如何开展医学免疫学设计性实验

如何开展医学免疫学设计性实验如何开展医学免疫学设计性实验微生物学免疫学教研室微生物学免疫学教研室 刘辉刘辉讲座内容讲座内容v免疫学设计性实验方案简介免疫学设计性实验方案简介v设计性实验开题报告的撰写设计性实验开题报告的撰写一、免疫学设计性实验方案简介一、免疫学设计性实验方案简介v设计性实验的含义和意义设计性实验的含义和意义v免疫学设计性实验方案免疫学设计性实验方案（一）设计性实验的含义和意义（一）设计性实验的含义和意义v什么是设计性实验？什么是设计性实验？设计性实验是指给定实验目的要求和实验条件，设计性实验是指给定实验目的要求和实验条件，由学生自行设计实验方案并加以实现的实验。由学生自行设计实验方案并加以实现的实验。v设计性实验的意义：培养设计性实验的意义：培养 科研意识科研意识 创新能力创新能力 团队精神团队精神（二）免疫学设计性实验方案（二）免疫学设计性实验方案v选题范围选题范围v具体实施计划具体实施计划v考核办法考核办法1.选题范围选题范围v自然流产与自身抗体的关系自然流产与自身抗体的关系 自然流产的发生机制之一：免疫学因素自然流产的发生机制之一：免疫学因素 自身抗体：自身抗体：抗心磷脂抗体、抗精子抗体、抗心磷脂抗体、抗精子抗体、抗核抗体、抗子宫内膜抗体、抗核抗体、抗子宫内膜抗体、抗甲状腺抗体等等抗甲状腺抗体等等2.具体实施计划具体实施计划v分工合作分工合作 每每4人一组人一组,明确分工明确分工v时间安排时间安排R第第4周：查阅文献周：查阅文献R第第5周：整理资料、立题、撰写立题报告周：整理资料、立题、撰写立题报告R第第6周：交立题报告周：交立题报告R第第7周：开始实验周：开始实验R第第8周：总结、评选优秀、周：总结、评选优秀、PPT演示演示3.考核办法考核办法v实验报告：实验报告：5分（平均分）分（平均分）实验原理、方法、结果及分析、结论实验原理、方法、结果及分析、结论v立题报告：立题报告：10分分v评选优秀：评选优秀：每班选一份每班选一份 发证书发证书 实用性实用性科学性科学性合理性合理性创新性创新性可行性可行性二、设计性实验开题报告的撰写二、设计性实验开题报告的撰写v开题报告的含义与作用开题报告的含义与作用v开题报告的内容开题报告的内容（一）开题报告的含义与作用（一）开题报告的含义与作用v开题报告含义开题报告含义 当课题方向确定之后，课题负责人在调查研究当课题方向确定之后，课题负责人在调查研究的基础上撰写的报请上级批准的选题计划。的基础上撰写的报请上级批准的选题计划。它说明课题应该进行研究、自己有条件进行研它说明课题应该进行研究、自己有条件进行研究以及准备如何开展研究等问题，也可以说是对课究以及准备如何开展研究等问题，也可以说是对课题的论证和设计。题的论证和设计。v开题报告作用开题报告作用 是提高选题质量和水平的重要环节。是提高选题质量和水平的重要环节。是科研能否得到批准资助和顺利开展的关键。是科研能否得到批准资助和顺利开展的关键。设计好比一项工程的蓝图，没有优良的工程蓝设计好比一项工程的蓝图，没有优良的工程蓝图，绝不可能建设质量良好的工程。图，绝不可能建设质量良好的工程。“制定好一份质量优良的设计方案，科研工作制定好一份质量优良的设计方案，科研工作就已完成了一半。就已完成了一半。”（一）开题报告的含义与作用（一）开题报告的含义与作用（二）开题报告的内容（二）开题报告的内容v题目题目v简表简表v立论依据立论依据v研究方案研究方案1.题目题目v立题步骤立题步骤 给出选题范围给出选题范围 查阅文献查阅文献*整理分析，形成假说整理分析，形成假说 立题立题v题目要求题目要求 与内容统一、明确具体、科学规范、与内容统一、明确具体、科学规范、醒目简洁（一般不超过醒目简洁（一般不超过20字）字）正确发现、提出正确发现、提出问题的过程问题的过程1.题目题目v爱因斯坦：爱因斯坦：提出一个问题往往比解决一个问题更重要，因提出一个问题往往比解决一个问题更重要，因为解决问题也许只是一个实验上的技巧而已，而提为解决问题也许只是一个实验上的技巧而已，而提出新问题是需要创造性的想象力，而且标志着科学出新问题是需要创造性的想象力，而且标志着科学的真正进步。的真正进步。vBehring：德国药学家：德国药学家 提出细菌毒素假说提出细菌毒素假说 研究出白喉毒素是致死的原因研究出白喉毒素是致死的原因 并进一步提出应用白喉抗血清治疗白喉并进一步提出应用白喉抗血清治疗白喉2、简表、简表v认真填写：第一印象认真填写：第一印象v真实介绍：便于联系真实介绍：便于联系v明确分工明确分工3.立论依据立论依据v国内外研究概况和发展趋势国内外研究概况和发展趋势 v研究目的研究目的v研究意义研究意义v参考文献参考文献（1）国内外研究概况和发展趋势）国内外研究概况和发展趋势 v研究现状及现状分析研究现状及现状分析v针对性针对性v先进性先进性v提出尚未解决的问题提出尚未解决的问题v你的研究与现状的联系你的研究与现状的联系（2）研究目的）研究目的v你研究什么？你研究什么？表明你在哪一方面研究表明你在哪一方面研究v课题的焦点课题的焦点v具体具体（3）研究意义）研究意义v你为什么研究？你为什么研究？v简明扼要简明扼要v应用基础研究：科学意义和应用前景应用基础研究：科学意义和应用前景（4）参考文献）参考文献v采用并列出近五年的采用并列出近五年的5-10篇篇v注意正确的书写格式注意正确的书写格式 序号序号 作者作者 题目题目 期刊期刊 时间时间 卷卷 期期 页页例例：18 王妍婷王妍婷.FAS/FASL与妊娠与妊娠.山西医科大学学报，山西医科大学学报，2002，33（2）：）：181-184 序号序号18在文中内容的右上角标出在文中内容的右上角标出例例：-细胞凋亡可能参与妊娠免疫耐受的形成细胞凋亡可能参与妊娠免疫耐受的形成18-v-Fas/FasL-Fas/FasL相互作用引起的细胞凋亡可能参与妊娠免疫耐受的形成相互作用引起的细胞凋亡可能参与妊娠免疫耐受的形成1818。那么。那么Fas/FasLFas/FasL系统介导的系统介导的AICDAICD的异常就会打破妊娠免疫耐受而致的异常就会打破妊娠免疫耐受而致RSARSA，sFas/sFasLsFas/sFasL作为影响作为影响AICDAICD的因素，是否与的因素，是否与RSARSA有关呢？又是何种关有关呢？又是何种关系？系？本研究旨在通过检测本研究旨在通过检测RSARSA患者血清中患者血清中sFas/sFasLsFas/sFasL蛋白和蛋白和mRNAmRNA的变化；的变化；sFas/sFasLsFas/sFasL与与ACAACA、ATAATA、EmAbEmAb有无相关性；丈夫淋巴细胞免疫治疗前后有无相关性；丈夫淋巴细胞免疫治疗前后RSARSA患者血清中患者血清中sFas/sFasLsFas/sFasL蛋白和蛋白和mRNAmRNA的变化，来研究的变化，来研究sFas/sFasLsFas/sFasL与与RSARSA的关系，探讨的关系，探讨sFas/sFasLsFas/sFasL在在RSARSA发生中的作用及发生中的作用及RSARSA的免疫异常的机制，的免疫异常的机制，寻找寻找RSARSA的发病因素，为诊断、干预、治疗的发病因素，为诊断、干预、治疗RSARSA提供新指标、新思路。提供新指标、新思路。参考文献参考文献 18 18 王妍婷等，王妍婷等，Fas/FasLFas/FasL与妊娠，山西医科大学学报，与妊娠，山西医科大学学报，20022002；3333（2 2）：）：181-184 181-184 立论依据立论依据 举例举例4.研究方案研究方案v研究方案研究方案 课题确定之后，在正式开展研究之前制订的整课题确定之后，在正式开展研究之前制订的整个课题研究的工作计划，它初步规定了课题研究各个课题研究的工作计划，它初步规定了课题研究各方面的具体内容和步骤。方面的具体内容和步骤。v研究方案对整个研究工作的顺利开展起着关键的作研究方案对整个研究工作的顺利开展起着关键的作用，研究方案水平的高低，是一个课题质量与水平用，研究方案水平的高低，是一个课题质量与水平的重要反映。的重要反映。4.研究方案研究方案v研究内容研究内容 v研究方法研究方法v技术路线及实验方案技术路线及实验方案v所需实验材料与仪器所需实验材料与仪器（1）研究内容）研究内容v“具体做哪些？具体做哪些？”研究的对象、研究的问题研究的对象、研究的问题 研究哪几个方面？有哪几个层次？检测哪几个指标？研究哪几个方面？有哪几个层次？检测哪几个指标？等等研究内容研究内容 举例举例v研究内容研究内容 采用采用ELISAELISA法及法及RT-PCRRT-PCR半定量法检测以下指标：半定量法检测以下指标：比较比较RSARSA患者与正常孕妇血清患者与正常孕妇血清sFas/sFasLsFas/sFasL蛋白和蛋白和mRNAmRNA的变化；的变化；检测丈夫淋巴细胞免疫治疗前后检测丈夫淋巴细胞免疫治疗前后RSARSA患者血清患者血清sFas/sFasLsFas/sFasL蛋蛋白和白和mRNAmRNA的变化；的变化；（2）研究方法）研究方法v通过参考文献，调查实验条件选定适当的设计方案通过参考文献，调查实验条件选定适当的设计方案回答回答“怎样做？怎样做？”原则：既具有较高的论证强度，又要切实可行原则：既具有较高的论证强度，又要切实可行v选择恰当的研究对象选择恰当的研究对象v设置合理的对照（对比研究），分组设置合理的对照（对比研究），分组研究方法研究方法 举例举例v研究方法：研究方法：酶联免疫吸附实验（酶联免疫吸附实验（ELISAELISA）间接法、）间接法、RT-PCRRT-PCR半定量法。半定量法。分组：分组：正常育龄妇女组正常育龄妇女组 正常早孕妇女组正常早孕妇女组 RSARSA妇女组妇女组例数：每组约例数：每组约50508080例例RSARSA诊断标准：排除遗传、解剖、内分泌、感染性因素以外诊断标准：排除遗传、解剖、内分泌、感染性因素以外的的URSAURSA自然流产次数自然流产次数22次次标本：血清，标本源于皖南医学院优生优育研究所不孕门诊标本：血清，标本源于皖南医学院优生优育研究所不孕门诊统计学处理：统计学处理：22检验、检验、t t检验检验 直线相关分析直线相关分析（3）技术路线及实验方案）技术路线及实验方案v具体操作程序具体操作程序 按时间和实验顺序来安排按时间和实验顺序来安排 可用流程图、示意图可用流程图、示意图 技术路线及实验方案技术路线及实验方案 举例举例v技术路线技术路线实验方案实验方案：采血，分离血清，采血，分离血清，-20-20保存备用保存备用ELISAELISA间接法检测间接法检测ACAACA、ATAATA、EmAbEmAb ELISA ELISA双抗体夹心法检测双抗体夹心法检测sFas/sFasLsFas/sFasL获得获得ODOD值值 RT-PCRRT-PCR半定量法检测半定量法检测sFas/sFasLsFas/sFasL mRNA mRNA水平水平数据处理，全部数据输入计算机，用相关统计软件数据处理，全部数据输入计算机，用相关统计软件分析数据，寻找差异性、相关性。分析数据，寻找差异性、相关性。（4）所需实验材料与仪器）所需实验材料与仪器v查阅文献查阅文献v调查实验室条件调查实验室条件所需实验材料与仪器所需实验材料与仪器 举例举例v材料试剂：材料试剂：血清、血清、ELISAELISA检测试剂及聚苯乙烯反应板（购检测试剂及聚苯乙烯反应板（购于深圳晶美生物有限公司、于深圳晶美生物有限公司、MBI FermentasMBI Fermentas公司）公司）v仪器：仪器：试管、吸管、试管、吸管、5050微量移液器、微量移液器、3737恒温箱、化恒温箱、化学发光学发光-酶标仪、酶标仪、荧光显微镜荧光显微镜等等v文献：文献：记录保存传播知识的载体记录保存传播知识的载体 文字、图形、声频、视频等文字、图形、声频、视频等v医学文献种类医学文献种类 教科书（教材、实验指导）教科书（教材、实验指导）参考书、专著及专题论著参考书、专著及专题论著 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