7-实验室设备

实验室设备 嘉禾县疾病预防控制中心7实验室设备 实验室所用设施、设备和材料应符合国家相关标准和规定要求。一级病原微生物实验室和二级病原微生物实验室的设施设备要求。7.1 生物安全柜有生物安全柜的科室要有一个生物安全柜的操作规程。合适地使用生物安全柜能提供一个清洁的工作环境。生物安全柜能提供给人员、物品和环境的保护。生物安全柜隔离来自被限制的生物危害材料区域人员的生物危害。生物安全柜藉由经过高效率微粒子空气滤过器(HEPA)过滤空气中烟雾状生物危害性材料。吸入的空气在进入生物安全柜工作区域之前经一个 HEPA 滤过器过滤。排气也通过 HEPA滤过器过滤。气溶胶在生物安全柜的工作区域中产生被包含在生物安全柜里面。二级生物安全柜操作程序:l 如果使用,把紫外灯关掉；打开荧光灯和排风机。l 用75%的乙醇或适当的消毒剂消毒所有的内部表面。l 将物品按程序放入生物安全柜内的位置;不要阻塞进气孔。等候 2-3 分钟对工作区域清洁。l 在工作区域之内，物品之间保持适当的间距。l 工作应该从干净的到污染的地方进行。l 工作完毕后,让柜内的物品在移出之前运行 2-3 分钟。l 用75%乙醇或适当的消毒剂擦拭所有的工作表面。l 关闭荧光灯和排风机。需要注意的是：A. 生物安全柜运行正常时才能使用。B. 生物安全柜在使用中打开的玻璃观察挡板不能超过规定高度。C. 安全柜内应尽量少放器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。D. 安全柜内不能使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。允许使用微型电加热器，但最好使用一次性无菌接种环。E. 所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。F. 尽量减少操作者身后的人员活动。G. 操作者不应反复移出或伸进手臂以免干扰气流。H. 不要使实验记录本、移液器以及其它物品阻挡空气格栅，因为这将干扰气体流动，引起物品的潜在污染和操作者的暴露。I. 在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行23分钟。J. 在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。许多生物安全柜装备有杀菌的紫外线灯。照射时间、距离、灰尘或碎片的出现和紫外灯强度影响紫外灯的杀菌效果。紫外灯的可见兰紫色光不指示有杀菌的效应。紫外灯需要定期地清洁排除灰尘。紫外灯可能损害眼睛、皮肤和实验室设备。紫外灯应该在有人进入前被关闭。禁止使用到期的紫外灯。7.2 离心沉淀程序所有的离心沉淀将使用放入密封的离心转子中的离心机保护桶或密封的离心管。如果使用的是无效的小离心机安全杯，则应该在生物安全柜中操作离心机。操作离心机的每个人应该熟悉相应的操作程序。在操作记录簿上详细记录离心机和转子使用情况以决定技术维修的需要。下列是被推荐的离心沉淀法程序:l 在使用离心管和瓶之前检查它们有否压力标记。l 在生物安全柜里面轻轻装满所有的离心机管和瓶。在放入安全杯或转子前用消毒剂擦拭离心管。l 离心管决不要装得太多,当离心管装得太满可能发生泄漏。最大为离心管的3/4。l 离心前离心管的盖子处于盖着状态。l 所有的管子放入保护桶或密封转子中。检验保护桶的“O”型密封圈和保护桶或转子的内部。l 在放入转子或保护桶之前用消毒剂擦拭管子或瓶子的外面。l 不要超过安全的转子速度。l 如果一个异常的情况发生(噪音或振动) 立即停止离心机。l 离心完毕后在打开离心机之前等候五分钟。这将会使气溶胶沉淀下来以防止事故的发生。l 在每次使用后清洁和防护输送器或转子和离心机内部。l 在生物安全柜中打开保护桶或转子。7.3 化学吸附真空管和过滤器化学吸附真空管和过滤器防止传染性和非传染性物质吸入真空管线里。化学吸附真空管和过滤器:l 将化学消毒剂放入化学吸附瓶中。让被吸附液体完全稀释。(例如: 100 毫升普通漂白氯开始,吸入 900 毫升的液体和废弃物)。l 如果真空管堵塞或者液体接触过滤器则检查真空过滤器并替换。旧的过滤器将作医学废弃流处理。组织培养瓶过滤器消毒剂溶液溢出瓶收集瓶真空管7.4注射器和针头注射器和皮下注射器的针头是一种危险的器械。为了减少偶尔的意外注射、气溶胶的产生或溢出，当有替代的方法可以利用的时候，应避免使用注射器。例如，在注射器上为口腔或鼻腔的注射使用钝针或套管。当使用肠外注射的时候，推荐下列使用皮下注射器针头和注射器的注意点：l 在生物安全柜里使用注射器和针头时，最好和避免拿注射器的手作快速和不必要的移动。l 检查玻璃注射器是否有裂纹和碎裂以及针头是否有倒钩和堵塞。这些检查应该在使用和消毒前完成。只使用针头锁闭为了确信针头被安全锁定放入桶内。无论什么时候只要有可能就用塑料的可任意处理的注射器替换玻璃制的注射器。l 只要可能就使用更安全的针。l 使用操作针和注射器的时候戴乳胶手套。l 装满注射器时尽量减少注射器内泡沫和气泡的产生。l 排除掉注射器内多余的气体、液体和泡沫，垂直打入湿的含合适的消毒剂的脱脂棉花内或打入含有消毒棉花的小瓶内。l 不要为了混匀而用注射器将有传染性物质的液体强力地注射进开口的小瓶里。如果注射器的针头在试管里液面下则用注射器混合仅仅是用来补液。l 注射器从试管中被装满时，注意不要污染注射器的中部，这可能导致传染性物质转移至手指头。l 在从橡皮塞中拔除注射器和针头时，用含适当的消毒剂的脱脂棉花包裹和塞住针头。如果有涉及消毒剂污染到敏感的实验材料，可以使用消毒的脱脂棉，并立即丢弃至生物危害袋内。l 将注射器丢入专用的容器内。别折弯、别剪、别重复或以别的方式处理针。如果重复使用不可避免，使用相同的手法。别将注射器扔进非专用的容器内。7.5移液管l 决不要用嘴吸移液管；在吸取传染性材料的时候总是使用一些移液管辅助器具。所有危险的东西更适宜在生物安全柜里操作。l 传染性的或有毒的材料不应该从移液管中强力地排出。l 传染性的或有毒的液体要防止因用空气吹打液体而导致泡沫的产生。l 决不应该为了混合而用移液管反复地吹吸含有传染性或者有毒物质的液体。l 移液管的排出除应该与液体或琼脂水平尽可能地近，并且，只要可能内容物应该沿着管壁或瓶壁排出，不要从高处排出。l 用于吸取传染性或者有毒材料移液管尾部应该用棉花塞住，甚至在操作AIDS时用安全移液管。l 避免从移液管中偶然落下的传染性或者有毒的材料到工作面。在抛弃或再次使用前放含湿的消毒剂的毛巾或其他的能吸收的材料到工作面和高压锅上。l 污染的移液管应该放入类似次氯酸盐消毒剂的容器内。装移液管的圆筒不要垂直地放置由于其高度，必须放在生物安全柜外的地面上。从生物安全柜中拿出污染的移液管，将它们垂直地放入容器中防止从移液管中的液体滴入到地面上或容器的边缘而形成气溶胶，并且，移液管顶部常常超出消毒剂的液面。l 为被使用的移液管在生物安全柜的范围内放置丢弃盘。经适当时间的浸泡后，多余的消毒剂小心的倒入水池。盘子和移液管一起高压消毒，用清洁的盘子换上新鲜的消毒剂备用。7.6搅拌机、混匀器、超声波清洗和粉碎机大多数实验室因混合、混匀、振荡、研磨、裂解而操作搅拌机、混匀器、超声波粉碎机或者危险的细胞裂解器所产生的气溶胶是生物危害的主要来源。甚至碾钵和杵的使用都可能是危险的操作。可以产生气溶胶的其它的装置是球搅拌器、胶体搅拌器、喷射搅拌器、组织研磨器、磁力搅拌机、搅拌器、超声波清洗器、超声波细胞粉碎仪、混合器。适当的去污染是在超声波清洗前防止气溶胶产生的要点。无论怎样超声波仪在使用后都要清洗处理。当实验室使用的器材有可能产生生物危害的气溶胶的操作时必需：l 在生物安全柜中操作混合、裂解细胞和研磨器；l 使用安全搅拌器来防止离心机转子底部的泄漏。在使用前推荐用消毒水、盐或亚甲基兰冲洗；l 如果搅拌器被用于传染性物质则用一条含合适的湿的消毒剂盖在搅拌器顶部。对设备和残留物在使用后应尽快地进行消毒；l 玻璃搅拌器不适合用于传染性物质的操作，因为玻璃容易破裂；l 有时搅拌球要求补充冷却防止轴承损坏并可尽量降低搅拌物的温度；l 打开安全搅拌器以前，搅拌器停止工作至少一分钟以使气溶胶沉淀；l 在感染组织或材料用任何开放的装置研成粉的工作最好在生物安全柜内操作。7.7 冻干样品冻结在安瓿中被干燥在真空歧管上或在一个负压的容器中。如果安瓿已封口并仍然在真空状态下的时候，它可能在那个封口或稍后打开的时候引起向内破碎。为了避免这种情况,在冻干完成后且在封口之前,逐渐地冲入干燥的氮气使内压至常态，避免干燥的样品散发。如果样品在充填期间沿着颈壁装入，安瓿狭窄或收缩部份的瓶颈被污染。随后，当安瓿与火焰一起封口的时候,在颈壁上的干燥材料变成烧焦或部份地分解; 当它被再融解的时候，这材料的残留物可能影响干燥的材料。为了避免这些，应该用一个注射器的长的套管或一个长滴管来填充玻璃小瓶。不允许套管或吸液管的出口端碰触玻璃小瓶的瓶颈。所有用于培养物、毒素或其它生物危害材料冷冻干燥的安瓿应该用耐热玻璃制成的。这一类型的玻璃需要高温火用煤气或氧-煤气混合气体封口。这些硬质玻璃安瓿比软质玻璃安瓿更加不容易起泡，在真空状态下封口的时候向内破裂而且在处理和储藏期间不易损坏。含有传染性样品的安瓿和玻璃小瓶加样时, 后来的冷冻干燥, 并且封口或含有传染性的样品准备的安瓿和玻璃小瓶的结束应该在一个生物安全柜中进行。同样对安瓿和小瓶的准备包括不冷冻干燥的液体样品也是如此。安全预防的获得将依赖物质、设备和可用的容器。因此，在开始这一个程序之前，生物安全负责人应该与专业科室负责人磋商后制定各个仪器的程序。所有使用程序的人必须依照这个程序。7.8其它设备（水浴箱、冷藏箱、振荡器）水浴箱通常用于钝化、孵育或测试传染性物质，应该包含消毒剂。对于冷水浴箱，推荐75% 丙烯乙二醇。叠氮钠不应该被当作抑制细菌繁殖使用。它可能有引起严重的爆炸的危险。检查低温冰箱、液氮和干冰及冷藏库,定期清洁除去任何坏的安瓿、试管及含有传染性的材料并消毒。在这清洁期间使用橡皮手套并保持通风。对储存在冰箱或冷冻库中的所有有传染性的或有毒的材料进行适当分类。安全措施应该与危害等级相同。被污染液氮危害程度将会相当地依赖被储存的微生物的传染性能力、在液氮中的稳定性和在空气中生存的能力。除了密封的玻璃安瓿之外储存在共用液氮罐中的组织细胞在容器中可能造成污染。因为过滤膜和其他的因素, 如滤液不能确定无传染性则应经培养或其它试验证明它们无菌。振荡器应该被小心地对细颈瓶或被振荡的其他容器的潜在破损检查。应该使用耐用塑料螺帽或厚玻璃细颈瓶。这些应该是安全地拴紧到振荡机平台上。另外要防范的是放入塑料袋中的细颈瓶由于或没有吸收材料。在极端危险状况下不应该独自操作。76