变的类型1、数目畸变(numerical aberration)2、结构畸变(structural aberration)（二）染色体畸变的类型1、数目畸变(numerical ab231、染色体数目畸变（1）染色体数目畸变的原因（2）染色体数目畸变的类型（a）整倍体（euploid)（b）非整倍体(aneuploid)（c）嵌合体(mosaic)1、染色体数目畸变（1）染色体数目畸变的原因24(1)数目畸变的原因最常见原因为染色体不分离(1)数目畸变的原因最常见原因为染色体不分离25（2）染色体数目畸变的类型（a）整倍体）整倍体(euploid)正常人：体细胞染色体数目为46条（2n）,称为二倍体二倍体（diploid)配子细胞染色体数目为23条（n）,称为单倍体单倍体（haploid）若细胞的染色体数目以n为基数成倍的增加，则称为整倍体整倍体。（2）染色体数目畸变的类型（a）整倍体(euploid)26整倍体细胞表现为多倍体多倍体(polyploid）染色体数目3n如：三倍体三倍体（triploid）69，XXY 四倍体四倍体（tetraploid)92,XXYY多倍体一般不能存活，多倍体细胞多见于肿瘤细胞或流产儿细胞。整倍体细胞表现为多倍体(polyploid）27返回69,XXY返回69,XXY2892,XXYY返回92,XXYY返回29（b）非整倍体(aneuploid)超二倍体超二倍体(hyperdiploid)（2n+x）指一个细胞中的染色体数目增加了一个或数个。指一个细胞中的染色体数目增加了一个或数个。如如4747，XXXX，+21+21（2121三体）三体）47 47，XXYXXY 亚二倍体亚二倍体(hypodiploid)(2n-x)指一个细胞中的染色体数目减少了一个或数个。指一个细胞中的染色体数目减少了一个或数个。如如4545，XYXY，-21-21（2121单体）单体）45 45，X0X0 假二倍体假二倍体(pseudodiploid)(2n+x-y,x=y)指指某某对对染染色色体体减减少少一一个个，同同时时另另一一对对染染色色体体又又增增加加 一一个个，染色体的总数不变，这种情况称为假二倍体。染色体的总数不变，这种情况称为假二倍体。如如4646，XYXY，-18-18，+21+21（b）非整倍体(aneuploid)超二倍体(hyper30（c）嵌合体(mosaic)嵌合体嵌合体:一个个体内同时有两种或两种以上不同核型的细胞系。产生原因产生原因:在受精卵的卵裂过程中及胚胎发育早期的细胞分裂过程中发生染色体不分离现象，使一个胚胎的部分细胞发生染色体的数目畸变，形成一个个体具有几种不同核型的细胞系。如45,X/46,XX/47,XXX（c）嵌合体(mosaic)嵌合体:一个个体内同时有两种或两312.结构畸变（structural aberration）染色体结构畸变染色体结构畸变:指染色体发生断裂(breakage)和再接合（reunion)而形成各种类型重组的结果。染色体结构畸变的类型染色体结构畸变的类型：（1）缺失(deletion,del)（2）重复(duplication,dup)（3）倒位(inversion,inv)（4）易位(translocation,t)（5）环形染色体(ring chromosome,r)（6）等臂染色体(isochromosome,i)2.结构畸变（structural aberration）32(1)缺失(deletion,del)指染色体臂的部分丢失。n n末端缺失末端缺失：染色体的长臂或短臂发生一次断裂，缺失了末端节段。n n中间缺失中间缺失：染色体的长臂或短臂内发生了两次断裂，两断裂面之间的断片脱离后两断裂面又重新结合。(1)缺失(deletion,del)指染色体臂的部分丢失33染色体病诊断技术课件34（2）重复(duplication,dup)重复重复：是指同源染色体中一条断裂后，其断片连接到另一条同源染色体上的相应部位，或是由同源染色体间的不等交换，结果一条同源染色体上部分基因重复了，而另一条同源染色体则相应缺失了。（2）重复(duplication,dup)重复：是指同源染35返回返回36(3)倒位(inversion,inv)倒位倒位：染色体发生两处断裂后，中间的断片倒转180度后又重新连接。臂内倒位臂内倒位：(paracentric inversion)系指倒位部分不包括着丝粒而仅限于一臂之内。臂间倒位臂间倒位：(pericentric inversion)系指倒位部分包括着丝粒。(3)倒位(inversion,inv)倒位：染色体发生两处37染色体病诊断技术课件38（4）易位(translocation,t)广义的易位广义的易位系指染色体的节段位置发生改变，即一条染色体断裂后其片段接到同一条染色体的另一处或接到另一条染色体上去。狭义的狭义的易位易位系指两条染色体之间的相互易位。即两条染色体都发生断裂，相互交换断片后又重新接合，形成两条新的易位染色体。（4）易位(translocation,t)广义的易位系指染39返回返回40罗伯逊易位(Robertsonian translocation,rob)罗伯逊易位罗伯逊易位：是一种涉及两条近端着丝粒的易位类型，其断裂发生在着丝粒部位或着丝粒附近，整个染色体臂发生了相互易位，形成两个中着丝粒染色体。其中由染色体短臂形成的小染色体往往丢失。罗伯逊易位(Robertsonian translocati41返回返回42(5)环形染色体(ring chromosome,r)环形染色体环形染色体：由于断裂发生在染色体两个臂的远端,随后这两臂的断裂端彼此粘着形成环形结构。(5)环形染色体(ring chromosome,r)环形43返回返回44（6）等臂染色体(isochromosome,i)等臂染色体等臂染色体：系指染色体的两臂带有相等的遗传信息。（6）等臂染色体(isochromosome,i)等臂染色45返回返回463、人类染色体畸变的国际命名体制(ISCN)(1)常用符号和缩写术语(2)非显带染色体畸变核型书写规则：染色体总数，性染色体类型及畸变，常染色体畸变(3)显带染色体畸变核型的书写规则（繁式，简式）3、人类染色体畸变的国际命名体制(ISCN)(1)常用符号和47注：符号书写次序，染色体总数，性染色体类型或畸变，常染色注：符号书写次序，染色体总数，性染色体类型或畸变，常染色体畸变情况。体畸变情况。注：符号书写次序，染色体总数，性染色体类型或畸变，常染色体畸48染色体病诊断技术课件49染色体病诊断技术课件50染色体病诊断技术课件51染色体病诊断技术课件52三、常染色体病诊断（一）常用的显带技术（一）常用的显带技术（二）常染色体病诊断（二）常染色体病诊断三、常染色体病诊断（一）常用的显带技术53（一）常用显带技术（一）常用显带技术54a)Q带带(QFQ)b)G带带(GTG)a)Q带(QFQ)b)G带(GTG)55c)R带带(RHG)d)C带带(CBG)c)R带(RHG)d)C带(CBG)56染色体显带技术的选用染色体显带技术的选用染色体畸变带型选用理由QGRCX畸变+与C组鉴别，识别异常Y畸变+Yq明亮Q带，C带识别染色质区三体性+识别额外染色体CML ph1(22q)+21q大带，22q小带易位和大的缺失+识别断裂点小的末端缺失和有些易位 +R带末端一般有深带，便于识别近末端断裂点及变异区异常着丝粒区 +识别着丝粒区减数分裂异常配对或异常结构+Q带和G带类似体细胞，C带识别着丝粒区近端着丝粒染色体随体和短臂变异+荧光亮度鉴别D组和C组的多态性环形和结构的异常+识别结构异常和着丝粒区染色体显带技术的选用染色体畸变带型选用理由QGRCX畸变+57e)高分辨高分辨G带带e)高分辨G带58(二)常染色体病诊断1 1、1q1q部分单体综合征部分单体综合征部分单体综合征部分单体综合征2 2、2p2p部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征3 3、3p 3p部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征4 4、4 4号环状染色体综合征号环状染色体综合征号环状染色体综合征号环状染色体综合征5 5、5p5p-综合征综合征综合征综合征6 6、6q 6q部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征部分三体综合征7 7、1313三体综合征三体综合征三体综合征三体综合征8 8、18p18p部分单体综合征部分单体综合征部分单体综合征部分单体综合征9 9、1818三体综合征三体综合征三体综合征三体综合征1010、2121三体综合征三体综合征三体综合征三体综合征(二)常染色体病诊断1、1q部分单体综合征591、1q部分单体综合征部分单体综合征（1）主要症状：）主要症状：生长发育迟缓，智力低下。眼距宽，生长发育迟缓，智力低下。眼距宽，内眦赘皮。塌鼻梁，鼻短，唇裂，小下颌。内眦赘皮。塌鼻梁，鼻短，唇裂，小下颌。耳低位、畸形。颈短，先天性心脏病耳低位、畸形。颈短，先天性心脏病（室间隔缺损，肺动脉瓣狭窄或闭锁；动脉导（室间隔缺损，肺动脉瓣狭窄或闭锁；动脉导管闭锁等）。生殖器异常，肌张力低，手脚管闭锁等）。生殖器异常，肌张力低，手脚短宽。短宽。其他：人中长，癫痫，尖叫的哭声其他：人中长，癫痫，尖叫的哭声1、1q部分单体综合征（1）主要症状：601、1q部分单体综合征部分单体综合征预后与防治：预后与防治：多在婴儿期死亡。应加强染色体多在婴儿期死亡。应加强染色体平衡易位携带者的婚、育指导，平衡易位携带者的婚、育指导，根据染色体检查可作出产前诊根据染色体检查可作出产前诊断。断。1、1q部分单体综合征预后与防治：611、1q部分单体综合征部分单体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XX,del(1)(q43qter)46,XX,del(1)(q42qter)1、1q部分单体综合征（2）核型：621、1q部分单体综合征部分单体综合征1、1q部分单体综合征631、1q部分单体综合征部分单体综合征1、1q部分单体综合征641、1q部分单体综合征部分单体综合征1、1q部分单体综合征652、2p部分三体综合征部分三体综合征（1 1）主要症状：）主要症状：）主要症状：）主要症状：生长发育迟缓，严重智力低下。小头，前额隆凸。生长发育迟缓，严重智力低下。小头，前额隆凸。生长发育迟缓，严重智力低下。小头，前额隆凸。生长发育迟缓，严重智力低下。小头，前额隆凸。眼距宽，内眦赘皮，眼球震颤，外眼角下斜，鼻眼距宽，内眦赘皮，眼球震颤，外眼角下斜，鼻眼距宽，内眦赘皮，眼球震颤，外眼角下斜，鼻眼距宽，内眦赘皮，眼球震颤，外眼角下斜，鼻根低平，蒜头鼻（鼻短），耳大，根低平，蒜头鼻（鼻短），耳大，根低平，蒜头鼻（鼻短），耳大，根低平，蒜头鼻（鼻短），耳大，耳低位、小下耳低位、小下耳低位、小下耳低位、小下颌，人中长。躯干长，胸骨畸形，肋骨畸形。男颌，人中长。躯干长，胸骨畸形，肋骨畸形。男颌，人中长。躯干长，胸骨畸形，肋骨畸形。男颌，人中长。躯干长，胸骨畸形，肋骨畸形。男性小阴茎，隐睾。性小阴茎，隐睾。性小阴茎，隐睾。性小阴茎，隐睾。其他：可有高鼻梁。腭裂，先天性心脏畸形其他：可有高鼻梁。腭裂，先天性心脏畸形其他：可有高鼻梁。腭裂，先天性心脏畸形其他：可有高鼻梁。腭裂，先天性心脏畸形2、2p部分三体综合征（1）主要症状：662、2p部分三体综合征部分三体综合征预后与防治：预后与防治：一般可活至儿童期早期，预后一般可活至儿童期早期，预后差，对携带者应加强婚、育指差，对携带者应加强婚、育指导，根据染色体检查可作出产前导，根据染色体检查可作出产前诊断。诊断。2、2p部分三体综合征预后与防治：672、2p部分三体综合征部分三体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XX,-16,+der(16),t(2;6)(p13;q11)pat46,XX,-17,+der(17),t(2;17)(p23;q25)pat2、2p部分三体综合征（2）核型：682、2p部分三体综合征部分三体综合征2、2p部分三体综合征692、2p部分三体综合征部分三体综合征2、2p部分三体综合征702、2p部分三体综合征部分三体综合征2、2p部分三体综合征712、2p部分三体综合征部分三体综合征2、2p部分三体综合征722、2p部分三体综合征部分三体综合征2、2p部分三体综合征733、3p部分三体综合征部分三体综合征（1 1）主要症状：）主要症状：）主要症状：）主要症状：小头，中度到重度智力低下。四方形大脸，前额小头，中度到重度智力低下。四方形大脸，前额小头，中度到重度智力低下。四方形大脸，前额小头，中度到重度智力低下。四方形大脸，前额隆凸。颞部凹陷，眼距宽，内眦赘皮，人中长而隆凸。颞部凹陷，眼距宽，内眦赘皮，人中长而隆凸。颞部凹陷，眼距宽，内眦赘皮，人中长而隆凸。颞部凹陷，眼距宽，内眦赘皮，人中长而凸起，鲤鱼嘴。小下颌，大耳，颈短，先天性心凸起，鲤鱼嘴。小下颌，大耳，颈短，先天性心凸起，鲤鱼嘴。小下颌，大耳，颈短，先天性心凸起，鲤鱼嘴。小下颌，大耳，颈短，先天性心脏病，消化道畸形。隐睾，小阴茎，指纹中斗纹脏病，消化道畸形。隐睾，小阴茎，指纹中斗纹脏病，消化道畸形。隐睾，小阴茎，指纹中斗纹脏病，消化道畸形。隐睾，小阴茎，指纹中斗纹多。多。多。多。其他：有的鼻梁扁宽，唇其他：有的鼻梁扁宽，唇其他：有的鼻梁扁宽，唇其他：有的鼻梁扁宽，唇/腭裂，小指内弯等。腭裂，小指内弯等。腭裂，小指内弯等。腭裂，小指内弯等。3、3p部分三体综合征（1）主要症状：743、3p部分三体综合征部分三体综合征预后与防治：预后与防治：预后差，多数在婴儿期死亡。应预后差，多数在婴儿期死亡。应加强对携带者的婚、育指导，根加强对携带者的婚、育指导，根据染色体检查可作出产前诊断。据染色体检查可作出产前诊断。3、3p部分三体综合征预后与防治：753、3p部分三体综合征部分三体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XX,-4，-14,+der(4),+der(14),T(3;4;14)（p12;q13;p13)mat,9qh+,mat3、3p部分三体综合征（2）核型：763、3p部分三体综合征部分三体综合征3、3p部分三体综合征773、3p部分三体综合征部分三体综合征3、3p部分三体综合征783、3p部分三体综合征部分三体综合征3、3p部分三体综合征793、3p部分三体综合征部分三体综合征3、3p部分三体综合征804、4号环状染色体综合征号环状染色体综合征（1）主要症状：）主要症状：出生前后生长发育迟缓，出生体重轻，智出生前后生长发育迟缓，出生体重轻，智力低下，痉挛。小头，眼距宽，内眦赘力低下，痉挛。小头，眼距宽，内眦赘皮，外眼角上斜，腭裂，先天性心皮，外眼角上斜，腭裂，先天性心脏病，肾畸形，生殖器异常。上肢畸形脏病，肾畸形，生殖器异常。上肢畸形（可有桡骨缺损），拇指缺如，骨成熟延（可有桡骨缺损），拇指缺如，骨成熟延迟。迟。4、4号环状染色体综合征（1）主要症状：814、4号环状染色体综合征号环状染色体综合征预后与防治：预后与防治：预后与心脏畸形等严重程度不同而有预后与心脏畸形等严重程度不同而有差异，严重者多在婴儿期死亡，少数差异，严重者多在婴儿期死亡，少数可活到儿童早期（报告病例有可活到儿童早期（报告病例有4岁、岁、6岁、岁、8岁、岁、11岁等）幸存者有智力低岁等）幸存者有智力低下，应加强指导。下，应加强指导。4、4号环状染色体综合征预后与防治：824、4号环状染色体综合征号环状染色体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XY,r(4)(p16q35);46,XY,r(4)(p15q35);46,XX,r(4)(p15q35);46,XX(XY),r(4)(p16q35)4、4号环状染色体综合征（2）核型：834、4号环状染色体综合征号环状染色体综合征4、4号环状染色体综合征845、5p-综合征(猫叫综合征）n n1963年，Lejeune首次报导。n n主要症状：哭声如猫叫，智力落后，生长阻滞，小头，满月脸，斜视，心脏畸形。n n核型：46,XY,5p-46,XY,del(5)(p15)46,XY,del(5)(:5p15 qter)5、5p-综合征(猫叫综合征）1963年，Lejeune首次85染色体病诊断技术课件86染色体病诊断技术课件87染色体病诊断技术课件886、6q部分三体综合征部分三体综合征（1 1）主要症状：）主要症状：）主要症状：）主要症状：长发育迟缓，身材矮小，严重智力低下，长发育迟缓，身材矮小，严重智力低下，长发育迟缓，身材矮小，严重智力低下，长发育迟缓，身材矮小，严重智力低下，小头，扁平脸。鼻根扁平，人中长，鲤鱼嘴。下唇小头，扁平脸。鼻根扁平，人中长，鲤鱼嘴。下唇小头，扁平脸。鼻根扁平，人中长，鲤鱼嘴。下唇小头，扁平脸。鼻根扁平，人中长，鲤鱼嘴。下唇中央凹陷，下颌后缩，牙齿异常。耳大，耳低位，中央凹陷，下颌后缩，牙齿异常。耳大，耳低位，中央凹陷，下颌后缩，牙齿异常。耳大，耳低位，中央凹陷，下颌后缩，牙齿异常。耳大，耳低位，耳畸形。颈短，特异性宽、短的蹼颈。脊柱侧弯、耳畸形。颈短，特异性宽、短的蹼颈。脊柱侧弯、耳畸形。颈短，特异性宽、短的蹼颈。脊柱侧弯、耳畸形。颈短，特异性宽、短的蹼颈。脊柱侧弯、后弯，四肢挛缩、畸形，乳距宽。男性外生殖器后弯，四肢挛缩、畸形，乳距宽。男性外生殖器后弯，四肢挛缩、畸形，乳距宽。男性外生殖器后弯，四肢挛缩、畸形，乳距宽。男性外生殖器发育不良。发育不良。发育不良。发育不良。其他：腭弓高。并趾。心脏畸形。其他：腭弓高。并趾。心脏畸形。6、6q部分三体综合征（1）主要症状：896、6q部分三体综合征部分三体综合征预后与防治：预后与防治：预后不良。对携带者应加强预后不良。对携带者应加强婚、育的指导婚、育的指导。6、6q部分三体综合征预后与防治：906、6q部分三体综合征部分三体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XX,dir dup(6)(q21q27);46,XY,dir ins(5;6)(q33;q15q27)mat6、6q部分三体综合征（2）核型：916、6q部分三体综合征部分三体综合征6、6q部分三体综合征926、6q部分三体综合征部分三体综合征6、6q部分三体综合征936、6q部分三体综合征部分三体综合征6、6q部分三体综合征946、6q部分三体综合征部分三体综合征6、6q部分三体综合征957、13三体综合征n n1960年Patau 等人首次报导。n n主要症状：严重的多发畸形，比21三体、18三体都要严重。n n核型：47,XX,+13 46,XX,-D,+t(Dq13q)46,XX/47,XX,+137、13三体综合征1960年Patau 等人首次报导。96染色体病诊断技术课件97染色体病诊断技术课件987、13三体综合征7、13三体综合征997、13三体综合征7、13三体综合征1007、13三体综合征7、13三体综合征1017、13三体综合征7、13三体综合征1028、18p部分单体综合征（1 1）主要症状：）主要症状：）主要症状：）主要症状：出生前后生长发育迟缓，出生体重轻（平均出生前后生长发育迟缓，出生体重轻（平均出生前后生长发育迟缓，出生体重轻（平均出生前后生长发育迟缓，出生体重轻（平均2800g)2800g)，轻度到重度智力低下，癫痫。身材矮，轻度到重度智力低下，癫痫。身材矮，轻度到重度智力低下，癫痫。身材矮，轻度到重度智力低下，癫痫。身材矮小，站立时双腿叉开并稍向前倾。小头，眼距小，站立时双腿叉开并稍向前倾。小头，眼距小，站立时双腿叉开并稍向前倾。小头，眼距小，站立时双腿叉开并稍向前倾。小头，眼距宽，内眦赘皮，外眼角下斜，斜视。人中宽，小宽，内眦赘皮，外眼角下斜，斜视。人中宽，小宽，内眦赘皮，外眼角下斜，斜视。人中宽，小宽，内眦赘皮，外眼角下斜，斜视。人中宽，小下颌，上唇短而下颌，上唇短而下颌，上唇短而下颌，上唇短而 前凸，下唇外翻。耳大，耳低前凸，下唇外翻。耳大，耳低前凸，下唇外翻。耳大，耳低前凸，下唇外翻。耳大，耳低位。颈短，蹼颈（女），后发际低。鸡胸，脐疝或位。颈短，蹼颈（女），后发际低。鸡胸，脐疝或位。颈短，蹼颈（女），后发际低。鸡胸，脐疝或位。颈短，蹼颈（女），后发际低。鸡胸，脐疝或腹股沟疝。手短而宽，手背水肿，第腹股沟疝。手短而宽，手背水肿，第腹股沟疝。手短而宽，手背水肿，第腹股沟疝。手短而宽，手背水肿，第5 5指屈曲，蹼状指屈曲，蹼状指屈曲，蹼状指屈曲，蹼状趾，平底足或摇篮足。趾，平底足或摇篮足。趾，平底足或摇篮足。趾，平底足或摇篮足。其他：可有肘外翻，头部畸形，小眼球，耳聋等。其他：可有肘外翻，头部畸形，小眼球，耳聋等。其他：可有肘外翻，头部畸形，小眼球，耳聋等。其他：可有肘外翻，头部畸形，小眼球，耳聋等。8、18p部分单体综合征（1）主要症状：1038、18p部分单体综合征预后与防治：预后与防治：除伴有严重畸形者，一般寿命正除伴有严重畸形者，一般寿命正常。文献报告一例为常。文献报告一例为61岁的患岁的患者；一例者；一例46,XX，18p-的轻度智力的轻度智力低下的女患者，曾生育一个低下的女患者，曾生育一个18p-的的患儿，故应加强婚、育的指导。患儿，故应加强婚、育的指导。8、18p部分单体综合征预后与防治：1048、18p部分单体综合征（2）核型：）核型：常见的核型有常见的核型有 46,XX(XY)18p-;46,XX(XY),del 18(p11)mat8、18p部分单体综合征（2）核型：1058、18p部分单体综合征8、18p部分单体综合征1068、18p部分单体综合征8、18p部分单体综合征1078、18p部分单体综合征8、18p部分单体综合征1089、18三体综合征n n1960年Edwards首次报导。n n主要症状：特殊的面容，手呈特殊握拳状，摇篮足n n核型:47,XX,+18 46,XX/47,XX,+18 48,XXX,+189、18三体综合征1960年Edwards首次报导。1099、18三体综合征9、18三体综合征1109、18三体综合征9、18三体综合征1119、18三体综合征9、18三体综合征1129、18三体综合征9、18三体综合征1139、18三体综合征9、18三体综合征114染色体病诊断技术课件115染色体病诊断技术课件116染色体病诊断技术课件11710、21三体综合征(Down 综合征)（1）主要症状）主要症状:n n特殊面容特殊面容：鼻梁低,眼斜视,外眼角上翘,内眦赘皮,耳小,低位,口常开,流口水。n n智力障碍智力障碍，智商一般在25-50。n n50%有先天性心脏畸形，通贯手通贯手（猿线），草鞋脚草鞋脚。10、21三体综合征(Down 综合征)（1）主要症状:118染色体病诊断技术课件119染色体病诊断技术课件120染色体病诊断技术课件121内内 眦眦 赘赘 皮皮内 眦 赘 皮122染色体病诊断技术课件123染色体病诊断技术课件124返回返回125染色体病诊断技术课件126返回返回127草草 鞋鞋 脚脚返回草 鞋 脚返回12810、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)12910、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)13010、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)13110、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)13210、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)13310、21三体综合征(Down 综合征)10、21三体综合征(Down 综合征)134n n单纯型单纯型（游离型）47，XX(XY),+21n n易位型易位型 46,XY,-D,+t(DqGq)n n嵌合型 46，XY/47,XY,+21（2）核型：）核型：单纯型（游离型）（2）核型：135游游 离离 型型返回游 离 型返回136易易 位位 型型返回易 位 型返回137（4）预后）预后：男性患者不育（5）发病率）发病率：与母亲年龄有关。（4）预后：男性患者不育138假定母亲是平衡易位的携带者，则她的核型是：45,XX,-14,-21,+t(14q21q)产生6种不同的卵子 与正常精子23,Y结合23,X 23,X 46,XY 46,XY 22,X,-14,-21,+t(14q21q)22,X,-14,-21,+t(14q21q)45,XY,-14,-21,+t(14q21q)45,XY,-14,-21,+t(14q21q)23,X,-14,+t(14q21q)23,X,-14,+t(14q21q)46,XY,-14,+t(14q21q)46,XY,-14,+t(14q21q)22,X,-21 22,X,-21 45,XY,-2145,XY,-2123,X,-21,+t(14q21q)23,X,-21,+t(14q21q)46,XY,-21,+t(14q21q)46,XY,-21,+t(14q21q)22,X,-14 22,X,-14 45,XY,-1445,XY,-14（3）14/21平衡易位染色体的传递平衡易位染色体的传递假定母亲是平衡易位的携带者，则她的核型是：（3）14/21平139四、性染色体病诊断技术（一）性染色质（一）性染色质（二）性染色体病（二）性染色体病1)先天性睾丸发育不全综合征2)先天性卵巢发育不全综合征3)脆性X染色体智力障碍综合征四、性染色体病诊断技术（一）性染色质140（一）性染色质1、X性染色质（性染色质（X小体，小体，Barr小体）小体）2、鼓槌、鼓槌3、Y染色质染色质（一）性染色质1、X性染色质（X小体，Barr小体）1411、X性染色质(X-chromatin)Lyon假说（假说（1961）：）：1、在哺乳动物（包括人类）的正常雌性间期细胞，两条X染色体中的一条是遗传上失活的，形成X性染色质。2、最初的失活发生在胚胎发育的早期。3、最初的失活是随机的。1、X性染色质(X-chromatin)Lyon假说（1961421、X性染色质(X-chromatin)1、X性染色质(X-chromatin)143染色体病诊断技术课件1442、鼓槌(drum stick)2、鼓槌(drum stick)1453、Y染色质(Y-chromatin)3、Y染色质(Y-chromatin)146（二）性染色体病1、先天性睾丸发育不全、先天性睾丸发育不全综合征综合征(Klinefelter syndrome)n n主要临床特征主要临床特征：外表男性，睾丸小，不育，男性乳房发育。其性情体态女性化。身材瘦长，体力较弱。（二）性染色体病1、先天性睾丸发育不全综合征(Klinef147n核型核型：47,XXY48,XXXY49,XXXXY46,XY/47,XXY核型：1482、先天性卵巢发育不全综合征(Turner syndrome)n主要临床特征：主要临床特征：外表女性，原发闭经，卵巢萎缩，外生殖器发育不良，身材矮小（身高一般不超过1.50M），盾状胸，肘外翻，乳房不发育，色素痣色素痣，蹼颈和低发际，一般不能生育。2、先天性卵巢发育不全综合征(Turner syndrome149色色 素素 痣痣色 素 痣150肘肘 外外 翻翻肘 外 翻151发发 际际 低低 蹼蹼 颈颈返回发 际 低 蹼 颈返回152n核型：核型：45,X045,X0/46,XX核型：1533、脆性X染色体智力障碍综合征(Martin-Bell syndrome)n主要临床特征：主要临床特征：三大一低大睾丸大头围大耳朵低智商3、脆性X染色体智力障碍综合征(Martin-Bell sy154染色体病诊断技术课件155染色体病诊断技术课件1563、脆性、脆性X染色体智力障碍综合染色体智力障碍综合征征核型：fra(X)(q27.3)（CGG)n3、脆性X染色体智力障碍综合征核型：157染色体病诊断技术课件158脆性位点脆性X综合征为X连锁遗传，出现几率在男婴中为1/2500，主要成因可能是因为CGG三核苷片段重复数目的变化。脆性位点脆性X综合征为X连锁遗传，出现几率在男婴中为1/25159五.荧光原位杂交 Fluorescence in situ hybridization,FISHn n分子细胞遗传学分子细胞遗传学分子细胞遗传学分子细胞遗传学(Molecular Cytogenetics)(Molecular Cytogenetics)是近是近是近是近年来发展起来的一门学科年来发展起来的一门学科年来发展起来的一门学科年来发展起来的一门学科,是传统的细胞遗传是传统的细胞遗传是传统的细胞遗传是传统的细胞遗传学与分子遗传学结合的产物学与分子遗传学结合的产物学与分子遗传学结合的产物学与分子遗传学结合的产物,始于始于始于始于FISHFISHn n用染料标记探针，与中期或间期染色体杂交后，用染料标记探针，与中期或间期染色体杂交后，用染料标记探针，与中期或间期染色体杂交后，用染料标记探针，与中期或间期染色体杂交后，依其荧光标记的强弱进行检测以确定基因在染依其荧光标记的强弱进行检测以确定基因在染依其荧光标记的强弱进行检测以确定基因在染依其荧光标记的强弱进行检测以确定基因在染色体上的位置色体上的位置色体上的位置色体上的位置,并能确定染色体是否畸变。并能确定染色体是否畸变。并能确定染色体是否畸变。并能确定染色体是否畸变。探针标记方法：探针标记方法：探针标记方法：探针标记方法：n n直接标记（荧光或非荧光）直接标记（荧光或非荧光）直接标记（荧光或非荧光）直接标记（荧光或非荧光）n n间接标记（荧光抗体，信号放大）间接标记（荧光抗体，信号放大）间接标记（荧光抗体，信号放大）间接标记（荧光抗体，信号放大）常用常用常用常用五.荧光原位杂交 Fluorescence in sit160染色体病诊断技术课件161Diagramatic representation of FISH analysis using three different kinds of probesDiagramatic representation of 162着丝粒探针着丝粒探针着丝粒探针163(一)荧光原位杂交的特点：快速；快速；信号强；信号强；特异性高；特异性高；多色。多色。标记探针的物质：标记探针的物质：（1 1）生物素）生物素(biotin)/(biotin)/地高辛地高辛(digoxigenin)(digoxigenin)半抗原报告分子（间接标记）半抗原报告分子（间接标记）（2 2）荧光物质（直接标记）荧光物质（直接标记）Cy2 Cy2或或FluorX(FluorX(绿色绿色)/Cy3()/Cy3(橙色橙色)/Cy3.5()/Cy3.5(猩红色猩红色)/Cy5()/Cy5(红色红色)/Aqua()/Aqua(蓝色蓝色)间接标记的信号检测（抗间接标记的信号检测（抗biotinbiotin或或digoxigenindigoxigenin抗体上连接荧光物质）物质：抗体上连接荧光物质）物质：conjugated to avidin or antibody of digoxigenin conjugated to avidin or antibody of digoxigenin (1)Fluorescein isothiocyanate(FITC)(1)Fluorescein isothiocyanate(FITC)或或BidopyBidopy绿色绿色 (2)Texas Red,Rhodamine,(2)Texas Red,Rhodamine,红色红色 (3)AMCA (3)AMCA蓝色蓝色染色体复染的物质染色体复染的物质:Propidium Iodide(PI)Propidium Iodide(PI)（红色），（红色），DAPIDAPI（兰色），（兰色），quinacrinequinacrine（绿色），（绿色），chromomycine A3chromomycine A3（绿色）（绿色）(一)荧光原位杂交的特点：快速；信号164 165(二二)染色体涂染探针染色体涂染探针(chromosome painting probes)(chromosome painting probes)整条染色体探针或染色体区带特异性探针整条染色体探针或染色体区带特异性探针染色体涂染方法：染色体涂染方法：正向正向(forward)(forward)：正常：正常probeprobe杂交到待检测的异杂交到待检测的异常标本上；常标本上；逆向逆向(reverse)(reverse)：分离异常染色体制备探针，杂：分离异常染色体制备探针，杂交到正常标本上。交到正常标本上。应用应用 染色体数目和结构异常分析；染色体数目和结构异常分析；不同物种间的同源性比较；不同物种间的同源性比较；白血病及其它肿瘤的染色体诊断和研究。白血病及其它肿瘤的染色体诊断和研究。*不能用于间期不能用于间期FISHFISH(二)染色体涂染探针(chromosome painti166染色体病诊断技术课件167染色体病诊断技术课件168(三)FISH技术的应用基因（或DNA片段）的染色体定位；染色体数目与结构异常的检测；间期细胞遗传学（绒毛/羊水/）；肿瘤遗传学研究(三)FISH技术的应用基因（或DNA片段）的染色169FISHFISH检测（检测（chromosome painting)chromosome painting)染色体易位染色体易位FISH检测（chromosome painting)染色体170FISH diagnosis of the interstitial deletion in Prader-Willi syndromeFISH diagnosis of the intersti171FISH analysis of unbalanced autosomal translocation involving chromosome 10FISH analysis of unbalanced au172Multicolor FISH of an interphase cellMulticolor FISH of an interpha173多色多色FISHM-FISH技术技术多色FISH17424 different chromosome panting probes labeled with combinations of 5different fluorochromes24 different chromosome pantin17524-color mutiplex FISH(M-FISH)24-color mutiplex FISH(M-FISH)176彩色显带FISH（Rx-FISH）探针根据灵长类动物与人类基因组的同源性制作探针，使人类的24条染色体显示出彩色带型。彩色显带FISH（Rx-FISH）探针根据灵长类动物与人类177Trisomy 21 Down syndromeTrisomy 21 Down syndrome178染色体病诊断技术课件179Cancer Medicine,Kufe DChromosomal aberrations were found in tumor cellsChromosomal aberrations were found in tumor cellsCancer Medicine,Kufe DChromos180Cancer Medicine,Kufe DChromosomal aberrations were found in tumor cellsChromosomal aberrations were found in tumor cellsCancer Medicine,Kufe DChromos181复习思考题复习思考题*1、以外周血淋巴细胞为例，简述染色体制备、以外周血淋巴细胞为例，简述染色体制备的基本步骤，并对关键步骤的作用略加说明。的基本步骤，并对关键步骤的作用略加说明。2、染色体分组的依据是什么？、染色体分组的依据是什么？3、常有内的显带技术有哪些？各有什么特点？、常有内的显带技术有哪些？各有什么特点？4、写出、写出 21q22.12的含义。的含义。*5、染色体畸变的种类有哪些？并对每种畸变、染色体畸变的种类有哪些？并对每种畸变略加说明。略加说明。6、染色体病有哪些共同的特征？、染色体病有哪些共同的特征？复习思考题*1、以外周血淋巴细胞为例，简述染色体制备的基本步182