5中药制剂中各类化学成分分析

P96第五章 中药制剂中各类化学成分分析楼一层楼一层 1 生物碱类成分分析概述概述:-什么是生物碱什么是生物碱理化性质理化性质n物理性状物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性）n碱性碱性n溶解性溶解性n沉淀反应沉淀反应w沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸n显色反应显色反应w+酸性染料（磺酸肽类）酸性染料（磺酸肽类）有色配合物有色配合物n紫外光谱特征紫外光谱特征游离易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂生物碱盐水溶性增强 1 生物碱类成分分析生物碱类成分的分离生物碱类成分的分离n溶剂萃取溶剂萃取n柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）定性鉴别定性鉴别n沉淀反应、显色反应沉淀反应、显色反应w多肽、蛋白质、鞣质等多肽、蛋白质、鞣质等假阳性反应假阳性反应w麻黄碱、秋水仙碱等麻黄碱、秋水仙碱等假阴性反应假阴性反应马钱子散中生物碱成分的鉴别马钱子散中生物碱成分的鉴别取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时，滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋碘化铋钾钾试液12滴，即生成黄棕色沉淀。1 生物碱类成分分析n薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别w吸附剂：氧化铝、硅胶吸附剂：氧化铝、硅胶w展开剂：氯仿、苯等展开剂：氯仿、苯等w显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等n气相色谱气相色谱麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定n液相色谱液相色谱 1 生物碱类成分分析含量测定含量测定n总生物碱含量测定总生物碱含量测定 w化学分析法化学分析法 w分光光度法分光光度法 n直接测定直接测定 n离子对萃取比色法离子对萃取比色法n酸性染料比色法酸性染料比色法 BH十十十十In（BH十十In）BH十十In n苦味酸盐比色法苦味酸盐比色法 n雷氏盐比色法雷氏盐比色法 n异羟肟酸铁比色法异羟肟酸铁比色法（含有酯键结构的生物碱含有酯键结构的生物碱）1 生物碱类成分分析含量测定含量测定n单体生物碱含量测定单体生物碱含量测定 w薄层色谱法薄层色谱法 w高效液相色谱法高效液相色谱法 n液液液分配色谱法（以反相为主，如液分配色谱法（以反相为主，如ODSODS或或C C1818）n改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液）剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液）n固定相改进（封尾技术）固定相改进（封尾技术）n液液固吸附色谱法固吸附色谱法n离子交换色谱法（阳离子交换树脂）离子交换色谱法（阳离子交换树脂）n检测器检测器w气相色谱法气相色谱法 2 黄酮类成分分析概述概述 2-苯基色原酮苯基色原酮理化性质理化性质n物理性状物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性）n溶解性溶解性n酸碱性酸碱性w酸性：与酚羟基的数目和位置有关酸性：与酚羟基的数目和位置有关 7,4-二羟基二羟基 7-或或4-羟基羟基 一般酚一般酚 5-羟基羟基w碱性碱性游离甙元易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等黄酮甙易溶于水、甲醇、乙醇 2 黄酮类成分分析理化性质理化性质n显色反应显色反应w还原反应（盐酸镁粉反应）还原反应（盐酸镁粉反应）w金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、镁盐）镁盐）n紫外光谱特征紫外光谱特征I带带(300-400nm)BB环桂皮酰基环桂皮酰基IIII带带(240-285nm)AA环苯甲酰基环苯甲酰基 2 黄酮类成分分析黄酮类成分的分离黄酮类成分的分离n溶剂萃取溶剂萃取n柱层析（柱层析（聚酰胺柱聚酰胺柱）n沉淀法沉淀法定性鉴别定性鉴别n显色反应显色反应w盐酸盐酸-镁粉反应镁粉反应w金属盐类配合反应金属盐类配合反应 2 黄酮类成分分析定性鉴别定性鉴别n薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别w硅胶硅胶-分离弱极性黄酮分离弱极性黄酮 n展开系统：甲苯展开系统：甲苯-甲酸乙酯甲酸乙酯-甲酸，氯仿甲酸，氯仿-甲醇甲醇 w聚酰胺聚酰胺-分离含游离酚羟基的黄酮及其苷分离含游离酚羟基的黄酮及其苷n展开系统：醋酸，醋酸乙酯展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸甲酸-水等水等w纤维素纤维素-分离多糖苷混合物分离多糖苷混合物n展开系统：正丁醇展开系统：正丁醇-乙酸乙酸-水，甲酸，乙酸水，甲酸，乙酸 2 黄酮类成分分析含量测定含量测定n总黄酮含量测定总黄酮含量测定 w紫外分光光度法紫外分光光度法w比色法比色法w高效液相色谱法高效液相色谱法n正相色谱正相色谱n硅胶固定相硅胶固定相没有羟基或乙酰化黄酮类成分没有羟基或乙酰化黄酮类成分n反相色谱（反相色谱（C C1818或或C C8 8）n流动相：甲醇流动相：甲醇-水水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水水n检测器检测器 萜类内酯萜类内酯（蒸发光散射）（蒸发光散射）2 黄酮类成分分析银杏叶提取物银杏叶提取物总黄酮醇苷总黄酮醇苷含量含量测定测定 含量测定含量测定 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离度应大于1.5。对照品溶液的制备对照品溶液的制备（略）供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45m）滤过，取滤液，即得。测定法测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄酮苷的含量。总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）2.51 3 三萜皂甙类成分分析概述概述-30个个C理化性质理化性质n物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）n溶解性溶解性n紫外光谱特征紫外光谱特征大多无明显的紫外吸收或仅在大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端吸收附近有末端吸收 皂甙元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等ROHHHCOOHO3R2OHOHR1O3206甘草酸甘草酸人参皂甙人参皂甙(A型型)3 三萜皂甙类成分分析理化性质理化性质n显色反应显色反应w醋酐醋酐-浓硫酸反应浓硫酸反应w五氯化锑反应五氯化锑反应w三铝醋酸反应三铝醋酸反应w冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反应乙酰氯反应w氯仿氯仿-硫酸反应硫酸反应n金属盐类反应金属盐类反应w+铅、钡、铜盐铅、钡、铜盐沉淀沉淀 酸性皂甙酸性皂甙+硫酸铵硫酸铵/醋酸铅醋酸铅/中性盐中性盐沉淀沉淀 中性皂甙中性皂甙+碱式醋酸铅碱式醋酸铅/氢氧化钡氢氧化钡/碱性盐碱性盐沉淀沉淀 3 三萜皂甙类成分分析三萜皂甙类成分的分离三萜皂甙类成分的分离n溶剂萃取溶剂萃取n柱层析（大孔树脂柱）柱层析（大孔树脂柱）n沉淀法沉淀法定性鉴别定性鉴别n泡沫反应泡沫反应n显色反应显色反应 3 三萜皂甙类成分分析定性鉴别定性鉴别n薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别w吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土w展开剂：展开剂：n三萜皂三萜皂甙甙氯氯仿仿-甲醇甲醇-水、正丁醇水、正丁醇-醋酸乙酯醋酸乙酯-水水等等极性较大的极性较大的体系体系n三萜皂甙元三萜皂甙元-以苯、氯仿、己烷等为主要组分以苯、氯仿、己烷等为主要组分w显色剂显色剂n三氯醋酸、三氯醋酸、50%50%及及10%10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓硫酸乙醇液、磷钼酸、浓硫酸硫酸-醋酸酐、碘蒸气等醋酸酐、碘蒸气等 3 三萜皂甙类成分分析含量测定含量测定n总皂甙含量测定总皂甙含量测定 w重量法重量法w比色法比色法n显色剂：香草醛显色剂：香草醛-硫酸，香草醛硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐高氯酸，酸酐-硫酸硫酸等等等等n三萜皂甙类单体成分含量测定三萜皂甙类单体成分含量测定w薄层色谱法薄层色谱法w高效液相色谱高效液相色谱n甘草酸、远志皂甙甘草酸、远志皂甙紫外检测器紫外检测器n其他其他蒸发光散射检测器（蒸发光散射检测器（ELSDELSD）概述概述苯醌苯醌(对苯醌和邻对苯醌和邻-)、菲醌、萘醌和菲醌、萘醌和蒽醌蒽醌理化性质理化性质n物理性状物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性）（存在的形态，升华性，光不稳定性）n溶解性溶解性n酸碱性酸碱性酚羟基酚羟基酸性酸性游离溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等醌甙可溶于热水，易溶于甲醇、乙醇大黄素OOCH3OHOHOH910OOO丹参醌IIA4 醌类成分分析 4 醌类成分分析理化性质理化性质n显色反应显色反应w羟基蒽醌羟基蒽醌+碱碱橙，红，紫红，蓝橙，红，紫红，蓝w+Pb2+/Mg2+配合物配合物w+对亚硝基二甲基苯胺对亚硝基二甲基苯胺紫，绿，蓝，灰紫，绿，蓝，灰 4 醌类成分分析定性鉴别定性鉴别n显色反应显色反应n升华法升华法n薄层鉴别薄层鉴别w吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶w展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统分离甙和甙元分离甙和甙元 不含甲醇或水的混合溶剂系统不含甲醇或水的混合溶剂系统分离甙元分离甙元w显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、氨熏显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、氨熏 4 醌类成分分析含量测定含量测定n游离蒽醌的测定游离蒽醌的测定弱极性溶剂提取后，加碱比色弱极性溶剂提取后，加碱比色 n结合蒽醌的测定结合蒽醌的测定极性溶剂提取，水解测甙元极性溶剂提取，水解测甙元先酸水解后，非先酸水解后，非极性溶剂提取甙元后测定极性溶剂提取甙元后测定n醌类单体成分含量测定醌类单体成分含量测定w薄层色谱法薄层色谱法w高效液相色谱高效液相色谱 4 醌类成分分析牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定混合碱液比色法混合碱液比色法对照品溶液测定：对照品溶液测定：以1，8-二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度（100g/mL）。取1mL对照品液于10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱溶解并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm波长处测定。样品测定：样品测定：游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片，刮去糖衣，精密称定重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，称重，水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量，滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中，用蒸馏水20mL洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿层用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，直至混合碱液无色，合并碱液，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿层。将混合碱液在水浴上加热数分钟至氯仿挥尽，冷却，移入100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。4 醌类成分分析牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定混合碱液比色法混合碱液比色法 总蒽醌的测定：总蒽醌的测定：精密称取游离蒽醌项下的牛黄解毒片粉一片置于150mL烧瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小时，放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小时，放冷，吸出氯仿液，再加氯仿，反复操作至氯仿无色为止。合并氯仿层液，用蒸馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。将碱液置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中，用混合碱液稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。结合蒽醌的计算：结合蒽醌的计算：每片含结合蒽醌量=每片含总蒽醌量每片含游离蒽醌量。4 醌类成分分析复方丹参片中丹参酮复方丹参片中丹参酮A含量测定含量测定高效液相色谱法高效液相色谱法 色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270nm。对照品溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取丹参酮A对照品10mg，置50mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1mL中含丹参酮A40g）供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10L，注入液相色谱仪，测定，即得。5 挥发性成分分析概述概述理化性质理化性质n物理性状（气味，比重，折光性）物理性状（气味，比重，折光性）n溶解性：易溶于有机溶剂溶解性：易溶于有机溶剂n显色反应显色反应w酚类酚类+三氯化铁蓝，蓝紫，绿w羰基羰基+苯肼、羟胺结晶体w醛类醛类+硝酸银胺银镜w内酯类内酯类+亚硝酰铁氰化钠+NaOH红色并逐渐消失w奧类奧类+浓硫酸蓝，紫柠檬烯柠檬烯OHCHCHCHO薄荷醇薄荷醇桂皮醛桂皮醛 5 挥发性成分分析定性鉴别定性鉴别n化学反应化学反应w氧化反应氧化反应(高锰酸钾，铬酸）高锰酸钾，铬酸）w香草醛硫酸反应香草醛硫酸反应n薄层色谱薄层色谱w吸附剂：硅胶、氧化铝吸附剂：硅胶、氧化铝w展开剂：石油醚，正己烷，（加少量的乙酸乙脂展开剂：石油醚，正己烷，（加少量的乙酸乙脂或苯）或苯）w显色剂显色剂n气相色谱法气相色谱法nGC-MS或或GC-FTIR5 挥发性成分分析含量测定含量测定n总挥发油含量测定总挥发油含量测定 w挥发油测定器挥发油测定器w蒸馏法蒸馏法n单一成分含量测定单一成分含量测定w气相色谱气相色谱w薄层色谱法薄层色谱法w高效液相色谱高效液相色谱wGC-MS或或GC-FTIR(气相色谱傅里叶变换红外光谱气相色谱傅里叶变换红外光谱)联用技术联用技术6 木脂素类成分分析概述概述 两个苯丙素两个苯丙素 衍生聚合物衍生聚合物理化性质理化性质n物理性状物理性状（存在的形态，光学活性）n溶解性溶解性n紫外光谱特征：紫外光谱特征：250-350nmn显色反应显色反应w通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇wLabat反应：反应：+硫酸硫酸+没食子酸没食子酸蓝绿wEcgrine反应：反应：+硫酸硫酸+变色酸变色酸蓝紫游离易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等成甙时可溶于甲醇、乙醇等OH3COROOCH3OCH3OCH3CH3OCH3OCH3H3COH3COH3COH3CO牛蒡子甙牛蒡子甙(元元)五味子甲素五味子甲素 6 木脂素类成分分析定性鉴别定性鉴别n显色反应显色反应w功能基的颜色反应功能基的颜色反应n薄层鉴别薄层鉴别w吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶w展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）w显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、碘熏碘熏 6 木脂素类成分分析含量测定含量测定n总木脂素成分含量测定总木脂素成分含量测定w变色酸比色法变色酸比色法n单体成分含量测定单体成分含量测定w薄层色谱法薄层色谱法n吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶n展开剂：低极性的有机溶剂展开剂：低极性的有机溶剂w高效液相色谱高效液相色谱n固定相：固定相：C C1818n流动相：乙腈流动相：乙腈-水，甲醇水，甲醇-水水n检测器检测器 7 其他类型成分分析有机酸有机酸n概述概述:脂肪族类、芳香族类和萜类脂肪族类、芳香族类和萜类.-COOH(羧基羧基)n理化性质理化性质w物理性状物理性状（存在的形态，溶解性，挥发性）n提取分离提取分离w有机溶剂提取法有机溶剂提取法w离子交换法离子交换法w水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 7 其他类型成分分析有机酸有机酸n定性鉴别定性鉴别w吸附色谱吸附色谱w分配色谱分配色谱n含量测定含量测定w酸碱滴定法酸碱滴定法总有机酸总有机酸w分光光度法分光光度法w高效液相色谱法高效液相色谱法w薄层色谱法薄层色谱法w其他方法其他方法 7 其他类型成分分析环烯醚萜类环烯醚萜类n概述概述特殊的单萜特殊的单萜（具有烯键和醚键）n理化性质理化性质w物理性状物理性状（存在的形态，多苦味，稳定性）w溶解性：溶解性：易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇n薄层定性鉴别薄层定性鉴别w吸附剂：吸附剂：硅胶、聚酰胺w显色剂：显色剂：硫酸乙醇，茴香醛试液，香草醛硫酸试液，对二甲氨基苯甲醛硫酸试液OOOOglu龙胆苦甙龙胆苦甙 7 其他类型成分分析环烯醚萜类环烯醚萜类n含量测定含量测定w高效液相色谱法高效液相色谱法w薄层扫描法薄层扫描法w荧光分光光度法荧光分光光度法w分光光度法分光光度法复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定精密称取本品精密称取本品3g，置索氏提取器内，加甲醇回流提取，置索氏提取器内，加甲醇回流提取6小时，小时，回收甲醇至干，加水回收甲醇至干，加水10ml溶解，用水饱和正丁醇提取，提取溶解，用水饱和正丁醇提取，提取液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭-中性氧化铝柱，中性氧化铝柱，用甲醇用甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用2ml甲醇溶甲醇溶解，作为供试品溶液。解，作为供试品溶液。薄层条件：硅胶薄层条件：硅胶GF254薄层板，展开剂氯仿薄层板，展开剂氯仿甲醇甲醇25%氨氨水（水（4:1:0.1），检测波长），检测波长247nm，参比波长，参比波长370nm。7 其他类型成分分析香豆素类香豆素类n概述概述n理化性质理化性质w物理性状物理性状（存在的形态，气味，挥发性）w溶解性溶解性w紫外光谱特征：紫外光谱特征：300nm（10000）w分子荧光分子荧光补骨脂素补骨脂素OOOOOCH2CCCH3茵陈内酯茵陈内酯游离易溶于甲醇、乙醇、乙醚、氯仿等香豆素甙能溶于水、甲醇、乙醇等 7 其他类型成分分析香豆素类香豆素类n显色反应显色反应w异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应w与酚羟基反应与酚羟基反应nFeClFeCl3 3nGibbsGibbs试剂（试剂（2,6-2,6-二氯苯醌氯亚胺）反应二氯苯醌氯亚胺）反应蓝色蓝色n重氮试剂化反应重氮试剂化反应 7 其他类型成分分析香豆素类香豆素类n定性鉴别定性鉴别w化学反应法化学反应法w荧光法荧光法w薄层色谱法薄层色谱法七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别取本品取本品10g，研细，加醋酸乙酯，研细，加醋酸乙酯20ml、盐酸、盐酸0.5ml，超声处，超声处理理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，使溶解，作为供试品溶液。作为供试品溶液。薄层条件：硅胶薄层条件：硅胶G薄层板，展开剂正已烷薄层板，展开剂正已烷醋酸乙酯（醋酸乙酯（4:1），），显色剂为显色剂为10%氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯365nm下检视。下检视。7 其他类型成分分析香豆素类香豆素类n含量测定含量测定w分光光度法分光光度法w荧光光度法荧光光度法w薄层色谱法薄层色谱法w高效液相色谱法高效液相色谱法w气相色谱法气相色谱法 7 其他类型成分分析乌蛇止痒丸中蛇床子素的含量测定乌蛇止痒丸中蛇床子素的含量测定色谱条件色谱条件 固定相：OV-1，2m3mmID玻璃柱；气体流速：N2 30ml/min，H2 50ml/min，Air 500ml/min；柱温：200；进样器和检测器温度：260。供试品溶液和对照品溶液的制备供试品溶液和对照品溶液的制备 精密称取内标物正廿三烷适量，加氯仿溶解，制成每1ml约含6mg的溶液，作为内标溶液。取乌蛇止痒丸适量，研成细粉，精密称取约5g，置索氏提取器中，精密加入内标溶液5.0ml，加氯仿80ml，回流至近无色。将提取液浓缩至数毫升，通过3g小型硅胶柱，用氯仿洗脱至10ml量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，作为供试品溶液。称取蛇床子素约25mg，加入内标溶液5.0ml，振摇使溶解，摇匀，作为对照品溶液。校正因子的测定校正因子的测定 精密吸取对照品溶液，连续进样35次，每次2l，按峰面积计算校正因子。样品测定样品测定 精密吸取供试品溶液，连续进样35次，每次2l，用校正因子计算样品含量。7 其他类型成分分析单萜及二萜类单萜及二萜类单萜倍半萜多是挥发油；二萜是树脂的主要成分单萜倍半萜多是挥发油；二萜是树脂的主要成分n含芍药甙中药制剂的分析含芍药甙中药制剂的分析w薄层色谱薄层色谱w高效液相色谱高效液相色谱n含穿心莲内酯中药制剂的分析含穿心莲内酯中药制剂的分析w薄层色谱薄层色谱w回滴法回滴法w比色法比色法总内酯总内酯w薄层扫描或高效液相色谱法薄层扫描或高效液相色谱法单体成分单体成分HOCH2OHCH2CH2CHOOOH穿心莲内酯穿心莲内酯 7 其他类型成分分析多糖（多糖（polysaccharides）n概述概述n理化性质理化性质w物理性状物理性状（存在形式，还原性）w溶解性：溶解性：溶于水，低浓度的酸碱，盐溶液，不溶于醇、醚、丙酮n提取分离提取分离w水提醇沉水提醇沉防止水解，注意消除酶、酸、碱等的影响 7 其他类型成分分析多糖（多糖（polysaccharides）n提取分离提取分离w金属盐沉淀法金属盐沉淀法w季胺氢氧化物沉淀季胺氢氧化物沉淀w柱色谱法柱色谱法（活性炭活性炭+等量的硅藻土）等量的硅藻土）w凝胶色谱法（葡聚糖凝胶凝胶色谱法（葡聚糖凝胶sephadex，琼脂糖凝，琼脂糖凝胶胶sepharose，聚丙烯酰胺凝胶，聚丙烯酰胺凝胶Bio-gel P）w制备型区域电泳制备型区域电泳7 其他类型成分分析多糖（多糖（polysaccharides）n定性鉴别定性鉴别w薄层色谱（硅胶、纤维素、硅藻土）薄层色谱（硅胶、纤维素、硅藻土）w纸色谱纸色谱展开剂：正丁醇、水混合体系显色剂：苯胺-邻苯二甲酸的正丁醇饱和水溶液等w电泳法电泳法n滤纸电泳、玻璃纤维纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、凝胶电泳滤纸电泳、玻璃纤维纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、凝胶电泳w高效液相色谱法高效液相色谱法w气质联用气质联用酸水解酸水解中和中和柱前衍生柱前衍生GC-MS7 其他类型成分分析多糖（多糖（polysaccharides）n含量测定含量测定w总多糖的测定总多糖的测定n3,5-二硝基水杨酸比色法二硝基水杨酸比色法棕红色（棕红色（550nm）半微量定量法n苯酚苯酚-硫酸法硫酸法蓝绿色（蓝绿色（480-490nm）n蒽酮蒽酮-硫酸法硫酸法黄绿色黄绿色(620nm)w单体多糖的含量测定单体多糖的含量测定n高效凝胶液相色谱法高效凝胶液相色谱法确定分子量确定分子量n高效液相色谱法高效液相色谱法确定组成确定组成色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱检测器：示差折光检测器检测器：示差折光检测器 7 其他类型成分分析多糖多糖灵芝多糖的灵芝多糖的测定测定 含量测定含量测定 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 精密称取105干燥至恒重的葡萄糖对照品适量 标准曲线的制备标准曲线的制备 (硫酸蒽酮法，=625nm)供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品粉末约2g，精密称定，置索氏提取器中，加水90ml，电加热器加热回流提取至提取液无色，提取液转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，加入乙醇150ml，摇匀，4 放置12小时，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解并转移至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。测定法测定法 （略）（略）本品按干燥品计算，含灵芝多糖以无水葡萄糖(C6H12O6)计，不得少于0.50%谢谢观看/欢迎下载BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH