高中生物《基因工程的基本操作程序》课件九（19张PPT）（人教版选修3）

欢迎进入生物课堂 一 2基因工程的基本操作程序 DUCK179制作 复习 基因工程的基本操作步骤 提取目的基因 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的表达和检测看课本P8的图 DUCK179制作 一 目的基因的获取 1 目的基因 主要指的是编码蛋白质的结构基因 也可以是一些具有调控作用的因子2 获取方法 1 从基因文库中获取目的基因 2 人工合成例 利用PCR技术扩增目的基因 DUCK179制作 从基因文库中获取目的基因 什么叫基因文库 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断 导入到受体菌的群体中 各个受体菌分别含有这种生物的不同基因 称为基因文库 DUCK179制作 基因组文库与部分基因文库的关系 DUCK179制作 基因文库的构建模式图 通过对受体菌的培养而储存基因 DUCK179制作 如何从基因文库中得到所需要的基因 依据 目的基因的有关信息 如 根据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性 DUCK179制作 利用PCR技术扩增目的基因 PCR 聚合酶链式反应 是以DNA变性 复制的某些特性为原理设计的前提条件是必须对目的基因有一定的了解 需要设计引物 DUCK179制作 PCR技术原理及反应过程 原理 DNA双链复制 反应过程 1加热至90 95 目的基因DNA解链2冷却至55 60 引物结合到互补DNA链3加热至70 75 热稳定DNA聚合酶从从引物起始互补链的合成 DUCK179制作 DUCK179制作 二 基因表达载体的构建 1 基因表达载体的组成 复制原点目的基因启动子终止子标记基因等 思考 作为基因工程表达载体 只需含有目的基因就可以完成任务吗 为什么 DUCK179制作 启动子 位于基因的首端的一段特殊的DNA片断 它是RNA聚合酶识别和结合的部位 有了它才能驱动基因转录出mRNA 最终获得蛋白质 调节基因 操纵基因 结构基因 RNA聚合酶 半乳糖苷酶 酶 酶 启动子 结构蛋白基因 RNA聚合酶 DUCK179制作 终止子 位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断 能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因 从而将有目的基因的细胞筛选出来 DUCK179制作 总结 表达载体需由哪几部分组成 复制原点启动子目的基因终止子标记基因 它们的作用是 DUCK179制作 三 目的基因导入受体细胞 1 导入植物细胞常用的方法是什么 具体过程是怎样的 2 导入动物细胞常用的方法是什么 基本操作程序是怎样的 3 导入大肠杆菌的方法是怎样的 钙离子有什么作用 哪些细胞可以作为目的基因的受体 DUCK179制作 1 导入到植物细胞常用的方法有农杆菌感染法 双子叶植物和祼子植物 基因枪法 单子叶植物 和花粉通道法2 导入到动物细胞常用的方法是显微注射法 先提纯目的基因 再体外注射入卵细胞或受精卵中 最后将含目的基因的受精卵移植到输卵管或子宫中发育成新个体 3 导入到大肠杆菌 原因 时先用Ca2 处理成感受态后与溶有载体DNA的缓冲液混合 吸收DNA分子 完成转化 DUCK179制作 DUCK179制作 四 目的基因的检测与鉴定 导入目的基因后需要检测哪些方面 各采取什么方法 什么是DNA分子探针 检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA 利用抗体 抗原杂交检测的原理是什么 DUCK179制作 四 目的基因的检测与鉴定 1 分子水平的检测 分子杂交技术2 个体生物学水平的签定 DUCK179制作 同学们 来学校和回家的路上要注意安全 同学们 来学校和回家的路上要注意安全