基因工程名词解释.doc

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资源描述
基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。遗传工程:广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义:基因工程。限制性核酸内切酶:是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶,简称限制酶回文结构:每条单链以任一方向阅读时都与另一条链以相同方向阅读时的序列是一致的,例如5GGTACC3 3CCATGG5.同裂酶(isoschizomer)或异源同工酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列(BamH I 和Bst I具有相同的识别序列GGATGC)同尾酶(isocaudiners):来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。两个同尾酶形成的黏性末端连接之后,一般情况下连接处不能够再被其任何一种同尾酶识别。BamH I 识别序列: GGATCCBgl II 识别序列: AGATCT黏性末端 (cohesive terminus/sticky ends):DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为黏性末端。平末端(blunt ends): DNA片段的末端是平齐的。星活性(star activity):指限制性内切酶在非标准条件下,对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应,导致出现非特异性的DNA片段的现象。易产生星活性的内切酶用*标记。如:EcoR I*底物位点优势效应: 酶对同一个DNA底物上的不同酶切位点的切割速率不同。连杆/衔接物(linker):化学合成的812个核苷酸组成的寡核苷酸片段。以中线为轴两边对称,其上有一种或几种限制性核酸内切酶的识别序列,酶切后可产生一定的粘性末端,便于与具有相同粘性末端的另一DNA片段连接。衔接头/接头(adaptor):化学合成的寡核苷酸,含有一种以上的限制性核酸内切酶识别序列。其一端或两端具有一种或两种内切酶切割产生的黏性末端。激酶:对核酸末端羟基进行磷酸化的酶。载体:指能够运载外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞,具有自我复制能力,使外源DNA片段在受体细胞中得到扩增和表达,不被受体细胞的酶系统所破坏的一类DNA分子。克隆载体(cloning vector) :用于在受体细胞中进行目的基因扩增的载体。表达载体(expression vector):使目的基因在宿主细胞中得以表达的载体。穿梭载体(shuttle vector) :能在两种不同的生物体内复制的载体。质粒(plasmid):指独立存在于宿主细胞染色体外、能够自我复制的DNA分子。严谨型质粒(stringent plasmid) :拷贝数为1至几个的质粒。松弛型质粒(relaxed plasmid) :拷贝数多于10个的质粒。接合质粒(conjugative plasmid):指质粒所携带的基因的功能是使细胞彼此有效地接触,以便将质粒DNA从供体细胞转移至受体细胞。显性质粒(表达型质粒):指携带除与自身复制和转移相关的基因,还携带一些使宿主细胞呈现新性状基因的质粒。隐性质粒:宿主含有某种质粒,但无异样的性状表现出来,这样的质粒称隐性质粒。亲和性质粒:指能同寓于一细胞中的不同质粒。不亲和性质粒:指不能同寓于一细胞中的不同质粒。迁移作用(mobilization):指在接合质粒的共存下引发的非接合质粒的转移特性。由 mob和bom两个基因控制多拷贝质粒:复制子经过人工突变,除去控制拷贝数负调节基因,使质粒拷贝数达到每个细胞数千,用于扩增外源基因。整合质粒:装有整合促进基因及整合特异序列,便于外源基因准确重组整合入受体细胞的染色体上穿梭质粒:含有两个不同的复制子,能在两种不同的受体细胞中复制表达质粒:装有强的启动基因,合适的顺序以及有效的终止子,以便任何外源基因在受体细胞内的高效表达探针质粒:筛选克隆或寻找基因元件,通常装有一个可以定量测定其表达的标记基因,如抗性基因。溶菌生长:噬菌体感染宿主细胞后,大量增殖子代噬菌体颗粒,使宿主细胞裂解,释放出来的病毒颗粒又再感染其它细胞,这种周而复始的生命过程(生活周期)称溶菌生长。烈性噬菌体:噬菌体感染宿主细胞后,DNA不整合到宿主染色体,只进行溶菌生长,这样的噬菌体称烈性噬菌体。溶原生长:噬菌体感染细菌,DNA整合到寄主染色体中,随寄主细胞染色体的复制而复制,寄主细胞仍然正常分裂,并不死亡,这种生命过程叫作溶原生长。温和噬菌体(temperate phage):病毒感染宿主细胞后DNA整合到寄主染色体中,无感染其它细胞的能力,这样的病毒,称温和噬菌体。溶原性细菌(lysogen):细菌染色体中整合有噬菌体基因组的细菌。对同种噬菌体具有免疫性。溶原化(lysogenization):用温和噬菌体感染细菌使之成为溶原性细菌的过程。原噬菌体(prophage):在溶原性细菌内存在的整合噬菌体DNA ,称原噬菌体。cos位点(cohesive end site) :指在连接酶的作用下,连接上述黏性末端结合形成的双链DNA区段。又称黏性末端位点。柯斯质粒载体或称粘粒(cosmid):是一类人工构建的含有入DNA cos 位点、噬菌体包装有关的DNA短序列(具有噬菌体的高感染性)、质粒DNA复制子、抗生素标记基因等元件的特殊质粒载体。在宿主细胞中可以作为正常噬菌体进行复制,但不表达噬菌体的任何功能。人工染色体(英文:artificial chromosome):指人工构建的含有天然染色体基本功能单位的载体系统。包括酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)、P1派生人工染色体(PAC)、哺乳动物人工染色体(MAC)和人类游离人工染色体(HAEC)。目的基因(target gene):是指已被或欲被分离、改造、扩增和表达的特定基因或DNA片段。基因文库:是某种特定的生物所含有的能够包含所有基因的足够数目的克隆的集合(将生物材料的基因组DNA或cDNA片段化,然后与特定的载体连接导入宿主菌形成包含目的基因在内的DNA片段的克隆群)。基因组文库(genomic library):某种生物的基因组的全部遗传信息(DNA序列)通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。cDNA文库(cDNA library):某种生物基因组转录的部分或全部mRNA经反转录产生的各种cDNA片段分别与克隆载体重组,贮存在一种受体菌群体中,这样的群体称为cDNA文库。受体细胞(receptor cell):又称为宿主细胞或寄主细胞(host cell)从实验技术上讲:是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞。从实验目的上讲:是有应用价值和理论研究价值的细胞。感受态细胞:指处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态的细胞。转化(transformation):重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称为转化。转染(transfection):采用与质粒DNA转化受体细胞相似的方法,将重组l噬菌体DNA分子直接导入受体细胞中的过程,称为转染。转导(transduction):是指通过噬菌体(病毒)颗粒感染宿主细胞的途径把外源DNA分子转移到受体细胞内的过程。体外装配(in vitro packaging): DNA的转染效率不高,如果将重组的分子装配成头-尾结构的病毒粒子,将极大的提高效率。转化率:是指DNA分子转化受体菌获得转化子的效率。外源基因表达体系:泛指目的基因与表达载体重组后,导入合适的受体细胞,并能在其中有效表达,产生目的基因产物。融合蛋白(fusion protein):将外源蛋白基因与受体菌自身蛋白基因重组在一起,没有改变两个基因的阅读框,以这种形式表达的蛋白,称为融合蛋白。分泌型蛋白(secreted protein):外源基因的表达产物N端连有一信号肽序列,通过运输和分泌的方式穿过细胞的外膜进入培养基中。包涵体(inclusion body):一定条件下,外源基因表达产物在大肠杆菌中积累并致密地聚集在一起形成无膜的裸露结构,称为包涵体。分子杂交:具有一定同源性的两条核酸(DNA or RNA)单链在适宜的温度及离子强度等条件下,可按碱基互补配对原则高度特异地复性形成双链。杂交探针:具有一定序列的核苷酸片段,能与互补的核酸序列复性杂交,并且能通过适当标记进行检测。主要用于核酸分子杂交。转基因生物(Genetical modified Orgamism,GMO;Transgenic Organism,TO):含有转基因并为其遗传修饰了的动植物发育为个体。转基因的共抑制效应:研究表明,转基因的失活机制是转基因与内源基因(同源基因)的共抑制效应,即当受体细胞基因组中含有转基因的同源基因时,转基因与内源基因的表达同时受到抑制.多效性胚胎干细胞(ES):胚胎发育到卵泡阶段的细胞能在培养基中体外扩增,重新输入到胚胎胚泡后,仍保留分化成其他细胞的能力。胰岛素:是由胰腺中的胰岛中的细胞合成的,可以控制血液中的血糖水平。基因诊断法又称分子诊断法或DNA探针检测法:应用专用的DNA分子探针,对受检者的特定基因(DNA)或其转录本(mRNA)进行杂交分析,从而对遗传疾病作出诊断的技术。基因治疗:是一种通过提供患者缺陷基因的正确拷贝治疗遗传性疾病的方法。5
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