新药药效学研究的思路和方法课件

新药药效学研究新药药效学研究(ynji)(ynji)的思路和方的思路和方法法徐徐 凌凌 云云2009-12-042009-12-042009-12-042009-12-04第一页，共六十二页。新药药效学研究的思路和方法主要主要(zhyo)(zhyo)(zhyo)(zhyo)内容内容n n新药申报中药理毒理研究内容及要求n n药效学研究的一般原则和要求n n药效学实验要考虑的问题(wnt)(wnt)n n常用的参考书目第二页，共六十二页。2新药药效学研究的思路和方法新药新药(xnyo)(xnyo)研究的三个阶段和审评尺度研究的三个阶段和审评尺度 安全性安全性 有效性有效性质量质量(zhling)可控可控性性药学药学(yoxu)研研究究药理毒理研究药理毒理研究临床研究临床研究第三页，共六十二页。3新药药效学研究的思路和方法新药研究的法律法规及指导新药研究的法律法规及指导(zhdo)(zhdo)原则原则n n中华人民共和国药品管理法中华人民共和国药品管理法（江泽民主席（江泽民主席(zhx)(zhx)，2001-2-28)2001-2-28)n n中华人民共和国药品管理法实施条例中华人民共和国药品管理法实施条例（朱镕基总（朱镕基总理，理，2002-8-4)2002-8-4)n n药品注册管理办法（局令第药品注册管理办法（局令第2828号）号）（邵明立局长，（邵明立局长，2007-7-10)2007-7-10)n n指导原则指导原则第四页，共六十二页。4新药药效学研究的思路和方法药品注册管理药品注册管理(gunl)(gunl)(gunl)(gunl)办法（局令第办法（局令第2828号）号）附件附件1 1：中药、天然药物注册中药、天然药物注册(zhc)(zhc)分类及申报资料要求分类及申报资料要求(33(33项项)附件附件2 2：化学药品注册分类及申报资料要求化学药品注册分类及申报资料要求(32(32项项)附件附件3 3：生物制品注册分类及申报资料要求生物制品注册分类及申报资料要求(18(18项项)附件附件4 4：药品补充申请注册事项及申报资料要求药品补充申请注册事项及申报资料要求附件附件5 5：药品再注册申报资料项目药品再注册申报资料项目附件附件6 6：新药监测期新药监测期 期限表（说明：除以下情形的新药不设立监测期限表（说明：除以下情形的新药不设立监测期）期）第五页，共六十二页。5新药药效学研究的思路和方法新药新药(xn yo)(xn yo)(xn yo)(xn yo)申报中药理毒理研究内容及要求申报中药理毒理研究内容及要求第六页，共六十二页。6新药药效学研究的思路和方法药理药理(yol)(yol)毒理研究资料内容毒理研究资料内容n n药理毒理研究资料综述（中药理毒理研究资料综述（中药理毒理研究资料综述（中药理毒理研究资料综述（中19/19/19/19/化化化化16161616）n n主要药效学试验资料及文献资料（主要药效学试验资料及文献资料（主要药效学试验资料及文献资料（主要药效学试验资料及文献资料（20/1720/1720/1720/17）n n一般药理研究的试验资料及文献资料一般药理研究的试验资料及文献资料一般药理研究的试验资料及文献资料一般药理研究的试验资料及文献资料（21/1821/1821/1821/18）n n急性毒性试验资料及文献资料急性毒性试验资料及文献资料急性毒性试验资料及文献资料急性毒性试验资料及文献资料（22/1922/1922/1922/19）n n长期毒性试验资料及文献资料（长期毒性试验资料及文献资料（长期毒性试验资料及文献资料（长期毒性试验资料及文献资料（23/2023/2023/2023/20）n n过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管管管管(xugun)(xugun)(xugun)(xugun)、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等主要与局部、全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料全身给药相关的特殊安全性试验研究和文献资料（24/2124/2124/2124/21）第七页，共六十二页。7新药药效学研究的思路和方法n n复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的复方制剂中多种成份药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资料及文献资料（无试验资料及文献资料（无试验资料及文献资料（无试验资料及文献资料（无/22/22/22/22）n n致突变致突变致突变致突变(tbin)(tbin)(tbin)(tbin)试验资料及文献资料（试验资料及文献资料（试验资料及文献资料（试验资料及文献资料（25/2325/2325/2325/23）n n生殖毒性试验资料及文献资料（生殖毒性试验资料及文献资料（生殖毒性试验资料及文献资料（生殖毒性试验资料及文献资料（26/2426/2426/2426/24）n n致癌试验资料及文献资料（致癌试验资料及文献资料（致癌试验资料及文献资料（致癌试验资料及文献资料（27/2527/2527/2527/25）n n依赖性试验资料及文献资料（依赖性试验资料及文献资料（依赖性试验资料及文献资料（依赖性试验资料及文献资料（23/2623/2623/2623/26）n n非临床非临床非临床非临床药代动力学试验资料及文献资料（药代动力学试验资料及文献资料（药代动力学试验资料及文献资料（药代动力学试验资料及文献资料（28/2728/2728/2728/27）第八页，共六十二页。8新药药效学研究的思路和方法药理药理(yol)(yol)毒理研究资料内容毒理研究资料内容l l 药理毒理研究资料综述药理毒理研究资料综述药理毒理研究资料综述药理毒理研究资料综述l l 药理研究资料药理研究资料药理研究资料药理研究资料主要药效、作用机理研究、药代动力主要药效、作用机理研究、药代动力学学l l毒理研究资料毒理研究资料毒理研究资料毒理研究资料一般药理、急毒、长毒、局部毒性一般药理、急毒、长毒、局部毒性一般药理、急毒、长毒、局部毒性一般药理、急毒、长毒、局部毒性(dxn)(dxn)、遗传毒性遗传毒性遗传毒性遗传毒性(dxn)(dxn)、生殖毒性、生殖毒性、生殖毒性、生殖毒性(dxn)(dxn)、致癌性、致癌性、致癌性、致癌性第九页，共六十二页。9新药药效学研究的思路和方法化学药品注册化学药品注册(zhc)(zhc)分类分类 1 1、未在国内外上市销售未在国内外上市销售(xioshu)(xioshu)(xioshu)(xioshu)的药品（分的药品（分6 6个亚类）。个亚类）。2 2、改变给药途径尚未在国内外上市销售的改变给药途径尚未在国内外上市销售的制剂制剂。3 3、已在国外上市销售但尚未在国内上市销已在国外上市销售但尚未在国内上市销售的药品（分售的药品（分4 4个亚类）。个亚类）。第十页，共六十二页。10新药药效学研究的思路和方法 4 4、改变已上市销售盐类药物改变已上市销售盐类药物(yow)(yow)(yow)(yow)的酸根、碱的酸根、碱基（或者金属元素），但不改变其药理作用基（或者金属元素），但不改变其药理作用的原料药及其制剂。的原料药及其制剂。5 5、改变国内已上市销售药品的剂型，但不改改变国内已上市销售药品的剂型，但不改变给药途径的制剂。变给药途径的制剂。6 6、已有国家药品标准的原料药或者制剂。已有国家药品标准的原料药或者制剂。第十一页，共六十二页。11新药药效学研究的思路和方法新药新药(xnyo)(xnyo)申报对药理毒理研究资料的要求申报对药理毒理研究资料的要求n n不同注册分类的药物所要求提供的药理毒理不同注册分类的药物所要求提供的药理毒理研究资料的内容是不同的。（化药分类，研究资料的内容是不同的。（化药分类，中药中药(zhngyo)(zhngyo)分类）分类）例：例：例：例：雷公藤内酯微乳凝胶雷公藤内酯微乳凝胶雷公藤内酯微乳凝胶雷公藤内酯微乳凝胶 化药化药化药化药1.61.61.61.6类类类类 HES130/0.4 HES130/0.4 HES130/0.4 HES130/0.4氯化钠注射液氯化钠注射液氯化钠注射液氯化钠注射液 化药化药化药化药3.13.13.13.1 蛋白琥珀酸铁原料药蛋白琥珀酸铁原料药蛋白琥珀酸铁原料药蛋白琥珀酸铁原料药 化药化药化药化药3.13.13.13.1 蛋白琥珀酸铁口服液化药类蛋白琥珀酸铁口服液化药类蛋白琥珀酸铁口服液化药类蛋白琥珀酸铁口服液化药类uu立题和文献调研非常重要立题和文献调研非常重要第十二页，共六十二页。12新药药效学研究的思路和方法化药注册分类及申报资料化药注册分类及申报资料(zlio)(zlio)项目要求项目要求资料分类资料分类资料分类资料分类资料资料资料资料项目项目项目项目注册分类及资料项目注册分类及资料项目注册分类及资料项目注册分类及资料项目 1 1 1 12 2 2 23 3 3 34 4 4 45 5 5 56 6 6 6 化学化学化学化学 药品药品药品药品 药理药理药理药理 毒理毒理毒理毒理 研究研究研究研究 资料资料资料资料16161616+17171717+*16*16*16*16*18*18*18*18-18181818+*16*16*16*16*18*18*18*18-19191919+*16*16*16*16*18*18*18*18-20202020+*16*16*16*16*18*18*18*18-21212121*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19*19 22222222*13*13*13*13-23232323+-24242424+-25252525*8*8*8*8-*8*8*8*8*8*8*8*8-26262626*9*9*9*9-27272727+*20*20*20*20*20*20*20*20+*20*20*20*20-第十三页，共六十二页。13新药药效学研究的思路和方法化药注册化药注册(zhc)(zhc)分类与第分类与第17号资料号资料n n注册分类注册分类注册分类注册分类(fn li)(fn li)(fn li)(fn li)，必须提供。，必须提供。，必须提供。，必须提供。n n注册分类注册分类注册分类注册分类2 2 2 2，必须提供。所采用的给药途径应当与临床，必须提供。所采用的给药途径应当与临床，必须提供。所采用的给药途径应当与临床，必须提供。所采用的给药途径应当与临床拟用途径一致。拟用途径一致。拟用途径一致。拟用途径一致。n n注册分类注册分类注册分类注册分类，可用文献资料代替试验资料。，可用文献资料代替试验资料。，可用文献资料代替试验资料。，可用文献资料代替试验资料。n n注册分类注册分类注册分类注册分类，提供与已上市销售药物比较的主要药效学试验，提供与已上市销售药物比较的主要药效学试验，提供与已上市销售药物比较的主要药效学试验，提供与已上市销售药物比较的主要药效学试验资料。如果改变已上市销售盐类药物的酸根、碱基（或者金资料。如果改变已上市销售盐类药物的酸根、碱基（或者金资料。如果改变已上市销售盐类药物的酸根、碱基（或者金资料。如果改变已上市销售盐类药物的酸根、碱基（或者金属元素）而制成的药物已在国外上市销售，则按注册分类属元素）而制成的药物已在国外上市销售，则按注册分类属元素）而制成的药物已在国外上市销售，则按注册分类属元素）而制成的药物已在国外上市销售，则按注册分类3 3 3 3的申报资料要求办理。的申报资料要求办理。的申报资料要求办理。的申报资料要求办理。（如双氯酚酸钠片（如双氯酚酸钠片（如双氯酚酸钠片（如双氯酚酸钠片 双氯酚酸钾片）双氯酚酸钾片）双氯酚酸钾片）双氯酚酸钾片）n n注册分类、注册分类、注册分类、注册分类、，可免此号资料。，可免此号资料。，可免此号资料。，可免此号资料。第十四页，共六十二页。14新药药效学研究的思路和方法药效学研究(ynji)(ynji)的一般原则和要求第十五页，共六十二页。15新药药效学研究的思路和方法药效学研究的一般药效学研究的一般(ybn)(ybn)原则原则n n随机(su j)(su j)（randomization）n n对照（control）n n重复（replication）第十六页，共六十二页。16新药药效学研究的思路和方法随机随机(suj)(suj)原则原则n n完全(wnqun)(wnqun)随机化法n n配对随机法：先将动物按性别、体重、窝别或其他因素加以配对。n n区组随机法：将全部动物按性别、体重、及其他条件分成若干组。如实验需要分两个组第十七页，共六十二页。17新药药效学研究的思路和方法区组随机区组随机(suj)(suj)法法n n0 04 4入入A A组，组，5 59 9入入B B组，则查随机数字表组，则查随机数字表 A A：8 8例；例；B B：1212例例 将最后将最后(zuhu)(zuhu)4 4个原来都属个原来都属B B组的数字，按单数入组的数字，按单数入A A组，组，偶数入偶数入B B组的原则，这样组的原则，这样A A、B B两组都有两组都有1010例动物。例动物。随随机机数数0 05 52 27 78 84 42 27 74 41 16 68 83 38 85 51 15 56 69 96 6分分组组A AB BA AB BB BA AA AB BA AA AB BB BA AB BB BA AB BB BB BB B第十八页，共六十二页。18新药药效学研究的思路和方法对照对照(duzho)(duzho)原则原则n n没有比较没有比较没有比较没有比较(bjio)(bjio)就没有区别。就没有区别。就没有区别。就没有区别。n n所谓所谓所谓所谓“对照对照对照对照”，即设立非处理因素相同、而处理因素与试，即设立非处理因素相同、而处理因素与试，即设立非处理因素相同、而处理因素与试，即设立非处理因素相同、而处理因素与试验组不一样的一组对象。验组不一样的一组对象。验组不一样的一组对象。验组不一样的一组对象。n n实验组与对照组的实验动物在种属、性别、窝别、实验组与对照组的实验动物在种属、性别、窝别、实验组与对照组的实验动物在种属、性别、窝别、实验组与对照组的实验动物在种属、性别、窝别、体重、健康状况等方面要尽可能相同。体重、健康状况等方面要尽可能相同。体重、健康状况等方面要尽可能相同。体重、健康状况等方面要尽可能相同。n n对照有多种形式。对照有多种形式。对照有多种形式。对照有多种形式。第十九页，共六十二页。19新药药效学研究的思路和方法重复重复(chngf)(chngf)原则原则n n一是在同样条件能将实验结果(ji gu)(ji gu)重复出来，即具有重现性；（抗肿瘤实验要重复三批动物试验）n n另一意思是在实验中应有足够的动物数或实验次数，即应具有一定的样本数。第二十页，共六十二页。20新药药效学研究的思路和方法药效学研究药效学研究(ynji)(ynji)的常用方法的常用方法n n体内试验法（体内试验法（重现性较体外实验差，但接近重现性较体外实验差，但接近重现性较体外实验差，但接近重现性较体外实验差，但接近(jijn)(jijn)人人人人体情况，是药物有效性必须评价的内容。体情况，是药物有效性必须评价的内容。体情况，是药物有效性必须评价的内容。体情况，是药物有效性必须评价的内容。）n n体外试验法体外试验法血清药理学：血清药理学：血清药理学：血清药理学：将受试药物经口给与动物后，取其血将受试药物经口给与动物后，取其血将受试药物经口给与动物后，取其血将受试药物经口给与动物后，取其血清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。该方法的干扰因素太多，其该方法的干扰因素太多，其该方法的干扰因素太多，其该方法的干扰因素太多，其应用的可靠性存在争议。应用的可靠性存在争议。应用的可靠性存在争议。应用的可靠性存在争议。n n新药药效学试验以体内实验为主，体外实验新药药效学试验以体内实验为主，体外实验为辅。为辅。第二十一页，共六十二页。21新药药效学研究的思路和方法药效学研究药效学研究(ynji)(ynji)的常用给药方法的常用给药方法n n预防性给药预防性给药n n治疗治疗(zhlio)(zhlio)性给药（常用）性给药（常用）n n防治结合的给药方式防治结合的给药方式第二十二页，共六十二页。22新药药效学研究的思路和方法新药新药(xnyo)(xnyo)药效学研究的要求（）药效学研究的要求（）n n证实主要治疗作用及较重要的其他治疗作用。证实主要治疗作用及较重要的其他治疗作用。证实主要治疗作用及较重要的其他治疗作用。证实主要治疗作用及较重要的其他治疗作用。n n主要的药效作用要明确，并力求反映量效和（或）时效关主要的药效作用要明确，并力求反映量效和（或）时效关主要的药效作用要明确，并力求反映量效和（或）时效关主要的药效作用要明确，并力求反映量效和（或）时效关系系系系(gunx)(gunx)。n n药效学实验要尽量反映受试药物的特点（包括作用强度、作药效学实验要尽量反映受试药物的特点（包括作用强度、作药效学实验要尽量反映受试药物的特点（包括作用强度、作药效学实验要尽量反映受试药物的特点（包括作用强度、作用时间、作用特点等）。用时间、作用特点等）。用时间、作用特点等）。用时间、作用特点等）。n n创新药或类别高的中药的药效学研究要尽可能揭示药物的创新药或类别高的中药的药效学研究要尽可能揭示药物的创新药或类别高的中药的药效学研究要尽可能揭示药物的创新药或类别高的中药的药效学研究要尽可能揭示药物的作用机制。作用机制。作用机制。作用机制。第二十三页，共六十二页。23新药药效学研究的思路和方法新药新药(xnyo)(xnyo)药效学研究的要求（）药效学研究的要求（）n n体内、体外实验方法相结合；以体内实验为主。体内、体外实验方法相结合；以体内实验为主。体内、体外实验方法相结合；以体内实验为主。体内、体外实验方法相结合；以体内实验为主。n n分清主次，突出重点。主要作用设项，每项选做分清主次，突出重点。主要作用设项，每项选做分清主次，突出重点。主要作用设项，每项选做分清主次，突出重点。主要作用设项，每项选做种实验方法。其他作用（辅助疗效）酌情做项，种实验方法。其他作用（辅助疗效）酌情做项，种实验方法。其他作用（辅助疗效）酌情做项，种实验方法。其他作用（辅助疗效）酌情做项，每项选做种实验方法。每项选做种实验方法。每项选做种实验方法。每项选做种实验方法。宜选用宜选用宜选用宜选用(xunyng)(xunyng)(xunyng)(xunyng)种以上动物进行药效试验；每一方种以上动物进行药效试验；每一方种以上动物进行药效试验；每一方种以上动物进行药效试验；每一方面药理作用要选用面药理作用要选用面药理作用要选用面药理作用要选用(xunyng)(xunyng)(xunyng)(xunyng)种动物模型或细胞模种动物模型或细胞模种动物模型或细胞模种动物模型或细胞模型来做。型来做。型来做。型来做。第二十四页，共六十二页。24新药药效学研究的思路和方法新药新药(xnyo)(xnyo)药效学研究的要求（）药效学研究的要求（）n n局部用药发挥全身作用的，尽可能进行体内透皮吸收试验，局部用药发挥全身作用的，尽可能进行体内透皮吸收试验，局部用药发挥全身作用的，尽可能进行体内透皮吸收试验，局部用药发挥全身作用的，尽可能进行体内透皮吸收试验，以了解药物吸收程度及速度等，有助于评价药效。以了解药物吸收程度及速度等，有助于评价药效。以了解药物吸收程度及速度等，有助于评价药效。以了解药物吸收程度及速度等，有助于评价药效。n n中药材新的药用部位，以人工方法动物体内的制取中药材新的药用部位，以人工方法动物体内的制取中药材新的药用部位，以人工方法动物体内的制取中药材新的药用部位，以人工方法动物体内的制取物和引种（养殖药材）的药效学试验，均应与原药物和引种（养殖药材）的药效学试验，均应与原药物和引种（养殖药材）的药效学试验，均应与原药物和引种（养殖药材）的药效学试验，均应与原药材进行对比试验。材进行对比试验。材进行对比试验。材进行对比试验。n n以中药疗效以中药疗效以中药疗效以中药疗效(lioxio)(lioxio)为主的中药或化药复方制剂，需做复方为主的中药或化药复方制剂，需做复方为主的中药或化药复方制剂，需做复方为主的中药或化药复方制剂，需做复方制剂及组方中的中药部分、化药部分三者在药效毒理制剂及组方中的中药部分、化药部分三者在药效毒理制剂及组方中的中药部分、化药部分三者在药效毒理制剂及组方中的中药部分、化药部分三者在药效毒理方面的对比试验，也叫方面的对比试验，也叫方面的对比试验，也叫方面的对比试验，也叫拆方研究拆方研究拆方研究拆方研究第二十五页，共六十二页。25新药药效学研究的思路和方法新药新药(xn yo)(xn yo)(xn yo)(xn yo)药效学研究的要求（药效学研究的要求（4 4）n n中药及其复方要从多方面反映新药的药效中药及其复方要从多方面反映新药的药效（如抗肿瘤中药：抗癌、扶正、增效、减毒（如抗肿瘤中药：抗癌、扶正、增效、减毒等）。等）。n n有时药效不够明显或仅见作用趋势，统计学有时药效不够明显或仅见作用趋势，统计学处理无显著差异，应如实上报作为参考，但处理无显著差异，应如实上报作为参考，但仅适用于辅助疗效。仅适用于辅助疗效。n n传统中药的药效学研究要在中医药理论指导传统中药的药效学研究要在中医药理论指导下，按照疾病的中医症候下，按照疾病的中医症候(zhnghu)(zhnghu)造模。造模。第二十六页，共六十二页。26新药药效学研究的思路和方法主要主要(zhyo)(zhyo)(zhyo)(zhyo)药效学试验资料及文献资料药效学试验资料及文献资料（中（中20/20/化化1717）&内容内容 体外药效学试验体外药效学试验 体内药效学试验体内药效学试验 作用机制作用机制(jzh)(jzh)研究研究$原则原则先体外，后体内；先重要，后次要先体外，后体内；先重要，后次要试验方案依据、条件简介试验方案依据、条件简介试验结果、分析、评价试验结果、分析、评价第二十七页，共六十二页。27新药药效学研究的思路和方法主要药效学资料最终主要药效学资料最终(zuzhn)(zuzhn)评价评价n n评述体外评述体外/内试验主要结果内试验主要结果n n预测可能提示的临床意义预测可能提示的临床意义 n n药物作用的起效和持续时间药物作用的起效和持续时间n n活性强度，量效关系活性强度，量效关系n n有效剂量（有效剂量（IC50IC50或或ED50ED50）等）等n n 结果是否支持拟定的适应证结果是否支持拟定的适应证/功能主治？功能主治？n n 作用机理研究能否确认作用机理研究能否确认(qurn)(qurn)(qurn)(qurn)？n n 不能确认或有矛盾的试验结果如何处理？不能确认或有矛盾的试验结果如何处理？第二十八页，共六十二页。28新药药效学研究的思路和方法主要药效学资料主要药效学资料(zlio)(zlio)常见问题常见问题（解释，补做）（解释，补做）（解释，补做）（解释，补做）n n对使用特殊溶媒未设对照不进行解释对使用特殊溶媒未设对照不进行解释对使用特殊溶媒未设对照不进行解释对使用特殊溶媒未设对照不进行解释n n药效未反映量效关系或时效关系的原因不分析药效未反映量效关系或时效关系的原因不分析药效未反映量效关系或时效关系的原因不分析药效未反映量效关系或时效关系的原因不分析n n阳性药未显示应有的疗效的原因不清阳性药未显示应有的疗效的原因不清阳性药未显示应有的疗效的原因不清阳性药未显示应有的疗效的原因不清n n数据数据数据数据(shj)(shj)未进行统计学处理或选择方法不妥未进行统计学处理或选择方法不妥未进行统计学处理或选择方法不妥未进行统计学处理或选择方法不妥n n药物的特点未分析、总结药物的特点未分析、总结药物的特点未分析、总结药物的特点未分析、总结n n结果缺乏专业分析、讨论、评价结果缺乏专业分析、讨论、评价结果缺乏专业分析、讨论、评价结果缺乏专业分析、讨论、评价第二十九页，共六十二页。29新药药效学研究的思路和方法药效学实验药效学实验(shyn)(shyn)(shyn)(shyn)要考虑的问题要考虑的问题第三十页，共六十二页。30新药药效学研究的思路和方法对受试药物对受试药物(yow)(yow)的要求的要求如果用原料或中药提取物做试验，要求符合如果用原料或中药提取物做试验，要求符合暂定的质量标准。暂定的质量标准。如果用制剂做试验，要求处方固定，制备工如果用制剂做试验，要求处方固定，制备工艺、药品质量标准应基本稳定。艺、药品质量标准应基本稳定。要向药理毒理研究者提供书面的受试药物的要向药理毒理研究者提供书面的受试药物的质检报告。质检报告。药效、毒理应采用同一批号的受试药物。原药效、毒理应采用同一批号的受试药物。原则上要求中试样品。则上要求中试样品。不同不同(btn)(btn)给药途径对受试物的要求不一样。给药途径对受试物的要求不一样。问题问题(wnt)(wnt)1 1第三十一页，共六十二页。31新药药效学研究的思路和方法如何如何(rh)(rh)选取动物模型？选取动物模型？n n要求：公认性；与临床疾病的相似性。n n类型：自发性动物模型（难得）及诱发性或实验性动物模型（常见）两大类。n n很多动物模型有待改进(gijn)(gijn)、完善，更多的有待于创新建立。问题问题(wnt)(wnt)2 2第三十二页，共六十二页。32新药药效学研究的思路和方法动物模型动物模型自发性动物模型：突变系的遗传疾病和近交系的肿瘤模型，如高血糖小鼠、肥胖症小鼠、高血压大鼠等。实验性动物模型：通过化学、物理、生物等因素，人工诱发器官、组织或全身性损害，如动物发热(f r)(f r)模型、动物佐剂性关节炎模型、四氧嘧啶所致糖尿病大鼠等。第三十三页，共六十二页。33新药药效学研究的思路和方法实验实验(shyn)(shyn)动物动物vv实验动物的三个特殊要求实验动物的三个特殊要求实验动物的三个特殊要求实验动物的三个特殊要求 人工人工人工人工(rngng)(rngng)(rngng)(rngng)培育，遗传背景清楚培育，遗传背景清楚培育，遗传背景清楚培育，遗传背景清楚 生活环境设施应达国标中的等级标准生活环境设施应达国标中的等级标准生活环境设施应达国标中的等级标准生活环境设施应达国标中的等级标准 专门用于科研、教学、生产、专门用于科研、教学、生产、专门用于科研、教学、生产、专门用于科研、教学、生产、检定、实验等检定、实验等检定、实验等检定、实验等v常用实验动物常用实验动物常用实验动物常用实验动物 小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠（仓鼠）、小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠（仓鼠）、小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠（仓鼠）、小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠（仓鼠）、兔、犬、猴、猫、小型猪、鸡等。兔、犬、猴、猫、小型猪、鸡等。兔、犬、猴、猫、小型猪、鸡等。兔、犬、猴、猫、小型猪、鸡等。第三十四页，共六十二页。34新药药效学研究的思路和方法如何选择实验如何选择实验(shyn)(shyn)动物？动物？选用与实验动物模型要求相适应的实验动物规格选用与实验动物模型要求相适应的实验动物规格选用与实验动物模型要求相适应的实验动物规格选用与实验动物模型要求相适应的实验动物规格（年龄、体重、性别等年龄、体重、性别等年龄、体重、性别等年龄、体重、性别等）如二甲苯致耳廓肿试验，雄性，如二甲苯致耳廓肿试验，雄性，如二甲苯致耳廓肿试验，雄性，如二甲苯致耳廓肿试验，雄性，25252525 30g30g30g30g；抗炎试验多选用雄性动；抗炎试验多选用雄性动；抗炎试验多选用雄性动；抗炎试验多选用雄性动物。物。物。物。无特殊要求的，选成年健康动物，各种动物体重为：无特殊要求的，选成年健康动物，各种动物体重为：无特殊要求的，选成年健康动物，各种动物体重为：无特殊要求的，选成年健康动物，各种动物体重为：小鼠，小鼠，小鼠，小鼠，18181818 22g22g22g22g；大鼠，；大鼠，；大鼠，；大鼠，150g150g150g150g 250g250g250g250g；家兔，；家兔，；家兔，；家兔，1.51.51.51.5 2.5kg2.5kg2.5kg2.5kg；比格犬，比格犬，比格犬，比格犬，8 8 8 8 10kg10kg10kg10kg；每一批动物体重相差不超过；每一批动物体重相差不超过；每一批动物体重相差不超过；每一批动物体重相差不超过20%20%20%20%。选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物。同选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物。同选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物。同选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物。同品种不同品系的动物存在特殊的反应，应注意选择品种不同品系的动物存在特殊的反应，应注意选择品种不同品系的动物存在特殊的反应，应注意选择品种不同品系的动物存在特殊的反应，应注意选择(xunz)(xunz)(xunz)(xunz)应用。如应用。如应用。如应用。如WistarWistarWistarWistar大鼠、大鼠、大鼠、大鼠、SDSDSDSD大鼠等。大鼠等。大鼠等。大鼠等。问题问题(wnt)(wnt)3 3第三十五页，共六十二页。35新药药效学研究的思路和方法选用与人的机能、代谢、机构选用与人的机能、代谢、机构(jgu)(jgu)(jgu)(jgu)和疾病特和疾病特点相似的动物。（点相似的动物。（猕猴、犬、猫、猪等猕猴、犬、猫、猪等）选用人兽共患疾病的实验动物和传统应用的选用人兽共患疾病的实验动物和传统应用的实验动物（实验动物（SARS:SARS:果子狸果子狸,禽流感：鸡禽流感：鸡）实验动物的选择和应用需注意符合相应的国实验动物的选择和应用需注意符合相应的国际规范（际规范（GLPGLP、3R3R原则原则）第三十六页，共六十二页。36新药药效学研究的思路和方法动物动物(dngw)(dngw)实验应注意的问题实验应注意的问题n n遵循国际遵循国际“”原则原则替代（替代（replacementreplacement）减少减少(jinsho)(jinsho)(jinsho)(jinsho)（reductionreduction）优化（优化（refinementrefinement）n n善待动物善待动物n n自我保护自我保护第三十七页，共六十二页。37新药药效学研究的思路和方法观察指标如何观察指标如何(rh)(rh)选择？选择？n n特异性特异性 ：如治疗类风湿关节炎药，抗炎、：如治疗类风湿关节炎药，抗炎、镇痛、免疫调节等。镇痛、免疫调节等。n n客观性：客观性：尽量使用仪器。尽量使用仪器。n n敏感性敏感性：n n量化性：量化性：对质反应指标采用计分法，定量组对质反应指标采用计分法，定量组织学方法织学方法(fngf)(fngf)(fngf)(fngf)，人为地进行定量或半定量。，人为地进行定量或半定量。n n重现性重现性 ：指标稳定，重现性好。：指标稳定，重现性好。问题问题(wnt)(wnt)4 4第三十八页，共六十二页。38新药药效学研究的思路和方法如何如何(rh)(rh)确定药效学试验的剂量？确定药效学试验的剂量？n n临床等效剂量：根据体表面积折算法在同等体表面积单位时的剂量。（适用于安全系数小的药物如抗癌药等）n n根据临床用量的体重计算（常用）：根据人用剂量按体重计算。n n根据半数致死量（LD50）计算：可用其1/201/10做为有效(yuxio)(yuxio)剂量的预摸。n n根据文献估计剂量问题问题(wnt)(wnt)5 5第三十九页，共六十二页。39新药药效学研究的思路和方法n n考虑长毒剂量设计：药效试验高剂量组应低于长毒试验的中剂量组或低剂量组，为此药效试验的高剂量组，不宜(by)(by)超过人用量的20倍(指大鼠试验)。n n根据预试验测定剂量：通过预试验找出最小有效量，再做正式试验。预试验应以等效剂量为标准进行预摸。正式实验时常常以等效剂量作为中剂量，大、中、小剂量差为23的等比级数为宜。第四十页，共六十二页。40新药药效学研究的思路和方法如何如何(rh)(rh)设置剂量组？设置剂量组？n n主要药效学试验应设三个剂量组，犬与猴等大动物主要药效学试验应设三个剂量组，犬与猴等大动物主要药效学试验应设三个剂量组，犬与猴等大动物主要药效学试验应设三个剂量组，犬与猴等大动物可设可设可设可设2 2 2 2个剂量组；个剂量组；个剂量组；个剂量组；n n通常按等比数原则，整体动物剂量按通常按等比数原则，整体动物剂量按通常按等比数原则，整体动物剂量按通常按等比数原则，整体动物剂量按2 2 2 2倍或倍或倍或倍或3.163.163.163.16倍递增，倍递增，倍递增，倍递增，离体器官剂量按离体器官剂量按离体器官剂量按离体器官剂量按3 3 3 3倍倍倍倍或或或或10101010倍倍倍倍递增；递增；递增；递增；n n安全范围较小的药物（如抗肿瘤药物）可采用等差级数分安全范围较小的药物（如抗肿瘤药物）可采用等差级数分安全范围较小的药物（如抗肿瘤药物）可采用等差级数分安全范围较小的药物（如抗肿瘤药物）可采用等差级数分组；组；组；组；n n化药和纯度比较高的化药和纯度比较高的化药和纯度比较高的化药和纯度比较高的1 1 1 1、5 5 5 5、7 7 7 7类中药新药应尽量作出量类中药新药应尽量作出量类中药新药应尽量作出量类中药新药应尽量作出量-效和时效和时效和时效和时-效关系。效关系。效关系。效关系。n n进行进行进行进行(jnxng)(jnxng)药效对比时，一般选用中效剂量。药效对比时，一般选用中效剂量。药效对比时，一般选用中效剂量。药效对比时，一般选用中效剂量。问题问题(wnt)(wnt)6 6第四十一页，共六十二页。41新药药效学研究的思路和方法不同种属动物和人用剂量不同种属动物和人用剂量之间如何之间如何(rh)(rh)换算？换算？n n方法方法(fngf)(fngf)(fngf)(fngf)1 1 按公斤体重换算按公斤体重换算 B B B B种动物剂量（种动物剂量（种动物剂量（种动物剂量（mg/kg)=wmg/kg)=wmg/kg)=wmg/kg)=w A A A A种动物剂量（种动物剂量（种动物剂量（种动物剂量（mg/kg)mg/kg)mg/kg)mg/kg)例：已知小鼠对某药的最大耐受量为例：已知小鼠对某药的最大耐受量为例：已知小鼠对某药的最大耐受量为例：已知小鼠对某药的最大耐受量为20 mg/kg20 mg/kg20 mg/kg20 mg/kg，计算，计算，计算，计算家兔的给药剂量。家兔的给药剂量。家兔的给药剂量。家兔的给药剂量。查表查表查表查表1 1 1 1，A A A A种动物为小鼠，种动物为小鼠，种动物为小鼠，种动物为小鼠，B B B B种动物为家兔，交叉点为种动物为家兔，交叉点为种动物为家兔，交叉点为种动物为家兔，交叉点为折算系数折算系数折算系数折算系数w=0.37w=0.37w=0.37w=0.37，故家兔给药剂量为，故家兔给药剂量为，故家兔给药剂量为，故家兔给药剂量为 0.37 0.37 0.37 0.3720mg/kg=7.4mg/kg20mg/kg=7.4mg/kg20mg/kg=7.4mg/kg20mg/kg=7.4mg/kg 1.5kg 1.5kg 1.5kg 1.5kg家兔用药量为家兔用药量为家兔用药量为家兔用药量为11.1mg11.1mg11.1mg11.1mg。问题问题(wnt)(wnt)7 7第四十二页，共六十二页。42新药药效学研究的思路和方法表动物与人体的每公斤体重表动物与人体的每公斤体重表动物与人体的每公斤体重表动物与人体的每公斤体重(tzhng)(tzhng)等效剂量折算系数表等效剂量折算系数表等效剂量折算系数表等效剂量折算系数表折算系数折算系数折算系数折算系数小鼠小鼠小鼠小鼠大鼠大鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠豚鼠豚鼠兔兔兔兔猫猫猫猫犬犬犬犬人人人人(0.02kg)(0.02kg)(0.2kg(0.2kg)(0.4kg)(0.4kg)(1.5kg)(1.5kg)(2kg)(2kg)(12kg(12kg)(60kg(60kg)B B种种种种动动动动物物物物或或或或成成成成人人人人小鼠小鼠小鼠小鼠(0.02kg)(0.02kg)1.001.001.401.401.601.602.702.702.202.204.804.809.019.01大鼠大鼠大鼠大鼠(0.2kg)(0.2kg)0.700.701.001.001.141.141.881.882.302.303.603.606.256.25豚鼠豚鼠豚鼠豚鼠(0.(0.kg)kg)0.610.610.870.871.001.001.651.652.052.053.003.005.555.55兔兔兔兔(1.5kg)(1.5kg)0.370.370.520.520.600.601.001.001.231.231.761.763.303.30猫猫猫猫(2kg)(2kg)0.300.300.420.420.480.480.810.811.001.001.441.442.702.70犬犬犬犬(12kg)(12kg)0.210.210.280.280.340.340.560.560.680.681.001.001.801.80人人人人(60kg)(60kg)0.110.110.160.160.180.180.300.300.370.370.530.531.001.00第四十三页，共六十二页。43新药药效学研究的思路和方法表表表表2 2 2 2 不同不同不同不同(b tn)(b tn)(b tn)(b tn)动物剂量折算系数动物剂量折算系数动物剂量折算系数动物剂量折算系数动物种类动物种类动物种类动物种类小鼠小鼠小鼠小鼠大鼠大鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠豚鼠豚鼠 家兔家兔家兔家兔 猫猫猫猫猴猴猴猴犬犬犬犬人人人人K(K(K(K(折算系数折算系数折算系数折算系数)1 10.710.710.620.620.370.370.300.300.310.310.210.210.110.11简化倍数简化倍数简化倍数简化倍数9 97 76 64 43 33 32 21 1注：不同种类动物注：不同种类动物(dngw)(dngw)等效剂量分别相当于人临床剂量的等效剂量分别相当于人临床剂量的29倍倍。误差允许范围为。误差允许范围为0.51倍。倍。第四十四页，共六十二页。44新药药效学研究的思路和方法怎样给动物怎样给动物(dngw)(dngw)麻醉？麻醉？n n不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要求与动物种类而加以选择。求与动物种类而加以选择。求与动物种类而加以选择。求与动物种类而加以选择。n n麻醉深度的控制麻醉深度的控制麻醉深度的控制麻醉深度的控制(kngzh)(kngzh)(kngzh)(kngzh)是顺利完成实验获得正确实验结是顺利完成实验获得正确实验结是顺利完成实验获得正确实验结是顺利完成实验获得正确实验结果的保证。果的保证。果的保证。果的保证。n n麻醉期间要采取保温措施。麻醉期间要采取保温措施。麻醉期间要采取保温措施。麻醉期间要采取保温措施。n n静脉注射必须缓慢，肌紧张和痛觉消失应停止注射。多用静脉注射必须缓慢，肌紧张和痛觉消失应停止注射。多用静脉注射必须缓慢，肌紧张和痛觉消失应停止注射。多用静脉注射必须缓慢，肌紧张和痛觉消失应停止注射。多用腹腔注射。腹腔注射。腹腔注射。腹腔注射。n n麻醉深度不够，要经过一段时间才能补充麻醉剂。麻醉深度不够，要经过一段时间才能补充麻醉剂。麻醉深度不够，要经过一段时间才能补充麻醉剂。麻醉深度不够，要经过一段时间才能补充麻醉剂。补加剂量不超过原注射量的补加剂量不超过原注射量的补加剂量不超过原注射量的补加剂量不超过原注射量的1/41/51/41/5。问题问题(wnt)(wnt)9 9第四十五页，共六十二页。45新药药效学研究的思路和方法n n常用局部麻醉剂常用局部麻醉剂n n普鲁卡因普鲁卡因：毒性小，见效快，：毒性小，见效快，0.5%0.5%1%1%用用于局部浸润麻醉；于局部浸润麻醉；n n利多卡因利多卡因：见效快，组织：见效快，组织(zzh)(zzh)(zzh)(zzh)穿透性好，穿透性好，1%1%2%2%用于大动物神经干阻滞麻醉，用于大动物神经干阻滞麻醉，0.25%0.25%0.5%0.5%用于局部浸润麻醉。用于局部浸润麻醉。第四十六页，共六十二页。46新药药效学研究的思路和方法n n常用全身麻醉剂常用全身麻醉剂常用全身麻醉剂常用全身麻醉剂n n乙醚：乙醚：乙醚：乙醚：安全度大，麻醉深度易于掌握，麻醉后恢复安全度大，麻醉深度易于掌握，麻醉后恢复安全度大，麻醉深度易于掌握，麻醉后恢复安全度大，麻醉深度易于掌握，麻醉后恢复快。快。快。快。适用适用适用适用(shyng)(shyng)(shyng)(shyng)于各种动物，尤其是做慢性实验的动物。于各种动物，尤其是做慢性实验的动物。于各种动物，尤其是做慢性实验的动物。于各种动物，尤其是做慢性实验的动物。n n戊巴比妥钠：戊巴比妥钠：戊巴比妥钠：戊巴比妥钠：一次给药的有效时间可延续一次给药的有效时间可延续一次给药的有效时间可延续一次给药的有效时间可延续3h5h3h5h，毒，毒，毒，毒性小，便宜。常配成性小，便宜。常配成性小，便宜。常配成性小，便宜。常配成3 3%生理盐水溶液生理盐水溶液生理盐水溶液生理盐水溶液，可加温溶解，在，可加温溶解，在，可加温溶解，在，可加温溶解，在常温下放置常温下放置常温下放置常温下放置1 1 1 12 2 2 2月不失药效。适用于急性动物实验。月不失药效。适用于急性动物实验。月不失药效。适用于急性动物实验。月不失药效。适用于急性动物实验。狗，狗，狗，狗，iviv或或或或ip3035mg/kgip3035mg/kg，猫、兔、鼠，猫、兔、鼠，猫、兔、鼠，猫、兔、鼠 ip 40 ip 40 ip 40 ip 4045mg/kg45mg/kg45mg/kg45mg/kg。第四十七页，共六十二页。47新药药效学研究的思路和方法如何如何(rh)(rh)设立对照组？设立对照组？n n正常对照组正常对照组n n模型对照组模型对照组 n n阳性阳性(yngxng)(yngxng)(yngxng)(yngxng)模型阳性药模型阳性药 上市销售的已知有效的同类药物上市销售的已知有效的同类药物n n原剂型对照原剂型对照 问题问题(wnt)(wnt)1010第四十八页，共六十二页。48新药药效学研究的思路和方法阳性阳性(yngxng)(yngxng)对照药的选择要求对照药的选择要求n n可比性：可比性：药效肯定的同类中药或化学药，要药效肯定的同类中药或化学药，要求作用（或主治）相同，给药途径尽量一致。求作用（或主治）相同，给药途径尽量一致。n n合法性：合法性：应用应用(yngyng)(yngyng)药典或部颁标准收载，药典或部颁标准收载，或近来批准生产的合法药物。或近来批准生产的合法药物。n n择优性：择优性：选用目前医学界公认有效的代表药。选用目前医学界公认有效的代表药。问题问题(wnt)(wnt)1111第四十九页，共六十二页。49新药药效学研究的思路和方法n n一个受试药可能有几个阳性对照一个受试药可能有几个阳性对照(duzho)(duzho)药；药；n n阳性药可设一个或多个剂量组；阳性药可设一个或多个剂量组；n n给药时间和给药途径既要考虑受试药物能完给药时间和给药途径既要考虑受试药物能完全发挥作用，也要兼顾阳性对照药的作用特全发挥作用，也要兼顾阳性对照药的作用特点，不强求同步一致。点，不强求同步一致。n n模型阳性药必须作出阳性结果，否则有理由模型阳性药必须作出阳性结果，否则有理由怀疑所选方法和指标的可信度。怀疑所选方法和指标的可信度。第五十页，共六十二页。50新药药效学研究的思路和方法每组样本量如何每组样本量如何(rh)(rh)确定？确定？n n小动物（大鼠、小鼠、蛙）小动物（大鼠、小鼠、蛙）：10103030例，计例，计量资料量资料(zlio)(zlio)(zlio)(zlio)1010例例,计数资料计数资料(zlio)(zlio)(zlio)(zlio)3030例；例；n n中等动物（兔、豚鼠）中等动物（兔、豚鼠）：8 81212例。计量资例。计量资料料66例例,计数资料计数资料2020例；例；n n大动物（犬、猫、猴）大动物（犬、猫、猴）：5 51515例。例。避免干扰因素：动物、仪器、药物。避免干扰因素：动物、仪器、药物。问题问题(wnt)(wnt)1212第五十一页，共六十二页。51新药药效学研究的思路和方法如何如何(rh)(rh)进行数据统计？进行数据统计？pp定量资料：定量资料：又称量反应资料（如血压、尿量、又称量反应资料（如血压、尿量、体温、血液生化测定值等）。体温、血液生化测定值等）。多采用多采用t t检验检验和方差检验。和方差检验。pp定性资料：定性资料：又称质反应资料，（如死或不死又称质反应资料，（如死或不死,惊厥出现或不出现等），试验结果常用百分惊厥出现或不出现等），试验结果常用百分率表示。率表示。采用采用“卡方卡方”检验。检验。pp分级资料：分级资料：也称为有序的计量资料，（如药也称为有序的计量资料，（如药效的持续时间、病理程度按等级划分效的持续时间、病理程度按等级划分(hu fn)(hu fn)(hu fn)(hu fn)的的资料等）。资料等）。常采用秩和法及常采用秩和法及RiditRidit法等非参法等非参数统计分析方法。数统计分析方法。问题问题(wnt)(wnt)1313第五十二页，共六十二页。52新药药效学研究的思路和方法n n数据在数据在数据在数据在 3 3 3 3s s s s之外的属异常数据，要分析原因。之外的属异常数据，要分析原因。之外的属异常数据，要分析原因。之外的属异常数据，要分析原因。n n使用方差分析，要进行方差齐性检验。如两组的使用方差分析，要进行方差齐性检验。如两组的使用方差分析，要进行方差齐性检验。如两组的使用方差分析，要进行方差齐性检验。如两组的S S S S相差一相差一相差一相差一倍以上即为方差倍以上即为方差倍以上即为方差倍以上即为方差(fn ch)(fn ch)(fn ch)(fn ch)不齐。不齐。不齐。不齐。n n使用使用使用使用t t t t检验，要进行正态性检验。如均数两侧之差大于检验，要进行正态性检验。如均数两侧之差大于检验，要进行正态性检验。如均数两侧之差大于检验，要进行正态性检验。如均数两侧之差大于2 2 2 2nnnn，即为明显偏态。，即为明显偏态。，即为明显偏态。，即为明显偏态。n n有无不定值。有有无不定值。有有无不定值。有有无不定值。有10101010，30303030等不定值的资料时，不宜等不定值的资料时，不宜等不定值的资料时，不宜等不定值的资料时，不宜用均数作用均数作用均数作用均数作t t t t检验可改用中位数表达。作检验可改用中位数表达。作检验可改用中位数表达。作检验可改用中位数表达。作MannwhitneyMannwhitneyMannwhitneyMannwhitney秩和检验，等级和检验，或序值法检验。秩和检验，等级和检验，或序值法检验。秩和检验，等级和检验，或序值法检验