生物化学酶通论学习教案

会计学1生物化学生物化学(shn w hu xu)酶通论酶通论第一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院1982 Cech和Altman发现四膜虫细胞大核期间26S rRNA前体具有自我剪接功能。并于1986年证明(zhngmng)其内含子L-19 IVS具有多种催化功能。 Schultz与Lerner研制成功抗体酶。 Boyer和Wakler阐明ATP合成酶合成与分解ATP的分子机制。第1页/共61页第二页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（一）酶和一般(ybn)催化剂的比较酶与非生物(shngw)催化剂相比的几点共性：催化效率高，用量少（细胞中含量低）。加快反应速度但不改变化学反应平衡点。降低反应活化能。反应前后自身结构不变。催化剂改变了化学反应的途径，使反应通过一条活化能比原途径低的途径进行，催化剂的效应只反映在动力学上（反应速度），不影响反应的热力学（化学平衡）。 第2页/共61页第三页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第3页/共61页第四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）酶作为(zuwi)生物催化剂的特点（1） 催化效率高：酶催化反应速度是相应的无催化反应的108-1020倍，并且至少高出非酶催化反应速度几个数量级。（2）专一性高：酶对反应的底物和产物都有极高的专一性，几乎没有副反应发生。（3）反应条件温和：温度低于100，正常大气压，中性pH环境。（4）活性可调节：根据据生物体的需要，许多酶的活性可受多种调节机制的灵活调节，包括：酶量的调节、激素调节、反馈抑制、别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解(jin ji)等。（5） 酶的催化活性离不开辅酶、辅基、金属离子。第4页/共61页第五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）酶作为生物(shngw)催化剂的特点酶的催化作用可使反应速度提高10 101倍。例如：过氧化氢分解 2H2O2 2H2O + O2用Fe3+ 催化，效率为610-4 mol/molS，而用过氧化氢酶催化，效率为6106 mol/molS。转换数（turnover number）的概念：每秒钟每个酶分子能催化底物(d w)发生变化的微摩尔数，用kcat表示（ mol/S ）。-淀粉酶催化淀粉水解，1克结晶酶在65C条件下可催化2吨淀粉水解。1高效性（酶具有极高的催化效率）第5页/共61页第六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院2专一性 Specificity酶的专一性 Specificity又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质。亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应(huxu fnyng)。例如：蛋白酶催化蛋白质的水解；淀粉酶催化淀粉的水解；核酸酶催化核酸的水解。第6页/共61页第七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院3反应条件(tiojin)温和酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40C。高温或其它苛刻的物理或化学条件(tiojin)，将引起酶的失活。酶易失活凡能使蛋白质变性的因素如强酸、强碱、高温等条件都能使酶破坏而完全失去活性。所以酶作用一般都要求比较温和的条件如常温、常压和接近中性的酸碱度。第7页/共61页第八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院.酶活力(hul)可调节控制如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活(j hu)及激素控制等。.某些酶催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关。第8页/共61页第九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院二、酶的化学本质(bnzh)及其组成（一）酶的化学(huxu)本质绝大多数酶是蛋白质。证据：（1）能被蛋白酶水解失活，酸水解的产物是氨基酸；（2）具有蛋白质的一切共性，如凡是能使蛋白质变性的因素都能使酶变性。少数酶是RNA（核酶）。第9页/共61页第十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）酶的化学(huxu)组成及类别（小结）据酶分子组成(z chn)分类单纯蛋白质酶类simple protein结合蛋白质酶类（缀合蛋白质）Conjugated protein酶蛋白质(脱辅酶) apoprotein apoenzyme辅助因子cofactor金属离子辅基prosthetic g.辅酶coenzyme脱辅酶与辅因子结合后所形成的复合物称为“全酶” 即：全酶=脱辅酶+辅因子第10页/共61页第十一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第11页/共61页第十二页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院单体酶-monomeric enzyme：一般由一条肽链组成，如溶菌酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。但有的单体酶有多条肽链组成，如胰凝乳蛋白酶由3条肽链，链间由二硫键相连构成一个共价整体。寡聚酶-oligomeric enzyme：由2个或2个以上亚基组成，亚基间可以(ky)相同也可不同。亚基间以次级键缔合。如3-磷酸甘油醛脱氢酶、乳酸脱氢酶、丙酮酸激酶等。多酶体系-multienzyme system：由几种酶靠非共价键彼此嵌合而成。主要指结构化的多酶复合体如丙酮酸脱氢酶系、脂肪酸合成酶复合体等。据酶蛋白特征(tzhng)分类单体酶寡聚酶多酶复合体第12页/共61页第十三页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院三、酶的命名(mng mng)和分类（一） 习惯(xgun)命名 1961年以前使用的酶沿用习惯命名：（1）依据底物来命名：如：催化蛋白质水解的酶称蛋白酶。催化淀粉水解的酶称淀粉酶。 （2）依据催化反应的性质及类型命名：如：水解酶、转氨酶。（3）结合上述两个原则命名，琥珀酸脱氢酶。 （4）有时加上酶的来源，如：胃蛋白酶、牛胰凝乳蛋白酶。第13页/共61页第十四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二） 国际(guj)系统命名法基本原则：明确标明酶的底物(d w)及催化反应的性质（底物(d w)为水时可略去不写）。谷丙转氨酶的系统名称 ： 丙氨酸:-酮戊二酸氨基转移酶第14页/共61页第十五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院国际(guj)酶学委员会（Enzyme Commsion）将酶分成六大类（根据各种酶所催化反应的类型）：（三）国际系统分类法及酶的编号第15页/共61页第十六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院CH3CHCOOHOHNAD+H+CH3CCOOHONADH第16页/共61页第十七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第17页/共61页第十八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院 习惯上可分为4个亚类：脱氢酶：受体为NAD或NADP，不需氧。氧化酶：以分子氧为受体，产物可为水或H2O2，常需黄素(hun s)辅基。过氧物酶：以H2O2为受体，常以黄素(hun s)、血红素为辅基。氧合酶（加氧酶）：催化氧原子掺入有机分子，又称羟化酶。按掺入氧原子个数可分为单加氧酶和双加氧酶。第18页/共61页第十九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院CH3CHCOOHNH2HOOCCH2CH2CCOOHOHOOCCH2CH2CHCOOHNH2CH3CCOOHOAX+B A+BX第19页/共61页第二十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第20页/共61页第二十一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院H2OCOOCH2CH3RRCOOHCH3CH2OHA-B+HOH AOH+BH第21页/共61页第二十二页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院AB A+B第22页/共61页第二十三页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院H0 -C-HH-C-OHCH2OPO3H2C=O CH2OHH-C=OH-C-OHCH2OPO3H2醛缩酶1，6-二磷酸果糖(gutng)磷酸二羟丙酮3-磷酸甘油醛C=OCH2OPO3H2H-C-OH CH2OPO3H2第23页/共61页第二十四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第24页/共61页第二十五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院OCH2OHOHOHOHOHOCH2OHCH2OHOHOHOH6-磷酸(ln sun)葡萄糖6-磷酸果糖 CHO C-OHHOC-H H-C-OH H-C-OH C-2OPO3H2 CH2OH C=OHOC-H H-C-OH H-C-OH C-2OPO3H2第25页/共61页第二十六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院应。应。n丙酮酸丙酮酸 + CO2 + CO2 草酰乙酸草酰乙酸第26页/共61页第二十七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（1）按反应性质分六大类，用1、2、3、 4、5、6表示。（2）根据(gnj)底物中被作用的基团或键的特点，将每一大类分为若干个亚类，编号用1、2、3 、。（3）每个亚类又可分为若干个亚亚类，用编号1、2、3、（4）流水编号1、2、3、酶的编号由4个数字(shz)组成，中间以“.”隔开。第27页/共61页第二十八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第28页/共61页第二十九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院如：乙醇脱氢酶 EC1.1.1.1乳酸脱氢酶 EC1.1.1.27 苹果酸脱氢酶 EC1.1.1.37 第一个数字表示大类： 氧化还原(hun yun)第二个数字表示反应基团：醇基第三个数字表示电子受体：NAD+或NADP+第四个数字表示此酶底物：乙醇，乳酸，苹果酸。第29页/共61页第三十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院国际分类的盲区：忽略了酶的物种差异和组织差异SOD： EC1.15.1.1，只有一个名称和编号 2O2-+2H+H2O2+O2 三类不同(b tn)的SOD：CuZn-SOD 真核生物细胞质中Mn-SOD 真核生物线粒体中Fe-SOD同是CuZn-SOD，来自牛红细胞与猪红细胞的，其一级结构也有很大不同(b tn)。在讨论一个具体的酶时，应对它的来源与名称一并加以说明。第30页/共61页第三十一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院四、酶的专一性（一）酶的专一性酶的专一性结构(jigu)专一性绝对(judu)专一性相对专一性基团专一性键专一性立体异构专一性旋光异构专一性几何异构专一性第31页/共61页第三十二页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院. 结构(jigu)专一性（）绝对(judu)专一性（Absolute specificity)有些酶对底物的要求非常严格，只作用于一个特定的底物。这种专一性称为绝对专一性。例如：脲酶、麦芽糖酶、淀粉酶、碳酸酐酶及延胡索酸水化酶（只作用于反丁烯二酸）等。第32页/共61页第三十三页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（）相对(xingdu)专一性(Relative Specificity)有些酶的作用对象不是一种底物，而是一类化合物或一类化学键。这种专一性称为相对专一性。包括：族(group)专一性（对键两端的基团要求的程度不同，只对其中一个基团要求严格）。如-葡萄糖苷酶，催化(cu hu)由-葡萄糖所构成的糖苷水解，但对于糖苷的另一端没有严格要求。胰蛋白酶，水解碱性氨基酸的羧基形成的肽键。键(Bond)专一性。如酯酶催化(cu hu)酯的水解，对于酯两端的基团没有严格的要求。第33页/共61页第三十四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院. 立体化学(l t hu xu)（异构）专一性（） 旋光异构专一性酶的一个重要特性是能专一性地与手性底物结合(jih)并催化这类底物发生反应。即当底物具有旋光异构体时，酶只能作用于其中的一种。例如，淀粉酶只能选择性地水解D葡萄糖形成的1，4糖苷键；L-氨基酸氧化酶只能催化L-氨基酸氧化；又如：乳酸脱氢酶只对L-乳酸是专一的。CH3CCOOHOCH3CCOOHHO H + NAD+ NADH + H + +LDH第34页/共61页第三十五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（）几何异构专一性（geometrical specificity）有些酶只能选择性催化某种几何异构体底物(d w)的反应，而对另一种构型则无催化作用。如延胡索酸水合酶只能催化延胡索酸即反丁烯二酸水合生成苹果酸，对马来酸（顺丁烯二酸）则不起作用；又如：丁二酸（琥珀酸）脱氢酶。COOHCH2CH2COOHHOOCCOOHCCHH+ FAD+ FADH2SDH琥珀酸延胡索酸第35页/共61页第三十六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）关于酶作用(zuyng)专一性的假说锁钥学说(1894年Emil Fischer lock and key thoery)：认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同(rtng)一把钥匙对一把锁一样。将酶的活性中心比喻作锁孔，底物分子象钥匙，底物能专一性地插入到酶的活性中心。第36页/共61页第三十七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（但如何解释酶的多底物现象、酶对（但如何解释酶的多底物现象、酶对正反方向正反方向(fngxing)的催化、相对专一的催化、相对专一性）性）第37页/共61页第三十八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院诱导契合学说(xu shu)(1958年 D.Koshlandinduced-fit hypothesis)：酶的活性中心在结构上具柔性，底物接近活性中心时，可诱导酶蛋白构象发生变化，这样就使酶活性中心有关基团正确排列和定向，使之与底物成互补形状有机的结合而催化反应进行。第38页/共61页第三十九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院诱导(yudo)契合学说的要点A.酶有其原来的形状，不一定一开始就是底物的模板B.底物能诱导酶蛋白(dnbi)的形状发生一定变化（专一性结合）C.当酶的形状发生变化后，就使得其中的催化基团形成正确的排列。D.在酶反应过程中，酶活性中心构象的变化是可逆的。即酶与底物结合时，产生一种诱导构象，反应结束时，产物从酶表面脱落，酶又恢复其原来的构象。第39页/共61页第四十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院ZnZnGlu270Tyr248Arg145底物 第40页/共61页第四十一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院五、酶的活力(hul)测定和分离纯化（一）酶活力(hul)测定酶的含量不能直接用重量和摩尔数表示（不纯、失活、分子量不知），而采用酶的活力单位表示。 1.酶活力酶活力：用在一定条件下，酶催化某一反应的反应速度表示。反应速度快，活力就越高。 酶量酶活力反应速度 第41页/共61页第四十二页，共61页。酶促反应速度(fn yng s d)的表示方法：单位时间、单位体积中底物的减少量或产物的增加量。 研究酶促反应速度，以酶促反应的初速度为准。因为底物浓度降低、酶部分失活、产物抑制和逆反应等因素(yn s)，会使反应速度随反应时间的延长而下降。 第42页/共61页第四十三页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院2.酶的活力(hul)单位 习惯单位（U）: 底物(或产物)变化(binhu)量 / 单位时间 国际单位（IU）:1moL变化(binhu)量 / 分钟 Katal（Kat）：1moL变化(binhu)量 / 秒3.酶的比活力比活力=总活力单位总蛋白mg数= U(或IU) mg蛋白第43页/共61页第四十四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院4.酶活力(hul)的测定方法终点法: 酶反应进行到一定(ydng)时间后终止其反应，再用化学或物理方法测定产物或反应物量的变化。 动力学法:连续测定反应过程中产物、底物或辅酶的变化量，直接测定出酶反应的初速度。第44页/共61页第四十五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（1）分光光度法（spectrophotometry）：多利用产物在紫外或可见光部分的光吸收性质，选择适当波长，测定反应过程的进行情况。简便、节约时间和样品，可以检测nmol/L水平的变化。（2）荧光法(fluorometry)：主要利用底物或产物的荧光性质。灵敏度高，但易受到干扰。（3）同位素测定法：同位素标记底物，反应后经分离，检测产物的脉冲数，即可换算(hun sun)成酶的活力单位。灵敏度最高。（4）电化学方法：pH计、 氧电极法 第45页/共61页第四十六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）酶的分离(fnl)和纯化酶的分离提纯方法，也就是常用来分离提纯蛋白质的方法。（1）把很大体积的酶制剂浓缩到较小体积;（2）把酶制剂中大量的杂质蛋白和其它大分子物质分离出去。判断分离提纯方法的优劣，用总活力的回收和比活力提高的倍数来衡量。过程：选材；破碎；抽提；分离及纯化；结晶(jijng)；保存。第46页/共61页第四十七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院六、核 酶(ribozyme)*Ribozyme是一种(y zhn)RNA生物催化剂Ribozyme的发现：RNA具有酶的催化功能是由Cech T.R于1982年提出的。1981年，发现四膜虫（tetrahymena thermophila）的26S rRNA前体在成熟过程中，其居间序列通过剪接(jinji)反应被除去。并证明四膜虫rRNA前体的居间序列核糖核酸（L-19RNA）具有多种催化功能，将这种具有催化活性的RNA称为 Ribozyme (ribonucleic acid enzyme)。获得1989年诺贝尔化学奖。第47页/共61页第四十八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院rRNA基因的转录产物即rRNA前体（大约6400个核苷酸残基）很不稳定，在鸟苷和Mg2+存在下切除自身的内含子（intron或intervening sequence,IVS-居间序列或间插序列），使两个外显子(exon)拼接起来，形成(xngchng)成熟的rRNA此过程没有任何蛋白质酶参与，称为自我剪接（self-splicing）,并证明RNA具有催化活性。第48页/共61页第四十九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第49页/共61页第五十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院Ribozyme在一定条件下，高度专一地催化下列反应，具有(jyu)相应酶的活性（底物专一、符合米氏方程、对竞争性抑制剂敏感） 1.核苷酸转移酶活性 2CpCpCpCpCCpCpCpCpCpC+CpCpCpC 2.磷酸二酯酶活性 CpCpCpCpC CpCpCpC+Cp 3.磷酸转移酶活性 CpCpCpCpCpCp+UpCpU CpCpCpCpCpC +UpCpUp 4.RNA限制性内切酶活性另外，1997年，Zhang和Cech证明了人工合成的RNA分子具有(jyu)肽基转移酶活性。第50页/共61页第五十一页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院Ribozyme发现(fxin)的重大意义：RNA具有酶的催化活性，向酶的化学本质是蛋白质这一传统概念提出了挑战。在理论上，对于生物起源和生命进化的研究具有重要启示。 生物催化分子进化的可能性： RNA RNA-蛋白质 蛋白质-RNA 蛋白质-辅酶或辅基 蛋白质 在实践上，由于Ribozyme的内切酶活性，可定点切割mRNA，破坏mRNA，抑制基因表达，为基因、病毒和肿瘤(zhngli)治疗提供了可行途径。第51页/共61页第五十二页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院七、抗体酶（abzyme）抗体酶指具有催化活性的免疫球蛋白，即在其高可变区赋予了酶的属性(shxng)。是抗体的高度选择性与酶的高效催化性相结合的产物。抗体与酶相似，都是蛋白质分子，酶与底物的结合及抗体与抗原的结合都是高度专一性的，但这两种结合的基本区别在于酶与高能的过渡态分子相结合，而抗体则与抗原（基态分子）相结合。利用抗体能与抗原特异结合的原理可用过度态类似物作为半抗原来诱发抗体，这样产生的抗体便能特异地识别反应过程中真正的过渡分子，从而降低反应的活化能。达到催化反应的目的(md)，这种具有催化功能的抗体就被称为催化抗体或抗体酶。第52页/共61页第五十三页，共61页。 O C A. 酯酶的底物酯B.酯的羧基碳原子受到亲核攻击形成四面体过渡态C.设计的磷酸酯类似物,作为 抗 原 去 免疫实验动物磷酸酯类似物(半抗原)对酯水解反应有催化作用的单克隆抗体(kngt)免疫(miny)免疫(miny)反应诱导法制备具有酯酶活性的抗体第53页/共61页第五十四页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院抗体酶的筛选(shixun)在抗体酶研究中，一个不可少的步骤是在细胞(xbo)融合后筛选到能分泌催化抗体的细胞(xbo)克隆。一般的方法是先筛选其抗体能结合特异抗原的细胞(xbo)克隆，再从纯化的抗体中筛选出有催化能力的单抗。主要筛选方法有生物学筛选法和纯化学筛选法。第54页/共61页第五十五页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院抗体酶的研究和应用(yngyng)前景催化抗体的出现不仅为人们开创了一条人工设计(shj)酶的新方法，也使人们对催化过程中催化剂的作用机理和催化剂和底物的相互识别有了进一步认识。目前已经发现具有催化作用的自身抗体在生物体内的存在，其不仅和疾病相关，可能还参与了生物体内的某些或基本的生物学反应。有可能成为抗体酶研究的新热点。充分利用抗体的种类繁多以及抗体酶的可诱导、可改造的特点，可望制备出具有治疗和辅助治疗某些疾病或催化某类具有特殊意义反应的抗体酶。抗体酶的研究无疑会对化学、生物学、医学等领域产生深远影响。第55页/共61页第五十六页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院八、酶工程简介(jin ji)1971年第一届国际酶工程会议上得到命名。主要研究：酶的生产、纯化、固定化技术(jsh)、酶分子结构的修饰和改造及其在工、农、医药等领域的应用。（一）酶工程的概念天然酶在开发和应用方面受到限制： 1.酶的不稳定性 2.酶的分离、纯化较难，成本高，价格贵目前在酶的应用方面所采取的一般方法： 1.化学方法：通过对酶的化学修饰或固定化处理，改善酶的性质以提高酶的效率和降低成本，或通过化学合成法制造人工酶。 2.利用基因重组技术生产酶以及对酶基因进行修饰或设计新基因，生产出性能稳定、具有新的生物活性以及催化效率更高的酶。第56页/共61页第五十七页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（二）化学(huxu)酶工程化学酶工程亦称初级酶工程，指天然酶、化学修饰酶、固定化酶及人工模拟酶的研究和应用。 1.天然酶：主要指工业用酶，从微生物发酵得到的酶。如：洗涤剂、皮革生产中用的蛋白酶；纸张制造用的淀粉酶；乳制品用的凝乳酶等。 2.化学修饰酶：用于医药及研究工作。通过（1）化学修饰酶的功能基 ；（2）通过交联反应(fnyng)；（3）大分子修饰作用（用葡萄糖修饰SOD增加其半寿期，提高耐热性、耐酸碱性等。用葡萄糖和聚乙二醇修饰尿激酶等）。 3.固定化酶(immobilized enzyme)：将水溶性酶用物理或化学方法，使之成为不溶于水的，但仍具有酶活性的状态。 4.人工模拟酶化学法合成酶（已知酶的活性中心和作 用机理）。第57页/共61页第五十八页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院3.固定化酶1971年在第一届国际(guj)酶工程会议上正式采用固定化酶名称酶的固定化方法： 物理法：吸附法和包埋法 化学法：共价偶联法和交联法目前，我国利用(lyng)固定化氨基酰化酶拆分DL-AA；固定化的葡萄糖异构酶生产高果糖玉米糖浆；第58页/共61页第五十九页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院（三）生物酶工程(gngchng)生物酶工程亦称高级(goj)酶工程，是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。生物酶工程的主要内容：克隆酶用基因工程技术大量生产酶（ -淀粉酶，青霉素酰胺酶、亮氨酸合成酶）突变酶对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（改变酶的催化活性、底物专一性、最适pH、改变酶的别构调节能力、改变酶对辅酶的要求、提高酶的稳定性）制造新酶设计新酶基因，合成自然界不曾有过的酶第59页/共61页第六十页，共61页。2006-1-7上海大学(shn hi d xu)生命科学学院第60页/共61页第六十一页，共61页。