糖皮质激素的抗炎作用课件

糖皮质激素的抗炎作用糖皮质激素的抗炎作用实验目的实验目的学习用蛋清致炎剂致动物实验性急性炎症学习用蛋清致炎剂致动物实验性急性炎症的方法。的方法。观察糖皮质激素的抗炎作用。观察糖皮质激素的抗炎作用。实验原理实验原理异体蛋白进入机体以后，可在短时异体蛋白进入机体以后，可在短时间内引起组织的急性炎症反应，炎间内引起组织的急性炎症反应，炎症部位明显肿胀，体积增大。本实症部位明显肿胀，体积增大。本实验用蛋清为异种蛋白质，注入大鼠验用蛋清为异种蛋白质，注入大鼠足跖内，可致局部急性炎症反应，足跖内，可致局部急性炎症反应，使局部组织肿胀。通过测定炎症部使局部组织肿胀。通过测定炎症部位的体积，观察炎症的发生及氢化位的体积，观察炎症的发生及氢化可的松的抗炎作用。可的松的抗炎作用。糖皮质激素（糖皮质激素（GCSGCS）是由肾上腺皮质中束状带分泌的一类甾）是由肾上腺皮质中束状带分泌的一类甾体激素，主要为皮质醇，具有调节糖、脂肪、和蛋白质的生体激素，主要为皮质醇，具有调节糖、脂肪、和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、物合成和代谢的作用，还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、抗休克作用。抗休克作用。抗炎作用：抗炎作用：GCSGCS有快速、强大而非特异性的抗炎作用。对各有快速、强大而非特异性的抗炎作用。对各种炎症均有效。在炎症初期，种炎症均有效。在炎症初期，GCSGCS抑制毛细血管扩张，减轻抑制毛细血管扩张，减轻渗出和水肿，又抑制白血细胞的浸润和吞噬，而减轻炎症症渗出和水肿，又抑制白血细胞的浸润和吞噬，而减轻炎症症状。在炎症后期，抑制毛细血管和纤维母细胞的增生，延缓状。在炎症后期，抑制毛细血管和纤维母细胞的增生，延缓肉芽组织的生成。而减轻疤痕和粘连等炎症后遗症。肉芽组织的生成。而减轻疤痕和粘连等炎症后遗症。抗炎作用机制：抗炎作用机制：GCSGCS扩散进入胞浆内，并与扩散进入胞浆内，并与GRGRHspHsp结合。同结合。同时时HspHsp被分离。被分离。GCSGCS和和GRGR复合物进入细胞核，与靶基因启动子复合物进入细胞核，与靶基因启动子序列的序列的GREGRE结合，增加抗炎细胞因子基因转录，与结合，增加抗炎细胞因子基因转录，与nGREnGRE结合。结合。抑制致炎因子的基因转录，而产生抗炎作用。抑制致炎因子的基因转录，而产生抗炎作用。图解图解实验对象实验对象大鼠，雌雄各半，体重大鼠，雌雄各半，体重150150克。克。实验器材与试剂实验器材与试剂器材：大鼠后足容积器材：大鼠后足容积测量器、测量器、1mL1mL注射器、注射器、50mL50mL小烧杯。小烧杯。试剂：新鲜蛋清，氢试剂：新鲜蛋清，氢化可的松注射液，生化可的松注射液，生理盐水。理盐水。实验步骤实验步骤1.1.取大鼠取大鼠2 2只，标记，称重，分别腹腔注射下列药物只，标记，称重，分别腹腔注射下列药物,1,1号鼠生理盐水号鼠生理盐水3mL/kg,23mL/kg,2号鼠：氢化可的松溶液号鼠：氢化可的松溶液15mg/kg 15mg/kg(0.5%(0.5%溶液溶液3mL/kg3mL/kg）。）。2.2.取带有侧管的大鼠后足容积测量器，将注射器与侧管取带有侧管的大鼠后足容积测量器，将注射器与侧管相连，盛入水，使液面与相连，盛入水，使液面与20mL20mL处平齐。处平齐。3.3.将各鼠右踝关节的突起点处用圆珠笔画圈作为测量标将各鼠右踝关节的突起点处用圆珠笔画圈作为测量标志，依次将各鼠右后足放入容积测量器内，使后肢暴露志，依次将各鼠右后足放入容积测量器内，使后肢暴露在筒外，浸入的深度以圆圈处与在筒外，浸入的深度以圆圈处与20ml20ml刻度重合为度。该刻度重合为度。该足进入液体以后，液面升高，液体自侧管溢出流入注射足进入液体以后，液面升高，液体自侧管溢出流入注射器中，溢出液体的毫升数即为该鼠右后足的体积。依次器中，溢出液体的毫升数即为该鼠右后足的体积。依次测定各鼠右后足的正常体积。测定各鼠右后足的正常体积。4.4.各鼠腹腔注射药后各鼠腹腔注射药后15min15min，从右后足掌心向掌，从右后足掌心向掌趾关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清趾关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清0.1ml0.1ml。5.5.注射蛋清后注射蛋清后20min20min、40min40min、60min60min、80min80min，分，分别测量右后足的体积，记录溢出液体的毫升数。别测量右后足的体积，记录溢出液体的毫升数。各鼠致炎以后的体积减去正常的体积，即为各个各鼠致炎以后的体积减去正常的体积，即为各个时间右后足的肿胀度。即：各个时间点右后足肿时间右后足的肿胀度。即：各个时间点右后足肿胀度胀度 =致炎后的容积致炎后的容积 -致炎前的容积。致炎前的容积。6.6.根据公式计算：根据公式计算：右后足肿胀率（右后足肿胀率（%）=（致炎后最大容积（致炎后最大容积 -致炎前致炎前的容积）的容积）/致炎前的容积致炎前的容积 100100%计算结果填入下表计算结果填入下表组别组别剂量剂量（mg/kg)mg/kg)致 炎 前致 炎 前容积容积（mLmL）致炎后容积（致炎后容积（mL)mL)右 后 足右 后 足肿 胀 率肿 胀 率（%）2020minmin40min40min60min60min80min80min生理盐水生理盐水组组氢化可的氢化可的松组松组糖皮质激素的抗炎作用注意事项注意事项蛋清应实验当天现行配置，置于蛋清应实验当天现行配置，置于4 4冰箱保冰箱保存。存。注意操作的一致性，测量要有专人负责。注意操作的一致性，测量要有专人负责。尽量减小误差尽量减小误差。思考题思考题结合本次实验结果，讨论氢化可的松结合本次实验结果，讨论氢化可的松的抗炎作用。的抗炎作用。