实验诊断医学知识专题讲座培训ppt课件

实验诊实验诊断医学知断医学知识专题识专题讲讲座座实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座1某某年年9 9月月某某日日晚晚上上某某院院急急诊诊科科来来一一病病人人，突突然然起起病病，寒寒战战、剧剧烈烈头头痛痛、恶恶心心呕呕吐吐，面面色色潮潮红红、眼眼结结膜膜充充血血、咳咳嗽嗽，左左耳耳红红肿肿热热痛痛，体温体温4040。案例分析案例分析2实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座某年某年9月某日晚上某院急诊科来一病人，突然起病，寒战、剧烈头痛月某日晚上某院急诊科来一病人，突然起病，寒战、剧烈头痛2医医生生及及时时抽抽血血进进行行血血液液培培养养，血血常常规规白白细细胞胞增高及核左移。增高及核左移。初步诊断败血症，收入院，使用泰能。初步诊断败血症，收入院，使用泰能。但但是是使使用用泰泰能能3 3天天，病病人人症症状状没没有有改改善善，血血液培养阴性，给家属下病危通知书。液培养阴性，给家属下病危通知书。案例分析案例分析3实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座医生及时抽血进行血液培养，血常规白细胞增高及核左移。案例分析医生及时抽血进行血液培养，血常规白细胞增高及核左移。案例分析3请请南南方方医医院院专专家家会会诊诊，详详细细询询问问病病史史和和仔仔细细体体查查，得得到到重重要要线线索索，病病人人一一周周前前爬爬过过白白云云山山，并并躺躺在在草草地地上上休休息息；病病人人左左耳耳有有似似被被蚊蚊虫叮咬后形成焦痂。虫叮咬后形成焦痂。案例分析案例分析4实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座请南方医院专家会诊，详细询问病史和仔细体查，得到重要线索，病请南方医院专家会诊，详细询问病史和仔细体查，得到重要线索，病4怀怀疑疑恙恙虫虫病病，外外裴裴试试验验阳阳性性。恙恙虫虫病病立立克克次次对对头头孢孢菌菌素素类类耐耐药药，用用四四环环素素类类抗抗生生素素，1 1天天后退热，继续用药后退热，继续用药1 1周，病人康复出院。周，病人康复出院。病病原原体体检检测测重重要要性性：明明确确临临床床诊诊断断和和指指导导临临床用药。床用药。案例分析案例分析5实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座怀疑恙虫病，外裴试验阳性。恙虫病立克次对头孢菌素类耐药，用四怀疑恙虫病，外裴试验阳性。恙虫病立克次对头孢菌素类耐药，用四5免免疫疫室室：酶酶链链免免疫疫吸吸附附试试验验（ELISAELISA）、胶胶体体金金层层析析试试纸纸条条、化化学学发发光光或或电电化化学学发发光光、乳胶凝集方法。乳胶凝集方法。检检测测肝肝炎炎病病毒毒、性性病病、呼呼吸吸系系统统病病原原体体抗抗原原或抗体。或抗体。检验科三个实验室合作进行病原体检查检验科三个实验室合作进行病原体检查6实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座免疫室：酶链免疫吸附试验（免疫室：酶链免疫吸附试验（ELISA）、胶体金层析试纸条、化）、胶体金层析试纸条、化6基基因因室室：荧荧光光定定量量PCRPCR方方法法，定定量量检检测测病病原原体基因。体基因。细细菌菌室室（重重点点）：涂涂片片检检查查、培培养养鉴鉴定定和和药药敏试验，检测细菌真菌。敏试验，检测细菌真菌。检验科三个实验室合作进行病原体检查检验科三个实验室合作进行病原体检查7实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座基因室：荧光定量基因室：荧光定量PCR方法，定量检测病原体基因。检验科三个实方法，定量检测病原体基因。检验科三个实7第一部分第一部分 细菌真菌细菌真菌涂片检查涂片检查及临床意义及临床意义第二部分第二部分 细菌真菌细菌真菌培养鉴定培养鉴定及临床意义及临床意义第三部分第三部分 细菌真菌细菌真菌药敏检测药敏检测及临床意义及临床意义第四部分第四部分 临床各科临床各科科研工作科研工作结合本次课结合本次课8实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座第一部分第一部分 细菌真菌涂片检查及临床意义细菌真菌涂片检查及临床意义8实验诊断医学知识专实验诊断医学知识专8Part 1 Morphological examinations of bacteria and fungi1 non-stained.2 gram stain,bacteria and fungi.3 acid-fast stain,acid-fast bacillus.4 Indian ink stain,cryptococcus.9实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Part 1 Morphological examinati9single-celled,budding forms called yeast(spore).multicellular,filamentous forms called mold(spore and hypha).dimorphic fungi,exist in two distinct morphologic forms.1 Non-stained10实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座single-celled,budding forms c10Skin scraping,nail scraping,and observation of hairs directly by microscopy are also most helpful in diagnosing dermatophytic infections.Employing a drop of potassium hydroxide(15%)on a glass slide over the surface of the specimen.11实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Skin scraping,nail scraping11hairs12实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座hairs12实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座12Skin scraping13实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Skin scraping13实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座13Routine urine examination14实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Routine urine examination14实验诊实验诊14Basic principle？Procedure？Peptidoglycan.crystal violet,iodine,alcohol.carbofuchsin red.Results,G+or G-,cocci or bacilli bacteria,fungi,in oil immersion field.2 Gram-stained15实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Basic principle？Procedure？2 15fungi in urine16实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座fungi in urine16实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座16positive cultured blood17实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood17实验诊断医实验诊断医17positive cultured blood18实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood18实验诊断医实验诊断医18positive cultured blood19实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood19实验诊断医实验诊断医19positive cultured blood20实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood20实验诊断医实验诊断医20positive cultured blood21实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood21实验诊断医实验诊断医21positive cultured blood22实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座positive cultured blood22实验诊断医实验诊断医22sputum23实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座sputum23实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座23sputum24实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座sputum24实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座24sputum25实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座sputum25实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座25sputum26实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座sputum26实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座26sputum27实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座sputum27实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座27Fungi in leukorrhea,vaginitis28实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Fungi in leukorrhea,vaginitis28Diplococcus Neisseria gonorrhoeae29实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Diplococcus Neisseria gonorrho29Basic principle?Procedure?Lipid.carbolfuchsin red,hydrochloric acid 3%alcohol,methylene blue.Results,acid-fast bacteria red,other bacteria and background blue.3 acid-fast stain30实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Basic principle?Procedure?3 30The result report modeNegative,acid-fast bacilli not found,Positive(1 or 2),1 or 2 whole visual field,Positive（+）,3 to 9 whole visual field,Positive（+）,10 to 99 whole visual field,Positive（+）,1 to 9 every visual field,Positive（+）,10 every visual field.31实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座The result report mode31实验诊断医学实验诊断医学31acid-fast bacilli from sputum（+）32实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座acid-fast bacilli from sputum（32Cryptococcus in cerebrospinal fluid.Basic principle,capsule.Procedure,sediment.Results.4 the Indian ink stain 33实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Cryptococcus in cerebrospinal 33Cryptococcus neoformans34实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Cryptococcus neoformans34实验诊断医实验诊断医34germinative 35实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座germinative 35实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座3536实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座36实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座36Advantages.cheap,rapid,diagnose primarily.Disadvantages.Not accurate.Part 1 Morphological examinations of bacteria and fungi37实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座Advantages.Part 1 Morphologica37第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定及临床意义细菌真菌培养鉴定及临床意义一、血液一、血液二、中段尿二、中段尿三、粪便三、粪便四、痰液四、痰液五、咽拭子五、咽拭子六、穿刺液六、穿刺液七、分泌物七、分泌物八、器械八、器械38实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座第二部分第二部分 细菌真菌培养鉴定及临床意义一、血液细菌真菌培养鉴定及临床意义一、血液二、中段尿二、中段尿38一、血液的病原体检查一、血液的病原体检查 Etiologic Examination of Blood and Bone MarrowEtiologic Examination of Blood and Bone Marrow目的和意义；目的和意义；采血指征；采血指征；采血注意事项采血注意事项;结果报告形式。结果报告形式。39实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座一、血液的病原体检查一、血液的病原体检查 Etiologic Examinat39 目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不断增多，侵袭瘤、器官移植、爱滋病和结核病病人不断增多，侵袭性诊疗技术广泛应用，败血症发病率不断增加。性诊疗技术广泛应用，败血症发病率不断增加。败血症病死率败血症病死率30%30%以上；以上；早期病原学诊断和合理抗早期病原学诊断和合理抗生素治疗，明显降低败血症病死率。生素治疗，明显降低败血症病死率。40实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座 目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿瘤、器官移目前我国社会老龄化日趋严重，慢性病及恶性肿瘤、器官移40血液培养的送检指征：血液培养的送检指征：发热发热3838或低温或低温36101010109 9/L L，“核左移核左移”白细胞增多；白细胞增多；粒细胞减少，成熟的多核白细胞粒细胞减少，成熟的多核白细胞1109090次次/分；呼吸频率分；呼吸频率2020次次/分；分；二氧化碳分压二氧化碳分压32mmHg38或低温或低温36；41实验诊断实验诊断41最好在抗生素使用前采集，最好在抗生素使用前采集，若若已已用用抗抗菌菌药药须须，则则尽尽量量避避开开血血药药浓浓度度的的高高峰期，最好在下次用药前。峰期，最好在下次用药前。血液标本采集时间血液标本采集时间42实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座最好在抗生素使用前采集，血液标本采集时间最好在抗生素使用前采集，血液标本采集时间42实验诊断医学知识实验诊断医学知识42血液标本采集时间血液标本采集时间43实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座血液标本采集时间血液标本采集时间43实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座43理想状态：在发热高峰期前半小时，理想状态：在发热高峰期前半小时，建议第一次可在病人发热初期或高峰期采集，建议第一次可在病人发热初期或高峰期采集，根据病人发热情况，在根据病人发热情况，在2424h h内再取内再取2-32-3次标本，次标本，最最好好每每次次“双双套套”“”“双双瓶瓶”，“双双套套”指指不不同同采血部位，采血部位，“双瓶双瓶”指树脂瓶和厌氧瓶。指树脂瓶和厌氧瓶。血液标本采集时间血液标本采集时间44实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座理想状态：在发热高峰期前半小时，血液标本采集时间理想状态：在发热高峰期前半小时，血液标本采集时间44实验诊断实验诊断4445实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座45实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座45标准血培养瓶（蓝色帽）：标准血培养瓶（蓝色帽）：帽子和标签纸左上方为蓝色，帽子和标签纸左上方为蓝色，“Standard 10 Aerobic/FStandard 10 Aerobic/F”，用于成人需氧菌和真菌培养，用于成人需氧菌和真菌培养，血液量血液量3-103-10ml ml，8-108-10mlml最佳。最佳。46实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座标准血培养瓶（蓝色帽）：标准血培养瓶（蓝色帽）：46实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座46中和抗生素的树脂瓶（灰色帽）：中和抗生素的树脂瓶（灰色帽）：帽子和标签纸左上方为灰色，帽子和标签纸左上方为灰色，“PLUS+Aerobic/FPLUS+Aerobic/F”，血液量血液量3-103-10ml ml，8-108-10mlml最佳。最佳。47实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座中和抗生素的树脂瓶（灰色帽）：中和抗生素的树脂瓶（灰色帽）：47实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座47厌氧瓶（黄色或橘红色帽）：厌氧瓶（黄色或橘红色帽）：帽子和标签纸左上方为黄色，帽子和标签纸左上方为黄色，“Standard Anaerobic/FStandard Anaerobic/F”，血液量血液量3-73-7ml ml，5-75-7mlml最佳。最佳。48实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座厌氧瓶（黄色或橘红色帽）：厌氧瓶（黄色或橘红色帽）：48实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座48中中和和抗抗生生素素的的儿儿童童瓶瓶（粉粉红红色色帽帽）：帽子和标签纸左上方为粉红色，帽子和标签纸左上方为粉红色，“PEDS PLUS/FPEDS PLUS/F”,血液量血液量1-31-3mlml。49实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座中和抗生素的儿童瓶（粉红色帽）：中和抗生素的儿童瓶（粉红色帽）：49实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座49采采集集标标本本前前先先开开申申请请单单，到到检检验验科科细细菌菌室室或或门门诊诊领领取血培养瓶；取血培养瓶；采采血血前前先先在在培培养养瓶瓶标标签签纸纸左左侧侧空空白白处处（箭箭头头所所指指处处）填填写写抽抽血血时时间间和和病病人人科科别别、床号和姓名；床号和姓名；不不要要在在培培养养瓶瓶条条形形码码上上涂涂写，以免影响扫描。写，以免影响扫描。50实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座采集标本前先开申请单，到检验科细菌室或门诊领取血培养瓶；采集标本前先开申请单，到检验科细菌室或门诊领取血培养瓶；5050将将标标签签纸纸上上条条形形码码右右侧侧部部分分（含含数数字字）撕撕下下贴贴于于检查申请单上；检查申请单上；而而其其它它标标本本均均是是将将申申请请单单上上双双联联号号码码撕撕下下贴贴于于标标本上。本上。51实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座将标签纸上条形码右侧部分（含数字）撕下贴于检查申请单上；将标签纸上条形码右侧部分（含数字）撕下贴于检查申请单上；5151注注射射器器采采血血后后，将将血血培培养养瓶瓶帽帽子子揭揭下下，橡橡皮皮由由金金属属皮皮（围围脖脖）固定于瓶上；固定于瓶上；将将橡橡皮皮塞塞用用70%70%酒酒精精消消毒毒，注注射射器器针针头头刺刺穿穿橡橡皮皮塞塞将将血血注注入入培培养养瓶内；瓶内；橡皮塞裸露即可。橡皮塞裸露即可。52实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座注射器采血后，将血培养瓶帽子揭下，橡皮由金属皮（围脖）固定于注射器采血后，将血培养瓶帽子揭下，橡皮由金属皮（围脖）固定于52 细菌室接到已采集血液的培养瓶后，细菌室接到已采集血液的培养瓶后，立即放入自立即放入自动血液培养检测仪，动血液培养检测仪，自动培养及实时检测。自动培养及实时检测。53实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座 细菌室接到已采集血液的培养瓶后，立即放入自动血液细菌室接到已采集血液的培养瓶后，立即放入自动血液5354实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座54实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座54阳性初步结果报告：阳性初步结果报告：仪器阳性报警，仪器阳性报警，90%90%以上阳性标本以上阳性标本24h24h内检出；内检出；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰氏染色；取出阳性瓶，对血液涂片及革兰氏染色；立立即即将将涂涂片片结结果果（G+G+、G-G-细细菌菌，球球菌菌或或杆杆菌菌，或真菌）电话通知相应科室，并在网上发出；或真菌）电话通知相应科室，并在网上发出；利利用用阳阳性性血血液液进进行行K-BK-B法法药药敏敏试试验验，第第二二天天将将初步药敏结果电话通知相应科室。初步药敏结果电话通知相应科室。结果报告形式结果报告形式55实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座阳性初步结果报告：结果报告形式阳性初步结果报告：结果报告形式55实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座55阳性最终结果报告：阳性最终结果报告：将阳性血液接种血平板培养细菌；将阳性血液接种血平板培养细菌；第第二二天天将将血血平平板板上上生生长长的的细细菌菌鉴鉴定定及及MICMIC法法药药敏敏试试验验；第第三三天天发发鉴鉴定定及及MICMIC法法药药敏敏结结果果的的正正式报告。式报告。阴性结果报告：阴性结果报告：如如培培养养5 5天天仍仍为为阴阴性性，再再接接种种血血平平板板培培养养一一天天，核实为阴性后再发报告。核实为阴性后再发报告。结果报告形式结果报告形式56实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座阳性最终结果报告：结果报告形式阳性最终结果报告：结果报告形式56实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座56二、中段尿标本病原体检查二、中段尿标本病原体检查 Etiologic Examination of UrineEtiologic Examination of Urine目的和意义；目的和意义；采集方法采集方法;结果报告形式。结果报告形式。57实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座二、中段尿标本病原体检查二、中段尿标本病原体检查 Etiologic Examin57检测泌尿系统感染；检测泌尿系统感染；一般进行细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；一般进行细菌和真菌培养、菌落计数和药敏；也也可可离离心心后后对对沉沉渣渣进进行行涂涂片片检检查查，革革兰兰氏氏染染色或抗酸染色；色或抗酸染色；也可用于淋球菌培养和涂片检查。也可用于淋球菌培养和涂片检查。目的和意义目的和意义58实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座检测泌尿系统感染；目的和意义检测泌尿系统感染；目的和意义58实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座58最常采集中段尿，最常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；晨起第一次尿送检最佳；先先用用肥肥皂皂水水、或或1 1：10001000高高锰锰酸酸钾钾水水溶溶液液冲冲洗洗女女性性外外阴阴部部及及尿尿道道口口或或男男性性尿尿道道口口，再再用用灭灭菌菌水水清清洗洗，最最后后用用灭灭菌菌纱纱布布檫檫拭拭；排排尿尿弃弃去去前前段段尿尿，留留取取中中段段尿尿约约1010mlml于于无无菌菌容容器器内内加加盖送检。盖送检。采集方法采集方法59实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座最常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；采集方法最常采集中段尿，晨起第一次尿送检最佳；采集方法59实验诊断医实验诊断医59尿尿道道病病原原菌菌可可在在温温暖暖尿尿液液中中繁繁殖殖，中中段段尿尿标标本本采采集集后后应应尽尽快快送送检检，否否则则将将影影响响病病原原菌菌计计数的准确性；数的准确性；排排尿尿困困难难者者可可导导尿尿，避避免免多多次次导导尿尿所所致致尿尿路路感染，感染，导尿包必须为无菌的合格产品。导尿包必须为无菌的合格产品。采集方法采集方法60实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座尿道病原菌可在温暖尿液中繁殖，中段尿标本采集后应尽快送检，否尿道病原菌可在温暖尿液中繁殖，中段尿标本采集后应尽快送检，否60“培培养养出出3 3种种以以上上细细菌菌，疑疑采采集集污污染染，重重留留标标本本”：如如培培养养出出3 3种种或或以以上上细细菌菌，且且无无优优势势菌菌；约约10%10%的的标标本本不不合合格格，采采集集时时污污染染，采采集集中中段段尿尿（尤尤其其女女性性）最最好好由由专专门门医医护护人人员员指指导导采采集，以减少污染。集，以减少污染。结果报告形式结果报告形式61实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座“培养出培养出3种以上细菌，疑采集污染，重留标本种以上细菌，疑采集污染，重留标本”：结果报告形式：结果报告形式661“培养出少量某种细菌、菌落计数结果培养出少量某种细菌、菌落计数结果”：如如菌菌量量较较少少 1010105 5ml ml，且且必必须须有有优优势势，才才可可以以确确定定为为感感染染，对对优优势势菌菌进进行行鉴鉴定定和药敏。和药敏。10104 4mlml至至10105 5mlml，也有意义。，也有意义。结果报告形式结果报告形式63实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座“培养出某种细菌、菌落计数结果、药敏结果培养出某种细菌、菌落计数结果、药敏结果”：结果报告形式：结果报告形式6363三、粪便标本病原体检查三、粪便标本病原体检查 Etiologic Examination of StoolEtiologic Examination of Stool目的和意义：目的和意义：对肠道疾病进行病原学诊断；对肠道疾病进行病原学诊断；涂片染色：涂片染色：查真菌、弧菌、球菌查真菌、弧菌、球菌/杆菌比；杆菌比；培养病原菌和药敏：培养病原菌和药敏：培养沙门氏和志贺菌；培养弧菌；培养真菌；培养沙门氏和志贺菌；培养弧菌；培养真菌；菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药敏。菌群失调病人，对占优势细菌进行鉴定药敏。64实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座三、粪便标本病原体检查三、粪便标本病原体检查 Etiologic Examina64标本采集：标本采集：挑取含脓、血或粘液粪便约挑取含脓、血或粘液粪便约2-32-3g g；置于清洁容器或置于保存液中送检；置于清洁容器或置于保存液中送检；排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。排便困难者或婴幼儿可用直肠拭子采集。65实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座标本采集：标本采集：65实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座65检查上下呼吸道感染检查上下呼吸道感染痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；痰液（下呼吸道）和咽拭子（咽喉部）；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行涂片查细菌、真菌或抗酸杆菌；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；可进行细菌、真菌或结核杆菌培养；上上述述检检查查只只要要一一口口痰痰即即可可，在在一一张张检检查查申申请请单上选上述多个项目。单上选上述多个项目。四和五、呼吸道标本的病原体检查四和五、呼吸道标本的病原体检查66实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座检查上下呼吸道感染四和五、呼吸道标本的病原体检查检查上下呼吸道感染四和五、呼吸道标本的病原体检查66实验诊断实验诊断66采集深部痰（采集深部痰（sputumsputum），），不是唾液和口水不是唾液和口水；自然咳痰法自然咳痰法(Expectorated sputum)Expectorated sputum)；最最好好为为清清晨晨第第一一口口痰痰，用用清清水水反反复复漱漱口口用用力力咳出第一口痰于无菌容器内；咳出第一口痰于无菌容器内；支气管镜采集法（支气管镜采集法（BronchoscopyBronchoscopy）。采集方法采集方法 67实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座采集深部痰（采集深部痰（sputum），不是唾液和口水；采集方法），不是唾液和口水；采集方法 6767报报“正常菌群正常菌群”：培养出的均为不致病的细菌；培养出的均为不致病的细菌；培养出的细菌种类较多且无优势菌；培养出的细菌种类较多且无优势菌；分离出少量嗜血杆菌分离出少量嗜血杆菌,也报告鉴定及药敏。也报告鉴定及药敏。结果报告形式结果报告形式 68实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座报报“正常菌群正常菌群”：结果报告形式：结果报告形式 68实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座68报报“无菌生长无菌生长”：病人抗生素使用过度导致；病人抗生素使用过度导致；可可能能病病毒毒、支支原原体体、衣衣原原体体等等血血平平板板无无法法培培养。养。结果报告形式结果报告形式 69实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座报报“无菌生长无菌生长”：结果报告形式：结果报告形式 69实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座69报报“分离出某种细菌或真菌，比例，药敏分离出某种细菌或真菌，比例，药敏”：分分离离出出致致病病菌菌，而而不不是是常常见见的的正正常常菌菌群群，且且具有优势，约占血平板菌群总数的百分比具有优势，约占血平板菌群总数的百分比%；同同一一病病人人如如痰痰中中连连续续分分离离出出同同一一种种菌菌，3 3天天内内如果已经做过药敏试验，则不再做药敏；如果已经做过药敏试验，则不再做药敏；同同一一病病人人痰痰中中细细菌菌的的种种类类和和比比例例，会会随随着着治治疗情况变化，也受留取痰标本的质量影响。疗情况变化，也受留取痰标本的质量影响。结果报告形式结果报告形式 70实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座报报“分离出某种细菌或真菌，比例，药敏分离出某种细菌或真菌，比例，药敏”：结果报告形式：结果报告形式 7070六、穿刺液（脑脊液）病原体检查六、穿刺液（脑脊液）病原体检查 EtiologicEtiologic Examination of Cerebrospinal FluidExamination of Cerebrospinal Fluid目的和意义：目的和意义：判断是否为感染性疾病判断是否为感染性疾病脑脑脊脊液液采采集集：通通过过腰腰椎椎穿穿刺刺术术（Lumber Lumber puncturepuncture）以以无无菌菌操操作作采采集集脑脑脊脊液液3-53-5mlml于于无无菌菌小小瓶瓶或或无无菌菌试试管管中中，一一般般第第一一管管用用于于微微生生物学检查；物学检查；71实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座六、穿刺液（脑脊液）病原体检查六、穿刺液（脑脊液）病原体检查 Etiologic Exa71六、穿刺液（脑脊液）病原体检查六、穿刺液（脑脊液）病原体检查 EtiologicEtiologic Examination of Cerebrospinal FluidExamination of Cerebrospinal Fluid引引起起脑脑膜膜炎炎的的病病原原体体脑脑膜膜炎炎奈奈瑟瑟菌菌等等抵抵抗抗力力弱弱，不不耐耐冷冷，故故采采集集的的脑脑脊脊液液应应立立即即保保温温送送检检或或床边接种床边接种;可查一般细菌真菌、隐球菌、抗酸杆菌。可查一般细菌真菌、隐球菌、抗酸杆菌。72实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座六、穿刺液（脑脊液）病原体检查六、穿刺液（脑脊液）病原体检查 Etiologic Exa72其其它它穿穿刺刺液液：如如胸胸腹腹水水、关关节节腔腔液液等等，穿穿刺刺针针注注入入无菌拭子管送检或将注射器直接送检；无菌拭子管送检或将注射器直接送检；如如为为多多管管穿穿刺刺液液或或相相关关组组织织，请请在在申申请请单单上上注注明明是是否都做培养鉴定；否都做培养鉴定；采采集集注注意意事事项项：注注意意无无菌菌操操作作；如如培培养养出出类类白白喉喉杆杆菌，常为采集时污染所致；可用血液培养瓶培养。菌，常为采集时污染所致；可用血液培养瓶培养。73实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座其它穿刺液：如胸腹水、关节腔液等，穿刺针注入无菌拭子管送检或其它穿刺液：如胸腹水、关节腔液等，穿刺针注入无菌拭子管送检或73七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查开开放放性性化化脓脓灶灶：应应先先用用灭灭菌菌生生理理盐盐水水冲冲洗洗表表面面污污染染菌菌，再再用用棉棉拭拭子子蘸蘸取取或或注注射射器器吸吸取取脓脓性分泌物；性分泌物；瘘瘘管管内内脓脓液液：先先用用灭灭菌菌棉棉拭拭子子挤挤压压瘘瘘管管弃弃去去前端脓液，再收集脓汁；前端脓液，再收集脓汁；74实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查开放性化脓灶：应先用灭菌生七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查开放性化脓灶：应先用灭菌生74七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查封闭性脓肿：封闭性脓肿：可用注射器穿刺抽取；可用注射器穿刺抽取；疑疑为为厌厌氧氧菌菌感感染染者者：取取脓脓液液后后立立即即排排净净注注射射器内空气，针头插入无菌橡皮塞送检；器内空气，针头插入无菌橡皮塞送检；如为液体，最好床旁接种厌氧血培养瓶；如为液体，最好床旁接种厌氧血培养瓶；外外界界相相通通部部位位的的标标本本，如如痰痰不不能能作作厌厌氧氧菌菌培培养养。75实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查封闭性脓肿：可用注射器穿刺七、分泌物（伤口或脓液）病原体检查封闭性脓肿：可用注射器穿刺75七、分泌物（生殖道）病原体检查七、分泌物（生殖道）病原体检查 Etiologic Examination of STDsEtiologic Examination of STDs性性传传播播疾疾病病，简简称称性性病病，是是一一组组通通过过性性行行为为传传播播的的，侵侵犯犯皮皮肤肤、性性器器官官和和全全身身多多脏脏器器损损害的感染性疾病；害的感染性疾病；标标本本采采集集：常常取取生生殖殖道道分分泌泌物物，男男性性取取尿尿道道口口分分泌泌物物或或前前列列腺腺液液，女女性性取取外外阴阴糜糜烂烂面面病病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物等。灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物等。76实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座七、分泌物（生殖道）病原体检查七、分泌物（生殖道）病原体检查 Etiologic Exa76淋病（淋病（gonorrheagonorrhea）涂片染色镜检：涂片染色镜检：急急性性淋淋菌菌性性尿尿道道炎炎敏敏感感度度和和特特异异度度高高达达90%90%以以上上；对对慢慢性性无无症症状状淋淋病病的的女女性性患患者者涂涂片片检查漏诊率达检查漏诊率达40%40%，故必须同时进行培养。，故必须同时进行培养。培养鉴定及药敏培养鉴定及药敏结果准确，诊断金标准。结果准确，诊断金标准。77实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座淋病（淋病（gonorrhea）77实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座77解脲解脲/人型支原体：人型支原体：细菌室开展了培养鉴定及药敏方法；细菌室开展了培养鉴定及药敏方法；需注意的是标本采集后应尽快送检。需注意的是标本采集后应尽快送检。诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；诊断试剂和方法要符合卫生部相关规定；注意保护病人的隐私。注意保护病人的隐私。78实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座解脲解脲/人型支原体：人型支原体：78实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座78八、器械病原体检查八、器械病原体检查 Etiologic Examination of other specimensEtiologic Examination of other specimens静脉插管等标本：静脉插管等标本：放入无菌拭子管中送检；放入无菌拭子管中送检；无菌试验：无菌试验：怀疑医疗用品被污染时送检；怀疑医疗用品被污染时送检；空空气气培培养养：到到细细菌菌室室取取培培养养平平皿皿置置于于待待测测地地点，打开平皿盖点，打开平皿盖1010minmin，盖上后送检；盖上后送检；医医护护人人员员手手培培养养和和物物表表培培养养：到到细细菌菌室室取取含含消消毒毒剂剂中中和和液液的的无无菌菌试试管管，用用棉棉签签涂涂抹抹后后放放入试管中送检。入试管中送检。79实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座八、器械病原体检查八、器械病原体检查 Etiologic Examinati79第三部分第三部分 细菌真菌药敏检测及临床意义细菌真菌药敏检测及临床意义药敏结果检验报告的解读，药敏结果检验报告的解读，细菌分布及药敏结果分析。细菌分布及药敏结果分析。80实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座第三部分第三部分 细菌真菌药敏检测及临床意义药敏结果检验报告的解细菌真菌药敏检测及临床意义药敏结果检验报告的解80药敏结果检验报告的解读药敏结果检验报告的解读81实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座药敏结果检验报告的解读药敏结果检验报告的解读81实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座81MICMIC稀释法稀释法（dilution methoddilution method）K-BK-B纸片扩散法纸片扩散法（Kirby-Bauer methodKirby-Bauer method）E-testE-test药敏检测药敏检测常用药敏试验方法常用药敏试验方法82实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座MIC稀释法（稀释法（dilution method）常用药敏试验方）常用药敏试验方82K-BK-B法法是是将将含含有有定定量量抗抗菌菌药药物物的的纸纸片片，贴贴在在已已接接种种测测试试菌菌的的琼琼脂脂平平板板上上，纸纸片片中中所所含含药药物物吸吸收收琼琼脂脂中中水水分分溶溶解解后后，不不断断向向纸纸片片周周围围扩扩散散形形成成递递减减的的梯度浓度。梯度浓度。K-B纸片扩散法药敏试验纸片扩散法药敏试验83实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座K-B法是将含有定量抗菌药物的纸片，贴在已接种测试菌的琼脂平法是将含有定量抗菌药物的纸片，贴在已接种测试菌的琼脂平83K-BK-B法药敏试验法药敏试验不同的抗生素纸片不同的抗生素纸片细菌接种细菌接种于于MHMH平板平板量取直径量取直径84实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座K-B法药敏试验不同的抗生素纸片细菌接种于法药敏试验不同的抗生素纸片细菌接种于MH平板量取直径平板量取直径884MICMIC稀释法稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释，定量接种待检菌，稀释，定量接种待检菌，3535培养培养18至至2424小时后观小时后观察结果；察结果；抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度，即最小抑抑制检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度，即最小抑菌浓度；菌浓度；MICMIC稀释法稀释法结果以结果以MICMIC（g/mlg/ml）数值报告，数值越小）数值报告，数值越小越敏感，与越敏感，与K-BK-B法相反；法相反；MIC稀释法药敏检测稀释法药敏检测85实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座MIC稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释，定量接稀释法一般在琼脂或肉汤中将抗菌药物系列对倍稀释，定量接8586实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座86实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座86稀释法的结果比稀释法的结果比K-BK-B法的更准确。法的更准确。本实验室利用细菌自动鉴定和药敏仪，为稀释本实验室利用细菌自动鉴定和药敏仪，为稀释法药敏试验，由仪器自动判断药敏结果。法药敏试验，由仪器自动判断药敏结果。药敏检测的方法药敏检测的方法87实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座稀释法的结果比稀释法的结果比K-B法的更准确。药敏检测的方法法的更准确。药敏检测的方法87实验诊断医实验诊断医87BD Phoenix 100 BD Phoenix 100 细菌自动鉴定及药敏分析仪细菌自动鉴定及药敏分析仪88实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座BD Phoenix 100 细菌自动鉴定及药敏分析仪细菌自动鉴定及药敏分析仪88实实88MICMIC稀释法稀释法药敏鉴定孔药敏鉴定孔生化试验生化试验细菌鉴定孔细菌鉴定孔89实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座MIC稀释法生化试验稀释法生化试验89实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座89E-test药敏检测药敏检测结合结合K-BK-B法和稀释法的优点；法和稀释法的优点；原理同稀释法检测，操作同原理同稀释法检测，操作同K-BK-B法简单；法简单；试纸条上含干化、稳定、浓度由高到低呈指试纸条上含干化、稳定、浓度由高到低呈指数梯度分布的某种抗菌药物；数梯度分布的某种抗菌药物；主要用于少数抗生素结果的验证。主要用于少数抗生素结果的验证。90实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座E-test药敏检测结合药敏检测结合K-B法和稀释法的优点；法和稀释法的优点；90实验诊断实验诊断90E-test药敏检测药敏检测91实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座E-test药敏检测药敏检测91实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座91临床实验室标准化委员会（临床实验室标准化委员会（clinical laboratory clinical laboratory standards of institute,CLSIstandards of institute,CLSI）标准判断标准判断敏感敏感（susceptiblesusceptible，S S）：推荐使用；：推荐使用；中中介介（intermediateintermediate，I I）：药药物物MICMIC接接近近体体液液或或组组织可达到药物浓度，但反应低于敏感株；织可达到药物浓度，但反应低于敏感株；耐耐药药（resistantresistant，R R）；指指常常规规用用药药剂剂量量不不能能达达到到MICMIC，临床疗效不可靠。临床疗效不可靠。药敏检测的方法药敏检测的方法92实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座临床实验室标准化委员会（临床实验室标准化委员会（clinical laborator92抗菌抗菌药物的作用靶位物的作用靶位93实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座抗菌药物的作用靶位抗菌药物的作用靶位93实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座93氨基糖甙类：氨基糖甙类：阿米卡星阿米卡星AmikacinAmikacin、庆大霉素、庆大霉素GentamicinGentamicin1 1代头孢：代头孢：头孢唑啉头孢唑啉CefazolinCefazolin2 2代头孢：代头孢：头孢呋辛钠头孢呋辛钠Cefuroxime sodiumCefuroxime sodium3 3代头孢：代头孢：头孢他啶头孢他啶CeftazidimeCeftazidime、头孢噻肟、头孢噻肟CefotaximeCefotaxime、头孢吡肟（马斯平）、头孢吡肟（马斯平）CefepimeCefepime细菌室药敏试验中常选用的抗生素种类细菌室药敏试验中常选用的抗生素种类94实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座氨基糖甙类：阿米卡星氨基糖甙类：阿米卡星Amikacin、庆大霉素、庆大霉素Gentami94单环单环-内酰胺类：内酰胺类：氨曲南氨曲南AztreonamAztreonam广谱青霉素类：广谱青霉素类：氨苄西林氨苄西林AmpicilinAmpicilin、青霉素、青霉素G G PenicillinPenicillin、苯唑西林、苯唑西林Oxacillin Oxacillin 抗假单胞菌广谱青霉素：抗假单胞菌广谱青霉素：哌拉西林哌拉西林PiperacillinPiperacillin95实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座单环单环-内酰胺类：氨曲南内酰胺类：氨曲南Aztreonam95实验诊断医学知实验诊断医学知95复方复方-内酰胺类：内酰胺类：阿莫西林阿莫西林-克拉维酸（奥格门丁）克拉维酸（奥格门丁）Amoxicilin/clavelanateAmoxicilin/clavelanate氨苄西林氨苄西林-舒巴坦（优力新）舒巴坦（优力新）Ampicillin/SulbactamAmpicillin/Sulbactam哌拉西林哌拉西林-他唑巴坦（特治星）他唑巴坦（特治星）Pioeracillin/TazobactamPioeracillin/Tazobactam头孢哌酮头孢哌酮-舒巴坦（舒普深）舒巴坦（舒普深）efoperazone/Sulbactamefoperazone/Sulbactam碳青霉烯类：碳青霉烯类：亚胺培南亚胺培南ImipenemImipenem、美罗培南、美罗培南MeropenemMeropenem96实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座复方复方-内酰胺类：内酰胺类：96实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座96多肽类：多肽类：多粘菌素多粘菌素E Colistin EE Colistin E、替考拉宁、替考拉宁TeicoplaninTeicoplanin、万古霉素、万古霉素VancomicinVancomicin磺胺类：磺胺类：复方新诺明（甲氧苄唑复方新诺明（甲氧苄唑-磺胺甲唑）磺胺甲唑）Timethoprim/SulfamethoxazoleTimethoprim/Sulfamethoxazole林可霉素类：林可霉素类：克林霉素克林霉素ClindamycinClindamycin大环内脂类：大环内脂类：红霉素红霉素ErythromycinErythromycin97实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座多肽类：多粘菌素多肽类：多粘菌素E Colistin E、替考拉宁、替考拉宁Teico97氯霉素：氯霉素：氯霉素氯霉素ChloramphenicolChloramphenicol三代喹诺酮：三代喹诺酮：环丙沙星环丙沙星Ciprofloxaxin Ciprofloxaxin、氧氟沙星、氧氟沙星Ofloxaxin Ofloxaxin、左旋氧氟沙星、左旋氧氟沙星Levofloxacin Levofloxacin、莫西、莫西沙星沙星MoxifloxacinMoxifloxacin四环素类：四环素类：四环素四环素TetracyclineTetracycline利福平利福平Rifampin Rifampin 98实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座氯霉素：氯霉素氯霉素：氯霉素Chloramphenicol98实验诊断医学实验诊断医学98 产产 超超 广广 谱谱-内内 酰酰 胺胺 酶酶(extended extended spectrum-lactamasespectrum-lactamase，ESBL)ESBL)：该该酶酶水水解解青青霉霉素素、头头孢孢菌菌素素及及单单胺胺类类的的超超广广谱谱-酶酶，主主要要由由肺肺炎炎克克雷雷伯伯菌菌和和大大肠肠埃埃希希菌菌等等肠肠杆杆菌菌科科细菌产生。细菌产生。99实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座 产超广谱产超广谱-内酰胺酶内酰胺酶(extended spect99 耐甲氧西林葡萄球菌（耐甲氧西林葡萄球菌（methecillin methecillin resistance staphylococcusresistance staphylococcus，MRSMRS），），CLSI CLSI规定，葡萄球菌如对苯唑西林（或甲规定，葡萄球菌如对苯唑西林（或甲氧西林）耐药：氧西林）耐药：对青霉素类、头孢菌素类、碳对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药，而不考虑体外药敏结果。药，而不考虑体外药敏结果。100实验诊断医学知识专题讲座实验诊断医学知识专题讲座 耐甲氧西林葡萄球菌（耐甲氧西林葡萄球菌（methecillin re100 耐高浓度庆大霉素肠球菌（耐高浓度庆大霉素肠球菌（High level Hi