中药药理实验方法学课件

药理实验实验方法学药理实验实验方法学第二讲第二讲中药药理研究的基本知识中药药理研究的基本知识（2）第三节第三节 实验设计实验设计药理实验实验方法学1主要内容主要内容五、实验数据的整理五、实验数据的整理一、基本原则一、基本原则二、实验对象二、实验对象 三、效应指标三、效应指标四、剂量设计四、剂量设计主要内容五、实验数据的整理一、基本原则二、实验对象三、效应2一一基本原则基本原则对照原则对照原则随机原则随机原则重复原则重复原则一基本原则对照原则3（一）、对照原则（一）、对照原则 常用的对照形式：常用的对照形式：（1）组间对照）组间对照（2）自身对照）自身对照（3）配对对照）配对对照（一）、对照原则常用的对照形式：4（1 1）组间对照）组间对照正常对照组（空白对照、阴性对照、溶媒对正常对照组（空白对照、阴性对照、溶媒对照）；照）；假手术对照组假手术对照组模型对照组模型对照组阳性对照组阳性对照组阳性对照阳性对照阳性对照阳性对照意义：意义：意义：意义：检验实验体系是否可靠检验实验体系是否可靠检验实验体系是否可靠检验实验体系是否可靠 粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上有哪些差异。有哪些差异。有哪些差异。有哪些差异。（1）组间对照5（2 2）自身对照）自身对照 观察同一个体给药前、后的区别观察同一个体给药前、后的区别。被检药物。被检药物和阳性药在同一个体上的作用比较。和阳性药在同一个体上的作用比较。（3 3）配对对照）配对对照差异最小的两个个体配成一对，一个给予受差异最小的两个个体配成一对，一个给予受试药，一个给予对照药。试药，一个给予对照药。（2）自身对照6（二）、（二）、随机原则随机原则目的：目的：（1）避免非研究因素影响。避免非研究因素影响。（2）除研究因素外，提高各比较组的其他除研究因素外，提高各比较组的其他因素的均衡性、可比性。因素的均衡性、可比性。（二）、随机原则7随机分组的方法：随机分组的方法：（1 1）抽签随机法：）抽签随机法：例：例：3030只小鼠，要求随机分为只小鼠，要求随机分为3 3组：组：可先将可先将3030只小鼠按只小鼠按1 1至至3030编号，做编号，做1-301-30号签，号签，充分混合号签后，随机各取充分混合号签后，随机各取1010枚为一组。枚为一组。随机分组的方法：8（2 2）随机数字表法（或随机排列表法）：）随机数字表法（或随机排列表法）：1515只小鼠，要求随机分为只小鼠，要求随机分为3 3组组.在随机数字表在随机数字表中确定某个数字开始，随机选取数字方向，中确定某个数字开始，随机选取数字方向，得到一组随机数字，除以组数，得到余数，得到一组随机数字，除以组数，得到余数，根据余数编组根据余数编组：（2）随机数字表法（或随机排列表法）：9顺序号顺序号:A A组：组：1 1，9 9，12 12，1313，1515B B组组:2:2，3 3，5 5，7 7，10 10，11 11C C组：组：4 4，6 6，8 8，14 14按原随机数字顺序继续抄一随机号按原随机数字顺序继续抄一随机号:08除以除以6余数余数:2,将将B组第二只，即组第二只，即3号小鼠编入号小鼠编入C组。组。调整后各组的编号调整后各组的编号:A A 组：组：1 1，9 9，12 12，13 13，15 15 B B 组：组：2 2，5 5，7 7，10 10，11 11 C C 组组:3:3，4 4，6 6，8 8，14 14 顺序号:10练习：练习：2020个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机分成分成4 4组。组。取随机数字表中取随机数字表中随机号：随机号：22 17 68 65 81 68 95 23 92 3522 17 68 65 81 68 95 23 92 35 87 02 22 57 51 61 09 43 95 06 87 02 22 57 51 61 09 43 95 06 58 24 82 03 47 58 24 82 03 47练习：11鼠号：鼠号：1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10随机号：随机号：22 17 68 65 81 68 95 23 92 3522 17 68 65 81 68 95 23 92 35除以除以4 4余数：余数：2 1 0 1 1 0 3 3 0 32 1 0 1 1 0 3 3 0 3鼠号：鼠号：11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20随机号：随机号：87 02 22 57 51 61 09 43 95 06 87 02 22 57 51 61 09 43 95 06 除以除以4 4余数：余数：3 2 2 1 3 1 1 3 3 23 2 2 1 3 1 1 3 3 2随机号（备用）：随机号（备用）：58 24 82 03 4758 24 82 03 47鼠号：12345612根据余数分组鼠号：根据余数分组鼠号：A A组组（余数（余数1 1）：）：2 4 5 14 16 17 2 4 5 14 16 17 B B组组（余数（余数2 2）：）：1 12 13 201 12 13 20C C组（余数组（余数3 3）：）：7 8 10 11 15 18 197 8 10 11 15 18 19D D组（余数组（余数0 0）：）：3 6 93 6 9随机号（备用）：随机号（备用）：58 24 82 03 4758 24 82 03 4758/6余数为余数为4，即，即A组第组第4个动物（个动物（14号）编入号）编入B组。组。根据余数分组鼠号：13根据余数分组鼠号：根据余数分组鼠号：A A组：组：2 4 5 16 17 2 4 5 16 17 B B组：组：1 12 13 20 14 1 12 13 20 14C C组组：7 8 10 11 15 18 19 7 8 10 11 15 18 19D D组组：3 6 9 3 6 9随机号（备用）：随机号（备用）：58 58 24 82 03 4724 82 03 4724/7余数为余数为3，即，即C组第组第3个动物（个动物（10号）编入号）编入D组。组。根据余数分组鼠号：14根据余数分组鼠号：根据余数分组鼠号：A A组：组：2 4 5 16 17 2 4 5 16 17 B B组：组：1 12 13 20 14 1 12 13 20 14C C组组：7 8 11 15 18 19 7 8 11 15 18 19D D组组：3 6 9 10 3 6 9 10 随机号（备用）：随机号（备用）：58 2458 24 82 03 47 82 03 4782/6余数为余数为4，即，即C组第组第4个动物（个动物（15号）编号）编入入D组。组。根据余数分组鼠号：15调整后随机分组的结果为（按动物号）：调整后随机分组的结果为（按动物号）：A A组：组：2 4 5 16 17 2 4 5 16 17 B B组：组：1 12 13 20 14 1 12 13 20 14C C组：组：7 8 11 18 19 7 8 11 18 19D D组：组：3 6 9 10 15 3 6 9 10 15调整后随机分组的结果为（按动物号）：16学生练习题一学生练习题一30个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机分成分成5 5组。组。取取随机数字：随机数字：37 56 08 18 09 77 53 84 46 4737 56 08 18 09 77 53 84 46 4731 91 18 95 58 24 16 74 11 5331 91 18 95 58 24 16 74 11 534444 10 13 85 57 61 65 61 68 66 10 13 85 57 61 65 61 68 663737 27 47 39 19 84 83 70 07 48 27 47 39 19 84 83 70 07 48学生练习题一30个小鼠，根据下例随机数顺序，将其随机分成17（3 3）分层随机）分层随机先将需严格控制的主要因素，如性别、体先将需严格控制的主要因素，如性别、体重等分为不同类别，或层次；在每一类别重等分为不同类别，或层次；在每一类别或层次中分别随机分成一定组。或层次中分别随机分成一定组。将每一类别或层次随机分成的组将每一类别或层次随机分成的组,组次相同组次相同的分别合并。的分别合并。（3）分层随机先将需严格控制的主要因素，如性别、体重等分为不18（三）、（三）、重复原则重复原则 目的：目的：验证在类似的条件是否可获得结果的验证在类似的条件是否可获得结果的重现以及结果的变异情况重现以及结果的变异情况 。要点：要点：A.A.确定适当的样本数。确定适当的样本数。B.B.各组动物数目尽量相同。各组动物数目尽量相同。按动物类型确定样本数：按动物类型确定样本数：（1 1）小动物：计量）小动物：计量1010例例;计数计数20-20-3030例例（2 2）中等动物：计量）中等动物：计量8 8例例;计数计数2020例例（3 3）大动物：）大动物：5-65-6例例（三）、重复原则19二、实验对象二、实验对象(一一)、受试动物、受试动物1 1、按要求选择不同级别符合医学实验标准的动物、按要求选择不同级别符合医学实验标准的动物一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病的动物）；一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病的动物）；二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通设施中的动二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通设施中的动物，饲料、垫料，用具均经过高压消毒）；物，饲料、垫料，用具均经过高压消毒）；二、实验对象(一)、受试动物20三级：无特殊病原体动物（三级：无特殊病原体动物（specific-pathogenfree,简称简称SPF动物）；在清洁级基础上还需不带动物）；在清洁级基础上还需不带干扰实验的微生物，在隔离室或层流室饲养干扰实验的微生物，在隔离室或层流室饲养。四级：无菌动物（机体内外均无任何寄生虫的动物，四级：无菌动物（机体内外均无任何寄生虫的动物，一般是临产前按无菌手术一般是临产前按无菌手术剖腹取出胎仔，在无菌剖腹取出胎仔，在无菌条件下用无菌饲料繁养获得的动物）。条件下用无菌饲料繁养获得的动物）。三级：无特殊病原体动物（specific-pathogen212 2、根据实验目的选择敏感种系、根据实验目的选择敏感种系（不同种属动物对药物敏感性、药物代谢动力学不同）原则原则:选择对药物的反应与人体相近的种系。选择对药物的反应与人体相近的种系。热源实验：热源实验：家兔，对热敏感性高。家兔，对热敏感性高。测定胆汁流量：测定胆汁流量：大鼠，无胆囊，可以胆管插管。大鼠，无胆囊，可以胆管插管。心血管系统心血管系统:大鼠、猫、犬等。大鼠、猫、犬等。呕吐实验：呕吐实验：鸽、猫或狗等。鸽、猫或狗等。抗肿瘤实验：抗肿瘤实验：裸鼠，免疫功能缺陷。裸鼠，免疫功能缺陷。过敏试验：过敏试验：豚鼠敏感。豚鼠敏感。2、根据实验目的选择敏感种系22组织胺：可引起豚鼠哮喘的发生，但对家可引起豚鼠哮喘的发生，但对家兔引起的是血管的收缩和右心室功能的衰兔引起的是血管的收缩和右心室功能的衰竭。竭。苯：家兔：白细胞减少及造血器官发育不家兔：白细胞减少及造血器官发育不全；犬：白细胞增多，脾脏和淋巴结增生。全；犬：白细胞增多，脾脏和淋巴结增生。组织胺：可引起豚鼠哮喘的发生，但对家兔引起的是血管的收缩和右233 3、性别、性别 ：根据要求选择：根据要求选择 用一种性别比两种性别兼用所得结果离散用一种性别比两种性别兼用所得结果离散度较小。通常优选雄性或雌雄各半。度较小。通常优选雄性或雌雄各半。4 4、年龄体重、年龄体重每批动物的体重，年龄越接近越好每批动物的体重，年龄越接近越好通常：通常：小鼠小鼠:18-22g:18-22g，大鼠，大鼠:20025g:20025g，豚鼠豚鼠:250-300g:250-300g，兔、猫，兔、猫:1.5-2Kg,:1.5-2Kg,犬犬:10-15kg:10-15kg。大鼠、小鼠大鼠、小鼠:6-8:6-8周龄周龄 3、性别：根据要求选择245 5、数量、数量 计量研究：小鼠每组计量研究：小鼠每组1010只只 大鼠每组大鼠每组88只只 豚鼠或兔每组豚鼠或兔每组66只只 猪或犬猪或犬55只只 计数研究：大、小鼠每组计数研究：大、小鼠每组 20-30 20-30只只 6 6、习性、习性:小鼠、大鼠均为群居动物，不宜单独饲养。小鼠、大鼠均为群居动物，不宜单独饲养。5、数量6、习性:257 7 实验条件控制实验条件控制时辰：时辰：动物生理活动有其昼夜节律，如小鼠夜动物生理活动有其昼夜节律，如小鼠夜间活动增加，白天活动减少。最好每批实间活动增加，白天活动减少。最好每批实验在每天相同的时间测定。验在每天相同的时间测定。环境温度：环境温度：室温稳定、适宜。室温稳定、适宜。饮食：饮食：有些实验需对动物禁食。有些实验需对动物禁食。适应：适应：3 37 7天。天。7实验条件控制时辰：动物生理活动有其昼夜节律，如小鼠夜间26（二）（二）受试药受试药1.1.制备情况制备情况（1）新药受试药要求：用处方固定，质量稳定、工艺、）新药受试药要求：用处方固定，质量稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产品。质控指标恒定后的中试产品。（2）一般受试中药：生药经鉴定，科属种清楚；提取）一般受试中药：生药经鉴定，科属种清楚；提取制备工艺明确，含量确定。制备工艺明确，含量确定。（3）单体：化学结构式清楚。）单体：化学结构式清楚。（4）在注射给药或离体试验时应注意药物中杂质、不）在注射给药或离体试验时应注意药物中杂质、不溶物质、无机离子及酸碱度等因素对实验的干扰。溶物质、无机离子及酸碱度等因素对实验的干扰。（二）受试药1.制备情况272 2、给药途径、给药途径实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验的方法检中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验的方法检测药物效应测药物效应。2、给药途径实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。283 3、给药时间及次数、给药时间及次数最好每日固定同一个时间给药。最好每日固定同一个时间给药。急性实验通常也需连续给药急性实验通常也需连续给药3-5天以上。天以上。预防性给药预防性给药：治疗给药治疗给药：3、给药时间及次数最好每日固定同一个时间给药。294 4 对照药对照药合法性：中国药典收载或符合部颁标准，合法性：中国药典收载或符合部颁标准，或新批准合法生产的药物。或新批准合法生产的药物。可比性：其功用、主治、剂型（给药途径）与受可比性：其功用、主治、剂型（给药途径）与受试药相似。特殊情况下，在合理范围内可适当灵试药相似。特殊情况下，在合理范围内可适当灵活掌握。活掌握。择优选用：有多种同类药可供选用时，应择优选择优选用：有多种同类药可供选用时，应择优选用公认疗效较好的药物。用公认疗效较好的药物。4对照药合法性：中国药典收载或符合部颁标准，30三、效应指标三、效应指标 观测指标应选用特异性强、敏感性高、观测指标应选用特异性强、敏感性高、重现性好，客观、定量或半定量的指标进重现性好，客观、定量或半定量的指标进行观测。行观测。三、效应指标观测指标应选用特异性强、敏感性高、31四、剂量设计四、剂量设计剂量的表示方法：剂量的表示方法：g/kg,mg/kg,ml/kg,（中药）（中药）g生药生药/kg例如：例如：1 1、取、取50g50g远志，水提浓缩后为远志，水提浓缩后为50ml50ml。灌胃给予。灌胃给予小鼠，给药容量为小鼠，给药容量为0.2ml/10g0.2ml/10g体重，计算远体重，计算远志的给药剂量。志的给药剂量。2 2、100%100%大黄水煎液，灌胃给予大鼠，给药容大黄水煎液，灌胃给予大鼠，给药容量量1ml/100g1ml/100g体重，计算大黄的给药剂量。体重，计算大黄的给药剂量。四、剂量设计剂量的表示方法：g/kg,mg/kg,ml/32剂量组数：剂量组数：新药研究至少设新药研究至少设3 3个剂量组。个剂量组。三者最好成等比，能反应量效关系。三者最好成等比，能反应量效关系。给药容量相等，浓度不等。给药容量相等，浓度不等。合理选择剂量：合理选择剂量：（1 1）参考）参考LDLD5050：在：在LDLD5050的的1/101/10、1/201/20、1/401/40等范围内设置高、中、低剂量组。等范围内设置高、中、低剂量组。（2）根据临床用药等效量计算）根据临床用药等效量计算剂量组数：新药研究至少设3个剂量组。33不同种类动物等效用药量的计算不同种类动物等效用药量的计算p191p191小小 白白鼠鼠20g大大白白鼠鼠200g豚豚鼠鼠400g兔兔1.5kg猫猫2.0kg猴猴4.0kg狗狗12.0kg人人70.0kg小小 白白 鼠鼠20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9大大 白白 鼠鼠200g0.141.01.743.94.29.217.856.0豚鼠豚鼠400g0.080.571.02.252.45.210.231.5兔兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2猫猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0猴猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1狗狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1人人70.0kg0.00250.0180.0310.070.0780.160.321.0不同种类动物等效用药量的计算p191小白鼠20g大白鼠2034应用举例：应用举例：某复方的总药量是某复方的总药量是70g/70g/剂，每天剂，每天1 1剂。剂。按实验动物与人用药量折算表计算按实验动物与人用药量折算表计算 ，200g200g重大鼠等效重大鼠等效量是多少？量是多少？答：答：200g200g重大鼠等效量为：重大鼠等效量为：70g0.018=1.26g/70g0.018=1.26g/只只小小 白白鼠鼠20g大大 白白鼠鼠200g豚豚 鼠鼠400g兔兔1.5kg猫猫2.0kg猴猴4.0kg狗狗12.0kg人人70.0kg小小 白白 鼠鼠20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9大大 白白 鼠鼠200g0.141.01.743.94.29.217.856.0豚鼠豚鼠400g0.080.571.02.252.45.210.231.5兔兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2猫猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0猴猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1狗狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1人人70.0kg0.00250.0180.0310.070.0780.160.321.0应用举例：某复方的总药量是70g/剂，每天1剂。按实验动物35人的每公斤体重给药量为：人的每公斤体重给药量为：70g70=1g/kg70g70=1g/kg。大鼠每公斤的给药量是：大鼠每公斤的给药量是：1.26g1000/200=6.3g/kg 1.26g1000/200=6.3g/kg 按体重计算，要达到等效，大鼠的剂量应为人按体重计算，要达到等效，大鼠的剂量应为人用剂量的用剂量的6.3 g/kg1 g/kg=6.36.3 g/kg1 g/kg=6.3（倍）。（倍）。人的每公斤体重给药量为：70g70=1g/kg。36不同种类动物等效用药量的计算不同种类动物等效用药量的计算小小 白白鼠鼠20g大大白白鼠鼠200g豚豚鼠鼠400g兔兔1.5kg猫猫2.0kg猴猴4.0kg狗狗12.0kg人人70.0kg小小 白白 鼠鼠20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9大大 白白 鼠鼠200g0.141.01.743.94.29.217.856.0豚鼠豚鼠400g0.080.571.02.252.45.210.231.5兔兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2猫猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0猴猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1狗狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1人人70.0kg0.00250.0180.0310.070.0780.160.321.0不同种类动物等效用药量的计算小白鼠20g大白鼠200g豚鼠37如同一复方要用小鼠实验，小鼠每只的给药如同一复方要用小鼠实验，小鼠每只的给药量为：量为：700.0025700.00250.175g/0.175g/只；只；0.17520/1000=8.75 g/kg0.17520/1000=8.75 g/kg；按体重计算，要达到等效，小鼠的剂量应为人按体重计算，要达到等效，小鼠的剂量应为人用剂量的用剂量的8.75 g/kg1 g/kg=8.758.75 g/kg1 g/kg=8.75（倍）。（倍）。如同一复方要用小鼠实验，小鼠每只的给药量为：38豚鼠应用量为豚鼠应用量为700.031=2.17g/700.031=2.17g/只；只；2.17400/1000=5.425 g/kg2.17400/1000=5.425 g/kg。按体重计算，要达到等效，豚鼠的剂量为人用按体重计算，要达到等效，豚鼠的剂量为人用量的量的5.42515.42515.4255.425（倍）。（倍）。豚鼠应用量为700.031=2.17g/只；39兔：兔：700.07700.074.9g/4.9g/只；只；4.91.54.91.53.27 g/kg3.27 g/kg。按体重计算，要达到等效，按体重计算，要达到等效，兔的剂量应为人用量的兔的剂量应为人用量的3.2713.2713.273.27（倍）。（倍）。兔：700.074.9g/只；40狗用量为狗用量为70g0.3270g0.3222.4g/22.4g/只；只；22.412=1.87g/kg22.412=1.87g/kg。按体重计算，要达到等效，按体重计算，要达到等效，狗的给药量应为人的狗的给药量应为人的1.8711.8711.871.87（倍）（倍）狗用量为70g0.3222.4g/只；22.412=41中药药理实验方法学课件42中药药理实验方法学课件43不同种类动物间用药剂量换算表不同种类动物间用药剂量换算表（转换因子（转换因子计算法）计算法）某利尿中药某利尿中药,250g,250g重大鼠的有效量为重大鼠的有效量为250 250 mg/kgmg/kg，试计算，试计算15kg15kg犬的等效实验剂量？犬的等效实验剂量？犬的等效实验剂量犬的等效实验剂量 250 mg/kg6.922 250 mg/kg6.922=78.4mg/kg=78.4mg/kg不同种类动物间用药剂量换算表（转换因子计算法）某利尿中药44（3 3）根据文献估计剂量）根据文献估计剂量 如有相关的药物，相似的复方，其使用剂量可如有相关的药物，相似的复方，其使用剂量可作为参考。作为参考。（4 4）通过预试估计剂量）通过预试估计剂量 （3）根据文献估计剂量455 5给药容量：给药容量：小鼠口服和腹腔注射：小鼠口服和腹腔注射：0.1-0.3 ml/10g0.1-0.3 ml/10g，皮下和，皮下和静脉注射通常静脉注射通常0.1-0.2 ml/10g0.1-0.2 ml/10g，肌肉注射每条，肌肉注射每条腿不宜超过腿不宜超过0.1ml0.1ml。大鼠口服：大鼠口服：1.0-1.5 ml/100g,1.0-1.5 ml/100g,腹腔注射通常腹腔注射通常0.5-1 ml/100g,0.5-1 ml/100g,皮下和静脉注射一般为皮下和静脉注射一般为0.3-0.3-0.5 ml/100g0.5 ml/100g。5给药容量：46药物溶液配置药物溶液配置例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有效麻例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有效麻醉剂量为醉剂量为40mg/kg40mg/kg。现有体重为。现有体重为20g20g左右的左右的3030只小鼠要麻醉。试问要称量多少克的戊只小鼠要麻醉。试问要称量多少克的戊巴比妥钠，设计的给药容量为多少，配成巴比妥钠，设计的给药容量为多少，配成怎样浓度？怎样浓度？药物溶液配置例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有效麻醉剂量为4047药物溶液配置药物溶液配置答：称量戊巴比妥钠答：称量戊巴比妥钠30mg30mg，加生理盐水至，加生理盐水至7.5ml,7.5ml,使浓度为使浓度为4mg/ml,4mg/ml,小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射0.1ml/10g(0.1ml/10g(即即10ml/kg)10ml/kg)。或：称量戊巴比妥钠或：称量戊巴比妥钠40mg40mg，加生理盐水至，加生理盐水至10ml,10ml,使浓度为使浓度为4mg/ml,4mg/ml,小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射0.1ml/10g(0.1ml/10g(即即10ml/kg)10ml/kg)。药物溶液配置答：称量戊巴比妥钠30mg，加生理盐水至7.5m48五、实验数据的整理五、实验数据的整理（一）原始数据记录、整理（一）原始数据记录、整理（二）统计分析（二）统计分析（三）讨论分析（三）讨论分析五、实验数据的整理（一）原始数据记录、整理49（一）原始数据记录、处理（一）原始数据记录、处理P1921、原始记录、原始记录基本要求：基本要求：真实，及时，直接，清楚，准确，真实，及时，直接，清楚，准确，完整、防止完整、防止随意随意涂改、不易消除等。涂改、不易消除等。主要内容：主要内容：实验名称、研究目的、研究机构名实验名称、研究目的、研究机构名称、实验材料、实验环境、方法、实验过程、称、实验材料、实验环境、方法、实验过程、结果及分析、实验人员、日期等。结果及分析、实验人员、日期等。注意事项：注意事项：（一）原始数据记录、处理P192502 2、数据表达和精确度：、数据表达和精确度：一般应至少有一般应至少有3 3位有效数字，位有效数字，标准差至少有标准差至少有2 2位有效数字，位有效数字，均数的小数位数应与标准差相同，均数的小数位数应与标准差相同，出示的结果应包括均数，标准差，例数，出示的结果应包括均数，标准差，例数，P P值值情况（大于、小于情况（大于、小于0.050.05或具体或具体P P值）值）数字的精确度要与测量仪器所能达到的精确数字的精确度要与测量仪器所能达到的精确度一致。度一致。2、数据表达和精确度：513 3、极端数据的处理、极端数据的处理：尽量避免差错形成极端数据。尽量避免差错形成极端数据。（1）对可疑数据）对可疑数据及时复测或复核及时复测或复核,及时纠正差错。及时纠正差错。（2）对于无法复测，但是可以肯定是处于差错，）对于无法复测，但是可以肯定是处于差错，可以删除。可以删除。3、极端数据的处理：52（3）在一组属于正态分布的数据中，超出（均）在一组属于正态分布的数据中，超出（均数数33倍标准偏差）倍标准偏差）之外的数据，可考虑舍弃。之外的数据，可考虑舍弃。一组数据按正态分布时：一组数据按正态分布时：xs xs 内的数据占内的数据占68.27%68.27%x1.96s x1.96s 内的数据占内的数据占95.0%95.0%x2.58s x2.58s 内的数据占内的数据占99.0%99.0%（3）在一组属于正态分布的数据中，超出（均数3倍标准偏差）53（二）数据统计分析（二）数据统计分析（1 1）两组间实验结果比较常用）两组间实验结果比较常用t t检验检验 （unpaired t testunpaired t test）。）。（2 2）多组间比较：方差分析（正态分布）多组间比较：方差分析（正态分布）（3 3）非正态分布：秩和检验，序值法）非正态分布：秩和检验，序值法（4 4）样本率比较：）样本率比较：X X2 2检验检验 中药药理实验方法学课件54T T值计算公式（通式）值计算公式（通式）T值计算公式（通式）55EXCELEXCEL软件软件T T检验过程：检验过程：选中选中fx T TESTfx T TEST显示填写框：显示填写框：Array 1Array 1 A1:A9 A1:A9 Array 2Array 2 B1:B9 B1:B9Tails Tails 2 2Type Type Array1为第一个数据集。为第一个数据集。Array2为第二个数据集。为第二个数据集。Tails指示分布曲线的尾数。指示分布曲线的尾数。如果如果tails=1，函数，函数TTEST使用单尾分布。如果使用单尾分布。如果tails=2，函数，函数TTEST使用双尾分布。使用双尾分布。EXCEL软件T检验过程：选中fxTTEST56TypeType为为t t检验的类型。检验的类型。1：成对检验：成对检验2：等方差双样本检验：等方差双样本检验3：异方差双样本检验：异方差双样本检验Type为t检验的类型。57 （三）（三）实验结果实验结果讨论分析讨论分析除了分析起是否有统计学意义，还应从专除了分析起是否有统计学意义，还应从专业知识的角度分析是否有生物学意义。业知识的角度分析是否有生物学意义。（三）实验结果讨论分析58