散射免疫比浊法PPT学习教案

会计学1散射免疫比浊法散射免疫比浊法目录目录 第一节第一节 免疫比浊技术原理免疫比浊技术原理 第二节第二节 自动化免疫比浊分析自动化免疫比浊分析 第三节第三节 小结小结 第1页/共35页第一节第一节 免疫比浊技术原理免疫比浊技术原理免疫比浊技术分类：免疫比浊技术分类：透射免疫比浊法透射免疫比浊法（turbidimetric immunoassay）散射免疫比浊法散射免疫比浊法（nephelometry immunoassay）速率散射比浊法速率散射比浊法终点散射比浊法终点散射比浊法第2页/共35页雅安职业技术学院4一、透射免疫比浊法一、透射免疫比浊法 当一定波长的光通过抗原抗体反应形成的免疫复合物时会因为反射和吸收而减弱，一定范围内，透射光被吸收的量与复合物的量呈当一定波长的光通过抗原抗体反应形成的免疫复合物时会因为反射和吸收而减弱，一定范围内，透射光被吸收的量与复合物的量呈正相关正相关关系，而复合物的量与抗原抗体量为一定的函数关系。关系，而复合物的量与抗原抗体量为一定的函数关系。（一）基本原理（一）基本原理第3页/共35页第4页/共35页透射免疫比浊法光路图透射免疫比浊法光路图第5页/共35页（二）技术要求（二）技术要求第6页/共35页（三）方法学评价（三）方法学评价第7页/共35页抗原抗体反应曲线抗原抗体反应曲线第8页/共35页雅安职业技术学院10二、二、散射免疫比浊法散射免疫比浊法散射比浊法散射比浊法是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到其中的抗原抗体复合物，光线被粒子颗粒折射而发生偏转，产是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到其中的抗原抗体复合物，光线被粒子颗粒折射而发生偏转，产 生散射光。生散射光。（一）基本原理（一）基本原理第9页/共35页第10页/共35页透射浊度法和散射浊度法的光路透射浊度法和散射浊度法的光路第11页/共35页（二）技术要求（二）技术要求第12页/共35页（三）方法学评价（三）方法学评价第13页/共35页第14页/共35页雅安职业技术学院16三、三、速率免疫比浊法速率免疫比浊法该法是抗原抗体结合反应的一种该法是抗原抗体结合反应的一种动态测定动态测定方法。将抗原抗体的沉淀反应与散射比浊分析相结合，对单位时间内抗原和抗体结合形成复合物的速度进行动力学测定即为方法。将抗原抗体的沉淀反应与散射比浊分析相结合，对单位时间内抗原和抗体结合形成复合物的速度进行动力学测定即为速率免疫比浊法速率免疫比浊法。（一）基本原理（一）基本原理第15页/共35页第16页/共35页累计时间复合物产生总量产生速率510152025303540455055608132560150230300360415450480500512359080706055453020 抗原抗体复合物形成时间与速率的关系抗原抗体复合物形成时间与速率的关系第17页/共35页（二）技术要求（二）技术要求第18页/共35页（三）方法学评价（三）方法学评价第19页/共35页雅安职业技术学院21四、免疫胶乳比浊法四、免疫胶乳比浊法将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒上，制成致敏的胶乳颗粒，当遇到相应抗原时，发生交联反应，形成抗原抗体复合物，胶乳颗粒发生凝集。将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒上，制成致敏的胶乳颗粒，当遇到相应抗原时，发生交联反应，形成抗原抗体复合物，胶乳颗粒发生凝集。（一）基本原理（一）基本原理第20页/共35页第21页/共35页（二）技术要求（二）技术要求第22页/共35页返回章目录返回章目录（三）方法学评价（三）方法学评价第23页/共35页（一）（一）BNBN特种蛋白分析测定系统特种蛋白分析测定系统该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种改良。以发光二极管作为光源，检测前向角该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种改良。以发光二极管作为光源，检测前向角13132424度的散射光，然后利用硅化光电二极管接收散射光信号，经过微电脑处理，与标准曲线进行比较，最后转换成待检物质的浓度。度的散射光，然后利用硅化光电二极管接收散射光信号，经过微电脑处理，与标准曲线进行比较，最后转换成待检物质的浓度。第二节第二节 自动化免疫比浊分析自动化免疫比浊分析一、主流免疫比浊设备概况一、主流免疫比浊设备概况1.测定原理测定原理第24页/共35页2.仪器基本组成仪器基本组成第25页/共35页BN100BN100、BNBN特种蛋白分析分析系统特种蛋白分析分析系统第26页/共35页本系统属于速率散射比浊分析法，在抗体过量的前提下，光束通过抗原抗体复合物时所产生的散射光速率变化大小与抗原浓度成正比。速率的峰值通过电脑处理系统转换成待测抗原的浓度。本系统属于速率散射比浊分析法，在抗体过量的前提下，光束通过抗原抗体复合物时所产生的散射光速率变化大小与抗原浓度成正比。速率的峰值通过电脑处理系统转换成待测抗原的浓度。1.测定原理测定原理（二）（二）ARRAYARRAY分析系统分析系统第27页/共35页2.仪器基本组成仪器基本组成第28页/共35页Array360Array360、IMMAGEIMMAGE特种蛋白分析分析系统特种蛋白分析分析系统第29页/共35页二、免疫比浊分析的主要影响因二、免疫比浊分析的主要影响因素素1 1抗原抗体比例抗原抗体比例 抗原抗体比例要适当。抗原抗体比例要适当。2 2抗体的纯度与效价抗体的纯度与效价 诊断试剂应尽可能选择高纯度与高效价的抗体。诊断试剂应尽可能选择高纯度与高效价的抗体。3 3免疫复合物的大小及稳定性免疫复合物的大小及稳定性 溶液中免疫复合物颗粒的分散度尽可能相同，颗粒应该不容易相互聚集。溶液中免疫复合物颗粒的分散度尽可能相同，颗粒应该不容易相互聚集。第30页/共35页4 4增聚剂增聚剂 利用增聚剂破坏抗原抗体的水化层，促进反应的进行。利用增聚剂破坏抗原抗体的水化层，促进反应的进行。5. 5. 离子强度离子强度 PBSPBS是较好的反应液是较好的反应液 。 返回章目录返回章目录第31页/共35页小小 结结 经典的免疫沉淀反应通常是在抗原抗体反应的终点进行结果判断，存在操作繁琐、费时、敏感度低及难以自动化等缺陷。自动化免疫比浊分析仪器的问世解决了以上的诸多问题。经典的免疫沉淀反应通常是在抗原抗体反应的终点进行结果判断，存在操作繁琐、费时、敏感度低及难以自动化等缺陷。自动化免疫比浊分析仪器的问世解决了以上的诸多问题。第32页/共35页返回章目录返回章目录第33页/共35页雅安职业技术学院谢谢 谢！谢！第34页/共35页