药物检测分析技术_刘斌_阿司匹林原料药、片剂、栓剂的含量测定

药物检测分析技术药物检测分析技术_ _刘斌刘斌_ _阿司匹林原料药、片剂、阿司匹林原料药、片剂、栓剂的含量测定栓剂的含量测定一、试剂及仪器一、试剂及仪器阿司匹林、阿司匹林片、阿司匹林栓阿司匹林、阿司匹林片、阿司匹林栓咖啡因咖啡因内标内标氢氧化钠滴定液（氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）、硫酸）、硫酸滴定液（滴定液（0.05mol/L）高效液相色谱仪高效液相色谱仪质量标准：质量标准：中国药典（中国药典（2005年版）第二部年版）第二部 p283、286阿司匹林不得少于阿司匹林不得少于99.5%。片剂：应为标示量的片剂：应为标示量的95.0%-105.0%。栓剂：应为标示量的栓剂：应为标示量的90.0%-110.0%。二、实训内容二、实训内容阿司匹林原料药含量测定：直接阿司匹林原料药含量测定：直接酸碱滴定法酸碱滴定法阿司匹林片剂含量测定：两步酸阿司匹林片剂含量测定：两步酸碱滴定法碱滴定法阿司匹林栓剂含量测定：高效液阿司匹林栓剂含量测定：高效液相色谱法相色谱法水杨酸类药物阿司匹林阿司匹林(aspirin)结构及其性质结构及其性质苯环苯环紫外吸收紫外吸收羧基羧基酸性酸性酚羟基酚羟基显色显色酯酯水解水解典型药物典型药物水杨酸水杨酸 SA(salicylic acid)阿司匹林阿司匹林(aspirin)对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠(PAS-Na)双水杨酯双水杨酯salsalate贝诺酯贝诺酯(Benorilate)羧基羧基-酸性酸性含量测定方法：酸碱滴定法含量测定方法：酸碱滴定法 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 两步滴定法两步滴定法 高效液相色谱法高效液相色谱法（一）（一）酸碱酸碱滴定法滴定法(Acid-base titration method)1 1、直接滴定、直接滴定水杨酸水杨酸pKa 2.98酸性较强酸性较强直接滴定直接滴定羧酸邻位羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性，吸电子基团，使酸性增增加加分子内氢键，更增加了其极性分子内氢键，更增加了其极性Aspirin、丙磺舒丙磺舒(Ch.P.BP.JP 等等)苯甲酸苯甲酸(Ch.P等等)均均采用本法采用本法乙醇乙醇作用：溶解作用：溶解ASA；防止；防止ASA在水溶在水溶 液中滴定过程易水解液中滴定过程易水解中性乙醇：中性乙醇：对指示剂对指示剂(酚酞酚酞)而言为中性，而言为中性，可消除滴定误差可消除滴定误差 pKa 36 的药物溶于中性醇的药物溶于中性醇,可可直接用直接用NaOH滴定滴定pKa 69 的药物要用的药物要用非水溶液滴定法非水溶液滴定法若若若若SA不合格，不宜采用本法不合格，不宜采用本法不合格，不宜采用本法不合格，不宜采用本法2.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)取本品约取本品约1.5g，精密称定，准确加，精密称定，准确加NaOH液液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液液(0.25mol/L)滴定滴定剩余剩余的的NaOH，并将滴定结果用，并将滴定结果用空白试验空白试验校正。校正。每每1ml的的NaOH液液(0.5mol/L)相当于相当于45.04mg的的C9H9O4。50mlNaOH杂质杂质水解阿司匹林水解阿司匹林中和硫酸，中和硫酸，V中和硫酸，中和硫酸，V0供试品供试品滴定滴定空白空白试验试验50mlNaOHV0-V即相当于即相当于阿司匹林消耗阿司匹林消耗的的NaOH体积体积阿司匹林的百分含量阿司匹林的百分含量(V0-V)TFm100%3.两步滴定法两步滴定法(Two-step titration)Aspirin片枸橼酸枸橼酸Citric acid酒石酸酒石酸Trataric acid水解产物水解产物水杨酸水杨酸SAHAc第一步：第一步：NaOH滴定所有的酸：滴定所有的酸：ASA、CA、TA、SA、HAc第二步：水解后剩余滴定第二步：水解后剩余滴定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每每1ml的的NaOH液液(0.1mol/L)相当于相当于18.02mg的的C9H8O4（1 1）为何取）为何取1010片，精密称定后取片粉进行含量测定？片，精密称定后取片粉进行含量测定？片剂存在片重差异和含量差异，为排除差异存在，片剂存在片重差异和含量差异，为排除差异存在，取片粉进行含量测定，使结果更具代表性。取片粉进行含量测定，使结果更具代表性。（2 2）计算：称取计算：称取10片重片重1.8240g片粉重片粉重0.5312gCNaOH：0.1032mol/L标示量标示量 0.1g V：3.02ml V0：20.18mlCH2SO4：0.05120mol/L阿司匹林标示量百分含量阿司匹林标示量百分含量(V0-V)TFmW标示量标示量100方法比较方法比较（二）高效液相色谱法（二）高效液相色谱法阿司匹林栓剂：基质不易分离阿司匹林栓剂：基质不易分离系统适应性试验系统适应性试验1.理论塔板数：理论塔板数：n=5.54(tR/W1/2h)24.重复性：取对照液，连续进样重复性：取对照液，连续进样5次，峰面积测量值次，峰面积测量值RSD2.0。2.分离度：分离度：3.拖尾因子：拖尾因子：酚羟基酚羟基-三氯化铁反应三氯化铁反应FeCl3，pH46紫堇色紫堇色酯键酯键水解反应水解反应杂质检查杂质检查阿司匹林阿司匹林SAASA副产物副产物u 溶液澄清度溶液澄清度u 水杨酸水杨酸u 易碳化物易碳化物u 炽灼残渣炽灼残渣u 重金属重金属1.1.溶液澄清度溶液澄清度(Na2CO3溶液溶液)醋酸苯酯醋酸苯酯水杨酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸乙酰水杨酸苯酯苯酯阿司匹林样品阿司匹林样品0.50g，加温热至约，加温热至约45的碳酸钠试液的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应该澄清。溶解后，溶液应该澄清。2.2.水杨酸水杨酸淡黄、红棕、深棕色芳酸类芳酸类苯甲酸类苯甲酸类结构及其性质结构及其性质（一）基本结构及其性质（一）基本结构及其性质苯环苯环紫外吸收紫外吸收羧酸或其酯，直接与苯环相羧酸或其酯，直接与苯环相连连酸性酸性其他取代基其他取代基其他其他 （二）典型药物（二）典型药物苯甲酸苯甲酸(benzoic acid)丙磺舒丙磺舒(probenecid)甲芬那酸甲芬那酸(mefenamic acid)羟苯乙酯羟苯乙酯(ethylparoben)羧基羧基三氯化铁反应三氯化铁反应赭色赭色中性溶液pH5.06.0米黄色米黄色FeCl3含量测定含量测定（一）酸碱滴定法（一）酸碱滴定法(Acid-base titration method)苯甲酸苯甲酸pKa 4.20 直接酸碱滴定法直接酸碱滴定法（二）双相滴定法（二）双相滴定法(Titrimetry in two phases)苯甲酸钠苯甲酸钠苯甲酸钠苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，为芳酸碱金属盐，易溶于水易溶于水易溶于水易溶于水；苯甲酸不溶于；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断。因此，利用水，不利于终点的正确判断。因此，利用苯甲酸能溶苯甲酸能溶苯甲酸能溶苯甲酸能溶于有机溶剂于有机溶剂于有机溶剂于有机溶剂的性质，采用双相滴定法。的性质，采用双相滴定法。HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/L25ml1.5g50mlHCl滴定至水层显橙红滴定至水层显橙红色色分出分出H2O层，置具塞锥层，置具塞锥形瓶形瓶乙醚层用乙醚层用H2O 5ml洗涤，洗涤，洗液并入锥形瓶洗液并入锥形瓶加乙醚加乙醚20ml，继续用，继续用HCl滴定，至水层显持滴定，至水层显持续的橙红色续的橙红色甲基橙指示剂甲基橙指示剂计算方法：计算方法：苯甲酸钠的百分含量苯甲酸钠的百分含量V:消耗滴定液的体积，消耗滴定液的体积，mlT:滴定度，每滴定度，每1ml滴定液相当于被滴定物质滴定液相当于被滴定物质的质量，的质量，mg/mlF:浓度校正系数浓度校正系数m:供试品取样量，供试品取样量，mg技能：技能：掌握采用容量分析法、高效液相色谱法对药掌握采用容量分析法、高效液相色谱法对药物进行定量分析的操作方法物进行定量分析的操作方法掌握原料药、制剂含量表示方法掌握原料药、制剂含量表示方法相关理论知识：相关理论知识：掌握原料药、制剂含量测定方法不同选择的掌握原料药、制剂含量测定方法不同选择的原因原因掌握芳酸及其酯类药物结构特征、分析方法掌握芳酸及其酯类药物结构特征、分析方法的选择的选择结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！30