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PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)目的基因引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖体A、B、C、D、2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为(D)A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为(D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增(C)A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A)A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在(A)保存。A、4CB、常温C、-80CD、高温8、PCR产物长期储存最好置于(D)。A、4CB、常温C、16CD、-20C9、PCR的基本反应过程包括(A)A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括(D)A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明(A)A、1983B、1971C、1987D、199312、TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C)A、37CB、50-55CC、70-75CD、80-85C13、以下哪种物质在PCR反应中不需要(D)A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加(C)A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是(A)A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则(A)A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括(D)A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的(D)。A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子的数量将达到(D)个。A、100X30B、100X30X2C、100X302D、100X23。20、PCR扩增产物的分析方法主要有(D)A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是二、判断题(共20题,每题2分)1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。(V)2、在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。(V)3、DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋。(V)4、PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。(V)5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。(V)6、PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等。(V)7、PCR技术需在体内进行。(X)8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。(V)9、核酸的复制是由5/3/方向进行的。(V)10、配对的碱基总是A与T和G与C。(V)11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb,此段间隔期称之为“窗口期”(V)12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。(V)13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。(V)14、若标本中含有蛋白变性剂(如甲醛),PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。(V)15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链,这种复制方式称之为半保留复制。(V)16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。(X)17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。(V)18、逆转录聚合酶链式反应(reversetranscription-PCR,RT-PCR)就是在应用PCR方法检测RNA病毒时,以RNA为模板,在逆转录酶的作用下形成cDNA链,然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。(V)19、在定量PCR中,72C这一步对荧光探针的结合有影响,故去除,实际上55C仍可充分延伸,完成扩增复制。(V)20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面(V)三、简答(共两题,每题10分)1、PCR技术答:PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物(要点1:2分),通过高温变性、低温退火、中温延伸(要点2:5分)这一周期的多次循环,使特异的DNA片段数量指数倍数增加(要点3:3分)。2、简述定量PCR检测操作的全过程。答:标本的采集,保存(2分)样品前处理(2分)待样品充分裂解后点样上机反应(2分)反应结束后观察结果(2分)发报告(2分)
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