临床常用免疫学检查课件

临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查兰州大学第一医院实验诊断教研室李燕平1临床常用免疫学检查兰州大学第一医院实验诊断教研室1基本概念（基本概念（1 1）免疫免疫（Immune）是机体识别“自身”与“非己”抗原，对自身抗原形成天然免疫耐受，对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常情况下，这种生理功能对机体有益，可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用。在一定条件下，当免疫功能失调时，也会对机体产生有害的反应和结果，如引发超敏反应、自身免疫病和肿瘤.2基本概念（1）免疫（Immune）2 免疫功能免疫功能 是免疫系统在识别和清除“非己”抗原的过程中所产生的各种生物学作用的总称。主要包括免疫防御免疫自稳免疫监视3 免疫功能免疫防御免疫自稳免疫监视3 免疫防御免疫防御（Immunological defence)-是机体排斥微生物的侵袭及其他 外源性抗原异物的一种免疫保护功能 正常时可产生抗感染免疫的作用，防御功能过强会产生超敏反应，过弱则产生免疫缺陷 （后两种情况均属异常反应）4 免疫防御（Immunological defence)4免疫自稳免疫自稳(Homeostasis)-是机体免疫系统维持内环境 相对稳定的一种生理功能 正常时：机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的血细胞和抗原抗体复合物，而对自身成份保持免疫耐受 异常时：发生生理功能紊乱、自身免疫病等5免疫自稳(Homeostasis)5 免疫监视免疫监视(Immune surveillance)-是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变和病毒干扰细胞的一种生理保护作用。机体借以防止、监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。丧失:机体突变细胞失控,有可能导致肿瘤发生;或出现病毒的持续感染。6 免疫监视(Immune surveillance)6免疫学检查内容1.血清免疫球蛋白检测2.血清补体检测3.细胞免疫检测4.肿瘤标志物检测5.自身抗体检测6.流式细胞术检测7.器官与骨髓移植的检测7免疫学检查内容1.血清免疫球蛋白检测7一、血清免疫球蛋白测定（一、血清免疫球蛋白测定（1 1）免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是一组具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白。Ig由浆细胞产生，存在于血液和体液（包括组织液和外分泌液）中，也可作为抗原受体表达于B细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白。多数Ig具有抗体活性，可以特异性的识别和结合抗原，并引发一系列生物学效应。所有的抗体均是免疫球蛋白，但并非所有的免疫球蛋白都是抗体。8一、血清免疫球蛋白测定（1）免疫球蛋白(immunoglo一、血清免疫球蛋白测定一、血清免疫球蛋白测定(2)(2)免疫球蛋白的化学结构：免疫球蛋白的化学结构：Ig分子由四条肽链借二硫键连接组成，即两条相同的重链和相同的轻链。免疫球蛋白的血清型：免疫球蛋白的血清型：根据Ig重链恒定区肽链抗原特异性的不同，可将分为五类，在人体的含量由多到少依次为：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。9一、血清免疫球蛋白测定(2)免疫球蛋白的化学结构：9免疫球蛋白的生物学活性免疫球蛋白的生物学活性：与抗原结合作用 补体活化作用 亲细胞作用 调理作用 膜传递作用10免疫球蛋白的生物学活性：10免疫球蛋白免疫球蛋白G测定测定 IgG占血清Ig的70%80%，大部分抗细菌、抗病毒、抗毒素抗体都属于IgG型，具有调理作用、中和毒素、中和病毒介导ADCC、激活补体经典途径，也是唯一能通过胎盘的Ig。IgG合成速度快，分解慢，半衰期长，在血中含量最高。【参考值参考值】：单向免疫扩散法7.6-16.6g/L。IgG11免疫球蛋白G测定 IgG占血清Ig的70%【临床意义】【临床意义】IgG增高：增高：多克隆性增高:即IgG、IgA、IgM均增高，常见于各种慢性感染、以及自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮等。单克隆性增高 仅有某一种Ig增高而其他种不增高，主要见于免疫增殖性疾病如MM。IgG降低降低 见于各种先天性和获得性体液免疫缺陷病、联合免疫缺陷病，也见于病毒感染和应用免疫抑制剂患者。IgG12【临床意义】IgG12 IgAIgA可分为可分为血清型血清型和和分泌型分泌型 大部分血清IgA为单体，少量为双聚体或多聚体。占血清中免疫球蛋白1015%。分泌型在分泌液中是最主要的Ig，在外分泌系统中表现其重要的免疫功能，呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴样组织可合成大量的分泌型IgA(即s IgA)，s IgA性能稳定，在局部浓度大，能抑制病原体和有害抗原黏附在黏膜上，阻挡其进入体内；同时也因其具有条理吞噬和溶解作用，构成了黏膜第一防御机制；与这些部位炎症、感染、肿瘤等密切相关。母乳中的s IgA提高了婴儿出生后4-6个月内的局部免疫屏障，常为局部抗体。参考值和临床意义：为了解内容 IgA免疫球蛋白免疫球蛋白A测定测定13 IgA可分为血清型和分泌型IgA免疫球蛋白A测定13 IgM：是分子量最大的是分子量最大的IgIg，为五聚体，半衰期短、，为五聚体，半衰期短、出现早、消失快、组织穿透力弱。占血清总出现早、消失快、组织穿透力弱。占血清总Ig的的5-10%。血型中天然凝集素和冷凝集素的抗体类型是IgM，不能通过胎盘，新生儿脐血中若IgM增高，提示有宫内感染。在感染或疫苗接种以后，最先出现的抗体是IgM，是有效的凝集和溶解细胞的因子。免疫球蛋白免疫球蛋白M测定测定IgM14 IgM：免疫球蛋白M测定IgM14 IgD：血清含量极少,其功能尚不完全清楚,已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和链球菌溶血素“O”抗体等均属IgD，但活性甚低免疫球蛋白免疫球蛋白D测定测定IgD15 IgD：免疫球蛋白D测定IgD15 IgE：介导 型变态反应的发生，为重要的变态反应指标，与寄生虫感染及过敏有关免疫球蛋白免疫球蛋白E测定测定IgE Ig的检测的检测-常用免疫扩散法,ELISA法,免疫比浊法等16 IgE：免疫球蛋白E测定IgE Ig的检测-常用免疫 IgE：介导 型变态反应的发生，为重要的变态反应指标，与寄生虫感染及过敏有关免疫球蛋白免疫球蛋白E测定测定IgEIg的检测：的检测：常用免疫扩散法常用免疫扩散法,ELISA法法,免疫比浊法等免疫比浊法等F Ig的检测的检测 -常用免疫扩散法,ELISA法,免疫比浊法等17 IgE：免疫球蛋白E测定IgEIg的检测：17二、血清补体的测定二、血清补体的测定 补体系统：补体系统：补体加上其调节因子和相关膜蛋白共同组成一 个反应系统，称为补体系统。补体系统参与机体的抗感 染及免疫调节，也可介导病理反应（如参与破坏自身组 织和细胞而导致自身免疫病的发生）补体系统是体内 主要的免疫系统和放大系统。补补 体体(complement,C)：存在于人和脊椎动物正常新鲜血液及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白。18二、血清补体的测定 补体系统：补 体(complement 组组 成成 由传统途径的9种成分C1C9，旁路途径的三种成分及其衍生物B、D、P、H、I等因子组成 常作项目常作项目 总补体溶血活性检测、补体旁路途径溶血活性检测、补体C1q检测、C3检测、C4检测等 方方 法法 单向免疫扩散法、免疫比浊法等二、血清补体的测定二、血清补体的测定19 组 成二、血清补体的测定19三、自身抗体的检查三、自身抗体的检查自身免疫自身免疫：当某种原因使自身免疫耐受削弱或破坏，免疫系统会对自身成分产生免疫应答，这种现象称为自身免疫自身免疫性病的概念及特征自身免疫性病的概念及特征 健康个体的免疫调节功能会将自身耐受和自身免疫协调在一个相符相承的合理水平。当某种原因使自身免疫应答过分强烈时，也会导致相应的自身组织、器官损伤或攻能障碍，这种病理状态称为自身免疫病（AID）特征：特征：患者血清中可检出高滴度的自身抗体 患者组织器官的病理特征为免疫炎症 动物中可复制出相应的动物模型20三、自身抗体的检查自身免疫：20类风湿因子类风湿因子(RF)(RF)测定测定 RF：是抗变性IgG的自身抗体，主要为IgM，也可有见IgG、IgA、IgD、IgE型，可与人或动物的变性IgG结合，而不与正常 IgG发生凝集，最多见于类风湿关节患者。RF在类风湿关节患者中的检出率70%，RF阳性支持早期RA的倾向性诊断，如对于年轻女性应进行RA和风湿热的鉴别；而对非活动期RA的诊断，需参考病史。RF并不是RA的特异性抗体，在SLE患者约有50%RF阳性，在其他结缔组织病如SS、硬皮病、慢性活动性肝炎及老年人中均可有不同程度的阳性率。检测方法：检测方法：乳胶凝集法(定性)免疫比浊法(可准确测其含量)。21类风湿因子(RF)测定 RF：21抗核抗体检测（抗核抗体检测（1 1）ANA：泛指核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。性质主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD、IgE，可与不同来源的细胞核起反应，无器官特异性和种属特异性。ANA主要存在与血清中 抗核抗体（抗核抗体（ANA）类型及意义）类型及意义 类型类型:抗核蛋白抗体(DNP)，即脱氧核糖蛋白、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等22抗核抗体检测（1）ANA：22 抗双链抗双链DNA(ds-DNA抗核抗体检测抗核抗体检测)抗体：抗体：抗ds-DNA的靶抗原是细胞核中DNA的 双螺旋结构，是SLE的标志性抗体.抗核抗体检测（抗核抗体检测（2 2）23 抗双链DNA(ds-DNA抗核抗体检测)抗体：抗核抗体 抗RNP抗体：即核糖核蛋白，高效价的抗RNP抗体对混合性结缔组织病有诊断意义，低效价的抗RNP抗体可在SLE患者中发现抗Sm抗体：是 SLE的特征性标志之一，若抗ds-DNA和抗Sm抗体同时检测，可提高SLE的诊断率抗SS-A抗体：为干燥综合正（SS）的A抗原,抗SS-A抗体主要见于SS，但也见于其他自身免疫病如SLE中抗SS-B抗体：为干燥综合正（SS）的B抗原,13%的SLE及30%的SS患者有抗SS-B抗体 抗抗ENA抗体：抗体：可提取性核抗原(ENA),多从动物胸腺中提取24 抗ENA抗体：24组织和细胞抗体检测（组织和细胞抗体检测（1 1）抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（AMA）是一种针对肝细胞质中线粒体内膜脂蛋白成分的自身抗体,无器官和组织特异性抗体,该抗体主要是IgG.常用大白鼠胃或肾皮质作抗原进行免疫荧光法测定 【临床意义】原发性胆汁性肝硬化（PAB）可有70%94%为阳性反应或效价=1:160；长期持续性肝阻塞、慢性活动性肝炎、原因不明肝硬化等也呈阳性反应25组织和细胞抗体检测（1）抗线粒体抗体（AMA）25 抗甲状腺球蛋白抗体及微粒体抗体：抗甲状腺球蛋白抗体及微粒体抗体：这种抗体可以针对甲状腺的多种成分,以甲状腺球蛋白抗体和微粒体为代表。抗体主要是IgG,可以介导ADCC活性,引起慢性淋巴细胞性甲状腺炎,又称乔本甲状腺炎26 抗甲状腺球蛋白抗体及微粒体抗体：26 抗乙酰胆碱抗体（抗乙酰胆碱抗体（AchR）抗AchR抗体的检测对重症肌无力（MG）具有诊断意义。且特异性和敏感性较高。大约90%的MG患者阳性；伴有眼肌症状的患者，抗体效价低于普通症状患者；同时还用来检测对该病免疫抑制疗效的效果。肌萎缩侧索硬化症患者用蛇毒治疗后可出现假阳性27 抗乙酰胆碱抗体（AchR）27 抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）检出阳性率较高的疾病有慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化（PAB），而在肝外性胆汁阻塞、药物诱发性肝病、急性病毒性肝炎及肝细胞癌等时，ASMA的检出率极低 其他：其他：抗心肌抗体、抗胃壁细胞抗体、抗胰岛素抗体、抗肾小球基底膜抗体、抗精子抗体、抗血细胞抗体等28 抗平滑肌抗体（ASMA）28血清血清C-C-反应蛋白的测定反应蛋白的测定 C-反应蛋白反应蛋白(CRP)是一种由肝脏产生的急性时相蛋白。CRP能激活补体，促进吞噬并有其他的免疫调节功能。因能与肺炎链球菌菌体的C多糖起沉淀反应而得名。CRP的检测对炎症，组织坏死，恶性肿瘤等诊断及疗效的观察有重要意义。常用方法有：常用方法有：单向免疫扩散法、免疫比浊法、胶乳凝集法等。注意其含量与年龄相关29血清C-反应蛋白的测定 C-反应蛋白(CRP)295 5、肿瘤标志物的检测（、肿瘤标志物的检测（1 1）概念 是由肿瘤细胞本身合成 释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质.分类 蛋白类 糖类 酶类 305、肿瘤标志物的检测（1）概念30蛋白类肿瘤标志物的检测 甲种胎儿球蛋白甲种胎儿球蛋白（AFP）概念：参考值：RIA或ELISA法低于25 g/L;定性试验阴性临床意义 （主要用于诊断干细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤）原发性肝细胞性肝癌 生殖腺胚胎癌 病毒性肝炎 孕妇31蛋白类肿瘤标志物的检测 甲种胎儿球蛋白（AFP）31 癌胚抗原测定癌胚抗原测定（CEA）概念：参考值：RIA或ELISA法低于15g/L;定性试验阴性临床意义（主要用于对消化道肿瘤的诊断/预后/复发的判断）CEA明显升高:胰腺癌、结肠癌、乳腺癌 CEA浓度下降,病情好转;浓度升高病情加重 CEA轻度升高:结肠炎、胰腺炎、肺气肿等 其他体液CEA检测:胃液和唾液中CEA的检测有助于对胃癌诊断32 癌胚抗原测定（CEA）32组织多肽抗原(TPA)概念：存在于胎盘和肿瘤组织中的单链多肽参考值：ELISA法低于130U/L;临床意义（主要用于恶性肿瘤的诊断/预后/复发的判断）TPA明显升高:急性肝炎 胰腺炎 肺炎、妊娠3个月 浓度下降,病情好转;浓度升高病情加重 33组织多肽抗原(TPA)概念：存在于胎盘和肿瘤组织中的单链多肽前列腺特异抗原测定(PSA)概念：参考值：临床意义（主要用于前列腺癌的诊断/预后/复发的判断）34前列腺特异抗原测定(PSA)概念：34鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)概念：参考值：临床意义（主要用于宫颈癌 肺鳞状上皮细胞癌食官癌等的诊断/预后/复发的判断）35鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)概念：35糖脂类肿瘤标志物癌抗原-50测定概念：参考值：临床意义（主要用于胰腺癌 胆囊癌 原发性肝癌的诊断/预后/复发的判断）36糖脂类肿瘤标志物癌抗原-50测定36癌抗原72-4测定概念：参考值：临床意义（主要用于卵巢癌 大肠癌 胃癌的诊断/预后/复发的判断）37癌抗原72-4测定概念：参考值：临床意义（主要用于糖链抗原19-9测定概念：参考值：临床意义（主要用于胰腺癌 肝胆和胃肠道疾病 的诊断/预后/复发的判断）38糖链抗原19-9测定概念：38癌抗原125测定概念：参考值：临床意义（主要用于卵巢肿瘤的诊断/预后/复发的判断）39癌抗原125测定概念：参考值：临床意义（主要用于卵癌抗原242测定概念：参考值：临床意义（主要用于胰腺癌 结肠癌 的诊断/预后/复发的判断）40癌抗原242测定概念：参考值：临床意义（主要用于胰癌抗原15-3测定概念：参考值：临床意义（主要用于乳腺癌的诊断/预后/复发的判断）41癌抗原15-3测定概念：参考值：临床意义（主要用于酶类肿瘤标志物前列腺酸性磷酸酶(PAP)神经元特异性烯醇化酶(NSE)异常凝集酶原(APT)a-L-岩藻糖苷酶(AFU)42酶类肿瘤标志物前列腺酸性磷酸酶(PAP)42