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紫外分光光度法测定氧氟沙星片剂中氧氟沙星的含量一、实验目的1、掌握紫外分光光度法测定氧氟沙星的原理和方法2、熟悉绘制工作曲线的一般方法和应用。二、实验原理氧氟沙星属第3代喹诺酮类光谱抗菌药物,其抗菌作用强,对 厌氧菌、支原体以及肺炎衣原体等也有一定作用。氧氟沙星在三氯甲 烷中略溶, 在水或甲醇中微溶或极微溶解, 在冰醋酸或氢氧化钠溶 液中易溶,在0.1mol/L盐酸中可溶。考虑到0.1mol/L盐酸溶液较为常 用,因此选择0.1mol/L的盐酸溶液为溶剂。氧氟沙星的吸收光谱上的 最大吸收峰波长为294土1 nm。本实验采用紫外分光光度法测定氧氟 沙星片剂中的含量,简洁、快速,可用作生产过程的快速测定。氧氟 沙星的结构如下:三、仪器与试剂仪器:UV2550紫外分光光度计,容量瓶(100ml),烧杯,具塞刻度试管(10ml),玻璃棒,微量加样器,研钵,布氏漏斗,吸量 管。试剂:氧氟沙星标准样品,氧氟沙星片(0.1g/片),0.1 mol/L 盐酸溶液。四、实验步骤1、标准溶液的配制:精密称取105 C干燥至恒重的氧氟沙星标准品10mg,置于烧杯 中,用0.1 mol/L盐酸溶液溶解,然后转移至100ml容量瓶中,稀释 至刻度,定容,摇匀,得100p g/ml氧氟沙星标准溶液。2、波长的选择精密量取一定量的上述标准溶液11 份,分别取0.02、0.2、0.4、 0.6、0.8、1、1.2、1.6、2.4、4、5ml 的标准溶液于 10ml 的刻度试 管中,用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度线,摇匀。制成浓度分别为 0.2、2、4、6、8、10、12、16、24、40、50p g/ml 的溶液。以 0.1mol/L 盐酸溶液作为空白溶液,用1cm的比色皿在紫外可见分光光度计上测 定每份溶液的吸光度。测定前,选取其中浓度为8p g/mL的溶液,以 0.1 mol/L盐酸溶液作参比,在200400 nm波长范围扫描,从光谱 中找出吸收峰,以吸光度值最大的波长作为测定波长3、标准工作曲线实验在最大吸光度的波长处,分别测定上述溶液的吸光度,在线性 范围内用吸收度(X)对质量浓度(Y)进行回归,得回归方程及相关性系 数 R 。4、检出限的测定:取 0.1mol/L 盐酸溶液 1 份于 10ml 的刻度试管中,在相同条件下 于入处测定其吸光度11次,按检出限公式:D=3o /K计算。5、精密度的测定:分别吸取已配制好的100ug/ml标准溶液1ml于6个10ml的刻度 试管中,并用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度,制成浓度为10p g/ml 的溶液。在相同条件下测得各自的吸光度A1、A2、A3、A4、A5、 A6,求 RSD。6、样品的测定取氧氟沙星片10片,精密称定,研细,精密称取(约相当于氧 氟沙星0.1g),置100ml容量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液至刻度, 摇匀,用布氏漏斗抽滤,精密量取续滤液1ml,置10ml的刻度试管 中,加 0.1mol/L 盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。吸 取供试品溶液8ml于100ml的容量瓶中用0.1mol/L盐酸溶液稀释至 刻度,作为样品。取配制好的样品溶液于吸收池中,在相同条件下于 入处测定其吸光度,求出氧氟沙星片剂中氧氟沙星的实际含量c。x7、回收率的测定:分别取上述2p g/ml,12p g/ml,40p g/ml的标准溶液5ml,与 5ml的上述8p g/ml的样品混合于10ml的刻度试管中,在相同条件 下测定吸光度A7、A8、A9在标准曲线上找到其对应的溶度,换算成 质量。求出回收率。五、数据记录及处理1、波长的选择2、标准曲线的绘制标准曲线吸光度标准液C(ug/ml)0.22.04.06.08.0101216244050入处吸光度3、检出限的测定测得11份0.1mol/LHCl溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度,组数1234567891011吸光 度A如下:召-无尸a =由标准偏差公式得o,求D=3o /K4、精密度的测定平行测定的 10ug/ml 氧氟沙星溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度如下:组数A1A2A3A4A5A6平均值吸光度辛0厂无尸求RSD。根据标准偏差公式求得o。其相对标准偏差RSD=o /x*100% (x为A的平均值)5、求氧氟沙星片剂中的含量 cx。x6、计算回收率(回收率=加入纯品后的测得量-加入前的测得量/纯品加入量*100)。
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