新课标人教版高中生物选修三专题一《DNA重组技术的基本工具》

生 长 快 、 肉 质 好 的 转 基 因鱼 (中 国 ) 乳 汁 中 含 有 人 生 长 激 素 的转 基 因 牛 (阿 根 廷 )过 程 分 析 DNA重 组 技 术 的 基 本 工 具 准 确 切 割 DNA的 工 具 （ “ 分 子 手 术 刀 ” ） DNA片 段 的 连 接 工 具 （ “ 分 子 缝 合 针 ” ） 基 因 转 移 工 具 （ “ 分 子 运 输 车 ” ） 基 因 的 大 小 以 纳 米 计 算 ， 要 对 它 进 行 剪 切 、拼 接 等 操 作 ， 没 有 非 常 精 细 的 工 具 是 不 行 的 。 进行 基 因 操 作 最 少 需 要 以 下 三 种 工 具 ： 黏 性 末 端平 末 端 大 肠 杆 菌 的 一 种 限 制 酶（ EcoR )能 识 别 GAATTC序 列 ，并 在 G和 A之 间 切 开 形 成 黏 性 末端 。 Sma 能 识 别 CCCGGG序 列 ， 并在 C和 G之 间 切 割 形 成 平 末 端 。 重 播 限 制 酶 切 割 DNA后 形成 的 末 端 黏 性 末 端 、平 末 端 是 如 何 形 成 的 ？ 基 因 的 针 线 DNA连 接 酶切 断 的 DNA片 段 要 与 受 体 细 胞 的DNA连 接 ， 你 觉 得 可 以 用 什 么 酶 ？DNA聚 合 酶 和 DNA连 接 酶 有 何相 同 点 和 不 同 点 ？ DNA连 接 酶 DNA聚 合 酶连 接 DNA链 双 链 单 链连 接 部 位 在 两 DNA片 段 之 间形 成 磷 酸 二 酯 键 将 单 个 核 苷 酸 加到 已 存 在 的 核 酸片 段 的 3末 端 的羟 基 上 ， 形 成 磷酸 二 酯 键 限 制 酶 切 割 后 有 两 种 不 同 的 结 果 ，一 种 产 生 黏 性 末 端 ， 一 种 产 生 平 末 端 。那 么 恢 复 它 们 的 连 接 时 ， 所 用 DNA连接 酶 是 否 可 以 不 加 选 择 ？E.coliDNA连 接 酶 ： 连 接 黏 性 末 端T4DNA连 接 酶 ： 连 接 黏 性 末 端 和 平 末 端 基 因 进 入 受 体 细 胞 的 载 体 要 让 一 个 从 甲 生 物 细 胞 内 取 出来 的 基 因 在 乙 生 物 体 内 进 行 表 达 ，首 先 得 将 这 个 基 因 送 到 乙 生 物 的 细胞 内 去 ！ 能 将 外 源 基 因 送 入 细 胞 的工 具 就 是 载 体 。 载 体 必 须 具 备 的 条 件如 果 载 体 对 受 体 细 胞 有 害 将 怎 样 ？目 的 基 因 是 否 进 入 受 体 细 胞 ， 没 有 标 记基 因 我 们 能 否 鉴 定 ？假 如 目 的 基 因 导 入 受 体 细 胞 后 不 能 复 制将 怎 样 ？作 为 载 体 没 有 切 割 位 点 将 怎 样 ？ 作 为 载 体 的 必 要 条 件1、 能 够 在 宿 主 细 胞 中 复 制 并 稳 定 地 保 存 ；2、 具 有 多 个 限 制 酶 切 点 ， 以 便 与 外 源 基 因连 接 ；3、 具 有 某 些 标 记 基 因 ， 便 于 进 行 筛 选 。 （如 抗 菌 素 的 抗 性 基 因 、 产 物 具 有 颜 色 反 应的 基 因 等 ）4、 对 受 体 细 胞 无 害 作 为 载 体 的 必 要 条 件 能 自 我 复 制 有 切 割 位 点 能 与 目 的 基 因 结 合 能 进 入 受 体 生 物 细 胞 并 在 受 体 生 物 细 胞 内 复 制并 表 达 ； 有 遗 传 标 记 基 因 对 受 体 细 胞 无 害 比 较 容 易 得 到 3、 基 因 的 运 输 工 具 运 载 体 能 复 制 并 带 着 插入 的 目 的 基 因 一起 复 制有 切 割 位 点有 标 记 基 因 的 存在 ， 将 来 可 用 含青 霉 素 的 培 养 基鉴 别 。 在 基 因 工 程 中 ， 切 割 运 载 体 和含 有 目 的 基 因 的 DNA片 段 ， 需使 用 （ ）A.同 种 限 制 酶 B. 两 种 限 制 酶C.同 种 连 接 酶 D. 两 种 连 接 酶 达 标 练 习 在 基 因 工 程 中 ， 切 割 运 载 体 和 含 有 目 的 基 因的 DNA片 段 ， 需 使 用 （ ）A. 同 种 限 制 酶 B. 两 种 限 制 酶C. 同 种 连 接 酶 D. 两 种 连 接 酶 基 因 工 程 常 用 的 受 体 细 胞 有 （ ）(1)大 肠 杆 菌 （ 2） 枯 草 杆 菌（ 3） 支 原 体 （ 4） 动 植 物 细 胞A. （ 3） （ 4） B. （ 1） （ 2） （ 4）C. （ 2） （ 3） （ 4） D. （ 1） （ 2） （ 3） A、 BamHI和 EcoRI； 末 端 互 补 序 列 AATT B、 BamHI和 Hind ； 末 端 互 补 序 列 GATCC、 EcoRI和 Hind ； 末 端 互 补 序 列 AATTD、 BamHI和 BglII； 末 端 互 补 序 列 GATC限 制 酶 是 一 种 核 酸 切 割 酶 ， 可 辨 识 并 切 割 DNA分 子 上特 定 的 核 苷 酸 碱 基 序 列 。 下 图 为 四 种 限 制 酶 BamHI，EcoRI， Hind 以 及 Bgl 的 辨 识 序 列 。 箭 头 表 示每 一 种 限 制 酶 的 特 定 切 割 部 位 ， 其 中 哪 两 种 限 制 酶所 切 割 出 来 的 DNA片 段 末 端 可 以 互 补 黏 合 ？ 其 正 确的 末 端 互 补 序 列 为 何 ？ （ ） 本 课 小 结 ： 分 类作 用 来 源作 用特 点结 果 作 业 ： 重 组 DNA分 子 的 模 拟 制 作 。效 果 分 析 ：