厌氧菌分枝杆菌棒状杆菌重点课件

第十二章第十二章厌厌 氧氧 性性 细细 菌菌（anaerobic bacteria）第十二章1必须在无氧环境下，才能生长繁殖必须在无氧环境下，才能生长繁殖根据能否形成芽胞，可分为根据能否形成芽胞，可分为 厌氧芽胞梭菌属厌氧芽胞梭菌属 破伤风梭菌破伤风梭菌(ClostridiumClostridium)产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 肉毒梭菌肉毒梭菌 艰难梭菌艰难梭菌无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌必须在无氧环境下，才能生长繁殖2厌氧芽胞梭菌属严格厌氧菌，严格厌氧菌，G+杆菌杆菌芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强周鞭毛，无荚膜（除产气荚膜梭菌外）周鞭毛，无荚膜（除产气荚膜梭菌外）致病菌产生外毒素致病，病情严重致病菌产生外毒素致病，病情严重防治：类毒素与抗毒素防治：类毒素与抗毒素 厌氧芽胞梭菌属严格厌氧菌，G+杆菌3破伤风梭菌破伤风梭菌（Ctetani）：）：破伤风的病原菌破伤风的病原菌生物学性状生物学性状生物学性状生物学性状形态、染色形态、染色形态、染色形态、染色：G G、芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状破伤风梭菌（Ctetani）：破伤风的病原菌生物学性状4 培养培养：专性厌氧专性厌氧 血平板：薄膜状爬行生长血平板：薄膜状爬行生长抵抗力抵抗力：芽胞芽胞 青霉素敏感青霉素敏感 培养：专性厌氧5 致病性致病性致病性致病性来源：土壤来源：土壤来源：土壤来源：土壤途径：伤口感染途径：伤口感染途径：伤口感染途径：伤口感染感染条件：感染条件：感染条件：感染条件：局部厌氧微环境局部厌氧微环境局部厌氧微环境局部厌氧微环境 窄而深或呈盲端的伤口，中间充满坏死组织窄而深或呈盲端的伤口，中间充满坏死组织窄而深或呈盲端的伤口，中间充满坏死组织窄而深或呈盲端的伤口，中间充满坏死组织 有泥土污染，使局部组织缺血缺氧有泥土污染，使局部组织缺血缺氧有泥土污染，使局部组织缺血缺氧有泥土污染，使局部组织缺血缺氧 大面积外伤伴有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染大面积外伤伴有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染大面积外伤伴有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染大面积外伤伴有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染致病物质：致病物质：致病物质：致病物质：不侵入组织，仅在伤口局部繁殖，其致病主要不侵入组织，仅在伤口局部繁殖，其致病主要有破伤风痉挛毒素引起有破伤风痉挛毒素引起 致病性6破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）结构结构菌体：一条多肽菌体：一条多肽释出菌体：轻链释出菌体：轻链-S-S-重链重链重链：神经节苷脂结合的单位重链：神经节苷脂结合的单位轻链：毒性作用轻链：毒性作用破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）结构7破伤风痉挛毒素作用机制破伤风痉挛毒素作用机制与神经系统的结合与神经系统的结合重链识别运动神经元外胞浆膜上的受体并结重链识别运动神经元外胞浆膜上的受体并结合，促使毒素进入细胞内小泡中合，促使毒素进入细胞内小泡中内在化作用内在化作用小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经元细胞体，进入传入神经末稍，到达运动神经元细胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统最终进入中枢神经系统破伤风痉挛毒素作用机制与神经系统的结合8破伤风痉挛毒素作用机制破伤风痉挛毒素作用机制膜的转位膜的转位通过重链通过重链N端的介导产生膜的转位使轻链进入胞端的介导产生膜的转位使轻链进入胞质溶胶质溶胶胞质溶胶中作用靶的改变胞质溶胶中作用靶的改变轻链发挥毒性作用，使储存抑制性神经介质小轻链发挥毒性作用，使储存抑制性神经介质小泡膜蛋白发生改变，阻止泡膜蛋白发生改变，阻止抑制性神经介质抑制性神经介质（-氨基丁酸、甘氨酸）氨基丁酸、甘氨酸）的释放，使肌肉活动的兴奋与的释放，使肌肉活动的兴奋与抑制失调，造成抑制失调，造成麻痹性痉挛麻痹性痉挛破伤风痉挛毒素作用机制膜的转位9厌氧菌分枝杆菌棒状杆菌重点课件10破伤风梭菌破伤风梭菌破伤风梭菌破伤风梭菌局部繁殖，并产生痉挛毒素局部繁殖，并产生痉挛毒素局部繁殖，并产生痉挛毒素局部繁殖，并产生痉挛毒素经创口经创口经创口经创口毒素经突触逆向运输毒素经突触逆向运输毒素经突触逆向运输毒素经突触逆向运输毒素经淋巴、血流毒素经淋巴、血流毒素经淋巴、血流毒素经淋巴、血流CNSCNS毒素经毒素经毒素经毒素经HCHC与神经与神经与神经与神经细胞表面受体结合细胞表面受体结合细胞表面受体结合细胞表面受体结合 毒素进入细胞毒素进入细胞毒素进入细胞毒素进入细胞轻链发挥毒性作用轻链发挥毒性作用轻链发挥毒性作用轻链发挥毒性作用阻止抑制性突触释放阻止抑制性突触释放阻止抑制性突触释放阻止抑制性突触释放抑制性神经介质抑制性神经介质抑制性神经介质抑制性神经介质 屈、伸肌同时强烈收缩屈、伸肌同时强烈收缩屈、伸肌同时强烈收缩屈、伸肌同时强烈收缩骨骼肌强直痉挛骨骼肌强直痉挛骨骼肌强直痉挛骨骼肌强直痉挛 角弓反张，牙关紧闭等角弓反张，牙关紧闭等角弓反张，牙关紧闭等角弓反张，牙关紧闭等破伤风梭菌局部繁殖，并产生痉挛毒素经创口毒素经突触逆向运输毒11A severe case of tetanus.muscles,back and legs are rigid muscle spasms can break bones can be fatal(e.g respiratory failure)A severe case of tetanus.12免疫性破伤风免疫属抗毒素免疫，主要是抗毒破伤风免疫属抗毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用（毒素与中枢神经组织素发挥中和作用（毒素与中枢神经组织结合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所结合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中和）能中和）病后不会获得牢固免疫力病后不会获得牢固免疫力获得有效抗毒素的途径是人工免疫获得有效抗毒素的途径是人工免疫类类毒素毒素免疫性破伤风免疫属抗毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用（毒素13微生物学检查法微生物学检查法一般不进行涂片镜检和分离培养典型的症状和病史即可作出诊断微生物学检查法一般不进行涂片镜检和分离培养14 防治防治特异性特异性预防预防 -注射注射破伤风破伤风类毒素类毒素 百白破三联疫苗百白破三联疫苗 免疫程序：免疫程序：3 3、4 4、5 5月月 3 3次次 2 2、7 7岁加强岁加强 2 2次次 特殊情况特殊情况 1 1次次紧急预防紧急预防-注射破伤风注射破伤风抗毒素抗毒素 （tetanus antitoxintetanus antitoxin，TATTAT）1500-1500-3000 U3000 U，同时做类毒素主动免疫同时做类毒素主动免疫伤口处理伤口处理伤口处理伤口处理 清创扩创清创扩创清创扩创清创扩创 -防止创口厌氧微环境的形成防止创口厌氧微环境的形成特异性治疗特异性治疗特异性治疗特异性治疗 早期足量早期足量早期足量早期足量 TAT 10TAT 10万万-20-20万万 U U，先做皮试先做皮试抗菌治疗抗菌治疗抗菌治疗抗菌治疗 抗生素抗生素 15产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌(Cperfringens)G G G G粗大杆菌，荚膜、芽胞（次极端、椭圆形、小于菌体），粗大杆菌，荚膜、芽胞（次极端、椭圆形、小于菌体），粗大杆菌，荚膜、芽胞（次极端、椭圆形、小于菌体），粗大杆菌，荚膜、芽胞（次极端、椭圆形、小于菌体），无鞭毛无鞭毛无鞭毛无鞭毛产气荚膜梭菌(Cperfringens)G粗大杆菌，荚16产气荚膜梭菌培养特性培养特性培养特性培养特性 厌氧培养，厌氧培养，厌氧培养，厌氧培养，45454545度最适度最适度最适度最适庖肉庖肉庖肉庖肉血平板血平板血平板血平板 双层溶血双层溶血双层溶血双层溶血 内环完全溶血内环完全溶血 -毒素毒素 外环不完全溶血外环不完全溶血-毒素毒素牛奶培养基牛奶培养基牛奶培养基牛奶培养基 “汹涌发酵汹涌发酵汹涌发酵汹涌发酵”（stormy fermentationstormy fermentation）分型分型分型分型 毒素的抗原性，分毒素的抗原性，分毒素的抗原性，分毒素的抗原性，分A-E 5A-E 5A-E 5A-E 5个血清型，个血清型，个血清型，个血清型，对人致病主要为对人致病主要为对人致病主要为对人致病主要为A A A A型型型型产气荚膜梭菌培养特性 厌氧培养，45度最适17双层溶血双层溶血双层溶血双层溶血内环完全溶血内环完全溶血-毒素毒素 外环不完全溶血外环不完全溶血-毒素毒素汹涌发酵汹涌发酵 （stormy fermentation）双层溶血汹涌发酵（stormy fermentation）18产多种外毒素，有产多种外毒素，有产多种外毒素，有产多种外毒素，有4 4 4 4种主要毒素种主要毒素种主要毒素种主要毒素所致疾病所致疾病所致疾病所致疾病 气性坏疽气性坏疽气性坏疽气性坏疽-60%80%-60%80%-60%80%-60%80%A A A A型，型，型，型，毒素等毒素等毒素等毒素等 食物中毒食物中毒食物中毒食物中毒-主要主要主要主要A A A A型型型型 坏死性肠炎坏死性肠炎坏死性肠炎坏死性肠炎-C C C C型，型，型，型，毒素毒素毒素毒素微生物学检查微生物学检查微生物学检查微生物学检查 染色镜检染色镜检染色镜检染色镜检G+G+G+G+大杆菌、荚膜，白细胞少，伴杂菌大杆菌、荚膜，白细胞少，伴杂菌大杆菌、荚膜，白细胞少，伴杂菌大杆菌、荚膜，白细胞少，伴杂菌防治防治防治防治 清创、扩创，使用抗生素，多价抗毒素和高压氧舱法清创、扩创，使用抗生素，多价抗毒素和高压氧舱法清创、扩创，使用抗生素，多价抗毒素和高压氧舱法清创、扩创，使用抗生素，多价抗毒素和高压氧舱法产多种外毒素，有4种主要毒素19肉毒梭菌肉毒梭菌（Cbotulinum）n芽芽胞胞呈呈椭椭圆圆形形，粗粗于于菌菌体体，位位于于次次极极端端，使使细细胞胞呈呈汤匙状汤匙状或或网球拍状，网球拍状，有鞭毛，无荚膜有鞭毛，无荚膜分分4组组7型型肉毒梭菌（Cbotulinum）芽胞呈椭圆形，粗于菌体，位20致病性致病性致病物质致病物质-肉毒毒素肉毒毒素剧毒（对人致死量为剧毒（对人致死量为0.1g)0.1g)所致疾病所致疾病食物中毒食物中毒进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食物中毒进食污染食物（多为罐头、肉制品、豆制品）发生食物中毒-食入毒素食入毒素临床表现：少见胃肠道症状，主要为临床表现：少见胃肠道症状，主要为神经末梢麻痹神经末梢麻痹（松驰型）（松驰型）婴儿肉毒病婴儿肉毒病细菌进入肠道，繁殖，产生毒素而致病细菌进入肠道，繁殖，产生毒素而致病以以6 6个月以内的小婴儿居多个月以内的小婴儿居多创伤感染中毒创伤感染中毒致病性致病物质-肉毒毒素21艰难梭菌（艰难梭菌（C Cdifficiledifficile）新生儿肠道中正常菌群新生儿肠道中正常菌群因因长长期期使使用用抗抗生生素素引引起起导导致致菌菌群群失失调调后后可引起内源性感染或院内交叉感染可引起内源性感染或院内交叉感染所致疾病所致疾病抗生素相关性腹泻抗生素相关性腹泻假膜性肠炎假膜性肠炎艰难梭菌（Cdifficile）新生儿肠道中正常菌群22无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌专性厌氧专性厌氧正常菌群，主要分布在皮肤、口腔、上正常菌群，主要分布在皮肤、口腔、上呼吸道、泌尿生殖道呼吸道、泌尿生殖道种类多种类多无芽胞厌氧菌专性厌氧23常见的致病菌常见的致病菌G-杆菌：杆菌：脆弱类杆菌脆弱类杆菌(Bfragilis)临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株G-球菌：韦荣菌属球菌：韦荣菌属咽喉部主要厌氧菌咽喉部主要厌氧菌G+球菌：消化链球菌属球菌：消化链球菌属仅次于脆弱类杆菌仅次于脆弱类杆菌主要寄居于阴道主要寄居于阴道G+杆菌：杆菌：丙酸杆菌属：痤疮丙酸杆菌丙酸杆菌属：痤疮丙酸杆菌双歧杆菌属双歧杆菌属真杆菌属真杆菌属常见的致病菌G-杆菌：脆弱类杆菌(Bfragilis)24致病条件致病条件属正常菌群，在成为条件致病菌后，可属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引起内源性感染引起内源性感染感染条件感染条件寄居部位改变寄居部位改变宿主免疫力下降宿主免疫力下降菌群失调菌群失调厌氧微环境厌氧微环境致病条件属正常菌群，在成为条件致病菌后，可引起内源性感染25感染特征感染特征 内源性感染，可及全身，多呈慢性无特定病型，大多为化脓性感染分泌物或脓液粘稠，乳白色、粉红色、血色或棕黑色，有恶臭，有时有气体使用氨基糖苷类抗生素长期无效脓液、血液等标本用普通培养法无厌氧菌生长临床上遇到以下情况，应考虑有无厌氧菌感染感染特征 内源性感染，可及全身，多呈慢性临床上遇到以下情况，26微生物学检查法微生物学检查法标本采取标本采取直接涂片镜检直接涂片镜检分离培养与鉴定分离培养与鉴定防治原则防治原则破坏其成为条件致病菌的条件破坏其成为条件致病菌的条件合理使用抗生素合理使用抗生素微生物学检查法27 分枝杆菌属分枝杆菌属(Mycobacterium）分枝杆菌属28分枝杆菌属分枝杆菌属一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名主要特点主要特点细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）常用抗酸染色鉴定，呈常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色抗酸染色阳性阳性引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿分类分类结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌复合群-对人类致病的对人类致病的对人类致病的对人类致病的有人型结核杆菌有人型结核杆菌有人型结核杆菌有人型结核杆菌和和和和牛型结核杆菌牛型结核杆菌牛型结核杆菌牛型结核杆菌非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌分枝杆菌属29结结核核病病是是一一种种古古老老的的疾疾病病。从从新新石石器器时时代代人人类类遗遗骨骨和和古古代代木木乃乃伊伊骨骨关关节节病病理理组组织织中中，已已发发现现人人类类在在史史前前时时代代已已患过结核病。患过结核病。中中国国医医史史中中，结结核核病病最最早早记记载载于于内内经经并并形形容容为为“虚虚痨痨”之之症症。古古代代文文献献有有提提及及肺肺痨痨为为痨痨虫虫于于肺肺所所致致，但但未未能确定致病的成因。能确定致病的成因。结核病是一种古老的疾病。从新石器时代人类遗骨和古代木乃伊骨关301919世世纪纪，结结核核病病在在欧欧洲洲和和北北美美大大肆肆流流行行，散散布布到到社社会会的的各各个个阶阶层层，生生活活困困顿顿的的人人群群成成了了结结核核病病的的温温床床。而而且且是是当当时时造造成成死死亡亡的的主主要要原原因因，被被人人们们称称为为“巨巨大大的的白色瘟疫白色瘟疫”。许许多多当当年年杰杰出出的的人人物物罹罹患患结结核核病病：雪雪莱莱、席席勒勒、勃勃朗朗宁宁、梭梭罗罗等等。结结核核病病的的流流行行甚至影响了诗人和艺术家的思想。甚至影响了诗人和艺术家的思想。19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，散布到社会的各个阶层，31德德国国科科学学家家Robert Koch在在1882年年发发现现了了一一种种特特殊殊的的微微生生物物结结核核杆杆菌菌，结结核核病病的的致致病病细细菌菌。他他还还证证明明了了这这种种微微生生物物是是可可以以在在培培养养基基里里培培养养出出来来的的。这这一一发发现使得结核的实验研究成为现实。现使得结核的实验研究成为现实。德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊的32世界结核病防治现状世界结核病防治现状自自发发现现MTB以以来来，全全球球约约有有两两亿亿人人死于死于TB，且疫情发展日趋严重。，且疫情发展日趋严重。WHO已已将将TB作作为为重重点点控控制制的的传传染染病病之之一一，并并于于1995年年起起将将每每年年的的3月月24日日定定为为“世世界界防防治治结结核核病病日日”，以以提提醒公众加深对醒公众加深对TB的认识。的认识。世界结核病防治现状自发现MTB以来，全球约有两亿人死于TB，33据据WHO预预计计，目目前前全全球球约约20亿亿人人已已感感染了染了MTB。全球现有全球现有TB病人病人2000万。万。TB的的死死亡亡将将达达历历史史最最高高水水平平，全全球球每每天天有有8000人人死死于于TB，每每年年约约300万万人人死死于于TB。特特别别是是在在发发展展中中国国家家，TB的的形形势势尤尤其其严严峻峻，全全球球98的的TB死死亡亡和和95的新发的新发TB都是在发展中国家。都是在发展中国家。据WHO预计，目前全球约20亿人已感染了MTB。34厌氧菌分枝杆菌棒状杆菌重点课件35我我我我国国国国属属属属于于于于全全全全球球球球2222个个个个TBTB高高高高负负负负担担担担国国国国家家家家之之之之一一一一，TBTB的的的的患患患患病病病病人人人人数数数数在在在在世世世世界界界界各各各各国国国国中中中中居居居居于于于于第第第第2 2位位位位。我我我我国国国国TBTB的流行具有的流行具有的流行具有的流行具有“五多一高五多一高五多一高五多一高”的特点：的特点：的特点：的特点：MTBMTB感染人数多。感染人数多。感染人数多。感染人数多。现患肺现患肺现患肺现患肺TBTB病人多。病人多。病人多。病人多。TBTB死亡人数多。死亡人数多。死亡人数多。死亡人数多。耐药耐药耐药耐药TBTB人多。人多。人多。人多。农村农村农村农村TBTB人多。人多。人多。人多。传染性肺传染性肺传染性肺传染性肺TBTB患者疫情居高不下。患者疫情居高不下。患者疫情居高不下。患者疫情居高不下。我国属于全球22个TB高负担国家之一，TB的患病人数在世界各36抗酸染色抗酸染色由于细菌细胞壁中含大量脂质，由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长一般不易着色，若经加温或延长染色时间着色后能抵抗盐酸酒精染色时间着色后能抵抗盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-(acid-fast bacilli)fast bacilli)抗酸染色法抗酸染色法(acid-fast stain)(acid-fast stain)：以：以5 5石炭酸复红石炭酸复红加温染色，加温染色，再用再用3 3盐酸酒精盐酸酒精脱色，然后用脱色，然后用美蓝复染，则美蓝复染，则分枝杆菌呈红色分枝杆菌呈红色(+)(+)，其他细菌和背景物质为蓝，其他细菌和背景物质为蓝色色(-)(-)。抗酸染色由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或37生物学性状生物学性状形态与染色形态与染色形态与染色形态与染色 菌体细长、分枝状菌体细长、分枝状菌体细长、分枝状菌体细长、分枝状 抗酸染色（分枝菌酸）抗酸染色（分枝菌酸）抗酸染色（分枝菌酸）抗酸染色（分枝菌酸）MuchMuch颗粒（颗粒（颗粒（颗粒（L L型）型）型）型）生物学性状形态与染色 38培养培养特点特点专性需氧专性需氧生长缓慢（生长缓慢（18-24h/18-24h/代）代）营养要求高，常用营养要求高，常用罗氏固体培养基罗氏固体培养基生长现象生长现象液体：表面生长（菌膜）液体：表面生长（菌膜）固体：颗粒、结节、菜花状菌落，乳白或米黄，不透明固体：颗粒、结节、菜花状菌落，乳白或米黄，不透明培养特点39 抵抵抵抵抗抗抗抗力力力力较较较较强强强强：干干干干痰痰痰痰中中中中可可可可存存存存活活活活6 68 8个个个个月月月月；在在在在3 3HClHCl、6 6HH2 2SOSO4 4或或或或4 4NaOHNaOH溶溶溶溶液液液液中中中中能能能能耐耐耐耐受受受受30min30min，因因因因而而而而常常常常以以以以酸酸酸酸碱碱碱碱处处处处理理理理严严严严重重重重污污污污染染染染的的的的样样样样本本本本，杀杀杀杀死死死死杂杂杂杂菌菌菌菌和和和和消消消消化化化化粘粘粘粘稠稠稠稠物物物物质质质质，以提高检出率。以提高检出率。以提高检出率。以提高检出率。4 4.抵抗力抵抗力 对对对对湿湿湿湿热热热热、紫紫紫紫外外外外线线线线、乙乙乙乙醇醇醇醇的的的的抵抵抵抵抗抗抗抗力力力力弱弱弱弱。在在在在液液液液体体体体中中中中加加加加热热热热62626363 15 15 minmin或或或或煮煮煮煮沸沸沸沸、直直直直射射射射日日日日光光光光下下下下2 23 3 h h、75%75%乙乙乙乙醇醇醇醇内内内内数数数数分分分分钟钟钟钟即即即即死亡。死亡。死亡。死亡。抵抗力较强：干痰中可存活68个月；在3HCl405 5.变异性变异性 对对对对链链链链霉霉霉霉素素素素、利利利利福福福福平平平平、异异异异烟烟烟烟肼肼肼肼等等等等抗抗抗抗结结结结核核核核药药药药物物物物较较较较易易易易产产产产生生生生耐耐耐耐药药药药性性性性，耐耐耐耐药药药药性性性性菌菌菌菌株株株株常常常常伴伴伴伴随随随随活活活活力力力力和和和和毒毒毒毒力减弱。力减弱。力减弱。力减弱。菌落、毒力等也易发生变异。菌落、毒力等也易发生变异。菌落、毒力等也易发生变异。菌落、毒力等也易发生变异。19081908年年年年CalmetteCalmette和和和和GurinGurin将将将将有有有有毒毒毒毒的的的的牛牛牛牛分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌培培培培养养养养于于于于含含含含胆胆胆胆汁汁汁汁、甘甘甘甘油油油油、马马马马铃铃铃铃薯薯薯薯的的的的培培培培养养养养基基基基中中中中，经经经经230230次次次次传传传传代代代代，历历历历时时时时1313年年年年，使使使使其其其其毒毒毒毒力力力力发发发发生生生生变变变变异异异异，成成成成为为为为对对对对人人人人无无无无致致致致病病病病性性性性，而而而而仍仍仍仍保保保保持持持持良良良良好好好好免免免免疫疫疫疫原原原原性性性性的的的的疫疫疫疫苗苗苗苗株株株株，称称称称为为为为卡卡卡卡介介介介苗苗苗苗（Bacillus Bacillus Calmette-Calmette-GurinGurin，BCGBCG）。）。）。）。5.变异性 对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药物较41 结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌无无无无内内内内毒毒毒毒素素素素，也也也也不不不不产产产产生生生生外外外外毒毒毒毒素素素素和和和和侵侵侵侵袭袭袭袭性性性性酶酶酶酶类类类类，其其其其致致致致病病病病作作作作用用用用可可可可能能能能与与与与细细细细菌菌菌菌在在在在组组组组织织织织细细细细胞胞胞胞内内内内顽顽顽顽强强强强增增增增殖殖殖殖引引引引起起起起炎炎炎炎症症症症反反反反应应应应，以以以以及及及及诱诱诱诱导导导导机机机机体体体体产产产产生生生生迟迟迟迟发发发发型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应性性性性损损损损伤伤伤伤有有有有关关关关。结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌可可可可通通通通过过过过呼呼呼呼吸吸吸吸道道道道、消消消消化化化化道道道道和和和和破破破破损损损损的的的的皮皮皮皮肤肤肤肤黏黏黏黏膜膜膜膜进进进进入入入入机机机机体体体体，侵侵侵侵犯犯犯犯多多多多种种种种组组组组织织织织器器器器官官官官，引引引引起起起起相相相相应应应应器器器器官官官官的的的的结核病，以肺结核最为常见。结核病，以肺结核最为常见。结核病，以肺结核最为常见。结核病，以肺结核最为常见。二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性 结核分枝杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其42致病物质致病物质-菌体成分菌体成分vv脂质：索状因子脂质：索状因子脂质：索状因子脂质：索状因子（破坏细胞，引起肉芽肿）（破坏细胞，引起肉芽肿）磷脂磷脂单核细胞增生单核细胞增生单核细胞增生单核细胞增生慢性肉芽肿慢性肉芽肿慢性肉芽肿慢性肉芽肿结节形成结节形成结节形成结节形成蜡质蜡质D D 引起迟发性过敏反应引起迟发性过敏反应硫酸脑苷酯硫酸脑苷酯 抑制吞噬体与溶酶体结合抑制吞噬体与溶酶体结合vv蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质IVIVIVIV型变态反应型变态反应型变态反应型变态反应vv多糖多糖多糖多糖致病性致病物质-菌体成分致病性43 1.1.原发感染原发感染 多见于儿童。随飞沫和多见于儿童。随飞沫和多见于儿童。随飞沫和多见于儿童。随飞沫和尘埃通过呼吸道进入肺泡。尘埃通过呼吸道进入肺泡。尘埃通过呼吸道进入肺泡。尘埃通过呼吸道进入肺泡。细胞内寄生。细胞内寄生。细胞内寄生。细胞内寄生。原发灶内结核杆菌可经原发灶内结核杆菌可经原发灶内结核杆菌可经原发灶内结核杆菌可经淋巴管扩散到肺门淋巴结淋巴管扩散到肺门淋巴结淋巴管扩散到肺门淋巴结淋巴管扩散到肺门淋巴结（原发综合征原发综合征原发综合征原发综合征）。随着机体）。随着机体）。随着机体）。随着机体免疫力的建立，原发灶大多免疫力的建立，原发灶大多免疫力的建立，原发灶大多免疫力的建立，原发灶大多可纤维化和钙化而自愈。可纤维化和钙化而自愈。可纤维化和钙化而自愈。可纤维化和钙化而自愈。极少数免疫力低下者经极少数免疫力低下者经极少数免疫力低下者经极少数免疫力低下者经淋巴、血流扩散至全身，导淋巴、血流扩散至全身，导淋巴、血流扩散至全身，导淋巴、血流扩散至全身，导致致致致全身粟粒性结核全身粟粒性结核全身粟粒性结核全身粟粒性结核或或或或结核性结核性结核性结核性脑膜炎脑膜炎脑膜炎脑膜炎。（一）（一）肺部感染肺部感染 1.原发感染（一）肺部感染44 多多多多见见见见于于于于成成成成年年年年人人人人。大大大大多多多多为为为为内内内内源源源源性性性性感感感感染染染染，极极极极少少少少由由由由外外外外源源源源性性性性感感感感染染染染所所所所致致致致。由由由由于于于于机机机机体体体体已已已已形形形形成成成成对对对对结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的特特特特异异异异性性性性细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫，对对对对再再再再次次次次侵侵侵侵入入入入的的的的结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌有有有有较较较较强强强强的的的的局局局局限限限限能能能能力力力力，故故故故继继继继发发发发感感感感染染染染的的的的特特特特点点点点是是是是病病病病灶灶灶灶局局局局限限限限，一一一一般般般般不不不不累累累累及及及及邻邻邻邻近近近近的的的的淋淋淋淋巴巴巴巴结结结结，主主主主要要要要表表表表现现现现为为为为慢慢慢慢性性性性肉肉肉肉芽芽芽芽肿肿肿肿性性性性炎炎炎炎症症症症，形形形形成成成成结结结结核核核核结结结结节节节节，发发发发生生生生纤纤纤纤维维维维化化化化或或或或干干干干酪酪酪酪样样样样坏坏坏坏死死死死。病变常发生在肺尖部位。病变常发生在肺尖部位。病变常发生在肺尖部位。病变常发生在肺尖部位。2.2.继发感染继发感染 多见于成年人。大多为内源性感染，极少由45（二）（二）肺外感染肺外感染 部部部部分分分分肺肺肺肺结结结结核核核核患患患患者者者者体体体体内内内内的的的的结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌可可可可经经经经血血血血液液液液、淋淋淋淋巴巴巴巴液液液液扩扩扩扩散散散散侵侵侵侵入入入入肺肺肺肺外外外外组组组组织织织织器器器器官官官官，引引引引起起起起相相相相应应应应的的的的脏脏脏脏器器器器结结结结核核核核，如如如如脑脑脑脑、肾肾肾肾、骨骨骨骨、关关关关节节节节、生生生生殖殖殖殖器器器器官官官官等等等等结结结结核核核核。艾艾艾艾滋滋滋滋病病病病等等等等免免免免疫疫疫疫力力力力极极极极度度度度低低低低下下下下者者者者，严严严严重重重重时时时时可可可可造造造造成成成成全全全全身身身身播播播播散散散散性性性性结结结结核核核核。痰痰痰痰菌菌菌菌被被被被咽咽咽咽入入入入消消消消化化化化道道道道可可可可引引引引起起起起肠肠肠肠结结结结核核核核、结结结结核核核核性性性性腹腹腹腹膜膜膜膜炎炎炎炎等等等等。通通通通过过过过破破破破损损损损皮皮皮皮肤肤肤肤感感感感染染染染结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌可可可可导导导导致致致致皮皮皮皮肤肤肤肤结结结结核核核核。近近近近年年年年有有有有许许许许多多多多报报报报道道道道，肺肺肺肺外外外外结结结结核核核核标标标标本本本本中中中中结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌L L L L型的检出率比较高，应引起足够重视。型的检出率比较高，应引起足够重视。型的检出率比较高，应引起足够重视。型的检出率比较高，应引起足够重视。（二）肺外感染 部分肺结核患者体内的结核分枝杆菌46（三）免疫性与（三）免疫性与超敏反应超敏反应 人人人人类类类类对对对对结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的感感感感染染染染率率率率很很很很高高高高，但但但但发发发发病病病病率率率率却却却却较较较较低低低低，表表表表明明明明人人人人体体体体对对对对结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌有有有有较较较较强强强强的的的的免免免免疫疫疫疫力力力力。机机机机体体体体感感感感染染染染结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌后后后后，虽虽虽虽能能能能产产产产生生生生多多多多种种种种抗抗抗抗菌菌菌菌体体体体蛋蛋蛋蛋白白白白的的的的抗抗抗抗体体体体，但但但但这这这这些些些些抗抗抗抗体体体体仅仅仅仅对对对对细细细细胞胞胞胞外外外外的的的的细细细细菌菌菌菌具具具具有有有有一一一一定定定定作作作作用用用用，而而而而对对对对细细细细胞内细菌不起作用胞内细菌不起作用胞内细菌不起作用胞内细菌不起作用。结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的免免免免疫疫疫疫性性性性与与与与致致致致病病病病性性性性均均均均与与与与结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌感感感感染染染染后后后后诱诱诱诱发发发发机机机机体体体体产产产产生生生生的的的的由由由由T T T T细细细细胞胞胞胞介介介介导导导导的的的的两两两两种种种种免免免免疫疫疫疫应应应应答答答答反反反反应应应应相相相相关关关关，即即即即细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫和和和和迟发型超敏反应迟发型超敏反应迟发型超敏反应迟发型超敏反应。（三）免疫性与超敏反应 人类对结核分枝杆菌的感染率很高471.1.免疫性免疫性 抗抗抗抗结结结结核核核核免免免免疫疫疫疫力力力力的的的的持持持持久久久久性性性性依依依依赖赖赖赖于于于于结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌在在在在机机机机体体体体内内内内的的的的存存存存活活活活，一一一一旦旦旦旦体体体体内内内内结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌消消消消亡亡亡亡，抗抗抗抗结结结结核核核核免免免免疫疫疫疫力力力力也也也也随随随随之之之之消消消消失失失失，这这这这种种种种免免免免疫疫疫疫称称称称为为为为有有有有菌菌菌菌免免免免疫疫疫疫或或或或传染性免疫传染性免疫传染性免疫传染性免疫。抗抗抗抗结结结结核核核核免免免免疫疫疫疫主主主主要要要要是是是是细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫，包包包包括括括括致致致致敏敏敏敏T T细细细细胞胞胞胞和和和和MM。致致致致敏敏敏敏T T细细细细胞胞胞胞可可可可杀杀杀杀死死死死有有有有结结结结核核核核杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的靶靶靶靶细细细细胞胞胞胞，同同同同时时时时释释释释放放放放多多多多种种种种淋淋淋淋巴巴巴巴因因因因子子子子（如如如如TNF-TNF-、IFN-IFN-、IL-2IL-2、IL-6IL-6等等等等），吸吸吸吸引引引引NKNK、T T、MM 等等等等聚聚聚聚集集集集炎炎炎炎症症症症部部部部位位位位，还还还还能能能能增增增增强强强强这这这这类类类类细细细细胞胞胞胞的的的的直直直直接接接接或或或或间间间间接接接接杀杀杀杀菌菌菌菌活活活活性性性性。激激激激活活活活的的的的MM 极极极极大大大大地地地地增增增增强强强强对对对对结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的吞吞吞吞噬噬噬噬消消消消化化化化、抑抑抑抑制制制制繁繁繁繁殖殖殖殖、阻阻阻阻止止止止扩扩扩扩散散散散甚甚甚甚至至至至彻彻彻彻底底底底消消消消灭灭灭灭的的的的能能能能力力力力，充充充充分分分分发挥细胞免疫的作用。发挥细胞免疫的作用。发挥细胞免疫的作用。发挥细胞免疫的作用。1.免疫性 抗结核免疫力的持久性依赖于结核分枝杆菌在机482.2.超敏反应超敏反应 机机机机体体体体获获获获得得得得对对对对结结结结核核核核杆杆杆杆菌菌菌菌免免免免疫疫疫疫力力力力的的的的同同同同时时时时，结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质与与与与蜡蜡蜡蜡质质质质D D共共共共同同同同刺刺刺刺激激激激T T细细细细胞胞胞胞，形形形形成成成成迟迟迟迟发发发发型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应状状状状态态态态。体体体体内内内内致致致致敏敏敏敏的的的的T T细细细细胞胞胞胞再再再再次次次次遇遇遇遇到到到到结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌时时时时，即即即即释释释释放放放放出出出出淋淋淋淋巴巴巴巴因因因因子子子子，引引引引起起起起强强强强烈烈烈烈的的的的迟迟迟迟发发发发型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应，形形形形成成成成以以以以单单单单核核核核细细细细胞胞胞胞浸浸浸浸润润润润为为为为主主主主的的的的炎炎炎炎症症症症反反反反应应应应，容容容容易易易易发发发发生生生生干干干干酷酷酷酷样样样样坏坏坏坏死死死死，甚至液化形成空洞。甚至液化形成空洞。甚至液化形成空洞。甚至液化形成空洞。2.超敏反应 机体获得对结核杆菌免疫力的同时，结49 儿儿儿儿童童童童结结结结核核核核病病病病大大大大多多多多为为为为初初初初次次次次感感感感染染染染，机机机机体体体体尚尚尚尚未未未未建建建建立立立立免免免免疫疫疫疫和和和和超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应，可可可可发发发发生生生生急急急急性性性性全全全全身身身身粟粟粟粟粒粒粒粒性性性性结结结结核核核核和和和和结核性脑膜炎结核性脑膜炎结核性脑膜炎结核性脑膜炎。成成成成年年年年人人人人结结结结核核核核大大大大多多多多为为为为复复复复发发发发或或或或再再再再次次次次感感感感染染染染，此此此此时时时时机机机机体体体体已已已已建建建建立立立立了了了了抗抗抗抗结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的免免免免疫疫疫疫和和和和超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应性性性性，病病病病症症症症常常常常为为为为慢慢慢慢性性性性局局局局限限限限性性性性结结结结核核核核，不不不不引引引引起起起起全全全全身身身身粟粟粟粟粒粒粒粒性性性性结结结结核核核核和和和和结结结结核核核核性性性性脑脑脑脑膜膜膜膜炎炎炎炎，但但但但局局局局部部部部病病病病症症症症较较较较重重重重，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。2.2.超敏反应超敏反应(续续)儿童结核病大多为初次感染，机体尚未建立免疫和超503.3.结核菌素试验结核菌素试验 将将将将一一一一定定定定量量量量结结结结核核核核菌菌菌菌素素素素注注注注入入入入皮皮皮皮内内内内，如如如如受受受受试试试试者者者者曾曾曾曾感感感感染染染染结结结结核核核核杆杆杆杆菌菌菌菌，则则则则在在在在注注注注射射射射部部部部位位位位出出出出现现现现迟迟迟迟发发发发型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应炎炎炎炎症症症症，判判判判为为为为阳阳阳阳性性性性，未未未未感感感感染染染染者者者者则则则则为为为为阴阴阴阴性性性性。此此此此法法法法可可可可用用用用于于于于检检检检测测测测可可可可疑疑疑疑患患患患者者者者是是是是否否否否感感感感染染染染过过过过结结结结核核核核菌菌菌菌、接接接接种种种种卡卡卡卡介介介介苗苗苗苗后后后后是是是是否否否否阳阳阳阳转转转转以以以以及及及及检检检检测机体细胞免疫功能测机体细胞免疫功能测机体细胞免疫功能测机体细胞免疫功能。结核菌素试剂有两种：结核菌素试剂有两种：结核菌素试剂有两种：结核菌素试剂有两种：旧结核菌素（旧结核菌素（旧结核菌素（旧结核菌素（old tuberculinold tuberculin，OTOT）：）：）：）：含含含含结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌的的的的甘甘甘甘油油油油肉肉肉肉汤汤汤汤培培培培养养养养物物物物加加加加热热热热过过过过滤滤滤滤液液液液，主主主主要要要要成成成成分分分分是是是是结结结结核核核核蛋蛋蛋蛋白白白白，也也也也含含含含细细细细菌菌菌菌的的的的其其其其他他他他代代代代谢谢谢谢产产产产物物物物和和和和培培培培养基成分。养基成分。养基成分。养基成分。纯纯纯纯蛋蛋蛋蛋白白白白衍衍衍衍生生生生物物物物（purified purified protein protein derivativederivative,PPDPPD）：）：）：）：OTOT经三氯醋酸沉淀后的纯化物。经三氯醋酸沉淀后的纯化物。经三氯醋酸沉淀后的纯化物。经三氯醋酸沉淀后的纯化物。3.结核菌素试验 将一定量结核菌素注入皮内，如受试者513 3.结核菌素试验结核菌素试验（续）（续）方法：方法：方法：方法：目目目目前前前前多多多多用用用用PPDPPD法法法法。取取取取PPDPPD-C C和和和和BCGBCG-PPDPPD各各各各5 5单单单单位位位位分分分分别别别别注注注注入入入入两两两两前前前前臂臂臂臂皮皮皮皮内内内内，484872h72h后后后后，红红红红肿肿肿肿硬硬硬硬结结结结小小小小于于于于5mm5mm者者者者为为为为阴阴阴阴性性性性反反反反应应应应；超超超超过过过过5mm5mm者为阳性；者为阳性；者为阳性；者为阳性；1515 mmmm为强阳性。为强阳性。为强阳性。为强阳性。3.结核菌素试验（续）方法：52结果分析：结果分析：结果分析：结果分析：阳阳阳阳性性性性反反反反应应应应表表表表明明明明机机机机体体体体已已已已感感感感染染染染过过过过结结结结核核核核枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌或或或或卡卡卡卡介介介介苗苗苗苗接接接接种种种种成成成成功功功功，对对对对结结结结核核核核杆杆杆杆菌菌菌菌有有有有迟迟迟迟发发发发型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应，说说说说明明明明有有有有特特特特异异异异性性性性免免免免疫疫疫疫力力力力。强强强强阳阳阳阳性性性性反反反反应应应应则则则则表表表表明明明明可可可可能能能能有有有有活活活活动动动动性性性性结结结结核核核核病病病病，尤尤尤尤其其其其是是是是婴婴婴婴儿儿儿儿。阴阴阴阴性性性性反反反反应应应应表表表表明明明明未未未未感感感感染染染染过过过过结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌或或或或未未未未接接接接种过卡介苗。种过卡介苗。种过卡介苗。种过卡介苗。原原原原发发发发感感感感染染染染早早早早期期期期、正正正正患患患患严严严严重重重重结结结结核核核核病病病病或或或或其其其其他他他他严严严严重重重重疾疾疾疾病病病病致致致致细细细细胞胞胞胞免免免免疫疫疫疫功功功功能能能能低低低低下下下下者者者者（如如如如用用用用过过过过免免免免疫抑制者）也可能出现阴性反应。疫抑制者）也可能出现阴性反应。疫抑制者）也可能出现阴性反应。疫抑制者）也可能出现阴性反应。3 3.结核菌素试验结核菌素试验（续）（续）结果分析：3.结核菌素试验（续）53应用：应用：应用：应用：诊断婴幼儿的结核病；诊断婴幼儿的结核病；诊断婴幼儿的结核病；诊断婴幼儿的结核病；测定接种卡介苗后免疫效果；测定接种卡介苗后免疫效果；测定接种卡介苗后免疫效果；测定接种卡介苗后免疫效果；在在在在未未未未接接接接种种种种卡卡卡卡介介介介苗苗苗苗的的的的人人人人群群群群作作作作结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌感染的流行病学调查；菌感染的流行病学调查；菌感染的流行病学调查；菌感染的流行病学调查；用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。3 3.结核菌素试验结核菌素试验（续）（续）应用：3.结核菌素试验（续）54结核菌素试验结核菌素试验结核菌素试验结核菌素试验 定义定义定义定义 用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌 是否能引起迟发型超敏反应的一种试验，以判定机体对是否能引起迟发型超敏反应的一种试验，以判定机体对 结核结核 分枝杆菌分枝杆菌有无免疫力有无免疫力 试剂试剂试剂试剂OTOT，PPDPPD 方法方法方法方法皮内皮内 0.1 0.1ml(5u)ml(5u)结果判断结果判断结果判断结果判断 4848484872h72h72h72h，红肿硬结红肿硬结 5mm5mm(-)(-)5mm5mm(+)(+)：有免疫力有免疫力 1 15mm5mm(+)(+)：可能有活动性结核病：可能有活动性结核病结核菌素试验55 根根根根据据据据结结结结核核核核分分分分枝枝枝枝杆杆杆杆菌菌菌菌感感感感染染染染的的的的类类类类型型型型，应应应应采采采采取取取取病病病病灶灶灶灶部部部部位位位位的的的的适适适适当当当当样样样样本本本本。如如如如肺肺肺肺结结结结核核核核取取取取咳咳咳咳痰痰痰痰（最最最最好好好好取取取取第第第第一一一一次次次次晨晨晨晨痰痰痰痰，挑挑挑挑带带带带血血血血或或或或脓脓脓脓痰痰痰痰）；肾肾肾肾或或或或膀膀膀膀胱胱胱胱结结结结核核核核以以以以无无无无菌菌菌菌导导导导尿尿尿尿或或或或取取取取中中中中段段段段尿尿尿尿液液液液；肠肠肠肠结结结结核核核核取取取取粪粪粪粪便便便便；结结结结核核核核性性性性脑脑脑脑膜膜膜膜炎炎炎炎取取取取脑脑脑脑脊脊脊脊液液液液；脓脓脓脓胸胸胸胸、肋肋肋肋膜膜膜膜炎炎炎炎、腹腹腹腹膜膜膜膜炎炎炎炎或骨髓结核等则穿刺取脓汁。或骨髓结核等则穿刺取脓汁。或骨髓结核等则穿刺取脓汁。或骨髓结核等则穿刺取脓汁。1 1 1 1直接涂片染色直接涂片染色直接涂片染色直接涂片染色 咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿。咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿。咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿。咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿。抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法2 2 2 2分离培养分离培养分离培养分离培养3 3 3 3动物试验：动物试验：动物试验：动物试验：豚鼠或地鼠豚鼠或地鼠豚鼠或地鼠豚鼠或地鼠4 4 4 4结核分枝杆菌核酸及抗体检测：结核分枝杆菌核酸及抗体检测：结核分枝杆菌核酸及抗体检测：结核分枝杆菌核酸及抗体检测：PCRPCR，ELISAELISA三三、微生物学检查法、微生物学检查法 根据结核分枝杆菌感染的类型，应采取病灶部位的适当样本56 预防：预防：接接接接种种种种卡卡卡卡介介介介苗苗苗苗能能能能极极极极大大大大降降降降低低低低结结结结核核核核病病病病发发发发病病病病率率率率。婴婴婴婴儿儿儿儿出出出出生生生生后后后后即即即即接接接接种种种种，较较较较大大大大儿儿儿儿童童童童须须须须做做做做结结结结核核核核菌菌菌菌素素素素试试试试验验验验，阴阴阴阴性性性性者者者者接接接接种种种种。接接接接种种种种后后后后6 68 8周周周周结结结结核核核核菌菌菌菌素素素素试试试试验验验验即即即即可可可可阳阳阳阳性性性性，阳阳阳阳转转转转率率率率可可可可达达达达969699%99%，表表表表示示示示接种者已接种者已接种者已接种者已有有有有免疫力。阳性反应可维持免疫力。阳性反应可维持免疫力。阳性反应可维持免疫力。阳性反应可维持约约约约5 5年年年年。治疗：治疗：早早早早期期期期、联联联联合合合合、足足足足量量量量、规规规规范范范范使使使使用用用用抗抗抗抗结结结结核核核核药药药药物物物物。常常常常用用用用药药药药物物物物有有有有异异异异烟烟烟烟肼肼肼肼、利利利利福福福福平平平平、链链链链霉霉霉霉素素素素、对氨基水杨酸钠、乙胺丁醇等。对氨基水杨酸钠、乙胺丁醇等。对氨基水杨酸钠、乙胺丁醇等。对氨基水杨酸钠、乙胺丁醇等。四四、防治原则、防治原则 预防：四、防治原则57思考题思考题1 1.试试述述结结核核杆杆菌菌的的染染色色、培培养养、致致病病物物质及感染特点。质及感染特点。2.2.何何谓谓结结核核菌菌素素试试验验？解解释释其其原原理理与与应应用。用。思考题1.试述结核杆菌的染色、培养、致病物质及感染特点。58以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小时10-14天局部红肿、浅溃疡局部红肿、溃疡 不扩散，不扩散，脱落后自行愈合脱落后自行愈合坏死，经久不愈有毒TB菌全身扩散全身扩散皮下皮下郭霍现象郭霍现象以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小时10-14天局部红59 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 (Corynebacterium diphtheriaeCorynebacterium diphtheriae)白喉棒状杆菌 60生物学性状形态与染色形态与染色形态与染色形态与染色 G G G G棒状杆菌棒状杆菌棒状杆菌棒状杆菌三不均三不均三不均三不均粗细粗细粗细粗细染色染色染色染色排列排列排列排列异染颗粒异染颗粒异染颗粒异染颗粒 美兰美兰美兰美兰/奈瑟染色奈瑟染色奈瑟染色奈瑟染色变异变异变异变异 -棒状杆菌噬菌体棒状杆菌噬菌体白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 美兰染色美兰染色生物学性状形态与染色 白喉棒状杆菌 美兰染色61培养特性培养特性营养要求较高营养要求较高吕吕氏氏培培养养基基（含含有有凝凝固固血血清清）上上生生长长迅迅速速，异染颗粒明显异染颗粒明显选择鉴别培养基选择鉴别培养基亚碲酸钾血平板亚碲酸钾血平板(黑色菌落黑色菌落)培养特性营养要求较高62致病性与免疫性致病物质致病物质致病物质致病物质vv白喉毒素白喉毒素白喉毒素白喉毒素毒性基因来源：毒性基因来源：毒性基因来源：毒性基因来源：携带携带携带携带ToxToxToxTox+-棒状杆菌噬菌体棒状杆菌噬菌体 溶原性转换溶原性转换组成：组成：A A亚单位毒性部位亚单位毒性部位 抑制易感细胞蛋白质合成抑制易感细胞蛋白质合成（EF2失活）失活）B B亚单位与心脏细胞、神经细胞表面受体结合亚单位与心脏细胞、神经细胞表面受体结合vv索状因子索状因子索状因子索状因子vvK K K K抗原抗原抗原抗原致病性与免疫性致病物质63Subunit BSubunit BSubunit ASubunit ASubunit BSubunit A64所致疾病所致疾病所致疾病所致疾病 白喉白喉白喉白喉传染源：传染源：传染源：传染源：患者、带菌者患者、带菌者患者、带菌者患者、带菌者传播途径：传播途径：传播途径：传播途径：飞沫飞沫易感人群：人群普遍易感易感人群：人群普遍易感菌菌鼻咽部繁殖鼻咽部繁殖局部炎症：局部炎症：假膜假膜早期致死早期致死外毒素外毒素心肌炎心肌炎软腭麻痹软腭麻痹声嘶声嘶肾上腺功能障碍肾上腺功能障碍晚期致死晚期致死入血入血所致疾病 白喉菌鼻咽部繁殖局部炎症：假膜早期致死外毒素心肌炎65This child has diphtheria resulting in a thick gray coating over back of throat.This coating can eventually expand down through airway and,if not treated,the child could die from suffocation This child has diphtheria resu66免疫性免疫性免疫性免疫性 抗毒素、锡克试验抗毒素、锡克试验抗毒素、锡克试验抗毒素、锡克试验微生物学检查微生物学检查微生物学检查微生物学检查 标本标本标本标本涂片镜检涂片镜检涂片镜检涂片镜检毒力试验（体内、体外）毒力试验（体内、体外）毒力试验（体内、体外）毒力试验（体内、体外）免疫性 抗毒素、锡克试验67Elek平板试验结果Elek Test沉淀线(阳性)含白喉抗毒素滤纸片白喉杆菌菌苔白喉杆菌菌苔Elek平板试验结果Elek Test沉淀线(阳性)含白喉68Elek immunodiffusion testElek immunodiffusion test69