土壤淤泥中的宏基因组提取

土壤、淤泥中的宏基因组提取(磁珠法)货号：KTSM2636.产品简介：本试剂盒适用于从土壤、淤泥、粪便中提取基因组DNA，采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，可以将样本中 杂质尽可能的去除，配有的研磨珠和高效的裂解液保证从土壤中提取基因组DNA的完整性。使用本试剂盒回收的DNA杂质少， 完整性好，可直接用于PCR、酶切等分子生物学下游实验。产品内容：产品组成KTSM2636(50 次)缓冲液 DA ( Buffer DA )50 ml裂解液 DLA ( Buffer DLA )25 ml溶菌酶2支Proteinase K1支裂解液 DLB ( Buffer DLB )10 ml结合液 DB ( Buffer DB )12.5 ml磁珠悬浮液1 ml漂洗液 DW1 ( Buffer DW1 )50 ml漂洗液 DW2 ( Buffer DW2 )35 ml洗脱缓冲液TE ( Buffer TE )5 ml研磨珠12.5g.储存条件：该试剂盒置于室温(15-25。)干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8。2-8。保存条件下，若溶液产生 沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37。水浴中孵育10 min，以溶解沉淀。产品特点：(1 )适用范围广：适用于花坛土、花盆土、农田土、山林土、海水淤泥、湖边淤泥、红土、黑土等多类土壤环境样本的提取， 同样适用于粪便样本的提取。(2 )简便快捷：能够集中在相对较短时间内完成实验操作。(3 )高纯度：与磁珠法纯化相结合，提取的DNA纯度高，可直接用于下游实验。(4 )完整性好：可同时提取革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。注意事项(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)：(1 )自备试剂：异丙醇，乙醇。(2 )若裂解液中有沉淀，可在37。水浴中重新溶解，摇匀后使用。(3)若对RNA较为敏感，可加入RNase A处理。操作步骤：使用前请先在结合液中加入异丙醇，漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶子上的标签。(1 )取0.3-0.5 g 土壤或粪便至2 ml离心管中，加入0.25g研磨珠和1 ml缓冲液DA，涡旋振荡1-3 min。(2 ) 12000 rpm 离心 2 min，弃上清。(3)加入500 pl裂解液DLA, 50 p l溶菌酶，振荡10 min , 95C温育10 min。(4 ) 12000 rpm 离心 2 min，取上清。(5)加入20 pl蛋白酶K和200 pl裂解液DLB , 70 C温育10 min。(6 )加入两倍体积的结合液DB (使用前加入异丙醇)振荡混匀10 sec。(7 )加入20 pl磁珠悬浮液，振荡混匀10 min。注意：为了确保磁珠彻底重悬，请在使用前振荡混匀。(8 )将离心管置于磁力架上，静置2 min，磁珠完全吸附后，吸去液体，小心勿碰到磁珠。(9 )将离心管从磁力架取下，加入500 pl漂洗液DW1 (使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，振荡混匀1 min。(10 )将离心管置于磁力架上，静置30 sec，磁珠完全吸附后，吸去液体，小心勿碰到磁珠。(11 )重复步骤8-9 一次。(12 )将离心管从磁力架取下，加入700 pl漂洗液DW2 (使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，振荡混匀1 min。(13 )将离心管置于磁力架上，静置30 sec，磁珠完全吸附后，吸去液体，小心勿碰到磁珠。注意：如果对于DNA纯度要求更高，可以重复步骤9和10 一次。(14 )将离心管置于磁力架上，室温晾干10-15 min或通风橱干燥3 min。注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。(15 )将离心管从磁力架取下，加入50-100 p l洗脱缓冲液TE ,振荡混匀，磁珠应完全浸没于缓冲液中，置于56C,孵育5 min，期间振荡混匀1-2次，每次5 sec。(16 )将离心管放置于磁力架上静置1 min，磁珠完全吸附后，小心将DNA溶液转移至一个新离心管中，并于适当条件保存。(17)